液相色谱仪验证专项方案.doc

Agilent1260液相色谱仪验证方案方案编号：STP-VP-013-00方 案 制 定方案起草签 名日 期质检部方 案 审 核方案审核签 名日 期生产部质管部工程部物流部研发部方 案 批 准方案批准签 名日 期验证小组人员名单组长姓名职务/职称部门成员姓名职务/职称部门目 录1 液相色谱仪概述2 验证目3 验证范畴4 验证参照文献5 筹划及进度6 设计确认7 安装确认8 运营确认9 性能确认10 验证周期1 液相色谱仪概述液相色谱仪是常茂生物化学工程股份有限公司用于检测成品，原料，中间品检测设备。设备由输液泵，自动进样器，柱温箱，紫外检测器，色谱工作站构成。由高压输液泵将规定流动相泵入色谱柱，自动进样器注入供试品，由流动相带入色谱柱内，各组分在柱内被分离，并依次进入检测器，由色谱工作站软件记录和解决色谱信号。 2 验证目确认Agilent1260液相色谱仪能符合GMP原则及设计规定，所制定原则及文献符合GMP规定，保证液相色谱检查法精确性。3 验证范畴本验证方案合用于常茂生物化学工程股份有限公司Agilent1260液相色谱仪，该设备安装于质量部质量控制室仪器室内。 验证内容涉及对Agilent1260液相色谱仪进行设计确认、安装确认、运营确认、性能确认。4 验证参照文献本方案以国家药物监督管理局颁布药物生产质量管理规范、由国家食品药物监督管理局组织编写药物生产验证指南、中华人民共和国药典为根据，制定了高效液相色谱仪验证方案。5 筹划及进度整个验证活动分四个阶段完毕：设计确认：从_年_ _月_ _日 至_年_月_日；安装确认：从_年_月_ 日 至_年_ 月_ 日；运营确认：从_年_月_ 日 至_年_ 月_ 日；性能确认：从_年_月_ _日 至_年_ 月_ 日。6 设计确认6.1 供应商资格和服务6.1.1 设备供应商应有良好生产运营状况，没有与国家法规或地办法规相违背生产状况。6.1.2 安装时能提供现场指引或培训技术人员数量、资格，并且将来在寻常使用中能提供维修。6.2 设备6.2.1 设备状况6.2.1.1 设备部件完好，无破损；6.2.1.2 内外表面光滑、平整、容易清洁；6.2.1.3 易拆卸、易维护。6.2.2 设备特性：液相色谱仪由输液泵，自动进样器，柱温箱，紫外检测器，色谱工作站构成。6.3 可接受原则，如表1。 表1 可接受原则测试项目承认质量原则紫外检测器基线漂移：0.005AU/60min基线噪音：0.0001AU波长精确度：2nm输液泵流量设定值（ml/min）0.51.02.0泵流量设定值误差（%）2%2%2%流速稳定性误差（%）2%2%2%梯度精确度（%）1自动进样器先后进样带入量0.1%柱温箱柱温箱设定值误差（）2柱温箱稳定性（）1重现性测试定性测量重现性（RSD）1.0%定量测量重现性（RSD）1.0%线性测试R20.9997 安装确认7.1 概述Agilent1260液相色谱仪由安捷伦仪器有限公司提供，安装于质量部质量控制室仪器室，用于成品，原料，中间样品含量和关于物质检测。安装确认目：证明所供应设备规格符合规定,设备所应备有技术资料齐全。开箱验收应合格，并确认安装条件（或场合）及整个安装过程符合设计规定。7.2 安装确认内容7.2.1 基本资料检查：检查与否有各种必须书面资料，如表2。表2 资料检查确认项目有无存储地点备注采购定单使用阐明书设备合格证书装箱单保修卡安装平面图及安装图使用维护保养原则操作规程7.2.2 设备所需外部环境确认目：确认设备安装与否符合原设计条件，如表3。表3 外部环境确认确认项目合格规定验证成果备注温度5-40相对湿度85%地面平滑、不易起尘环境无腐蚀性气体7.2.3 设备型号确认目：确认设备各部件型号，保证其与订单和装箱单所描述一致，如表4。表4 设备型号确认部件设备型号序列号验证成果输液泵自动进样器柱温箱紫外检测器7.2.4 公用设施确认目：确认公用设施，使其满足设计规定，如表5。表5 公用设施确认项目设计规定验证成果备注电压220V电源适配三孔插座7.2.5 软件版本确认目：确认安装软件与系统备份和维护软件版本是相似，安装软件符合系统和应用规定。操作系统当前操作系统与系统备份和维护操作系统版本相似。源版本：_备份版本：_软件版本当前应用软件与系统备份和维护软件版本相似 。源版本：_备份版本：_7.2.6 硬件环境与安装确认目：依照生产商硬件和系统设计规格原则，确认仪器和控制器工作区域符合规定， 如表6。 表6 硬件环境与安装确认序号描 述验证成果1仪器放在水平工作台上，计算机在仪器旁边。2检测器，输液泵，自动进样器，柱温箱，计算机、打印机和电源之间对的连接。3温度在5-35，湿度在45-85%之间。4室内无强电磁干扰源及有害有毒气体。5排风口和进风口对仪器和计算机无污染。6打开检测器，有信号浮现。7.2.7 软件配备确认目：确认安装应用软件符共计算机系统和外围设备规定，如表7。表7 软件配备确认序号描 述验证成果1打开电源开关，启动WINDOWS XP。2打开液相色谱仪各部件电源开关，在桌面上双击Instrument 1 Online图标。3确认Agilent ChemStation软件,仪器跟软件连接。4进入Agilent ChemStation主画面。7.2.8 部件清单目：确认仪器寻常维护和操作所需要消耗品和备用品，如表8。表8 部件清单部件名称数量存储地点备注7.2.9 维修服务确认目：确认仪器浮现故障后能及时解决，不影响操作。每本操作手册上均有简朴维护办法，通过仪器培训操作人员可以依照阐明书进行简朴维修和零部件更换。如果有其他比较大问题，顾客不能解决，可以电话告知厂家维修工程师。维修电话：7.3 安装确认成果阐明阐明此确认过程中与否依草案筹划进行。如有偏差或变更应依照“偏差管理规程”对此予以阐明并对与否通过或需补充内容加以阐明。8 运营确认8.1 目：证明液相色谱仪软硬件功能运营正常，并且达到设计规定及检测规定。8.2 运营确认内容8.2.1 噪音和漂移确认8.2.1.1 办法：检查条件：选用C18柱，以100%甲醇为流动相，流速为1.0ml/min，紫外检测器波长选在254nm。开机预热，待仪器稳定后记录基线60min,测得1min内基线波动幅度作为基线噪音，用检测器自身物理量（Au）作单位表达，基线漂移用60min内基线偏离原点值（Au/60min）作单位表达。检查办法：监视界面，依照PC计算机、记录仪60分钟图谱计算成果。8.2.1.2 可接受原则基线漂移：0.005AU/60min基线噪音：0.0001AU8.2.1.3 测试记录项 目承认质量原则附件号实测成果基线漂移0.005AU/60min基线噪声0.0001 AU8.2.2 波长精确性确认8.2.2.1 办法：波长精确度用波长示值误差表达。波长示值误差是设定检测器波长与实际波长之间差值。启动检测器，预热。配备一份100ug/mL咖啡因溶液，当咖啡因溶液从柱子洗脱并流入紫外可见检测器时，停止流速，用190nm到400nm波长对咖啡因溶液进行波长扫描，并输出各波长所相应吸光度，以波长为X轴，吸光度为Y轴建立一条二次曲线，二次曲线拐点相应X轴即为波长测得值。所测得波长与咖啡因特定吸取波长（205nm,245nm,273nm）差值即为波长示值误差。8.2.2.2 可接受原则波长精确度：2nm8.2.2.3 测试记录波长(nm)吸光度(mAU)二次曲线方程 (Y=ax2+bx+c)波长真实值 (nm)205波长测得值 (nm)示值误差 (nm)附件号波长(nm)吸光度(mAU)二次曲线方程 (Y=ax2+bx+c)波长真实值 (nm)245波长测得值 (nm)示值误差 (nm)附件号波长(nm)吸光度(mAU)二次曲线方程 (Y=ax2+bx+c)波长真实值 (nm)273波长测得值 (nm)示值误差 (nm)附件号8.2.3 流速确认8.2.3.1 办法：以水为流动相，将流速分别设定在0.5ml/min、1.0ml/min、2.0ml/min、待流速稳定后，用一校正过10ml容量瓶接受流动相并开始计时，当流动相接受至容量瓶刻度时停止计时并计算流速。每种流速做三次，按如下公式计算流速设定值误差，流速稳定性误差。8.2.3.2 可接受原则设定值误差：2% 稳定性误差：2%8.2.3.3 测试记录设定流速ml/min第1次收集时间（min）第2次收集时间（min）第3次收集时间（min）0.51.02.0设定流速ml/min第1次ml/min第2次ml/min第3次ml/min平均流速ml/min设定值误差%稳定性误差0.51.02.08.2.4 梯度比例确认8.2.4.1 办法:使用一根阻尼管(0.12mm)代替柱子，检测器波长调至265nm，流速1.0ml/min，流动相A:水，流动相B:0.5%丙酮，运营如下梯度程序。Time(min)%流动相A(water)%流动相B(0.5%丙酮)0.010000.1901010.0901010.1505020.0505020.1109030.0109030.1010040.0010040.1100050.01000打开泵，待流速稳定后，让泵开始执行梯度程序。程序完毕后，按下式计算：， ：单元B梯度；：每步梯度响应值 D=Vx-G， D：梯度精确性偏差；G：设立流动相B比例8.2.4.2 可接受原则 不超过18.2.4.3 测试记录HxH100VxGD10%50%90%附件号：8.2.5 先后进样带入量确认8.2.5.1 办法：选用4.6mm250mmC18或C8柱，流动相：甲醇：水=75：25，检测器254nm，流速1.0ml/min,进样量5ul，使用下列商业原则品进样。原则溶液(a):咖啡因溶液100ug/ml原则溶液(b):咖啡因溶液1ug/ml空白溶液:水备注：原则溶液分析证书必要作为附件以证明原则溶液是合用。进如下序列样：咖啡因溶液100ug/ml，1针水，1针咖啡因溶液1ug/ml，1针记录色谱并对咖啡因峰进行积分。8.2.5.2 可接受原则空白溶液中相应峰面积比例不超过原则溶液(a)中咖啡因峰面积0.1%；原则溶液(b)中咖啡因峰面积是原则溶液(a)中咖啡因峰面积0.9%-1.1%。8.2.5.3 测试记录咖啡因峰面积(mAu*S)附件号原则溶液(a)空白溶液原则溶液(b)8.2.6 柱温确认8.2.6.1 办法：设定柱温箱温度分别为30，40，将已校正过温度巡检仪探头放在柱温箱内，待仪器稳定2小时后，每隔0.5h观测温度巡检仪读数，持续观测三次。温度探头在柱温箱内分布见图1。 图1 温度探头在柱温箱内分布8.2.6.2 可接受原则柱温箱设定值误差（）：不超过2柱温箱稳定性（）：不超过18.2.6.3 测试记录仪器名称检定部门检定周期检定期间设定温度（）3040测定次数123柱温箱温度平均值（）柱温箱温度稳定性（）柱温箱设定值误差（）8.3 运营确认成果阐明阐明此确认过程中与否依草案筹划进行。如有偏差或变更应依照“偏差管理规程”对此予以阐明并对与否通过或需补充内容加以阐明。9 性能确认9.1 目：仪器运营确认完毕后来，在其功能实验符合规定状况下，应用原则品或对照品、或检测样品进行性能确认，以确认仪器符合使用规定。9.2 性能确认内容9.2.1 重现性9.2.1.1 办法：选用一根C8或C18柱，4.6mm250mm,5m。流动相:甲醇:水=75:25；流速:1.0ml/min；进样量:5ul；检测波长:254nm。启动检测器电源,将工作波长设立为254nm，预热，启动泵电源开关,流量设立为1.0ml/min(75%甲醇做流动相)，等待色谱柱充分平衡且检测器基线稳定,噪声和基线应符合规定规定,进咖啡因原则品溶液100ug/ml 10ul，进样六次。9.2.1.2 可接受原则定性测量重现性（RSD）：1.0%定量测量重现性（RSD）：1.0%9.2.1.3 测试记录原则品名称(浓度)/批号：_ 原则品COA附件号：_保存时间：RT1RT2RT3RT4RT5RT6相对原则偏差峰面积：A1A2A3A4A5A6相对原则偏差9.2.2 线性9.2.2.1 办法：选用一根C8或C18柱，4.6mm250mm,5m。流动相:甲醇:水=75:25； 流速:1.0ml/min；进样量:5ul；检测波长:254nm。启动检测器电源,将工作波长设立为254nm，预热，启动泵电源开关，流量设立为1.0ml/min(75%甲醇做流动相),等待色谱柱充分平衡且检测器基线稳定,噪声和基线应符合规定规定,进咖啡因原则品溶液200ug/ml，100ug/ml，25ug/ml，5ug/ml，1ug/ml 10ul,每个样进样1次。9.2.2.2 可接受原则有关系数R20.9999.2.2.3 测试记录原则品名称(浓度)/批号：_ 原则品COA附件号：_浓度 (ug/ml)峰面积(mAu*S)附件号1525100200原则曲线:有关系数R2:附件号:9.3 阐明此确认过程中与否依草案筹划进行。如有偏差或变更应依照“偏差管理规程”对此予以阐明并对与否通过或需补充内容加以阐明。10 验证周期10.1 目：旨在证明该设备验证状态没有发生漂移。10.2 依照药监部门或法规规定进行强制性再验证。10.3 药物生产过程中，由于各种主、客观因素，需要对该设备作某种变更。在这种状况下，变更也许对产品质量导致重要影响，因而，需要进行再验证。10.4 正常生产阶段，规定每年进行一次定期再验证。/