黄精桑葚酒增强免疫力实验研究.pdf

筛选评价Identification&SourceGendingSwhyenz 198黄精桑葚酒增强免疫力实验研究罗静，何丹，笪舫芳，张淼*，许立拔*（广西中医药大学，南宁 530200）基金项目：广西壮瑶药重点实验室（桂科基字201432号）、壮瑶药协同创新中心（桂教科研201320号）、广西壮族自治区民族药资源与应用工程研究中心（桂发改高技函20202605号）、广西中医药重点学科壮药学（GZXK-Z-20-64）、广西一流学科中药学（民族药学）（桂教科研201812号）第一作者：罗静，在读硕士研究生，研究方向为中药（壮瑶药）鉴定*通讯作者：张淼，助理研究员，在读博士，研究方向为中药及民族药的鉴定与开发；许立拔，硕士，助理工程师，主要从事中药及民族药研究与开发工作【摘 要】目的：研究黄精桑葚酒对衰老小鼠提高免疫力作用。方法：采用腹腔注射D-半乳糖建立衰老小鼠模型，各组小鼠分别灌胃蒸馏水及不同剂量黄精桑葚酒30d，测定小鼠体质量变化、免疫器官指数和血清中超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）水平。结果：黄精桑葚酒能促进衰老小鼠体质量的增长（P0.05），提高免疫器官指数，显著提高小鼠血清SOD活性（P0.01），但不能减少血清MDA含量。结论：黄精桑葚酒能增强衰老小鼠的免疫功能。【关键词】黄精桑葚酒；免疫力Study on Enhancing Immunity of Polygonatum sibiricum and Fructus mori wineLuo Jing，He Dan，Da Fangfang，Zhang Miao*，Xu Liba*（Guangxi University of Traditional Chinese Medicine，nanning 530200）【Abstract】Objective：To study the effect of Polygonatum sibiricum and Fructus mori wine on improving immunity of aging mice.Methods：The aging mouse model was established by intraperitoneal injection of D-galactose.The mice in each group were intragastrically administered with distilled water and different doses of Polygonatum sibiricum and Fructus mori wine for 30 days.The changes of body weight，immune organ index，superoxide dismutase（SOD）activity and malondialdehyde（MD-A）level in serum were measured.Results：Polygonatum sibiricum and Fructus mori wine can promote the growth of body weight in aging mice（P0.05），improve the immune organ index，significantly increase the activity of SOD in serum of mice（P0.01），but can not reduce the content of MDA in serum.Conclusion：Polygonatum sibiricum and Fructus mori wine can enhance the immune function of aging mice.【Keywords】Polygonatum sibiricum and Fructus mori wine；immunity酒是一种良好的溶媒，易进入药材组织溶解多种化学成分。保健酒是酒与药的结合，针对亚健康症状的缓解有其独特的优势。黄精是一种传统名贵中药，性平，味甘，具有补脾益气、滋肾益肺的功效。现有研究表明，黄精含有多糖、蒽醌、甾体皂苷等化学成分，具有抗疲劳、抗衰老、增强免疫力等作用。雎大员等1研究发现，黄精粗多糖能明显增加正常小鼠胸腺和脾脏的重量，激活小鼠网状内皮体统吞噬功能。现代研究表明，桑葚含有白藜芦醇、桑葚多糖、黄酮类化合物等功能性成分，具有调节免疫、抗疲劳、抗衰老等作用2。姚肖华3研究表明，桑葚多糖可促进淋巴细胞转化，改善妊娠小鼠免疫功能。本实验利用黄精桑葚酒对衰老小鼠免疫器官脏器指数、身体质量的影响及血清超氧化物歧化酶活性、丙二醛含量的影响，初步研究黄精桑葚酒衰老小鼠的调节免疫力作用，为进一步研究黄精桑葚酒的药理功效提供实验依据。199黄精桑葚酒增强免疫力实验研究1 材料1.1 动物160只雄性SPF级昆明种小鼠，湖南斯柯达生物科技股份有限公司许可证号：SCXK（湘）2016-0002。1.2 药物与试剂黄精桑葚酒（27Vol），广西壮瑶药重点实验室研制；0.9生理盐水，回音必集团（江西）东亚制药有限公司（批号：18041114）；D-半乳糖，国药集团化学试剂有限公司；超氧化物歧化酶（SOD）试剂盒、丙二醛（MDA）试剂盒，南京建成生物工程研究所（批号：181104、181015）。2 实验方法2.1小鼠血清SOD活性及MDA水平的测定每日1次，各组小鼠连续给药30 d，于灌胃末日禁食12 h，实验取样前称重并记录。取小鼠眼球血，离心后分离血清。用试剂盒测定血清超氧化物歧化酶（SOD）活性及丙二醛（MDA）含量，操作严格按照试剂盒说明书进行。2.2 免疫器官指数的计算小鼠脱颈处死，剖取胸腺、脾脏，去除脏器周围的脂肪和结缔组织，滤纸吸附血液，精确称质量。按如下所示公式计算免疫器官指数。免疫器官指数（mg/g）=脏器质量（mg）/小鼠体质量（g）2.3 数据统计分析所有数据采用“IBMSPSSS Statistics 21.0”软件进行统计学处理，计算各组数据的平均值及其标准差；采用t检验进行组间差异比较，当P0.05时认为数据有显著性差异，当P0.01时认为数据有极显著性差异。3 结果3.1黄精桑葚酒对亚急性衰老小鼠血清超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）水平的影响由表1可知，与衰老模型对照组小鼠血清SOD活性相比较，对照组、黄精桑葚酒低剂量组和黄精桑葚酒高剂量组的差异极为显著，具有统计学意义（P0.01），且对照组、黄精桑葚酒低剂量组和黄精桑葚酒高剂量组小鼠血清SOD活性均高于衰老模型对照组。与衰老模型对照组小鼠的血清MDA含量相比，对照组、黄精桑葚酒低剂量组和黄精桑葚酒高剂量组中只有黄精桑葚酒低剂量组有显著性差异，具有统计学意义（P0.05），但衰老模型对照组的MDA含量均低于其他三组。结果说明，黄精桑葚酒能显著增强亚急性衰老小鼠血清SOD活性，但不能降低衰老小鼠血清中MDA的含量。表1 不同剂量黄精桑葚酒对衰老小鼠血清SOD活性和MDA水平的影响（xs）组别动物数（只）SOD活性（U/mL）MDA水平（nmol/mL）衰老模型对照组105.000.118.762.58对照组1033.002.63*10.554.88黄精桑葚酒低剂量组1026.359.17*14.766.33*黄精桑葚酒高剂量组1026.8711.14*8.836.03注：与衰老模型对照组相比，*：P0.05；*：P0.01。3.2 黄精桑葚酒对亚急性衰老小鼠体质量和免疫器官指数的影响由表2可知，各组小鼠初始体质量之间无显著性差异，不具有统计学意义（P0.05），从终体质量来看除了对照组与衰老模型对照组相比无显著性差异（P0.05），黄精桑葚酒低剂量组和黄精桑葚酒高剂量组均与衰老模型对照组相比有显著性差异（P0.05）。与衰老模型对照组小鼠的体质量增长值相比较，对照组、黄精桑葚酒低剂量组和黄精桑葚酒高剂量组均具有显著性差异（P0.05），说明黄精桑葚酒对亚急性衰老小鼠体质量的增长有促进作用。表2 不同剂量黄精桑葚酒对衰老小鼠体质量的影响（xs，n=10）组别初始体质量（g）终体质量（g）体质量增长值（g）衰老模型对照组36.613.6244.343.497.731.69对照组33.862.0345.451.9911.591.36*黄精桑葚酒低剂量组36.052.7148.013.00*11.965.17*黄精桑葚酒高剂量组36.663.0048.1630.5*11.504.27*注：与衰老模型对照组相比，*：P0.05；*：P0.01。从表3可以看出，衰老模型对照组小鼠的胸腺指数除与对照组相比有显著性差异外（P0.05），与其余两组相比无显著性差异，不具有统计学意义（P0.05），但黄精桑葚酒低剂量组和高剂量组小鼠的胸腺指数均大于衰老模型对照组。从脾脏指数结果来看，筛选评价Identification&SourceGendingSwhyenz 200与衰老模型对照组相比，对照组、黄精桑葚酒低剂量组和黄精桑葚酒高剂量组有显著性差异，具有统计学意义（P0.05），其余三组之间无显著性差异，不具有统计学意义（P0.05）。结果表明，黄精桑葚酒对衰老小鼠免疫器官的衰老退化有抑制作用。表3 不同剂量黄精桑葚酒对衰老小鼠免疫器官的影响（xs，n=10）组别胸腺指数（mg/g）脾脏指数（mg/g）衰老模型对照组0.037 80.011 60.12100.0223对照组0.082 20.033 7*0.19140.0459*黄精桑葚酒低剂量组0.063 80.037 90.17500.0719*黄精桑葚酒高剂量组0.057 10.015 60.18750.0528*注：与衰老模型对照组相比，*：P0.05；*：P0.01。4 讨论用D-半乳糖建立的亚急性衰老小鼠模型会出现免疫力下降、抗氧化能力下降等变化。实验结果表明，与对照组小鼠体质量增长值、胸腺指数、脾脏指数相比，衰老模型对照组均有显著性差异且均低于正常对照组，提示衰老模型造模成功。与衰老模型对照组小鼠体质量增长值、胸腺指数、脾脏指数相比较，黄精桑葚酒低剂量组、高剂量组均大于衰老模型对照组，且体质量增长值、脾脏指数具有显著性差异，说明黄精桑葚酒能促进衰老小鼠体质量的增加，抑制免疫器官的萎缩。超氧化物歧化酶（SOD）是机体内的抗氧化酶，可将有害物质分解为无害物质。丙二醛（MDA）是一种对细胞有很大损害的醛类物质。血清中SOD活性增高，MDA含量降低，表明有一定抗氧化作用。而抗氧化与增强免疫力有一定内在联系。SOD实验结果显示，与衰老模型对照组相比较，黄精桑葚酒高、低剂量组血清中SOD活性提高且有显著性差异，但黄精桑葚酒不能降低血清中MDA含量，表明黄精桑葚酒可能有抗氧化作用。参考文献1睢大员，于晓凤.枸杞子、北五味子和黄精三种粗多糖的增强免疫与抗脂质还氧化作用J.白求恩医科大学学报，1996，22（6）：606-607.2王娜，范作卿，朱琳，等.桑葚的化学成分及应用研究进展J.现代农业科技，2017，695（9）：261-263，266.3姚肖华.桑葚多糖对妊娠小鼠免疫功能的影响J.营养学报，2013，35（5）：492-495.