安全性评价及生殖毒性.ppt

新新药药的的非非临临床床安全性安全性评评价价药药物的生殖与物的生殖与发发育毒性育毒性药药物毒理学第四物毒理学第四讲讲5/27/20241.5/27/20242.第一第一节节 新新药临药临床前床前药药理毒理研究的主要内容理毒理研究的主要内容5/27/20243.1 1、药药物注册分物注册分类类（1 1）未在国内外上市）未在国内外上市销销售的售的药药品；品；（2 2）改）改变给药变给药途径尚未在国内外上市途径尚未在国内外上市销销售售的的药药品；品；（3 3）已在国外市）已在国外市场场上上销销售但未在国内上市售但未在国内上市销销售的售的药药品；品；（4 4）改）改变变已上市已上市销销售售盐类药盐类药物的酸根、碱物的酸根、碱基，但不改基，但不改变药变药理作用的的原料理作用的的原料药药或制或制剂剂。（5 5）改）改变变国内已上市国内已上市销销售售药药品的品的剂剂型，但型，但不改不改变给药变给药途径的制途径的制剂剂；（6 6）已有国家）已有国家药药品品标标准的原料准的原料药药或制或制剂剂。5/27/20244.新新药药的安全性及有效性的安全性及有效性v药药理学研究理学研究主要主要药药效学效学一般一般药药理学理学药药代代动动力学力学v毒理学研究毒理学研究5/27/20245.毒理学研究毒理学研究急性毒性急性毒性长长期毒性期毒性局部特殊毒性局部特殊毒性过过敏性敏性溶血性溶血性刺激性刺激性免疫毒性免疫毒性遗传遗传毒性毒性生殖毒性生殖毒性致癌性致癌性依依赖赖性性致突致突变试验变试验主要内容主要内容主要主要药药效学效学试验试验一般一般药药理理试验试验多成分的相互影响多成分的相互影响药药代代动动力学力学试验试验药药理学研究理学研究5/27/20246.评评价目的价目的1.1.1.1.确定潜在的毒性靶器官和毒性反确定潜在的毒性靶器官和毒性反确定潜在的毒性靶器官和毒性反确定潜在的毒性靶器官和毒性反应应应应出出出出现现现现的的的的时时时时间间间间、性、性、性、性质质质质、程度及其可逆性、程度及其可逆性、程度及其可逆性、程度及其可逆性2.2.2.2.确定确定确定确定临临临临床床床床监测监测监测监测的安全性参数的安全性参数的安全性参数的安全性参数3.3.3.3.推算人体使用的安全起始推算人体使用的安全起始推算人体使用的安全起始推算人体使用的安全起始剂剂剂剂量以及随后的量以及随后的量以及随后的量以及随后的剂剂剂剂量量量量递递递递增方案增方案增方案增方案5/27/20247.具体具体问题问题具体分析具体分析品种特点品种特点最大限度暴露毒性（如果最大限度暴露毒性（如果临临床上存在某些方面的安全床上存在某些方面的安全性担性担忧时则应进忧时则应进行行该该方面的非方面的非临临床安全性研究）床安全性研究）执执行行GLP毒性暴露毒性暴露结结果向果向临临床床过过渡，利弊渡，利弊权权衡衡重在重在“评评价价”药药理毒理研究的整体性、理毒理研究的整体性、综综合性、合性、阶阶段性段性说说明明书书：“严进严进”、“宽进宽进”一般原一般原则则5/27/20248.（四）（四）药药物毒理学研究物毒理学研究在新在新药临药临床床试验阶试验阶段的任段的任务务第一期第一期临临床研究床研究第二期第二期临临床研究床研究第三期第三期临临床研究床研究不良反不良反应监测应监测探索安全的人用探索安全的人用剂剂量量安全性安全性 大范大范围围的社会考察的社会考察提高提高疗疗效，效，降低不良反降低不良反应应疗疗效（有效性）效（有效性）不良反不良反应应（安全性）（安全性）5/27/20249.三、三、药药理毒理研究理毒理研究资资料料16、药理毒理研究资料综述；17、主要药效学试验资料及文献资料；18、一般药理研究的试验资料及文献资料；19、急性毒性试验资料及文献资料；20、长期毒性试验资料及文献资料；21、过敏性（局部、全身和光敏毒性）、溶血性和局部（血管、皮肤、粘膜、肌肉等）刺激性等主要与局部、全身给药相关的特殊安全性试验研究和文献资料；22、复方制剂中多种成份药效、毒性、药代动力学相互影响的试验资料及文献资料；23、致突变试验资料及文献资料；24、生殖毒性试验资料及文献资料；25、致癌试验资料及文献资料；26、依赖性试验资料及文献资料；27、动物药代动力学试验资料及文献资料；四、四、临临床研究床研究资资料料28、国内外相关的临床研究资料综述；29、临床研究计划及研究方案；30、临床研究者手册；31、知情同意书样稿、伦理委员会批准件；32、临床研究报告；一、一、综综述述资资料料1、药品名称；2、证明性文件；3、立题目的与依据；4、对主要研究结果的总结及评价；5、药品说明书样稿、起草说明及最新参考文献；6、包装、标签设计样稿；二、二、药药学研究学研究资资料料7、药学研究资料综述；8、原料药生产工艺的研究资料及文献资料；制剂处方及工艺的研究资 料及文献资料；9、确证化学结构或者组份的试验资料及文献资料；10、质量研究工作的试验资料及文献资料；11、药品标准草案及起草说明，并提供标准品或者对照品；12、样品的检验报告书；13、辅料的来源及质量标准；14、药物稳定性研究的试验资料及文献资料；15、直接接触药品的包装材料和容器的选择依据及质量标准；新药申报材料汇总5/27/202410.一次或一次或24小小时时内多次内多次给给予予动动物物给药给药途径途径阴性阴性对对照照组组判断安全范判断安全范围围急性毒性研究急性毒性研究5/27/202411.急性毒性研究急性毒性研究F最大无反最大无反应剂应剂量量F未未见见反反应剂应剂量（量（NOEL）：No Observed Effect LevelF未未见见不良反不良反应剂应剂量（量（NOAEL）：）：No Observed Adverse Effect LevelF最小毒性反最小毒性反应剂应剂量量F最大耐受量（最大耐受量（MTD）：）：Maximal Tolerance DoseF最小致死最小致死剂剂量（量（MLD）：）：Minimal Lethal DoseF半数致死量（半数致死量（LD50）：）：Median Lethal Dose5/27/202412.相关相关动动物物给药给药途径途径剂剂量量毒代毒代动动力学力学药药药药代研究在毒理学研究的延伸代研究在毒理学研究的延伸代研究在毒理学研究的延伸代研究在毒理学研究的延伸阶阶段性段性以不同以不同给药给药期限的期限的长长期毒性研究来分期毒性研究来分别别支持支持药药物物进进入入 期、期、期或期或期期临临床床试验试验（生（生产产）长长期毒性研究期毒性研究5/27/202413.支持支持临临床床疗疗程超程超过过2 周的周的药药物物II 期和期和III 期期临临床床试验试验所需所需动动物物长长期毒性研究的最短期毒性研究的最短给药给药期限期限5/27/202414.检测检测指指标标 常常规规指指标标（一般症状、体重、（一般症状、体重、摄摄食量）食量）血液学指血液学指标标：10项项血液生化学指血液生化学指标标：12项项（非（非啮齿类啮齿类16项项）尿液分析指尿液分析指标标：9项项（非（非啮齿类啮齿类）体温、血体温、血压压、呼吸、心、呼吸、心电图电图及眼科及眼科检查检查（非（非啮啮 齿类齿类）组织组织病理学病理学检查检查脏脏器系数：器系数：12项项组织组织病理学病理学检查检查：30项项（非（非啮齿类啮齿类33项项）恢复期恢复期5/27/202415.局部用局部用药药特殊毒性研究特殊毒性研究刺激性刺激性给药给药部位的可逆性炎症改部位的可逆性炎症改变变过过敏性敏性（变态变态反反应应或超敏反或超敏反应应）特异性免疫反特异性免疫反应应，表，表现为组织损伤现为组织损伤或生理功能紊乱，异常或病理性的或生理功能紊乱，异常或病理性的型，快型，快发发或速或速发过发过敏型，敏型，IgE介介导导型，型，细细胞毒型或溶胞毒型或溶细细胞型，胞型，IgG介介导导型，免疫复合物型或血管炎型，免疫复合物型或血管炎型，型，IgG、IgM介介导导型，型，迟发迟发型或型或结结核菌素型，核菌素型，T淋巴淋巴细细胞介胞介导导光敏性光敏性光毒性（光刺激性）光毒性（光刺激性）光光过过敏性（光敏性（光变态变态反反应应）型型变态变态反反应应溶血性溶血性溶血及溶血及红细红细胞凝聚胞凝聚免疫性溶血免疫性溶血型和型和 型型过过敏反敏反应应非免疫性溶血非免疫性溶血5/27/202416.刺激性刺激性制剂阴性对照皮肤刺激性注射给药部位刺激性眼刺激性其他途径给药部位刺激性5/27/202417.过过敏性敏性注射注射给药给药全身主全身主动过动过敏敏试验试验（ASA）皮肤被皮肤被动过动过敏敏试验试验（PCA）经经皮皮给药给药豚鼠最大化豚鼠最大化试验试验（GPMT）Buehler试验试验（BT）吸入吸入给药给药豚鼠吸入豚鼠吸入诱导诱导刺激刺激试验试验皮肤光毒性皮肤光毒性试验试验皮肤光皮肤光过过敏性敏性试验试验阳性和阴性阳性和阴性对对照照5/27/202418.溶血性溶血性体外体外试试管法（肉眼管法（肉眼观观察）察）分光光度法分光光度法阴性阴性对对照照阳性阳性对对照（照（视视情况）情况）5/27/202419.免疫毒性研究免疫毒性研究评评价潜在的免疫原性价潜在的免疫原性 检测检测血清抗体滴度血清抗体滴度免疫复合物形成免疫复合物形成间间接引起生物活性分子接引起生物活性分子释释放放 病理毒性（病理毒性（结结合在合在长长毒中毒中观观察）察）淋巴器官称重淋巴器官称重血液学，血血液学，血细细胞分胞分类计类计数数免疫器官免疫器官组织组织病理学病理学检查检查5/27/202420.免疫毒性研究免疫毒性研究对对免疫功能的影响免疫功能的影响对对脾抗体形成脾抗体形成细细胞（胞（PFCPFC）的影响（体液免疫功能）的影响（体液免疫功能HMIHMI）溶血空斑溶血空斑试验试验 对对小鼠小鼠迟发迟发性性变态变态反反应应的影响（的影响（DTHDTH，细细胞免疫功能胞免疫功能CMICMI）放免放免/DNFB/DNFB二硝基氟苯二硝基氟苯 淋巴淋巴细细胞增殖胞增殖试验试验：有：有丝丝分裂原（分裂原（PHAPHA，ConAConA，LPS LPS，PWMPWM）刺激成淋巴）刺激成淋巴细细胞化作用胞化作用 NKNK细细胞活性胞活性测测定：乳酸脱定：乳酸脱氢氢酶酶（LDHLDH）释释放法放法 过过敏反敏反应应-人源蛋白豚鼠价人源蛋白豚鼠价值值很小，尚无可靠手段很小，尚无可靠手段5/27/202421.v鼠鼠伤伤寒沙寒沙门门氏菌氏菌营营养缺陷型回复突养缺陷型回复突变试验变试验（Ames试验试验）阴性及阳性阴性及阳性对对照照S9代代谢谢激活激活 v中国中国仓仓鼠肺成鼠肺成纤维细纤维细胞（胞（CHLCHL）染色体畸染色体畸变试验变试验空白、溶空白、溶剂剂、阳性、阳性对对照照S9代代谢谢激活激活v啮齿动啮齿动物（小鼠）微核物（小鼠）微核试验试验阴性及阳性阴性及阳性对对照照遗传遗传毒性（致突毒性（致突变变）研究）研究5/27/202422.v段段 一般生殖毒性一般生殖毒性试验试验雌性受孕、分娩、活胎与死胎、外雌性受孕、分娩、活胎与死胎、外观观、骨骼与内、骨骼与内脏脏等等雄性生育能力雄性生育能力v段段 致畸敏感期毒性致畸敏感期毒性试验试验胚胎毒性和潜在的致畸性胚胎毒性和潜在的致畸性v段段 围产围产期毒性期毒性试验试验子代子代动动物物生殖毒性研究生殖毒性研究5/27/202423.致癌性研究致癌性研究 创创新新药药 v 短期致癌短期致癌试验试验哺乳哺乳动动物培养物培养细细胞胞恶恶性性转转化化试验试验小鼠小鼠肿肿瘤瘤诱发试验诱发试验v 长长期致癌期致癌试验试验5/27/202424.具有精神神具有精神神经经作用的作用的药药物需要提供物需要提供 身体依身体依赖赖性性试试Q镇镇痛痛药药、镇镇静催眠静催眠药药 催促催促试验试验 诱导试验诱导试验自然戒断自然戒断试验试验或替代或替代试验试验 精神依精神依赖赖性性试验试验自身自身给药给药药药物依物依赖赖性研究性研究5/27/202425.1.1.科学的，科学的，“case-by-case”case-by-case”的的设计设计思路思路2.2.通通过药过药理作用来理作用来选择选择相关相关动动物物3.3.可采用一种可采用一种动动物物4.4.免疫原性非常重要免疫原性非常重要5.5.遗传遗传毒性通常不要求毒性通常不要求6.6.代代谢谢研究通常不要求研究通常不要求7.7.两年的致癌性两年的致癌性试验试验通常不要求通常不要求8.8.没有仿制品？没有仿制品？1.1.大多数品种的研究内容相似大多数品种的研究内容相似2.2.通通过过代代谢谢来来选择选择相关相关动动物物3.3.要求采用要求采用啮齿啮齿和非和非啮齿类动啮齿类动物物进进行行试验试验 4.4.通常没有免疫原性通常没有免疫原性5.5.要求要求进进行行遗传遗传毒性研究毒性研究 6.6.要求要求进进行代行代谢谢研究研究 7.7.要求要求进进行两年的致癌性行两年的致癌性试验试验8.8.有仿制品有仿制品生物制品生物制品小分子化合物小分子化合物非非临临床安全性床安全性评评价的主要不同价的主要不同5/27/202426.第二第二节节药药物生殖和物生殖和发发育毒性作用育毒性作用5/27/202427.5/27/202428.生殖过程 生殖细胞的发生形成 交配 受精 合子形成 着床 胚胎形成及发育 分娩 哺乳生殖毒性学发发育毒性学育毒性学5/27/202429.一、生殖毒性和发育毒性常用的术语1、胚胎毒性 指药物对胚胎的选择毒性 作用。2、胚胎毒物 具有胚胎毒性的物质。3、致畸性 指胚胎在器官发育期接触药 物后，能造成永久性结构或 功能畸形。5/27/202430.4、致畸剂 具有致畸性并使出生缺 陷发生率明显增加的物质。5、母体毒性 指对怀孕动物的毒性 效应。6、致畸指数 指药物等对母体的半 数致死量与最小致畸量之比。5/27/202431.二、男性生殖毒性学 男性生殖毒性学 精子的产生 精子输送 神经系统 内分泌系统5/27/202432.一）精子发生易感性精子的产生过程5/27/202433.特定靶位睾丸内环境 与精子快速生成过程有关的细胞分裂和代谢活性，对某些类型的损伤特别敏感。药物特别容易损害DNA或影响快速生长组织需要的细胞蛋白功能或细胞呼吸。DNA损害 蛋白质损伤 5/27/202434.二）下丘脑-垂体-性腺轴激素调节 下丘脑-垂体-性腺轴 雄激素 黄体生成素（LH）促性腺激素释放激素（GnRH）5/27/202435.三、女性生殖毒理学女性生殖毒理学女性生殖系统的功能 5/27/202436.一）卵细胞毒性 阻滞原始卵母细胞，影响进一步的成熟和排卵。如抗癌药-白消安。二）卵巢体细胞和生殖道毒性 卵巢体萎缩环氧树脂、呋喃妥因 输卵管和子宫萎缩镉5/27/202437.三）生殖功能激素调节和相关毒性1.下丘脑-垂体-性腺轴2.促性腺激素释放激（GnRH）3.黄体生成素LH4.促卵泡素FSH5.雌激素6.孕激素5/27/202438.四、发育毒理学 发育毒理学关注的是受精后胚胎发育的整个过程。5/27/202439.发育的三个过程 早胚期 后胚期 胎儿期一）自发流产和胚胎丢失二）胚胎毒性反应三）胎儿发育损害5/27/202440.五、毒性试验一）一般生殖毒性试验 药物对生殖过程第一阶段的影响，主要反映妊娠前及妊娠初期的情况。实验方法：1、动物 2、剂量与给药途径 3、给药时间 4、对照组 5、观察与报告5/27/202441.二）致畸胎试验 生殖过程第二阶段，确定药物是否具有胚胎毒性或致畸性。实验方法：1、动物 2、剂量与给药途径 3、给药时间 4、对照组 5、观察与检查 6、报告 7、判定 5/27/202442.三）围生期毒性试验 生殖过程第三阶段，反映药物对胚胎发育后期、母代分娩过程、哺乳期的影响。实验方法：1、动物 2、剂量与给药途径 3、给药时间 4、对照组 5、观察与报告5/27/202443.小结一、常用术语 1、胚胎毒性 2、致畸性 3、致畸剂 4、母体毒性 5、致畸指数二、男性生殖毒理学 1、精子易感性 2、下丘脑-垂体-性腺轴激素调节三、女性生殖毒理学 1、卵细胞毒性 2、卵巢体细胞和生殖毒性 3、生殖功能激素调节和相关毒性四、发育毒理学 1、自发流产和胚胎丢失 2、胚胎毒性反应五、毒性试验 1、一般生殖毒性试验 2、致畸胎试验 3、围生期毒性试验5/27/202444.5/27/202445.