核酸类药物-(2)ppt课件.ppt

第十二章第十二章 核酸核酸类药物物1.“珍奥核酸”的争论l1998年4月，大连珍奥核酸科技发展有限公司在大连开发区建成一期工程。l珍奥核酸说明书摘录 增强基因自我修复能力，显著改善脑机能，促进新陈代谢及细胞分裂，提高免疫力，美容养颜润肤。核酸具有抗病毒，抑肿瘤，抗衰老，健脑益智的功效。在临床实验中，令医学界十分惊奇的是：在糖尿病及并发症，肝脏疾病，高脂血症，脑血栓后遗症等心脑血管疾病，老年痴呆症，肢体震颤麻痹（帕金森氏病），关节炎，白细胞减少症，神经系统疾病，性功能减退，肝肾受损等诸多方面，核酸都显现出独特的保健功效。2.在广告中加入38位因研究核酸而获得诺贝尔奖的科学家的材料 3.l“珍奥核酸”被列入“98年国家级火炬计划”，成为大连的重点推荐产品。l在两年的时间里，“珍奥核酸”获得：l“全国第十二届发明展览金奖”l中国保健科技协会“向消费者推荐产品”l卫生部“2000年中老年保健国际学术论坛暨中国保健品国际博览会金奖”l辽宁省政府“医药行业科技进步一等奖”4.5.l方舟子：“核酸营养是个商业大骗局”l中国“人类基因组计划”项目负责人杨焕明：“所谓核酸食品在营养价值上和米粉没有太大的差别”l加州理工学院院长戴维巴尔的摩（1975年诺贝尔医学奖）：“据我所知，没有证据表明核酸是一种营养物或有益健康。在我看来它不可能有任何益处。”6.l如何分清核酸、核酸药物、珍奥核酸三者之间的区别？7.第十四章 核酸类药物l第一节 核酸类药物概述l第二节 天然核酸类物质的制取l第三节 核酸类结构改造药物的制备8.第十四章 核酸类药物l第一节 核酸类药物概述 1.核酸类药物概述 2.核酸类药物分类l第二节 天然核酸类物质的制取l第三节 核酸类结构改造药物的制备9.第十四章 核酸类药物l第一节 核酸类药物概述l第二节 天然核酸类物质的制取 1.RNA与DNA的提取与制备 （一）RNA的提取与制备 （二）DNA的提取与制备 2.单核苷酸的制备 （一）酶解法 （二）发酵法生产核苷酸 （三）半合成法制备核苷酸 3.核苷的制备 （一）RNA化学水解法制备核苷 （二）发酵法生产核苷l第三节 核酸类结构改造药物的制备10.第十四章 核酸类药物l第一节 核酸类药物概述l第二节 天然核酸类物质的制取l第三节 核酸类结构改造药物的制备 1.叠氮胸苷（AZT）2.阿糖腺苷 3.三氮唑核苷 4.阿糖胞苷 5.聚肌胞苷酸(PolyI:C）6.胞二磷胆碱11.核酸类药物概述l在在18691869年，年，F.MischerF.Mischer从从细胞核中分离得到一种胞核中分离得到一种酸性物酸性物质，即，即现在被称在被称为核酸核酸的物的物质。l19391939年，年，E.KnappE.Knapp等第一次用等第一次用实验方法方法证实核酸核酸是生命是生命遗传的基的基础物物质。l核酸不核酸不仅携携带有各种生物所特有的有各种生物所特有的遗传信息而且信息而且影响生物的蛋白影响生物的蛋白质合成和脂肪、糖合成和脂肪、糖类的代的代谢。12.核酸类药物概述l核酸是一种多聚体大分子，它的核酸是一种多聚体大分子，它的组成成单元是核苷元是核苷酸，将核苷酸中的磷酸基酸，将核苷酸中的磷酸基团去掉，剩余部分称核去掉，剩余部分称核苷，核苷苷，核苷进一步分解可生成戊糖和碱基。一步分解可生成戊糖和碱基。胰核酸胰核酸酶胰、胰、肠核苷酸核苷酸酶核苷核苷酶13.核酸类药物概述l核酸核酸类药物物则正是在恢复它正是在恢复它们的正常代的正常代谢或干或干扰某些异常代某些异常代谢中中发挥作用的。作用的。高尿酸血症：尿酸高尿酸血症：尿酸盐结晶沉晶沉积于关于关节、软组织、软骨及骨及肾，导致关致关节炎、尿路炎、尿路结石和石和肾脏疾病。疾病。l治治疗：别嘌呤醇呤醇14.核酸类药物概述l核苷及其衍生物干扰病毒DNA的合成，治疗病毒疾病。l腺苷、肌苷、尿苷、核苷酸、脱氧核苷酸、双丁酰环腺苷酸、胞二磷胆碱、核苷三磷酸等核酸组分及衍生物，是天然的代谢激活剂，有助于改善机体的物质代谢和能量代谢，加速受损组织的修复。临床广泛用于放射病、血小板减少、急慢性肝炎、血细胞减少、心血管疾病等。l辅酶A是调节糖、脂肪及蛋白质代谢的重要因子，用于治疗动脉硬化、脂肪肝、各种肝炎等。15.l嘌呤核苷酸GMPAMPl嘧啶核苷酸的结构16.核酸类药物分类具有天然具有天然结构的核酸构的核酸类物物质l如：如：ATP、GTP、CTP、UTP、IMP、CoA、CoI(NAD+)、CoII(NADP+)。l这类药物有助于改善物物有助于改善物质代代谢和能量平衡，和能量平衡，修复受修复受损组织，促使缺氧，促使缺氧组织恢复正常生恢复正常生理机能。理机能。l临床上广泛用于放射病、血小板减少症、白床上广泛用于放射病、血小板减少症、白细胞减少症、急慢性肝炎、心血管疾病和胞减少症、急慢性肝炎、心血管疾病和肌肉萎肌肉萎缩等的治等的治疗。17.核酸类药物分类具有天然具有天然结构的核酸构的核酸类物物质l这些些药物多数是生物体自身能物多数是生物体自身能够合成的物合成的物质，在，在具有一定具有一定临床功能的前提下，毒副作用小，它床功能的前提下，毒副作用小，它们的生的生产基本上都可以基本上都可以经微生物微生物发酵或从生物酵或从生物资源源中提取。中提取。lATPATP：用于心肌炎、心肌梗死、心力衰竭、及：用于心肌炎、心肌梗死、心力衰竭、及动脉或冠状脉或冠状动脉硬化、脉硬化、肝炎等的治肝炎等的治疗或或辅助治助治疗。l肌苷：用于急慢性肝炎、肝硬化、白肌苷：用于急慢性肝炎、肝硬化、白细胞减少、血小板减少等。胞减少、血小板减少等。18.核酸类药物分类自然自然结构核酸构核酸类物物质的的类似物和似物和聚合物聚合物l它它们是当今人是当今人类治治疗病毒、病毒、肿瘤、艾滋病的瘤、艾滋病的重要重要药物，也是物，也是产生干生干扰素、免疫抑制的素、免疫抑制的临床床药物。物。l主要有叠氮胸苷、阿糖腺苷、阿糖胞苷、聚主要有叠氮胸苷、阿糖腺苷、阿糖胞苷、聚肌胞等。肌胞等。19.核酸类药物分类自然自然结构核酸构核酸类物物质的的类似物和似物和聚合物聚合物l它它们大部分通大部分通过由自然由自然结构的核酸构的核酸类物物质进行半合成行半合成为结构改造物，或者采用化学一构改造物，或者采用化学一酶合成法。合成法。20.珍奥核酸究竟是什么？是从动植物组织中提取的核酸类物质，并不一定含有上述核酸类药物。因而珍奥核酸是一种保健品，服用珍奥核酸起不到上述治疗作用，保健品也不应作为药物使用。21.（一）（一）RNA的提取与制的提取与制备 在工在工业上主要由上主要由RNA生生产5-核苷酸。核苷酸。RNA经桔青桔青酶作用可得作用可得鲜厚味厚味强的的5-呈味核苷呈味核苷酸；在医酸；在医药上，可治肝炎、心上，可治肝炎、心脏病、关病、关节炎、抗炎、抗癌和抗病毒；癌和抗病毒；RNA还可可应用于洗用于洗涤剂、乳化、乳化剂、奶液和雪花膏等，在日用化奶液和雪花膏等，在日用化妆品中，有品中，有润肤养肤养颜的效果；在的效果；在农业生生产中，中，RNA的使用可使的使用可使农作作物早熟和增物早熟和增产。22.（一）（一）RNA的提取与制的提取与制备l1.RNA的工的工业来源来源 从微生物中提取从微生物中提取RNA，是工，是工业上最上最实际和有效的方法，和有效的方法，一些最常一些最常见的菌体含有丰富的核酸的菌体含有丰富的核酸资源。源。通常在细菌中RNA占5-25，在酵母中占2.715，在霉菌中占0.7%28%,面包酵母含RNA4.17.2。l2.高高RNA含量酵母菌体的含量酵母菌体的筛选 酵母菌体收率高，易于提取RNA。可以从自然界可以从自然界筛选并可用并可用诱变育种的方法提高酵母的育种的方法提高酵母的RNA含量。含量。23.（一）（一）RNA的提取与制的提取与制备l发酵法生酵法生产高含量高含量RNARNA酵母及其酵母及其RNARNA提取工提取工艺流程流程见图12-812-8。24.（一）（一）RNA的提取与制的提取与制备l3用工用工业废水培养高含量水培养高含量RNA酵母酵母 使用工使用工业废水培养高含量水培养高含量RNA酵母酵母减少减少环境境污染，降低粮食消耗染，降低粮食消耗，如味精生，如味精生产废水中的成份基水中的成份基本上可供酵母生本上可供酵母生长。25.（一）（一）RNA的提取与制的提取与制备l4.RNA提取实例26.（二）（二）DNA的提取与制的提取与制备 DNA，可以促进细胞的活化，调节新陈代谢，延缓机体衰老，维护正常免疫功能有积极的作用。l1工工业用用DNA的提取的提取 从冷冻鱼精中提取。鱼精中主要含有核蛋白、酶类以及多种微量元素。核蛋白的主要成分是脱氧核糖核酸(DNA)和碱性蛋白质(鱼精蛋白)，其中DNA 占大约23。纤维状状DNADNA沉淀沉淀27.（二）（二）DNA的提取与制的提取与制备l2具有生物活性具有生物活性DNA的制的制备 可从可从动物内物内脏（肝、脾、胸腺）中提取制（肝、脾、胸腺）中提取制备，操作条件，操作条件03。动物内脏加4倍量生理盐水经组织捣碎机捣碎1分钟，匀浆于2500rpm离心30分钟，沉淀用同样体积的生理盐水洗涤3次，每次洗涤后离心，将沉淀悬浮于20倍量的冷生理盐水中，再捣碎3分钟，加入2倍量5十二烷基磺酸钠，并搅拌23小时，在0 2500rpm离心，在上层液中加入等体积的冷乙醇，离心即可得纤维状DNA，再用冷乙醇和丙酮洗涤，减压低温干燥得粗品DNA。28.（一）（一）酶解法解法1.酶解法制解法制备脱氧核苷酸，脱氧核苷酸，参参见吴梧桐主吴梧桐主编，p33029.（一）（一）酶解法解法2.酶解法制解法制备戊糖核苷酸，戊糖核苷酸，参参见吴梧桐主吴梧桐主编，p33130.（一）（一）酶解法解法l3双双酶法生法生产肌苷酸和肌苷酸和鸟苷酸（苷酸（I+G）。）。l呈味核苷酸的主要品种是呈味核苷酸的主要品种是肌苷酸肌苷酸钠和和鸟苷酸苷酸钠，商，商品名称品名称为（I+G），用核），用核酸酸酶P1降解降解RNA可可获得得GMP和和AMP，其中，其中AMP经脱氨生成脱氨生成IMP。l双双酶法生法生产肌苷酸和肌苷酸和鸟苷苷酸的工酸的工艺流程流程l参参见吴梧桐主吴梧桐主编，p33031.（一）（一）酶解法解法l4菌体自溶法生菌体自溶法生产核苷酸核苷酸l 磷酸二磷酸二酯酶在合适的条件下降解在合适的条件下降解细胞内的胞内的RNA可可产生生5-核苷酸。在国内用谷氨酸核苷酸。在国内用谷氨酸产生菌体自溶生菌体自溶法生法生产5-核苷酸。工核苷酸。工艺流程如下：流程如下：32.（一）（一）酶解法解法l5碱水解法生碱水解法生产2、3-混合核苷酸。混合核苷酸。l用用酶法降解法降解RNA得到的是得到的是5-核苷酸，可用于生核苷酸，可用于生产呈味核苷酸。呈味核苷酸。l2、3-混合核苷酸在医药上有它的特殊用途。对血小板减少，白血球减少症和癌症化疗后升白血球均有较好疗效。l用碱水解用碱水解RNA 可可产生生2、3-混合核苷酸。混合核苷酸。实际上，是由于稀碱水解上，是由于稀碱水解过程中，先形成一个中程中，先形成一个中间环状物状物2、3 环状核苷酸，它很不状核苷酸，它很不稳定，定，进一步水一步水解生成解生成2，3 核苷酸。核苷酸。33.（二）（二）发酵法生酵法生产核苷酸核苷酸IMP生成生成总反反应过程程34.SAMP合成合成酶 IMP脱脱氢酶SAMP裂解裂解酶 GMP合成合成酶AMP和和GMP的生成的生成 SAMP（二）（二）发酵法生酵法生产核苷酸核苷酸35.（二）（二）发酵法生酵法生产核苷酸核苷酸l1发酵法生酵法生产肌苷酸（肌苷酸（IMP）l肌苷酸肌苷酸钠是一种高效增是一种高效增鲜剂，在谷氨酸，在谷氨酸钠中中添加添加2%，鲜度可以增加度可以增加3倍。因此在味精倍。因此在味精中添加肌苷酸中添加肌苷酸钠后成后成为第二代特第二代特鲜味精。味精。l l(1)产氨短杆菌氨短杆菌嘌呤核苷酸生物合成途径，呤核苷酸生物合成途径，代代谢调控和肌苷酸控和肌苷酸发酵机制。酵机制。（参（参见吴梧桐主吴梧桐主编，p333）36.（二）（二）发酵法生酵法生产核苷酸核苷酸37.（二）（二）发酵法生酵法生产核苷酸核苷酸l对5 -IMP的生物合成来的生物合成来说，关，关键的的酶是是PRPP转酰胺胺酶，利用，利用产氨短杆菌直接氨短杆菌直接发酵法生酵法生产肌苷酸肌苷酸的关的关键：l使用腺使用腺嘌呤缺陷型菌株。呤缺陷型菌株。l提供提供亚适量腺适量腺嘌呤从而解除了呤从而解除了对PRPP转酰胺胺酶的活性影响。的活性影响。l选育育Mn2+不敏感性不敏感性变异株异株l菌本身的菌本身的5 -核苷酸降解核苷酸降解酶活力低活力低38.（二）（二）发酵法生酵法生产核苷酸核苷酸l2.发酵法生酵法生产黄苷酸（黄苷酸（XMP）及）及酶法法转化成化成鸟苷苷酸（酸（GMP）。）。鸟苷酸苷酸钠是比肌苷酸是比肌苷酸钠更更强的增的增鲜剂，它，它还是三氮是三氮唑核苷和无核苷和无环鸟嘌呤的原料，因此在食品呤的原料，因此在食品工工业和制和制药行行业中需求量很大。中需求量很大。然而直接然而直接发酵生酵生产GMP产量很低，没有生量很低，没有生产价价值。39.（二）（二）发酵法生酵法生产核苷酸核苷酸l黄苷酸（黄苷酸（XMP）是）是鸟苷酸（苷酸（GMP）的前体）的前体产物，物，可以通可以通过累累积黄苷酸（黄苷酸（XMP），之后再用），之后再用酶转化化法生法生产GMP。l菌种菌种A：丧失失GMP合成合成酶的的鸟嘌呤缺陷型和腺呤缺陷型和腺嘌呤缺陷型。呤缺陷型。l菌种菌种B：5-核苷酸分解力微弱，核苷酸分解力微弱，GMP合成合成酶活性活性强.l控制控制A、B菌接种比例，混合培养，大量菌接种比例，混合培养，大量产生生XMP并高效并高效转化成化成GMP。40.（三）半合成法制（三）半合成法制备核苷酸核苷酸l由于由于发酵法生酵法生产核苷的核苷的产率很高，因此可由率很高，因此可由发酵酵法生法生产核苷后核苷后经提取，精制再提取，精制再经磷酸化制取核苷磷酸化制取核苷酸。酸。l方法：将核苷方法：将核苷悬浮于磷酸三甲浮于磷酸三甲酯或磷酸三乙或磷酸三乙酯中，中，在冷却条件下加入在冷却条件下加入氯化氧磷，化氧磷，进行磷酸化。从核行磷酸化。从核苷生成苷生成5-核苷酸收率可达核苷酸收率可达90%。41.核苷的制核苷的制备l核苷是多种核苷核苷是多种核苷类药物的原料，物的原料，这些些药物通物通常是生物自身能常是生物自身能够合成的合成的组成成遗传物物质的的结构构类似物，目前已用于似物，目前已用于临床的此床的此类药物物有几十种有几十种l另外，核苷的另外，核苷的发酵法生酵法生产水平大大高于同水平大大高于同类结构核苷酸的构核苷酸的发酵水平，因此肌苷酸酵水平，因此肌苷酸钠，鸟苷酸苷酸钠可分可分别由肌苷和由肌苷和鸟苷苷经化学磷酸化学磷酸化方法合成，化方法合成，ATP由腺苷由腺苷酯法合成。法合成。42.（一）（一）RNA化学水解法制化学水解法制备核苷核苷RNA以以甲甲酰胺胺化化学学水水解解，树脂脂分分离离、结晶晶，可可制制得得4种种核苷。核苷。43.（二）（二）发酵法生酵法生产核苷核苷l发酵法生酵法生产核苷是近代核苷是近代发酵工程酵工程领域中的杰出成域中的杰出成果，果，产率高，周期短，控制容易，率高，周期短，控制容易，产量大。量大。l菌种：枯草芽菌种：枯草芽孢杆菌或短小芽杆菌或短小芽孢杆菌杆菌变异株，异株，嘌呤核苷分解活性低，而呤核苷分解活性低，而嘌呤核苷酸呤核苷酸酶活性高。活性高。l 枯草杆菌的枯草杆菌的嘌呤核苷酸合成途径。呤核苷酸合成途径。(参参见吴梧桐主吴梧桐主编，p337)44.ADPAMPGMPGTPGDPSAMPIMPXMPAMP脱氨酶IMP脱氢酶GMP还原酶SAMP合成酶PRPPAICARSAICARPRPPATPSAMP裂解酶GMP合成酶 （二）（二）发酵法生酵法生产核苷核苷l在右在右边的合成途径中，的合成途径中，嘌呤呤核苷酸生物合成的第一个核苷酸生物合成的第一个酶PRPP转酰胺胺酶受受AMP、ADP、以及腺、以及腺嘌呤衍生物的呤衍生物的强烈抑制而受烈抑制而受鸟嘌呤衍生物呤衍生物的抑制很弱。的抑制很弱。IMP脱脱氢酶受受最最终产物物GMP及及鸟嘌呤衍生呤衍生物反物反馈抑制，抑制，SAMP合成合成酶受受AMP反反馈抑制的。抑制的。l枯草杆菌的腺枯草杆菌的腺嘌呤缺陷型，呤缺陷型，当培养基中提供限量腺当培养基中提供限量腺嘌呤呤时就累就累积肌苷。肌苷。l而枯草杆菌的腺而枯草杆菌的腺嘌呤、黄呤、黄嘌呤缺陷型，当培养基中提供呤缺陷型，当培养基中提供限量限量鸟嘌呤呤时就累就累积腺苷。腺苷。枯草杆菌的嘌呤核苷酸合成途径PRPP转酰胺酶45.1发酵法生酵法生产肌苷（肌苷（I或或Iou）l肌苷生肌苷生产菌（菌（AJ11102）遗传性状：性状：l腺腺嘌呤缺陷型（呤缺陷型（A-）；）；lGMP还原原酶缺失（缺失（GMPred-）；）；l磺胺磺胺脒抗性（抗性（SGr）；）；l精氨酸缺陷型（精氨酸缺陷型（Arg-）。）。l选育出从育出从遗传上解除正常代上解除正常代谢控制的理想菌控制的理想菌株。肌苷株。肌苷产率达率达20g/L.46.1发酵法生酵法生产肌苷（肌苷（I或或Iou）l工工艺要点：要点：l保保证培养基有充足培养基有充足N源。源。l短小芽短小芽孢杆菌受杆菌受PO43-的抑制。的抑制。lMg2+、Ca2+对肌苷生肌苷生产有促有促进作用。作用。l提供的生提供的生长因子腺因子腺嘌呤或酵母粉必呤或酵母粉必须亚适适量。量。l发酵条件，酵条件，3034，pH6.06.2，高，高溶氧，低分溶氧，低分压。47.2发酵法生酵法生产鸟苷和黄苷（苷和黄苷（G，X）l鸟苷生苷生产菌性状：以肌苷菌性状：以肌苷产生菌生菌为出出发菌株，再菌株，再增加德夸菌素抗性，解除增加德夸菌素抗性，解除GMP对酶PRPP转酰胺胺酶、IMP脱氢酶、GMP合成酶的反的反馈抑制抑制l黄苷生黄苷生产菌性状与菌性状与鸟苷苷产生菌株相生菌株相类似，关似，关键是是要缺失要缺失GMP合成合成酶。选育育鸟嘌呤和腺呤和腺嘌呤双重缺呤双重缺陷型（陷型（G-和和A-），培养基中限量供），培养基中限量供给腺腺嘌呤、呤、鸟嘌呤。呤。48.3发酵法生酵法生产腺苷（腺苷（A或或Ado）l腺苷腺苷产生菌生菌遗传性状：性状：l腺腺嘌呤回复（呤回复（A+）；）；l黄黄嘌呤缺陷（呤缺陷（Xn-）；）；lAMP脱氨脱氨酶缺失；缺失；lGMP还原原酶(GMPred-)缺失；缺失；l抗抗8杂氮黄氮黄嘌呤（呤（8AXr）l注意防止黄注意防止黄嘌呤缺陷型呤缺陷型标记的回复，保存期的回复，保存期间斜斜面的反复移植是黄面的反复移植是黄嘌呤回复，腺苷呤回复，腺苷产量下降的主量下降的主要原因。要原因。49.3发酵法生酵法生产腺苷（腺苷（A或或Ado）小小结：l以以产氨短杆菌氨短杆菌为出出发株，用株，用发酵法直接酵法直接产生生AMP或或GMP是很困是很困难的。因的。因为其生物合成途径其生物合成途径经IMP然后分成两条直然后分成两条直链途径，最途径，最终合成合成AMP和和GMP。l而使用枯草杆菌而使用枯草杆菌为出出发株，其合成途径株，其合成途径经IMP分分成两条成两条环形途径，只要阻塞某一代形途径，只要阻塞某一代谢途径，就能途径，就能产生另一途径相生另一途径相应累累积产物。物。50.（一）叠氮胸苷（一）叠氮胸苷（AZT）l商品名：商品名：Refrovir，中文商品名中文商品名齐多夫定。是第一种被美国多夫定。是第一种被美国FDA批批准用于准用于临床的治床的治疗艾滋病的新艾滋病的新药。l药理作用：在体内理作用：在体内经磷酸化后生磷酸化后生成叠氮胸苷酸，取代了正常的胸成叠氮胸苷酸，取代了正常的胸嘧啶核苷酸（核苷酸（TMP）参与病毒）参与病毒DNA合成，而含合成，而含AZT成分的成分的DNA不能不能继续复制，从而阻止病毒增复制，从而阻止病毒增殖。殖。51.（一）叠氮胸苷（一）叠氮胸苷（AZT）l化学合成，起始原料是胸苷，成本高。化学合成，起始原料是胸苷，成本高。52.（一）叠氮胸苷（一）叠氮胸苷（AZT）lAZT的常的常见付作用付作用为贫血、白血球减少，有血、白血球减少，有32%的患者服的患者服药后引起骨髓坏死症，破坏人体后引起骨髓坏死症，破坏人体造血功能。造血功能。l1990年年5月月新英格新英格兰医学医学杂志志发表了第表了第2个个治治疗爱滋病的滋病的药物，称双脱氧肌苷（物，称双脱氧肌苷（DDI），），商品名称商品名称Videx，由美国国立癌症研究所于，由美国国立癌症研究所于1985年年发现的。的。53.（一）叠氮胸苷（一）叠氮胸苷（AZT）lDDI的化学的化学结构和构和药理活性与理活性与AZT相似，治相似，治疗艾滋艾滋病的效果与病的效果与AZT相同。相同。lDDI的抗病毒作用，是通的抗病毒作用，是通过减慢减慢HIV在人体在人体细胞中胞中的复制（或繁殖）速度和在免疫系的复制（或繁殖）速度和在免疫系统中的中的扩散散（或（或传播）速度。播）速度。DDI的治的治疗效果比效果比AZT好，极少好，极少发现毒性反毒性反应，大，大剂量量给药时，发生外周神生外周神经痛痛和胰腺炎。和胰腺炎。54.（一）叠氮胸苷（一）叠氮胸苷（AZT）l后来，美国又批准一个治后来，美国又批准一个治疗艾滋病的新艾滋病的新药，称，称为双脱氧胸苷（双脱氧胸苷（DDS），是），是HIV复制的抑制复制的抑制剂，可，可代替代替AZT。l在体内，通在体内，通过细胞胞酶的作用，的作用，转化成有抗病毒活化成有抗病毒活性的双脱氧三磷酸腺苷（性的双脱氧三磷酸腺苷（ddATP），干），干扰逆逆转录酶而阻止而阻止HIV的复制。的复制。l临床床验证，DDS使使CD4细胞数目增多，延胞数目增多，延长生存生存时间，减少致病菌感染的，减少致病菌感染的发病率，可作病率，可作为抗抗HIV的的首首选药物。物。55.（二）阿糖腺苷（二）阿糖腺苷化学名称为9D阿拉伯呋喃糖腺嘌呤。或称腺或称腺嘌呤阿拉伯糖呤阿拉伯糖苷苷.56.（二）阿糖腺苷作用与用途（二）阿糖腺苷作用与用途l阿糖腺苷是广阿糖腺苷是广谱DNA病毒抑制病毒抑制剂，临床上用于治床上用于治疗疱疹性疱疹性角膜炎，角膜炎，单纯疱疹病毒感染引起的疱疹病毒感染引起的脑炎和乙型肝炎，与炎和乙型肝炎，与IFN一一样，能，能够直接作用于病毒。直接作用于病毒。l作用机理：阿糖腺苷在体内受激作用机理：阿糖腺苷在体内受激酶作用生成阿糖腺三磷，作用生成阿糖腺三磷，是脱氧腺三磷（是脱氧腺三磷（dATP）的拮抗物，从而阻抑了以）的拮抗物，从而阻抑了以dATP为底物的病毒底物的病毒DNA聚合聚合酶的活力。的活力。57.（二）阿糖腺苷（二）阿糖腺苷l(1)酶化学合成法化学合成法 l 以尿苷以尿苷为原料原料经氧氧氯化磷和二甲基甲化磷和二甲基甲酰胺反胺反应，生成氧，生成氧桥化合物，在碱性水溶液中水解成阿糖尿苷，然后加入尿化合物，在碱性水溶液中水解成阿糖尿苷，然后加入尿苷磷酸化苷磷酸化酶，使之生成阿糖，使之生成阿糖-1-磷酸，再加入腺磷酸，再加入腺嘌呤和呤和嘌呤呤核苷磷酸化核苷磷酸化酶，使，使转化化为阿糖腺苷阿糖腺苷58.（二）阿糖腺苷（二）阿糖腺苷酶法合成阿糖腺苷，法合成阿糖腺苷，选育了一株育了一株优秀菌株秀菌株产气气肠杆杆菌（菌（Enterbacteraerogens），能），能产生尿苷磷酸生尿苷磷酸酶（Upase）和）和嘌呤核苷磷酸化呤核苷磷酸化酶（Pynpase），用），用菌株的休止菌株的休止细胞作胞作为酶源从阿糖尿苷和腺源从阿糖尿苷和腺嘌呤高效呤高效地合成阿糖腺苷。菌体也可制成固定化地合成阿糖腺苷。菌体也可制成固定化细胞胞进行行连续化生化生产。59.（三）三氮（三）三氮唑核苷核苷l三氮三氮唑核苷又名利巴核苷又名利巴韦林林（ribavirin）,商品名病毒商品名病毒唑，为广广谱抗病毒抗病毒药物。物。l经X X光衍射解析，它的立体光衍射解析，它的立体结构与腺苷、构与腺苷、鸟苷非常苷非常类似，在体内被磷酸化成三似，在体内被磷酸化成三氮氮唑核苷酸，抑制肌苷酸核苷酸，抑制肌苷酸脱脱氢酶，阻断，阻断鸟苷酸的生苷酸的生物合成，从而抑制病毒物合成，从而抑制病毒DNADNA合成。合成。60.（三）三氮（三）三氮唑核苷核苷三三氮氮唑核核苷苷的的另另一一特特点点是是对病病毒毒作作用用点点多多，不不易易使使病病毒毒产生生抗抗药性性。适适用用于于流流感感、副副流流感感、腺腺病病毒毒肺肺炎炎、口口腔腔和和眼眼疱疱疹疹、小小儿儿呼呼吸吸系系统等等疾疾病病的的治治疗。特特别在在临床床上上经艾艾滋滋病病患患者者试用用，能能明明显的的改改善善患患者者症症状状，而而且且不不良良反反应比比AZT小小，药物物价格与价格与AZT相差相差50倍倍.61.（三）三氮（三）三氮唑核苷核苷l酶合成法合成法l以各种核苷以各种核苷为底物，在底物，在嘌呤核苷磷酸化呤核苷磷酸化酶（Pynpase）催化下水解生成核糖）催化下水解生成核糖-1-磷酸，再与磷酸，再与TCA反反应、直接生成三氮、直接生成三氮唑核苷核苷62.（三）三氮（三）三氮唑核苷核苷l在两步反在两步反应中用同一种中用同一种嘌呤核苷磷酸化呤核苷磷酸化酶，由于降解由于降解产物次黄物次黄嘌呤呤对酶比比TCA具有更具有更大的大的亲和性，致使次黄和性，致使次黄嘌呤再与核糖呤再与核糖-1-磷磷酸酸缩合，可逆反合，可逆反应促使促使总收率收率仅20%左右，左右，这是采用菌种所是采用菌种所产生的生的酶的局限性。的局限性。为解解决决这一一问题，设计了了2种直接生种直接生产的方法。的方法。63.（三）三氮（三）三氮唑核苷核苷l1采用前段与后段由两个不同的采用前段与后段由两个不同的酶催化，即前段使用催化，即前段使用嘧啶核苷磷酸化核苷磷酸化酶（upase），后段使用），后段使用嘌呤核苷磷酸化呤核苷磷酸化酶（Pynpase），而且已），而且已经筛选到一株同到一株同时产生生这两种两种酶的的菌株，即菌株，即产气气肠杆菌。杆菌。l以尿苷或胞苷以尿苷或胞苷为底物底物时，使用，使用产气气肠杆菌，菌株杆菌，菌株经24h24h培培养，养，经收集菌体后在收集菌体后在6060反反应96h96h，可，可获得得较高高产率的三率的三氮氮唑核苷。核苷。64.（三）三氮（三）三氮唑核苷核苷2前前段段及及后后段段反反应均均利利用用嘌呤呤核核苷苷磷磷酸酸化化酶，但但注注意意到到使使用用的的底底物物含含有有溶溶解解度度很很小小的的嘌呤呤碱碱基基的的核核苷苷或或者者生生成成的的降降解解产物物在在后后阶段段反反应时它它对酶的的亲和和力力要要比比TCA低低得得多多。如如使使用用鸟苷苷、肌肌苷苷、黄黄苷苷为底底物物。最最优秀菌株是乙秀菌株是乙酰短杆菌短杆菌AJ1442。65.（四）阿糖胞苷（四）阿糖胞苷l阿糖胞苷由胞阿糖胞苷由胞嘧啶与阿拉与阿拉伯糖伯糖组成，成，临床床应用的是用的是阿糖胞苷阿糖胞苷盐酸酸盐。阿糖胞。阿糖胞苷与胞苷与胞嘧啶核苷或脱氧胞核苷或脱氧胞嘧啶核苷的差核苷的差别在于糖的在于糖的组成部分是阿拉伯糖，不成部分是阿拉伯糖，不是核糖或脱氧核糖是核糖或脱氧核糖66.（四）阿糖胞苷（四）阿糖胞苷生生产工工艺：以：以5CMP为原料的合成法原料的合成法67.（四）阿糖胞苷作用与用途（四）阿糖胞苷作用与用途l阿糖胞苷阿糖胞苷进入体内入体内转变为阿糖胞苷酸，抑制阿糖胞苷酸，抑制DNA聚合聚合酶，阻止胞二磷，阻止胞二磷转变为脱氧胞二磷，从而抑脱氧胞二磷，从而抑制制DNA的合成，干的合成，干扰DNA病毒繁殖和病毒繁殖和肿瘤瘤细胞的胞的增殖。增殖。l用于治用于治疗急性粒急性粒细胞白血病，具有胞白血病，具有见效快，效快，选择性高的特点，其他抗癌性高的特点，其他抗癌药合用合用疗效更好。由于易效更好。由于易被胃被胃肠道粘膜和肝中胞道粘膜和肝中胞嘧啶核苷脱氨核苷脱氨酶作用而失作用而失活，故口服无效，只能注射。活，故口服无效，只能注射。68.（五）聚肌胞苷酸（五）聚肌胞苷酸(PolyI:C）l是是1967年美国人年美国人Field发现的人工合成的干的人工合成的干扰素素诱导物，具有抗病毒、抗物，具有抗病毒、抗肿瘤、增瘤、增强淋巴淋巴细胞免疫胞免疫功能和抑制核酸代功能和抑制核酸代谢等作用。等作用。l聚肌胞系由多聚肌苷酸和多聚胞苷酸聚肌胞系由多聚肌苷酸和多聚胞苷酸组成的双股成的双股多聚核苷酸。多聚核苷酸。Poly I在核糖上在核糖上联接次黄接次黄嘌呤，呤，PolyC在核糖上在核糖上联接胞接胞嘧啶，在一定的的条件下，在一定的的条件下，按碱基配按碱基配对的原理，两个的原理，两个单链碱基互碱基互补连接起来接起来形成螺旋双形成螺旋双链聚肌胞。聚肌胞。69.（五）聚肌胞苷酸（五）聚肌胞苷酸(聚肌胞聚肌胞,PolyI:C）l生生产工工艺：l1.底物底物5-核苷二磷酸吡核苷二磷酸吡啶盐的制的制备:以以5-肌苷酸和肌苷酸和5-胞苷胞苷酸酸为原料原料.l2.固定化多核苷酸磷酸化固定化多核苷酸磷酸化酶的制的制备l（1）酶的制的制备l（2）固相）固相载体的制体的制备l（3）多核苷酸磷酸化）多核苷酸磷酸化酶的固定化的固定化l3.Poly I:C的制的制备l（1）底物）底物预处理理lCDP吡吡啶盐转成成锂盐，IDP吡吡啶盐转成成钠盐。l（2）酶促反促反应：l分分别酶促反促反应制取制取Poly I、Poly C。然后等摩。然后等摩尔Poly I与与Poly C混合，生成混合，生成产品。品。70.（五）聚肌胞苷酸（五）聚肌胞苷酸(聚肌胞聚肌胞,PolyI:C）作用与用途）作用与用途l聚肌胞聚肌胞进入人体入人体诱导产生干生干扰素，后者作用素，后者作用于正常于正常细胞胞产生抗病毒蛋白（生抗病毒蛋白（AVF），干），干扰病毒的繁殖，保病毒的繁殖，保护未受感染未受感染细胞免受感染。胞免受感染。l临床已床已试用于用于肿瘤、血液病、病毒肝炎及痘瘤、血液病、病毒肝炎及痘类毒性感染等多种疾患。毒性感染等多种疾患。71.（六）胞二磷胆碱（六）胞二磷胆碱1954年年Kennedy博博士士等等人人发现了了胞胞二二磷磷胆胆碱碱，随随后后化化学学合合成成并并确确定定了了分分子子结构构。1957年年Rossiter研研究究发现，胞胞二二磷磷胆胆碱碱与与磷磷脂脂代代谢十十分分密密切切，是是卵卵磷磷脂脂生生物物合合成成的的重重要要辅酶。1963年年日日本本武武田田公公司司首首次次开开发，用用于于治治疗意意识障障碍碍获得得成成功功，商商品品名名Nicholin，译名尼可林。名尼可林。72.（六）胞二磷胆碱（六）胞二磷胆碱胞二磷胆碱的化学名称胞二磷胆碱的化学名称为胞胞嘧啶核苷核苷-二磷酸胆碱，二磷酸胆碱，有有氢型和型和钠型两种。型两种。结构式构式见下下图：73.（六）胞二磷胆碱生（六）胞二磷胆碱生产工工艺l（一）（一）酶合成法合成法l胞二磷胆碱由微生物菌体（如啤酒酵母）所提供胞二磷胆碱由微生物菌体（如啤酒酵母）所提供的的酶系催化胞苷酸和磷酸胆碱而合成系催化胞苷酸和磷酸胆碱而合成l反反应体系体系为：磷酸二：磷酸二氢钾-氢氧化氧化钠缓冲液冲液（pH8.0pH8.0）200mol/ml200mol/ml，CMP 20mol/mlCMP 20mol/ml，磷，磷酰胆胆碱碱 30 mol/ml 30 mol/ml，葡萄糖，葡萄糖 100mol/ml100mol/ml，MgSO4MgSO47H7H2 2O 20mol/mlO 20mol/ml，酵母泥，酵母泥 550mg/ml550mg/ml。于。于2828保温保温20h20h，可得胞二磷胆碱，可得胞二磷胆碱，对胞苷酸的收率胞苷酸的收率为80%80%。74.（六）胞二磷胆碱生（六）胞二磷胆碱生产工工艺l（二）黏性（二）黏性红酵母酵母发酵法酵法l国外国外发现一株粘性一株粘性红酵母可高酵母可高产胞二胞二磷胆碱。磷胆碱。l产生胞二磷胆碱的反生胞二磷胆碱的反应体系（体系（g/Lg/L）：葡萄糖）：葡萄糖140140；MgSOMgSO4 47H7H2 2O 6O 6；5 5-CMPNa-CMPNa2 2 20 20；磷酸胆碱；磷酸胆碱 2020；红酵母菌体（析干）酵母菌体（析干）5050；反；反应体系中保持磷酸体系中保持磷酸缓冲液冲液pH 7.0pH 7.0、0.2mol/L0.2mol/L，于，于3030反反应28h28h，产胞二胞二磷胆碱磷胆碱9.8g/L9.8g/L，对5 5-CMP-CMP收率收率92.5%92.5%。75.后面内容直接后面内容直接删除就行除就行资料可以料可以编辑修改使用修改使用资料可以料可以编辑修改使用修改使用76.主要主要经营：网：网络软件件设计、图文文设计制作、制作、发布广布广告等告等公司秉着以公司秉着以优质的服的服务对待每一位客待每一位客户，做到，做到让客客户满意！意！77.致力于数据挖掘，合同致力于数据挖掘，合同简历、论文写作、文写作、PPT设计、计划划书、策划案、学、策划案、学习课件、各件、各类模板等方方面面，模板等方方面面，打造全网一站式需求打造全网一站式需求78.感感谢您的您的观看和下看和下载The user can demonstrate on a projector or computer,or print the The user can demonstrate on a projector or computer,or print the presentation and make it into a film to be used in a wider fieldpresentation and make it into a film to be used in a wider field79.