1、自身免疫病与自身抗体检测及应用概念:自身免疫自身抗体自身免疫病自身免疫病分类(按病变组织涉及的范围)1.器官特异性:自身免疫性溶贫,桥本甲状腺炎2.非器官特异性:病变累及多器官与组织,如RA,SLE,SS等。(一)概述(一)概述三个基本特征:1.高滴度的自身抗体和(或)致敏淋巴细胞2.病理特征为免疫炎性3.动物中可复制相似疾病模型常伴以下特点病因不明,多为自发性或特发性病程较长,发作与缓解交替出现有遗传倾向女性、老年多发可查到抗核抗体易伴发免疫缺陷病或恶性肿瘤(二)自身免疫病共同特征(二)自身免疫病共同特征(三)发病机制(三)发病机制 隐蔽抗原释放 自身抗原出现 自身抗原成分改变 共同抗原的诱
2、导 淋巴细胞旁路活化免疫调节异常 多克隆刺激剂旁路活化 辅助刺激因子表达异常 遗传因素 多表现在HLA-B、DR抗原上 常见自身免疫病SLESLE:累及多器官多系统炎症性结缔组织病,多发于青年女性,临床症状复杂,可出现发热,皮疹,蝶形红斑,盘状红斑,光敏现象,口腔溃疡,关节痛,肾损伤,心血管病变,胃肠症状,贫血等。抗ds-DNA,抗Sm抗体是特征标志。常见自身免疫病常见自身免疫病RARA:一种以关节病变为主的全身性结缔组织炎症,多发于青壮年女性,特征:关节及周围组织呈对称性多发性损害,部分疾病可有心肺及血管受累,免疫学检查可见血清及滑膜液中有RF和抗CCP升高。(四)常见自身抗体的检测及应用(
3、四)常见自身抗体的检测及应用类风湿因子(RF)一种抗人或动物IgG分子Fc段抗原决定簇的抗体,是以变性IgG为靶抗原的自身抗体,可与人或动物的变性IgG结合。RF分为IgM,IgG,IgA,IgE,IgM为主要类型。可用散射比浊法或ELISA等方法检测。临床应用RF主要见于RA,但不是RA特异抗体,部分正常人也可出现,但滴度较低。RF阴性不能排除RA。IgM:伴严重关节功能障碍,预后不良IgG:与患者滑膜炎、血管炎和关节症状密切相关IgA:RA临床活动指标,与骨质破坏和关节炎症状严重程度有关。抗核抗体(抗核抗体(ANAANA)lANA是以自身真核细胞成分为靶抗原的一组自身抗体的总称,泛指各种核
4、成分的抗体。lANA在不同的疾病中呈现出不同的组合,不同疾病有自己的抗核抗体谱。l按理化特性和抗原部位分类:1.抗DNA抗体2.抗组蛋白抗体3.抗非组蛋白抗体4.抗核仁抗体检测方法检测方法1.ANA检测常用间接免疫荧光法,ELISA等方法,常用间接免疫荧光法作总ANA的筛选试验。用Hep2细胞和猴肝细胞做基质,Hep2细胞特点:人源性、细胞核大、分裂期细胞多、可大批培养。2.常见ANA荧光图形及意义(1)均质型:多由抗DNP抗体引起,也可由核小体抗体和抗双链DNA抗体引起,主要见于SLE,药物性狼疮。(2)斑点型:由抗ENA抗体引起,主要见于SLE,MCTD,PSS,SS等,高滴度斑点型常见于
5、MCTD。(3)周边型:主要由抗双链DNA抗体引起,见于SLE,特别是活动期。(4)核仁型:主要见于硬皮病(5)着丝点型:主要见于局限性硬皮病均质型抗双链抗双链DNADNA抗体检测抗体检测最特异和敏感的方法是绿蝇短膜虫做基质,动基体含有大量纯dsDNA,鞭毛一端动基体内显示清晰荧光。抗双链DNA抗体是SLE特异抗体,特异性大于95%,是SLE活动性重要指标(狼疮肾炎、血管炎、蝶形红斑与该抗体有关)抗抗ENAENA抗体谱抗体谱ENA:可提取性核抗原的总称,是细胞内许多小分子RNA和多肽组成的非组蛋白的酸性核蛋白颗粒。主要包括Sm,RNP,SSA,SSB,Jo-1,Scl-70 等抗原,对自身免疫病的诊断和鉴别有重要意义,常用免疫印迹法检测。抗Sm抗体SLE抗RNP抗体MCTD抗SSA/SSBSS抗Jo-1多发性肌炎抗Scl-70PSS小结小结1.意义重大 自身免疫病给患者带来巨大痛苦和负担,近年来发病率呈上升趋势,并且难以根治,因此,早期诊断和早期治疗对于控制和缓解患者病情具有重要意义,自身抗体的检测为临床诊断自身免疫病提供有力支持,甚至有确诊作用。2.一般原则 有的项目敏感性高,特异性低,有筛选意义,有的敏感性低,特异性强,可以先做ANA筛查,再做其他检测。3.质量控制 每次试验同时设置阴、阳对照,以监测结果的准确性。谢谢观赏!2020/11/519