微生物实验室病原微生物评估分析报告.doc

微生物试验室病原微生物风险评定汇报山丹县人民医院检验科目录检验科试验活动生物危害评定汇报3金黄色葡萄球菌生物危害评定汇报15淋病奈瑟菌生物危害评定汇报26结核杆菌生物危害评定汇报33蜡样芽胞杆菌生物危害评定汇报42假结核棒状杆菌生物危害评定汇报49志贺氏菌属生物危害评定汇报51阴沟肠杆菌生物危害评定汇报60小肠结肠炎耶尔森菌生物危害评定汇报62铜绿假单胞菌生物危害评定汇报68嗜水气单胞菌生物危害评定汇报75伤寒、副伤寒沙门菌生物危害评定汇报79沙门氏菌属生物危害评定汇报87诺卡菌属生物危害评定汇报96脑膜炎奈瑟氏菌生物危害评定汇报102流感嗜血杆菌生物危害评定汇报109黄杆菌属细菌生物危害评定汇报117红斑丹毒丝菌生物危害评定汇报122肺炎链球菌生物危害评定汇报127肺炎克雷伯菌生物危害评定汇报132大肠埃希菌生物危害评定汇报137产单核李斯特菌危害评定汇报145不动杆菌危害评定汇报150变形杆菌属、摩根氏菌属和普雷威登氏菌属细菌危害评定汇报155迟钝爱德华氏杆菌危害评定汇报159溶血性链球菌评定汇报161检验科试验活动生物危害评定汇报为确保试验室工作人员在工作中不被危害性生物及物品所侵害，确保危害性物品不外泄，对试验室工作环境进行评定，以判定生物安全防护等级，确保生物安全。一、危害程度分类及生物安全防护水平评定本检验科是为医院诊疗、预防、诊疗人体疾病或评定人体健康提供信息为目标，对来自人体材料进行临床生物化学、临床微生物、临床免疫学、临床血液、细胞遗传学等检验试验室。生物源危害关键是由多种检验标本中微生物，尤其是病原微生物引发，包含细菌、病毒、寄生虫等，含有潜在危险性，可能引发试验室感染；检验科微生物室还进行一定数量多种条件致病性细菌及真菌分离培养工作，工作过程存在病原微生物对试验人员、环境污染风险；除之以外试验室还存在触电、火灾、化学品腐蚀、偷窃等危险。依据试验室生物安全通用要求，本检验科不包含人间传染病原微生物名目中高致病性微生物分离培养及高致病性微生物菌、毒种保藏，试验室采取一定防护方法就能控制感染或防范灾难，或对对应病原体存在有效免疫方法。评定我检验科生物安全防护水平按二级试验室（BSL-2）生物安全要求。二、试验人员和试验室安全防护通常要求1.吸烟危害评定及防护（1）试验室工作区内绝对严禁吸烟；（2）点燃香烟是易燃液体潜在火种；（3）香烟、雪茄或烟斗全部是传染细菌和接触毒物路径。2. 试验区内食用食物、饮料及其它危害评定及防护（1）试验工作区内不得有食物、饮料及存在“手口”接触可能其它物质（2）试验室工作区内冰箱严禁存放食物。专用存放食物冰箱应放置在许可进食、喝水休息区内。3.使用化妆品危害评定及防护试验工作区内严禁使用化妆品进行化妆，但许可并提议常常洗手试验人员使用护手霜。4. 试验中眼睛和面部风险评定及防护（1）处理腐蚀性或毒性物质时，须使用安全镜、面罩或其它保护眼睛和面部防护用具。（2）工作人员在试验室危险区内不要佩戴隐形眼镜，除非同时使用护目镜或面罩。（3）使用、处理能够经过粘膜和皮肤感染试剂，或有可能发生试剂溅溢情况时，必需佩带护目镜、面罩或面具式呼吸器。5. 试验中服装和个人防护装备通常要求（1）应穿着符合试验室工作需要服装，工作服应洁净、整齐。当工作中有危险物喷溅到身上可能时，应使用一次性塑料围裙或防渗外罩。有时还需要佩戴其它防护装备如：手套、护目镜、披肩或面罩等。（2）采血员和其它需要接触病员工作人员，在接触病员时需穿试验服或工作服。（3）个人防护服装应定时更换以保持清洁，遇被危险物品严重污染，则应立即更换。（4）不得在试验室内设值班床，严禁在试验室内住宿。6. 试验中足部防护通常要求在工作区内，应穿舒适、防滑、并能保护整个脚面鞋。在有可能发生液体溅溢工作岗位，可加套一次性防渗漏鞋套。帆布鞋可吸收化学物品和有传染性液体，所以最好穿皮革或其它防渗漏合成材料鞋。7. 试验中头发和饰物风险评定及防护留长发工作人员应将头发盘在脑后，以预防头发接触到被污染物和避免人体脱屑落入工作区。头发不得垂肩，应和离心机、切片机等正在运转器械保持一定距离8. 试验中胡须风险评定及防护蓄有胡须男性工作人员必需遵守上项（7）要求。9.洗手要求试验室工作人员在脱下手套后、离开试验室前、接触患者前后、和在进食或吸烟前全部应该洗手。接触血液、体液或其它污染物时，应立即洗手。10.用口移液危害评定及防护用口液移可造成多个病原体试验室感染。全部试验室操作严禁用口液移，应使用助吸器具。11.锐利物品危害评定及防护谨慎处理针头、解剖刀、和碎玻璃等锐利物品。使用后针具不要折断、弯曲、破损、反复使用或用手重装在针管上。一次性注射器上针头用后不要取下。锐利物品应立即放置在专用锐器盒内，在完全装满之前或48小时之内更换。12.隔离方法要求接触患者时，试验室工作人员应遵守医院隔离方法。13.工作环境要求（1）“清洁”区和“非清洁”区依据试验室具体工作情况由主任选择并确定“清洁”和“非清洁”工作区，在清洁区和非清洁区之间设“缓冲室”。被指定为“清洁”区域，则应努力保持清洁，如采取预防方法，预防电话、视频显示器终端、键盘、门柄及其它常常被手或手上手套触摸物品污染，要求工作人员在触摸设备（如计算机键盘及电话保护罩等）前取下手套，制订仪器设备和工作面常规消毒和清洁制度和对严重污染紧急处理方法措施。被指定为“非清洁”区域，许可戴手套接触全部物品（如电话、门柄、计算机终端和其它物品），全部这些物品表面全部认为是不清洁。未戴手套人员假如使用该区域内电话、计算机终端或其它设备，应该戴上手套，或在使用后立即根本洗手。“清洁”和“非清洁”区全部应保持整齐。试验台最少应天天清洁、消毒一次，如有必需能够数次清洗、消毒。在处理溅溢样品或严重污染工作面时，应戴上手套和其它个人防护装备、使用对应适宜清洁剂清除全部溅溢物。（2）冰箱、冷冻柜、水浴和离心机应该定时清洗和消毒（时间由试验室主任来决定），在发生严重污染后应立即进行清洗和消毒。进行清洗、消毒时要戴上手套，穿上工作服或其它适宜防护服。（3）外衣：外衣（试验服、工作服、和围裙）应悬挂在远离散热器、蒸汽管道、供暖装置、和有明火地方，不要挂在压缩气瓶或灭火器上，也不要挂在门玻璃隔板上，妨碍视线。“清洁”和“非清洁”个人防护服要分开存放。（4）垃圾处理：天天最少清理垃圾一次。（5）装饰：不得在电灯、灯座或仪器上进行装饰，更不要使用电子装饰物、蜡烛、圣诞树等有引发火灾危险装饰品。（6）为便于清洁消毒，试验室内不应有织物装饰用具或椅子。（7）个人物品：试验工作区不得存放个人物品，如钱包、外套、皮靴、咖啡杯、运动服、预包装食品和药品等。（8）试验室内应配置应急设备，如应急洗眼装置，酒精等消毒用具。（9）试验室应安装非手触式洗手装置。（10）试验室内应安装防蚊蝇装置，应定时投撒灭蟑螂、老鼠药品。（11）用后废弃物品：试验工作区内用后废弃物品存量不要太大。具危险性液体如酸或碱性液体应放在视平线以下。较大废弃物容器应靠近地面存放。（12）出口通路：试验室出口和通道必需保持通畅无阻，不准堆放物品、垃圾、装置、或设备。安全门必需保持通畅，不得堵塞。注意：不管任何时间、何种原因全部不得阻塞通往灭火器、火警箱、防火毯、安全淋浴或出口道路。14.使用玻璃器具危害评定及防护操作玻璃器具时应遵照下述安全规则：（1）不使用破裂或有缺口玻璃器具。（2）不要用猛力取下玻璃试管上塞子，粘紧试管可用刀切开分离。（3）接触过传染性物玻璃器具，清洗之前，应先行消毒。（4）破裂玻璃器具和玻璃碎片应丢弃在有专门标识、单独、不易刺破容器里。（5）高热操作玻璃器具时应戴隔热手套。（6）在不影响试验质量前提下，应尽可能降低使用玻璃器具。15. 使用离心机危害评定及防护感染路径危害评定感染路径危害评定感染路径危害评定皮肤极少粘膜（眼结膜）可能呼吸道可能消化道（经手-口）极少经血（针刺伤、切割伤）极少经血（虫媒介）极少（1）气溶胶：离心过程中应控制气溶胶产生在最低水平。（2）操作：离心机只有在盖好盖板后，才能开启。（3）传染性物品：全部能够产生气溶胶进行播散生物制品或标本，全部应使用密封离心管，并在盖紧离心头或转头中进行。（4）为预防气溶胶飞溢，应在离心停止30分钟后打开离心物。（5）清洗：根据消毒隔离制度要求清洗离心机。（6）平衡：离心时应保持适宜平衡，以确保离心顺利进行。16采集血样危害评定及防护感染路径危害评定感染路径危害评定感染路径危害评定皮肤极少粘膜（眼结膜）极少呼吸道可能消化道（经手-口）极少经血（针刺伤、切割伤）可能经血（虫媒介）极少偷窃可能化学腐蚀极少放射无（1）天天早晨用500mg/L”84”消毒液擦拭抽血台面及其它物表，并开紫外灯消毒最少30分钟，并做好统计。（2）工人天天早晨更换消毒液，包含浸泡锐器、止血带消毒液和手消毒液。（3）工作人员必需穿工作服，戴好口罩、帽子、和手套。（4）使用合格一次性用具。严禁使用包装破损，超出使用期一次性用具。（5）严格实施无菌技术操作规程、静脉采血必需一人一针一管一巾一带。微量采血应做到一人一针一管一片，对每位病人操作前洗手或手消毒。（6）无菌物品如棉球需天天更换，开启后使用不得超出二十四小时。（7）工作人员需对锐器如采血针采取高度预防方法，用过采血针需浸泡在含有消毒液厚壁容器中。17. 标本(血清、血浆、全血、尿)上检验分析仪检测过程危害评定及防护感染路径危害评定感染路径危害评定感染路径危害评定皮肤极少粘膜（眼结膜）可能呼吸道可能消化道（经手-口）极少经血（针刺伤、切割伤）极少经血（虫媒介）极少偷窃可能化学腐蚀无放射无（1）为了避免液滴和气溶胶和扩散，试验室仪器加样、加液，清洗等过程应在封闭罩内进行。（2）试验中使后比色盘，反应杯等废弃物应该搜集在封闭容器内，集中处理。（3）在每一步完成后应依据操作指南对对仪器进行消毒。血液、体液污染物表时，应立即消毒。（4）工作人员要戴手套进行操作。18. 标本(血清、血浆、全血、尿、粪)手工检测过程危害评定及防护感染路径危害评定感染路径危害评定感染路径危害评定皮肤可能粘膜（眼结膜）可能呼吸道可能消化道（经手-口）可能经血（针刺伤、切割伤）可能经血（虫媒介）极少偷窃可能化学腐蚀可能放射无（1）天天早晨做好试验室清洁消毒工作。（2）工作人员要戴口罩、手套进行操作。（3）试验中使用竹签用后要用1000mg/L“84”消毒液浸泡。（4）废弃标本连同试管、盖帽要用1000mg /L“84”消毒液浸泡，由工人统一清洁后进行无害化处理。（5）试验中使用吸头、一次性塑料杯用后要用1000mg/L“84”消毒液浸泡。（6）标本污染物表时，应立即消毒。（7）离心时，发生试管破裂或标本溅出，由操作者负责用有效消毒剂对离心机内部进行立即消毒处理。19微生物分离判定药敏试验及基因扩增试验活动危害评定及防护感染路径危害评定感染路径危害评定感染路径危害评定皮肤可能粘膜（眼结膜）可能呼吸道可能消化道（经手-口）可能经血（针刺伤、切割伤）可能经血（虫媒介）可能偷窃可能化学腐蚀极少放射无（1）天天早晨开紫外灯消毒空气最少30分钟，同时做好各物表、仪器清洁消毒工作。（2）试验人员要戴手套、帽子进行操作。当估量会出现微生物和危险物溅出时要戴好眼罩或面罩。（3）操作中使用接种环、镊子等金属物品要在酒精灯火焰上烧灼灭菌。（4）可能产生致病性微生物气溶胶或出现溅出操作如涂片、接种时，应在生物安全柜内操作，并使用个体防护设备。（5）试验室内多种标本、菌种、培养基和其它废弃物在运出试验室前必需灭活（高压、浸泡），需运出试验室灭活物品必需放在专用密闭容器中。（6）操作过程中发生菌种污染物表时，应立即采取方法进行物表消毒。（7）当发生致病性微生物气溶胶污染时，应立即进行人员疏散，通知责任人到现场进行指导消毒。（8）对菌种保留应严格遵守菌种保留制度，严禁私自保留多种国家法定传染病菌株或毒株。（9）试验人员离开试验室前要去除手套，确定无污染或污染已排除，后方可洗手离去。（10）微生物、PCR试验室要设置纱窗、挡鼠板。三、特定试验活动危害评定（见以下章节之多种病原体危害评定）四、 工作人员素质 本试验室共有技术人员13名，其中申请进入BSL-2试验室13名。学士学位3名，5名曾经从事微生物学试验，3名曾经从事无菌试验室活动经历，5名技术人员学习过生物安全手册并经过定时培训及考评成绩合格，经体检无现患严重疾病，健康状态良好。五、评定结论此次评定本试验室共19项可能潜在危险试验活动，在试验操作试验施过程中在无控制方法情况下可能产生高危害度5项，中度14项，低度0项；对危害发生可能性分析，试验危害较大可能发生有0项，可能发生5项，较少可能发生14项；这些危害造成高度严重后果5项，后果严重性中度14项，后果严重性低度0项。依据拟采取预防控制方法后仍然存在残留风险为高度0项，中度0项，低度危害19项。评 估：山丹县人民医院检验科 评定人： 审 核： 审核人： 时 间：金黄色葡萄球菌生物危害评定汇报一、金黄色葡萄球菌传输和致病 金黄色葡萄球菌在自然界中无处不在，在空气、水、灰尘及人和动物排泄物中全部可找到。所以，食品受其污染机会很多。金黄色葡萄球菌肠毒素是个世界性卫生问题，在美国由金黄色葡萄球菌肠毒素引发食物中毒占整个细菌性食物中毒33%，加拿大则更多，占45%，中国每十二个月发生这类中毒事件也很多。 金黄色葡萄球菌流行病学通常有以下特点：季节分布，多见于春夏季；中毒食品种类多，如奶、肉、蛋、鱼及其制品。另外，剩饭、油煎蛋、糯米糕及凉粉等引发中毒事件也有报道；上呼吸道感染患者鼻腔带菌率83%，所以人畜化脓性感染部位常成为污染源。 通常说，金黄色葡萄球菌可经过以下路径污染食品：食品加工人员、炊事员或销售人员带菌，造成食品污染；食品在加工前本身带菌，或在加工过程中受到了污染，产生了肠毒素，引发食物中毒；熟食制品包装不严，运输过程受到污染；奶牛患化脓性乳腺炎或禽畜局部化脓时，对肉体其它部位污染。而肠毒素形成条件包含：存放温度，在37内，温度越高，产毒时间越短；存放地点，通风不良氧分压低易形成肠毒素；食物种类，含蛋白质丰富，水分多，同时含一定量淀粉食物，肠毒素易生成。 金黄色葡萄球菌是人类化脓感染中最常见病原菌，可引发局部化脓感染，也可引发肺炎、伪膜性肠炎、心包炎等，甚至败血症、脓毒症等全身感染。 葡萄球菌性菌血症可发生于任何和血管内导管或其它异物相关不足葡萄球菌脓肿或感染,它是严重烧伤病人死亡常见原因。连续性发烧常见,而且可伴有休克。 葡萄球菌性心内膜炎尤其好发于静脉注射给药者和装有些人工心脏瓣膜病人。忽然出现心脏杂音,脓毒性栓子和其它经典体征便可作出可疑诊疗,确诊需依据超声心动图和血培养。 葡萄球菌性骨髓炎关键见于儿童,可引发寒战,发烧和受累骨疼痛,继之出现红肿。关节周围感染常引发关节积液,提醒为化脓性关节炎而不是骨髓炎。白细胞计数常15000/l而且血培养常阳性。X线改变在1014日内不显著,骨质疏松和骨皮质反应甚至更长时间仍不能测出,而放射性核素骨扫描则常能较早出现异常。 现在葡萄球菌性小肠结肠炎很罕见,但若住院病人出现发烧,肠梗阻,腹痛和腹胀,低血压或腹泻,尤其是新近作过腹部手术或接收过抗生素者,可提醒本病。若粪便镜检发觉大片嗜中性白细胞和革兰氏阳性球菌,则可能作出诊疗,但必需排除产毒性艰苦梭状芽胞杆菌感染,这是抗生素相关性结肠炎最常见原因。 金黄色葡萄球菌致病力强弱关键取决于其产生毒素和侵袭性酶：a.溶血毒素：外毒素，分、四种，能损伤血小板，破坏溶酶体，引发肌体局部缺血和坏死；b.杀白细胞素：可破坏人白细胞和巨噬细胞；c.血浆凝固酶：当金黄色葡萄球菌侵入人体时，该酶使血液或血浆中纤维蛋白沉积于菌体表面或凝固，阻碍吞噬细胞吞噬作用。葡萄球菌形成感染易局部化和此酶相关；d.脱氧核糖核酸酶：金黄色葡萄球菌产生脱氧核糖核酸酶能耐受高温，可用来作为依据判定金黄色葡萄球菌；e.肠毒素：金黄色葡萄球菌能产生数种引发急性胃肠炎蛋白质性肠毒素，分为A、B、C、D、E及F五种血清型。肠毒素可耐受100C煮沸30分钟而不被破坏。它引发食物中毒症状是呕吐和腹泻。另外，金黄色葡萄球菌还产生溶表皮素、明胶酶、蛋白酶、脂肪酶、肽酶等。二、金黄色葡萄球菌生物学特征 经典金黄色葡萄球菌为球型，直径0.8m左右，显微镜下呈单个、成双和排列成葡萄串状。金黄色葡萄球菌属于葡萄球菌属，无芽胞、鞭毛，大多数无荚膜，革兰氏染色阳性衰老、死亡和被白细胞吞噬后菌体革兰染色呈阴性。金黄色葡萄球菌营养要求不高，在一般培养基上生长良好，需氧或兼性厌氧，最适生长温度3537、最适生长pH7.47.6。 金黄色葡萄球菌有高度耐盐性，可在10-15%NaCl肉汤中生长。可分解葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖，产酸不产气。甲基红反应阳性，VP反应弱阳性。很多菌株可分解精氨酸，水解尿素，还原硝酸盐，液化明胶。 金黄色葡萄球菌含有较强抵御力，对磺胺类药品敏感性低，但对青霉素、红霉素等高度敏感。三、金黄色葡萄球菌检测和诊疗1.标本采集：采自不一样感染部位多种标本，包含血液、脑脊液、穿刺液；痰液、脓液、创伤分泌物、尿液、粪便和呕吐物等。2.直接涂片镜检：直接涂片检验在正常情况下呈无菌状态体液标本如血液、脑脊液、穿刺液等，若有检出革兰氏阳性，显微镜下呈葡萄状排列、无芽胞、荚膜，直径0.5-1m球菌。即含相关键临床价值。3.分离培养：能够选择一般营养琼脂平板、血平板和高盐甘露醇平板，血平板用葡萄糖肉汤增菌培养基。该菌在一般肉汤中呈均匀快速混浊生长；若接种于琼脂平板上35过夜后可形成直径约23mm厚菌落、湿润有光泽、呈金黄色不透明圆形凸起。若接种于血平板，菌落周围可形成显著透明溶血环。在高甘露醇平板上金黄色葡萄球菌生成淡橙黄色菌落，以此可和其它凝固酶阴性葡萄球菌相判别。4.判别试验（1）血浆凝固酶试验：血浆凝固酶是金黄色葡萄球菌所产生，和其致病力相关一个侵袭性酶，其作用是使血浆中纤维蛋白在菌体表面沉积和凝固以阻碍吞噬细胞吞噬。血浆凝固酶分为结合型和游离型。前者结合在细菌细胞壁上，能直接作用于血浆中纤维蛋白原，使之转化为纤维蛋白，围绕菌体而形成凝块。而游离型血浆凝固酶则在产生后被分泌到菌体外，不能直接作用于纤维蛋白原，但能够激活血浆凝血酶原，使之转化成凝血酶，后者再作用于纤维蛋白原使其转化为纤维蛋白。具体测量方法也所以分为玻片法和试管法两种。玻片法:将待试菌落乳化于玻片上盐水中，经1020S证实无自凝后，用接种环取人或兔血浆一环，和乳化菌液混合，出现凝集者为阳性，另设生理盐水为阴性对照。试管法:吸收0.5mL兔血浆和0.5mL金黄色葡萄球菌肉浸液肉汤二十四小时培养物充足混匀，置37培养，每隔半小时观察一次，连续观察6小时，出现凝固，立即小试管倾斜或倒置时，内容物不流动，判为阳性。（2）耐热核酸酶试验：将二十四小时肉汤培养物沸水浴处理15min，用接种环划线刺种于甲苯胺兰-DNA平板，35培养二十四小时，在刺种线周围出现淡粉色者为阳性。本试验金黄色葡萄球菌为阳性。（3）甘露醇发酵试验 金黄色葡萄球菌可发酵甘露醇。（4）Staphaurex 胶乳凝集试验 是判定金黄色葡萄球菌一个快速、简便商品化直接凝集试验。其基础原理是在纸片上滴加包被有纤维蛋白原和IgG抗体聚苯乙烯胶乳，然后用接种环挑取待判定菌株新鲜培养物加入混匀，若出现凝集块现象即为阳性。5.生化判定 如上述，注意和其它凝固酶阳性葡萄球菌判别关键点：PYR（吡咯烷酮-萘基酰胺试验阴性；VP试验阳性；鸟氨酸脱羧酶试验阴性。6.免疫学方法 用酶联免疫吸附试验和对流免疫电泳方法可检测金葡菌磷壁酸抗体。7.分子生物学方法 包含PFGE脉冲场凝胶电泳和酶切图谱分析等。四、金黄色葡萄球菌防治及生物安全防护一、细菌防治金黄色葡萄球菌控制关键包含：1）预防金黄色葡萄球菌污染食品，预防带菌人群对多种食物污染：定时对生产加工人员进行健康检验，患局部化脓性感染（如疥疮、手指化脓等）、上呼吸道感染（如鼻窦炎、化脓性肺炎、口腔疾病等）人员要临时停止其工作或调换岗位。预防金黄色葡萄球菌对奶及其制品污染：如牛奶厂要定时检验奶牛乳房，不能挤用患化脓性乳腺炎牛奶；奶挤出后，要快速冷至-10以下，以防毒素生成、细菌繁殖。奶制品要以消毒牛奶为原料，注意低温保留。对肉制品加工厂，患局部化脓感染禽、畜尸体应除去病变部位，经高温或其它合适方法处理后进行加工生产。2）预防金黄色葡萄球菌肠毒素生成 应在低温和通风良好条件下贮藏食物，以防肠毒素形成；在气温高春夏季，食物置冷藏或通风阴凉地方也不应超出6小时，而且食用前要根本加热。3）无菌方法(如检验病人前后根本洗手和消毒适用器械)至关关键。已被感染病人应和其它易感病人隔离,患有活动性葡萄球菌感染,即使是局部性感染(如疖)医护人员,在其感染治愈前不得接触病人或器械。无症状鼻腔带菌者,除非所带菌株十分危险或被怀疑为暴发流行传染源,通常无须隔离。 诊疗包含脓肿引流,抗生素(重症病人需肠外给药)和全身支持疗法。培养标本应在开始诊疗前或更换抗生素之前获取。抗生素选择和剂量取决于感染部位,疾病严重程度和细菌对药品敏感性。 医院取得葡萄球菌和大多数小区取得菌株,通常对青霉素G,氨苄青霉素和抗假单胞菌青霉素有耐药性。大多数菌株对耐青霉素酶青霉素(甲氧苯青霉素,苯甲异噁唑青霉素,乙氧萘青霉素,邻氯青霉素,双氯青霉素),头孢菌素(头孢菌素,头孢唑啉,头孢菌素,头孢拉定,头孢羟唑,头孢西丁和第三代头孢菌素),卡巴培南类(亚胺培南,美罗匹宁),庆大霉素,万古霉素,替考拉宁,林可霉素和氯林可霉素,是敏感。即使头孢菌素和万古霉素全部有效,但通常首选一个耐青霉素酶青霉素。很多葡萄球菌菌株对红霉素,四环素类药品,氨基糖苷类,杆菌肽和氯霉素也敏感,但因有愈加好更安全药可用,故极少使用氯霉素和杆菌肽。 现在耐甲氧苯青霉素金黄色葡萄球菌(MRSA)菌株日益增多，这种细菌虽可从小区取得感染病人中分离得到,但多数是从感染静脉吸毒者和重症监护室病人中分离取得。MRSA菌株通常对耐-内酰胺酶青霉素,头孢菌素和卡巴培南类有耐药性。这些细菌对氨基糖苷类和大环内酯类(红霉素,克拉霉素,阿齐霉素,林可霉素和氯林可霉素)耐药性也很普遍。即使亚胺培南-西拉司丁或喹诺酮类对一些MRSA感染是有效,但静脉注射万古霉素为首选。肾功效正常成人通用剂量是每6小时静脉注射500mg 或每12小时静滴注1000mg,最少在1小时内滴完。肾功效受损时,剂量应依据血清中药品浓度加以调整,疗程视感染部位及病人反应而定,但通常为 24周。一些严重或有并发症感染,可能需要静脉给药诊疗68周,然后再口服诊疗1个月或更长时间。可用于替换万古霉素诊疗MRSA感染药品有：TMP-SMZ,成人剂量为TMP1015mg /(kg.d)加SMZ5075mg/(kg.d),分剂口服或肠外给药,每次间隔8小时或12小时,连续24周；利福平(600mg/d)口服或肠外给药；肠外给亚胺培南-西拉司丁(500mg每6小时1次)或美罗匹宁(0.51.0g每8小时1次。但利福平不要单独应用,因为细菌很易产生抗药性。在诊疗异物相关性MRSA感染或浆膜腔MRSA感染时,利福平和氨基糖苷类是有用辅助药品。邻氯青霉素,双氯青霉素,TMP-SMZ,环丙沙星及局部用莫匹罗星(mupirocin)可用于诊疗MRSA带菌状态,但MRSA对这些药品可产生抗药性。抗万古霉素肠球菌(VRE)菌株流行日益增加, 这种菌株在试验室中可将引发抗万古霉素基因转为凝固酶阳性金黄色葡萄球菌菌株,而在感染病人中则转变为凝固酶阴性葡萄球菌分离株。可是这些葡萄球菌很轻易对诊疗这类感染其它药品产生抗药性。杆菌肽,若有话,可试用于诊疗抗万古霉素葡萄球菌感染。对这些病人应严格隔离,以防她们细菌传输。二、细菌生物安全防护 依据病原微生物生物试验室生物安全管理条例中相关要求，人间传输微生物名目（待颁布）金黄色葡萄球菌属于三类，BSL-2。相关防护事宜包含：（1）操作要求1、试验时，未经试验室主任同意，限制或严禁进入试验室。2、不许在工作区域饮食、吸烟、清洗隐型眼镜和化妆。食物应存放在工作区域以外专用橱柜或冰箱中。3、全部操作过程应尽可能细心，避免产生和溅出气溶胶。4、对于污染锐器，必需时刻保持高度警惕，包含针、注射器、玻片、加样器等。5、注射和吸收感染材料时，只能使用针头固定注射器或一次性注射器（即注射器和针头是一体）。用过一次性针头必需弯曲、切断、破碎、重新套上针头套、从一次性注射器上去掉，或在丢弃前进行人工处理，要不将之小心放入不会被刺穿、用于搜集废弃锐器容器中。非一次性锐器必需放置在坚壁容器中，转移至处理区消毒，最好高压杀菌。6、打坏器皿不能直接用手处理，必需用其它工具处理，如刷子和簸箕、夹子或镊子。盛污染针头、锐器、碎玻璃容器在倒掉前，应按摄影关要求进行消毒。7、全部培养物、储存物及其它要求废物在释放前，均应使用可行消毒方法进行消毒，如高压灭菌。转移到就近试验室消毒物料应置于耐用、防漏容器内，密封运出试验室。离开该系统进行消毒物料，在转移前应包装，其包装应符合相关法规。8、溅出或偶然事件中，显著暴露于传染源时，要立即向试验室主任汇报。进行合适医学评定、观察、诊疗，保留书面统计。9、按日常程序、在相关传染源工作结束后、尤其是传染源溅出或洒出后、或受到其它传染源污染后，试验室设备和工作台面应该使用有效消毒剂消毒。污染设备在送去修理、维护前，要按摄影关要求消毒；在离开设施转移前，要按摄影关要求打包运输。（2）安全设备1、正确使用和保养生物安全柜、最好是二级生物安全柜、或其它适宜人员防护设施、或物理遏制装置。2、确定可能形成传染性气溶胶或溅出物试验过程，包含离心、研磨、匀浆、猛烈震荡或混匀、超声波破裂、开启装有传染源容器、采集感染标本等。3、包含高浓度或大致积传染源时，若选择密封转头或带安全罩离心机，若转头或安全罩仅在生物安全柜中打开，则可在开放试验室内离心。4、当必需在生物安全柜外处理标本时，需采取面部保护方法（跟镜、口罩、面罩、或其它防溅装置），以免传染源或其它有害物溅或洒到面上。5、在试验室内，必需使用专用防护性外衣、大褂、罩衫或制服。人员到非试验室区域时，防护服必需留在试验室内。防护服能够在试验室内处理，也能够在洗衣房中洗涤，但不能带回家中。6、可能接触潜在传染源、被污染表面或设备时，要戴手套。一次性手套不用清洗、不能反复使用，不能用于接触“洁净”表面（键盘、电话等），也不应该戴着到试验室外。要备有带滑石粉乳胶手套。脱掉手套后，要洗手。淋病奈瑟菌生物危害评定汇报一、淋病奈瑟菌传输和致病 淋病奈瑟菌又称淋球菌，是淋病病原菌，人类是本菌唯一天然宿主和传染源。淋病是淋菌性尿道炎简称，是由淋球菌引发泌尿生殖系统化脓性炎性疾病，它是人类很古老，也是目前世界范围内流行很广泛一个性传输疾病。 淋病患者是关键传染源，有症状或无症状患者均可经过性接触传输，其中轻症或无症状淋病患者是关键传染源。其传输路径关键包含性交传染，还可经过非性接触传输，如经过接触患者分泌物污染用具（衣裤、床上用具、毛巾、浴盆、马桶等）间接感染；孕妇淋病患者当羊膜破裂，可继发羊膜腔内及胎儿感染；新生儿经过患淋病母体产道时常可引发淋菌性眼炎；另外尚可经过医护人员手和器具引发医源性感染。 本病最初多侵犯尿道、宫颈内膜，继而可波及前列腺、精囊、副睾、子宫内膜及输卵管。有时肛门、直肠、咽粘膜、眼结膜也可受染。尚可经血行播散引发菌血症、关节炎、心内膜炎及脑膜炎，可引发死亡或不育、不孕、失明及尿道狭窄等后果。因为本病潜伏期短、传染性强、后果严重，所以它是中国目前关键防治性病之一。二、淋病奈瑟菌生物学特征 淋病奈瑟菌属奈瑟菌属，镜下呈肾形，常成双排列，邻近面扁平或稍凹，像两瓣黄豆对在一起，大小0.6m0.8m。革兰氏染色阴性，呈粉红色，美蓝染色呈蓝色。急性炎症期细菌多在患者分泌物少部分中性粒细胞胞浆中，慢性期则多在细胞外，且有些可呈单个球形或四联状。人工培养后形态亦常呈球形、单个、成双或四联排列。 淋球菌适于潮湿（相对温度8085）、温暖（35.536.5）、中性偏碱（pH7.27.6）、含510二氧化碳条件下生长。最怕干燥，在完全干燥环境下只能存活12小时，对温度改变敏感，超出38或低于30则不能生长，在培养基上室温放置12天即可死亡，在39 存活13小时，42存活15分钟，50存活5分钟。如在不完全干燥衣裤、被褥、毛巾、玩具上则可存活18二十四小时。通常消毒剂轻易将它杀灭，在 1:4000硝酸银溶液中7分钟死亡，1石炭酸溶液中3分钟内死亡。 淋球菌较为娇嫩，酶系统不完整，初代培养一般培养基不易成功，需在含有动物蛋白培养基上，且含有二氧化碳条件下才能生长。淋球菌在血琼脂培养基孵育二十四小时后，可形成直径0.51mm圆形稍隆起，湿润光滑，半透明，边缘呈花瓣状，有粘性露滴状菌。 淋球菌生化反应不发达，只分解葡萄糖，产酸不产气，不分解麦芽糖及蔗糖。藉助上述生化特征亦可和脑膜炎球菌及其它奈瑟菌相判别。淋球菌能产生氧化酶和过氧化氢酶，在诊疗上有一定意义。三、淋病奈瑟菌试验室检验及其诊疗细菌试验室检验及其它检验（1） 涂片检验：取患者尿道分泌物或宫颈分泌物，作革兰氏染色，在多形核白细胞内找到革兰氏阴性双球菌。涂片对有大量脓性分泌物单纯淋菌性前尿道炎患者，此法阳性率在90%左右，能够初步诊疗。女性宫颈分泌物中杂菌多，敏感性和特异性较差，阳性率仅为50-60%，且有假阳性，所以世界卫生组织推荐用培养法检验女病人。慢性淋病因为分泌物中淋球菌较少，阳性率低，所以要取前列腺按摩液，以提升检出率。咽部涂片发觉革兰氏阴性双球菌不能诊疗淋病，因为其它奈瑟菌属在咽部是正常菌群。另外对症状不经典涂片阳性应作深入检验。（2）培养检验：淋球菌培养是诊疗关键佐证，培养法对症状很轻或无症状男性、女性病人全部是较敏感方法，只要培养阳性就可确诊，在基因诊疗问世以前，培养是世界卫生组织推荐筛选淋病唯一方法。 现在国外推荐选择培养基有改良Thayer-Martin（TM）培养基和New York City（NYC）培养基。中国采取巧克力琼脂或血琼脂培养基，均含有抗生素，可选择地抑制很多其它细菌生长。在36，70%湿度，含 5%-10%CO2（烛缸）环境中培养，24-48小时观察结果。培养后还需进行菌落形态，革兰氏染色，氧化酶试验和糖发酵试验等判定。培养阳性率男性 80%-95%，女性80-90%。培养后需依据菌落形态、革兰染色、氧化酶试验和糖发酵试验做出判定。培养阳性率男性为8095，女性为 8090。（3）抗原检测1固相酶免疫试验（EIA）：可用来检测临床标本中淋球菌抗原，在流行率很高地域而又不能作培养或标本需长时间远送时使用，能够在妇女人群中用来诊疗淋球菌感染。2直接免疫荧光试验：经过检测淋球菌外膜蛋白I单克隆抗体作直接免疫荧光试验。但现在在男女二性标本敏感不高，特异性差，加之试验人员判定水平，故该试验尚不能推荐用来诊疗淋球菌感染。（4）基因诊疗1淋球菌基因探针诊疗:淋球菌基因探针诊疗，所用探针有：质粒DNA探针，染色体基因探针和rRNA基因探针。2、淋球菌基因扩增检测 PCR技术和连接酶链反应出现深入提升了检测淋球菌灵敏性，它含有快速、灵敏、特异、简便优点，能够直接检测临床标本中极微量病原体。（5）药敏试验 对培养阳性者可深入用纸片扩散法做药敏试验，或用琼脂平皿稀释法测定药品最小抑菌浓度（MIC），和用纸片酸度定量法检测内酰胺酶（使用 Whatman I号滤纸PP-NG菌株能使其颜色由蓝变黄，阳性为PPNG，阴性为N-PPNG），以确定淋球菌对抗生素敏感性，合理选择用药。四、淋病预防淋病奈瑟菌预防关键点以下：1.避免婚外性行为。2.在性生活中提倡使用避孕套等理化屏障，以预防淋球菌感染。3.预防性使用抗生素可降低感染危险，可应用于已知和淋病患者有性接触者。4.按淋病诊疗方案对病人进行合理诊疗，根本消亡传染源。5.对性伴侣应进行检验和诊疗。6.患者宜注意个人卫生和隔离，不和家人、小孩（尤其女孩）同床、共浴。7.实施对新生儿硝酸银溶液或红霉素溶液预防滴眼要求，预防新生儿淋病性眼炎发生。8.病人需经根本治愈后，方可结婚、生育和安排工作。五、淋病奈瑟菌生物安全防护依据病原微生物生物试验室生物安全管理条例中相关要求，人间传输微生物名目（待颁布）霍乱弧菌属于三类，BSL-2。相关防护事宜包含：（1）操作要求1、试验时，未经试验室主任同意，限制或严禁进入试验室。2、不许在工作区域饮食、吸烟、清洗隐型眼镜和化妆。食物应存放在工作区域以外专用橱柜或冰箱中。3、对于污染锐器，必需时刻保持高度警惕，包含针、注射器、玻片、加样器等。4、注射和吸收感染材料时，只能使用针头固定注射器或一次性注射器（即注射器和针头是一体）。用过一次性针头必需弯曲、切断、破碎、重新套上针头套、从一次性注射器上去掉，或在丢弃前进行人工处理，要不将之小心放入不会被刺穿、用于搜集废弃锐器容器中。非一次性锐器必需放置在坚壁容器中，转移至处理区消毒，最好高压杀菌。5、打坏器皿不能直接用手处理，必需用其它工具处理，如刷子和簸箕、夹子或镊子。盛污染针头、锐器、碎玻璃容器在倒掉前，应按摄影关要求进行消毒。6、全部培养物、储存物及其它要求废物在释放前，均应使用可行消毒方法进行消毒，如高压灭菌。转移到就近试验室消毒物料应置于耐用、防漏容器内，密封运出试验室。离开该系统进行消毒物料，在转移前应包装，其包装应符合相关法规。7、溅出或偶然事件中，显著暴露于传染源时，要立即向试验室主任汇报。进行合适医学评定、观察、诊疗，保留书面统计。8、按日常程序、在相关传染源工作结束后、尤其是传染源溅出或洒出后、或受到其它传染源污染后，试验室设备和工作台面应该使