一种全自动药敏系统检测念珠菌抗真菌药物敏感性的应用评价.pdf

论著一种全自动药敏系统检测念珠菌抗真菌药物敏感性的应用评价田瑞卿1,2 王琦琦1 万喆1 李若瑜1 刘伟1(1.北京大学第一医院皮肤性病科,北京大学真菌和真菌病研究中心,北京 1 0 0 0 3 4;2.保定市第一医院检验科,保定 0 7 1 0 0 0)【摘要】目的 评价一种全自动真菌药敏分析系统检测念珠菌属对常用抗真菌药物体外敏感性的临床应用价值。方法 利用微量肉汤稀释法C L S I M 2 7-A 4和全自动真菌药敏系统检测1 0 0株念珠菌对9种抗真菌药物的敏感性,对两种方法的一致性进行分析。结果 两种方法的一致性与所检测的念珠菌属及抗真菌药物种类有关,检测白念珠菌时,卡泊芬净的基本一致性为7 5%,检测光滑念珠菌时,卡泊芬净和伏立康唑的分类一致性分别为6 1.1%和6 6.7%,其他基本一致性和分类一致性为8 3%1 0 0%;两种方法测定1 0 0株念珠菌对9种抗真菌药物总的基本一致性在8 9%以上,总的分类一致性在9 1%以上。结论 全自动真菌药敏分析系统检测念珠菌属体外药物的敏感性与C L S I方法一致性较好,具有快速和自动的优势,在临床微生物实验室具有很好的应用价值。【关键词】念珠菌属;抗真菌药物敏感性试验;微量肉汤稀释法;全自动真菌药敏【中图分类号】R 9 7 8.5 R 3 7 9.4 【文献标志码】A 【文章编号】1 6 7 3-3 8 2 7(2 0 2 3)1 8-0 5 0 1-0 6A p p l i c a t i o n e v a l u a t i o n o f a n a u t o m a t i c d r u g s u s c e p t i b i l i t y s y s t e m f o r a n t i f u n g a l s u s c e p t i b i l i t y t e s t i n g o f C a n-d i d aT I AN R u i q i n g1,2,WANG Q i q i1,WAN Z h e1,L I R u o y u1,L I U W e i1(1.D e p a r t m e n t o f D e r m a t o l o g y,P e k i n g U n i v e r s i t y F i r s t H o s p i t a l a n d R e s e a r c h C e n t e r f o r M e d i c a l M y c o l o g y,P e k i n g U-n i v e r s i t y,B e i j i n g 1 0 0 0 3 4,C h i n a;2.D e p a r t m e n t o f L a b o r a t o r y,B a o d i n g NO.1 H o s p i t a l,B a o d i n g 0 7 1 0 0 0,C h i n a)【A b s t r a c t】O b j e c t i v e T o e v a l u a t e t h e c l i n i c a l v a l u e o f a f u l l y a u t o m a t i c f u n g a l d r u g s u s c e p t i b i l i t y a n a l y s i s s y s t e m f o r i n v i t r o a n t i f u n g a l s u s c e p t i b i l i t y t e s t i n g o f C a n d i d a t o c o mm o n a n t i f u n g a l d r u g s.M e t h o d s T h e s u s c e p t i b i l i t i e s o f 1 0 0 s t r a i n s o f C a n d i d a t o 9 a n t i f u n g a l d r u g s w e r e d e t e c t e d b y b r o t h m i c r o d i l u t i o n C L S I M 2 7-A 4 a n d a u t o m a t i c f u n g a l d r u g s u s c e p t i b i l i t y s y s t e m,a n d t h e a g r e e m e n t o f t h e t w o m e t h o d s w a s a n a l y z e d.R e s u l t s T h e a g r e e m e n t o f t h e t w o m e t h o d s i s r e l a t e d t o t h e s p e c i e s o f C a n d i d a a n d a n t i f u n g a l d r u g s.W h e n C a n d i d a a l b i c a n s w e r e d e t e c t e d,t h e e s s e n t i a l a g r e e m e n t o f c a s p o f u n g i n w a s 7 5%.F o r C a n d i d a g l a b r a t a,t h e c a t e g o r i c a l a g r e e m e n t o f c a s p o f u n g i n a n d v o r i c o n a z o l e w a s 6 1.1%a n d 6 6.7%,r e s p e c t i v e-l y,a n d o t h e r s w e r e 8 3%1 0 0%.T h e t o t a l e s s e n t i a l a g r e e m e n t o f 1 0 0 C a n d i d a t o 9 a n t i f u n g a l d r u g s d e t e r m i n e d b y t h e t w o m e t h o d s w a s m o r e t h a n 8 9%,a n d t h e t o t a l c a t e g o r i c a l a g r e e m e n t w a s o v e r 9 1%.C o n c l u s i o n T h e s u s c e p t i b i l i t y o f a u t o m a t-i c f u n g a l d r u g s u s c e p t i b i l i t y a n a l y s i s s y s t e m f o r C a n d i d a i n v i t r o i s c o n s i s t e n t w i t h C L S I,w h i c h h a s t h e a d v a n t a g e o f r a p i d i-t y a n d a u t o m a t i o n,a n d h a s a g o o d a p p l i c a t i o n v a l u e i n c l i n i c a l m i c r o b i o l o g y l a b o r a t o r y.【K e y w o r d s】C a n d i d a;a n t i f u n g a l s u s c e p t i b i l i t y t e s t;b r o t h m i c r o d i l u t i o n;f u l l y a u t o m a t i c f u n g a l d r u g s u s c e p t i b i l i t yC h i n J M y c o l,2 0 2 3,1 8(6):5 0 1-5 0 6作者简介:田瑞卿,女(汉族),硕士,副主任检验师.E-m a i l:t r q 1 0 2 41 6 3.c o m通信作者:刘伟,E-m a i l:l i u w e i b j m u.e d u.c n 近年来,随着肿瘤放化疗、器官移植、介入操作、糖皮质激素及广谱抗菌药物的广泛应用,侵袭性真菌病的发病率和死亡率逐年升高。在侵袭性真菌感染中侵袭性念珠菌病最常见,且病死率最105 中国真菌学杂志 2 0 2 3年1 2月 第1 8卷 第6期 C h i n J M y c o l,D e c e m b e r 2 0 2 3,V o l 1 8,N o.6 高1。多项研究显示念珠菌对抗真菌药物的耐药发生率呈逐年上升趋势,念珠菌的耐药问题受到人们越来越多的关注2-3。因此,对病原真菌进行体外抗真菌药物敏感试验也显得尤为重要。目前,真菌药敏试验方法以手工法或半自动的方法为主,随着真菌检出率的不断提高,临床实验室急需引入全自动的真菌药敏试验方法以提高工作效率。本研究以C L S I M 2 7-A 4微量肉汤稀释法为参考方法,探讨一种全自动真菌药敏分析系统对念珠菌属体外药物敏感性的检测能力。1 材料与方法1.1 菌株来源全部受试菌株分离自临床各类标本,保藏于北京大学真菌和真菌病研究中心,包括白念珠菌4 0株、近平滑念珠菌2 0株(含2株似平滑念珠菌)、光滑念珠菌1 8株、热带念珠菌1 8株、克柔念珠菌2株、葡萄牙念珠菌1株、季也蒙念珠菌1株;质控菌株为近 平 滑 念 珠 菌AT C C 2 2 0 1 9和 克 柔 念 珠 菌AT C C 6 2 5 8。所有菌株经显色培养基传代培养进行初步鉴定,纯培养物使用布鲁克质谱仪进行准确鉴定,可信度低者或显色表型与质谱鉴定不一致的菌株采用I T S区序列分析准确定种。所有菌株从-7 0 保藏冰箱取出后,在3 5 下沙堡弱琼脂斜面培养基上连续传代2次,以保证受试菌株的纯度和活力。1.2 仪器和试剂全自动药敏系统,包括全自动药敏仪、真菌药敏盘、培养液等由复星诊断科技(上海)有限公司提供;U型9 6孔药敏板购自江苏世泰实验器材有限公司;沙堡弱培养基购自江门市凯林贸易有限公司;R PM I-1 6 4 0粉为美国G i b c o公司产品;两性霉素B购自华北制药股份有限公司,其他抗真菌药物购自华中海威(北京)基因科技有限公司。1.3 微量肉汤稀释法肉汤培养基和梯度浓度药敏板的制备以及菌悬液的制备和接种均按照美国临床实验室标准化协会(C L S I)M 2 7-A 4进行4。接种后的药敏板于3 5 培养箱中孵育约2 4 h,两性霉素B读取生长完全(1 0 0%)抑制的最小抑菌浓度(M I C),其他药物读取相对于阳性对照孔5 0%抑制的药物浓度。每个受试菌株进行两次重复检测,读取M I C结果时由23人共同完成。1.4 全自动真菌药敏按照复星诊断真菌药敏试剂盒的操作说明进行操作,约2 4 h后仪器自动读取M I C值并判读结果。1.5 质量控制每次试验用上述两种方法平行测试质控菌株AT C C 2 2 0 1 9和AT C C 6 2 5 8,所测结果均应在规定的M I C范围内。1.6 数据分析基本一致性(e s s e n t i a l a g r e e m e n t,E A),试验方法与参考方法的M I C结果相差在两个倍比稀释度之内的样本比率5;分类一致性(c a t e g o r i c a l a-g r e e m e n t,C A),试验方法与参考方法敏感性一致的样本比率6,以2 0 2 0版C L S I文件M 5 9 3 r d e d i-t i o n和M 6 0 2 n d e d i t i o n折点和流行病学界值(e p i-d e m i o l o g i c a l c u t o f f v a l u e,E C V)作为C A分类的判断 标 准7-8。极 严 重 错 误(v e r y m a j o r e r r o r,VM E):试验方法检测结果为敏感,参考方法为耐药;严重错误(m a j o r e r r o r,M E):试验方法检测结果为耐药,参考方法为敏感;一般错误(M i E):试验方法检测结果为中介,参考方法为耐药或敏感;或者参考方法的检测结果为中介,试验方法为耐药或敏感。2 结 果2.1 全自动真菌药敏与C L S I M 2 7-A 4检测念珠菌属对抗真菌药物的敏感性结果表1列出了两种方法测定白念珠菌、近平滑念珠菌、光滑念珠菌和热带念珠菌对9种抗真菌药物的M I C范围,以及5 0%和9 0%菌株生长受抑制时的M I C值(分别表示为M I C5 0和M I C9 0)。总的来说,全自动方法测得的M I C与C L S I方法相比,相同或偏高。在检测白念珠菌对两性霉素B,近平滑念珠菌对阿尼芬净,光滑念珠菌和热带念珠菌时对泊沙康唑时,全自动方法测定的M I C略低于微量肉汤稀释法。2.2 全自动真菌药敏与C L S I M 2 7-A 4检测念珠菌抗真菌药物敏感性的一致性评估如表2所示,对于4 0株白念珠菌而言,其中1 0株白念珠菌,全自动方法测得的M I C高于C L S I两个稀释度以上,白念珠菌的卡泊芬净基本一致性为7 5%,但根据折点判断后,分类一致性为1 0 0%。其他药物的基本一致性和分类一致性均在8 5.5%以上。205 中国真菌学杂志 2 0 2 3年1 2月 第1 8卷 第6期 C h i n J M y c o l,D e c e m b e r 2 0 2 3,V o l 1 8,N o.6 表1 两种方法测定9种抗真菌药物对念珠菌的最小抑菌浓度(M I C)T a b.1 T h e M I C o f 9 a n t i f u n g a l d r u g s o n C a n d i d a b y t w o m e t h o d s(g/m L)菌种(株数)抗真菌药物方法M I C范围M I C5 0M I C9 0白念珠菌(4 0株)两性霉素B全自动0.0 610.50.5C L S I0.2 5111氟胞嘧啶全自动0.0 66 40.0 60.5C L S I0.0 66 40.0 60.2 5氟康唑全自动0.2 540.51C L S I0.1 280.2 51伊曲康唑全自动0.0 30.50.0 60.1 2C L S I0.0 30.50.0 60.1 2伏立康唑全自动0.0 1 60.50.0 30.0 6C L S I0.0 1 50.50.0 30.0 3泊沙康唑全自动0.0 30.2 50.0 30.0 6C L S I0.0 0 30.1 20.0 30.0 6阿尼芬净全自动0.0 1 60.50.0 60.2 5C L S I0.0 1 50.1 20.0 1 50.1 2米卡芬净全自动0.0 30.0 60.0 30.0 6C L S I0.0 1 50.0 30.0 1 50.0 1 5卡泊芬净全自动0.0 30.2 50.1 20.2 5C L S I0.0 1 50.2 50.0 1 50.1 2近平滑念珠菌(2 0株)两性霉素B全自动0.2 520.51C L S I0.50.50.50.5氟胞嘧啶全自动0.0 60.1 20.0 60.0 6C L S I0.0 60.1 20.0 60.1 2氟康唑全自动0.5812C L S I0.2 580.51伊曲康唑全自动0.0 60.2 50.0 60.1 2C L S I0.0 1 50.1 20.1 20.1 2伏立康唑全自动0.0 30.2 50.0 60.1 2C L S I0.0 30.1 20.0 30.0 3泊沙康唑全自动0.0 30.2 50.0 60.1 2C L S I0.0 30.2 50.0 60.0 6阿尼芬净全自动0.1 210.50.5C L S I0.2 5212米卡芬净全自动0.2 540.52C L S I0.2 5212卡泊芬净全自动0.1 210.50.5C L S I0.1 210.51光滑念珠菌(1 8株)两性霉素B全自动0.5211C L S I0.2 510.51305 中国真菌学杂志 2 0 2 3年1 2月 第1 8卷 第6期 C h i n J M y c o l,D e c e m b e r 2 0 2 3,V o l 1 8,N o.6(续表)菌种(株数)抗真菌药物方法M I C r a n g eM I C5 0M I C9 0氟胞嘧啶全自动0.0 60.0 60.0 6C L S I0.0 30.0 60.0 60.0 6氟康唑全自动43 241 6C L S I26 441 6伊曲康唑全自动0.1 240.2 50.5C L S I0.0 610.50.5伏立康唑全自动0.1 210.2 51C L S I0.0 620.0 60.2 5泊沙康唑全自动0.1 220.2 52C L S I0.540.51阿尼芬净全自动0.0 1 60.50.1 20.2 5C L S I0.0 320.0 60.1 2米卡芬净全自动0.0 320.0 30.0 3C L S I0.0 1 540.0 1 50.0 1 5卡泊芬净全自动0.0 320.1 20.2 5C L S I0.0 680.1 20.2 5热带念珠菌(1 8株)两性霉素B全自动0.2 5111C L S I0.2 5211氟胞嘧啶全自动0.0 60.1 20.0 60.1 2C L S I0.0 30.2 50.0 60.1 2氟康唑全自动0.52 5 622 5 6C L S I0.1 26 40.56 4伊曲康唑全自动0.0 680.1 20.5C L S I0.0 60.50.2 50.5伏立康唑全自动0.0 680.1 22C L S I0.0 320.0 62泊沙康唑全自动0.0 310.0 60.1 2C L S I0.0 310.0 60.5阿尼芬净全自动0.0 30.50.0 60.1 2C L S I0.0 1 50.1 20.0 30.1 2米卡芬净全自动0.0 30.1 20.0 30.1 2C L S I0.0 1 50.0 30.0 1 50.0 3卡泊芬净全自动0.0 30.2 50.1 20.2 5C L S I0.0 1 50.50.0 60.1 2 对于1 8株光滑念珠菌,其中7株卡泊芬净的M I C为0.0 60.2 5 g/m L,根据折点判读后,分类一致性为6 1.1%,但基本一致性为1 0 0%。伏立康唑也存在类似问题,基本一致性为1 0 0%,根据E C V判断后,分类一致性为6 6.7%。其他药物的一致性在9 4%以上。在1 8株热带念珠菌中,其中2株耐药的热带念珠菌,伊曲康唑和伏立康唑两个药物,全自动方法测得M I C8 g/m L,超出C L S I 测定结果两个梯度以上,根据折点判读,两种方法伏立康唑均为405 中国真菌学杂志 2 0 2 3年1 2月 第1 8卷 第6期 C h i n J M y c o l,D e c e m b e r 2 0 2 3,V o l 1 8,N o.6 耐药,而伊曲康唑根据E C V全自动方法判定为非野生型(NWT),C L S I方法判定为野生型(WT)。泊沙康唑的分类一致性为8 3.3%,其他药物一致性在9 4%以上。两种方法测定1 0 0株念珠菌对9种抗真菌药物总的基本一致性在8 9%以上,总的分类一致性在9 1%以上。2.3 试验方法与参考方法检测结果误差分析对有临床折点的药物进行误差分析发现,相对于参考方法,全自动方法测定结果未出现严重错误(ME)和 极 严 重 错 误(VME),均 为 一 般 错 误(M i E),其中氟康唑、伏立康唑和阿尼芬净均出现了4个一般错误,米卡芬净1个一般错误,卡泊芬净8个一般错误,在检测光滑念珠菌时,卡泊芬净的敏感性结果有7个一般错误,见表3。3 讨 论在侵袭性念珠菌病的病原菌中,已发现超过1 5种念珠菌可导致人类感染,白念珠菌、近平滑念珠菌、热带念珠菌和光滑念珠菌是我国侵袭性念珠菌感染的主要病原菌9。本研究选取了上述常见的临床分离株以及其他少数不常见念珠菌为研究对象,具有临床指导意义。随着抗真菌药物的广泛应用,念珠菌的耐药问题也逐渐受人关注。光滑和热带念珠菌对唑类药物的耐药性在国内外均有报道1 0-1 2。准确、规范的念珠菌体外药物敏感性检测方法对耐药菌株的检出和临床抗真菌药物的选择具有重要的指导价值。参考方法微量肉汤稀释法为手工操作、复杂、耗时,不宜在常规实验室开展。目前国内获注册证的商品化检 测 试 剂 品 种 有 限,实 验 室 应 用 较 多 的 有AT B F UNGU S 3,S e n s i t i t r e Y e a s t O n e显色药敏板,多以手工操作为主1 3-1 5。本研究以微量肉汤稀释法C L S I M 2 7-A 4为参考,评价一种全自动药敏分析系统的应用价值,旨在将这种全自动真菌药敏检测技术普遍应用于临床。表2 两种方法检测念珠菌抗真菌药物敏感性的一致性T a b.2 A g r e e m e n t o f t w o m e t h o d s f o r d e t e c t i n g a n t i f u n g a l s u s c e p t i b i l i t y o f C a n d i d a 菌种(株数)两性霉素B氟胞嘧啶氟康唑伊曲康唑伏立康唑泊沙康唑阿尼芬净米卡芬净卡泊芬净E A/%C A/%E A/%C A/%E A/%C A/%E A/%C A/%E A/%C A/%E A/%C A/%E A/%C A/%E A/%C A/%E A/%C A/%白念珠菌(4 0株)9 7.51 0 01 0 0-1 0 09 51 0 0-1 0 09 7.5 9 7.59 58 5.5 9 7.51 0 01 0 07 51 0 0近平滑念珠菌(2 0株)1 0 09 51 0 0-1 0 09 51 0 01 0 01 0 09 51 0 01 0 09 51 0 01 0 09 51 0 01 0 0光滑念珠菌(1 8株)1 0 01 0 01 0 0-1 0 09 4.41 0 01 0 01 0 06 6.7 9 4.4 9 4.41 0 08 8.91 0 01 0 01 0 0 6 1.1热带念珠菌(1 8株)1 0 01 0 01 0 0-1 0 01 0 08 8.9 8 8.9 8 8.9 8 8.9 9 4.4 8 3.31 0 09 4.41 0 01 0 09 4.4 9 4.4其他(4株)-总计(1 0 0株)9 99 91 0 0-1 0 09 69 89 89 89 09 79 39 49 61 0 09 98 99 1注:E A,e s s e n t i a l a g r e e m e n t;C A,c a t e g o r i c a l a g r e e m e n t.表3 试验方法检测念珠菌体外药物敏感性误差分析(个)T a b.3 T h e e r r o r s i n d e t e c t i o n o f i n v i t r o s u s c e p t i b i l i t y o f C a n d i d a w i t h t e s t m e t h o d抗真菌药物白念珠菌(n=4 0)近平滑念珠菌(n=2 0)光滑念珠菌(n=1 8)热带念珠菌(n=1 8)所有菌株(n=1 0 0)VMEMEM i EVMEMEM i EVMEMEM i EVMEMEM i EVMEMEM i E氟康唑002001001000004伏立康唑001001-002004阿尼芬净001000002001004米卡芬净000001000000001卡泊芬净000000007001008505 中国真菌学杂志 2 0 2 3年1 2月 第1 8卷 第6期 C h i n J M y c o l,D e c e m b e r 2 0 2 3,V o l 1 8,N o.6 使用质控菌株AT C C 2 2 0 1 9和AT C C 6 2 5 8进行质量控制,在质控菌株结果均在控的情况下,将两种方法检测的念珠菌对9种抗真菌药物的M I C 进行比较,基本一致性在8 9%以上,分类一致性在9 1%以上,对于有临床折点的药物进行误差分析显示,全自动方法测定结果只出现了少数一般错误(M i E),而 无 严 重 错 误(ME)和 极 严 重 错 误(VME)。按照不同菌种的抗真菌药物敏感性比较,对于白念珠菌而言,卡泊芬净的基本一致性偏低,为7 5%,这些菌株见于药敏试验存在明显的拖尾情况,全自动方法的M I C读取结果高于参考方法两个稀释度以上,这表明该系统可能对于存在拖尾的药敏结果判读不准确。但根据折点判断后,两种方 法 判 读 的 结 果 均 为 敏 感,分 类 一 致 性 为1 0 0%。在1 8株光滑念珠菌中,两种方法结果的基本一致性为1 0 0%,但其中7株光滑念珠菌卡泊芬净的M I C范围虽然为0.0 60.2 5 g/m L,但根据折点判读后,分类一致性较低,为6 1.1%,因为差一个药物浓度梯度就是不同的判断结果,导致光滑念珠菌对卡泊芬净的敏感性结果中有7个一般错误。检测光滑念珠菌对伏立康唑的敏感性时,存在类似现象,两种方法测定的M I C基本一致性为1 0 0%,但根据E C V判定后,6株光滑念珠菌复星的检测结果为NWT,而参考方法为WT。根据C L S I M 5 9和M 6 0,念珠菌属没有氟胞嘧啶的判断标准,白念珠菌没有伊曲康唑的判断标准,但两种方法所测定M I C均在两个稀释梯度之内,基本一致性均为1 0 0%。此外,克柔念珠菌、葡萄牙念珠菌、季也蒙念珠菌检测菌株数较少,两种方法测定的M I C 均在两个稀释度之内,然而克柔念珠菌的卡泊芬净和泊沙康唑两个药物,根据E C V判读后,各有1株菌敏感性结果不一致,其他药物判读结果均一致。针对上述问题,认为这与本研究选取不同种念珠菌的数量较少有关,这也是本研究的不足之处,还有待于加大各种常见念珠菌的菌株数量,并且能更多地覆盖其他少见念珠菌,从而为全自动真菌药敏分析系统的应用提供更有力的依据。然而需要指出的是,真菌药敏试验采用“9 0-6 0规则”,这意味着由敏感菌株引起的感染中,9 0%的概率治疗有效,而由耐药菌株引起的感染6 0%病例也可能治疗成功。因此,除了考虑两种方法的一致性之外,应进一步结合体内疗效分析,以便药敏试验能够更加客观地反映抗真菌治疗的临床疗效1 6-1 7。综上所述,全自动真菌药敏分析系统检测念珠菌属体外药物的敏感性与C L S I参考方法相比,具有很好的一致性,且操作简便,能够自动判读结果,有利于同时检测多个样本,在临床微生物实验室具有很好的应用价值。参 考 文 献1 KU L L B E R G B J,A R E D RU P M C.I n v a s i v e c a n d i d i a s i sJ.N E n g l J M e d,2 0 1 5,3 7 3(1 5):1 4 4 5-1 4 5 6.2 杨之辉,余进,李若瑜.中国侵袭性念珠菌病的流行现状J.国际流行病学传染病学杂志,2 0 2 1,4 8(4):2 6 6-2 7 1.3 范欣,黄晶晶,侯欣,等.不同唑类药物体外诱导热带念珠菌耐药特征及其耐药机制研究J.中国真菌学杂志,2 0 1 8,1 3(4):1 9 7-2 0 0.4 C L S I.R e f e r e n c e m e t h o d f o r b r o t h d i l u t i o n a n t i f u n g a l s u s-c e p t i b i l i t y t e s t i n g o f y e a s t s.4 t h e d.C L S I S t a n d a r d M 2 7S.W a y u e,P A:C l i n i c a l a n d L a b o r a t o r y S t a n d a r d I n s t i t u t e,2 0 1 7.5 C U E N C A-E S T R E L L A M,GOME Z-L O P E Z A,A L A S-T RU E Y-I Z QU I E R D O A,e t a l.C o m p a r i s o n o f t h e V i t e k 2 a n t i f u n g a l s u s c e p t i b i l i t y s y s t e m w i t h t h e C l i n i c a l a n d L a b o-r a t o r y S t a n d a r d s I n s t i t u t e(C L S I)a n d E u r o p e a n C o mm i t t e e o n A n t i m i c r o b i a l S u s c e p t i b i l i t y T e s t i n g(E U C A S T)b r o t h m i c r o d i l u t i o n r e f e r e n c e m e t h o d s a n d w i t h t h e S e n s i t i t r e Y e a-s t O n e a n d E t e s t t e c h n i q u e s f o r i n v i t r o d e t e c t i o n o f a n t i f u n-g a l r e s i s t a n c e i n y e a s t i s o l a t e sJ.J C l i n M i c r o b i o l,2 0 1 0,4 8(5):1 7 8 2-1 7 8 6.6 K I R A Z N,D A G I,O Z Y,e t a l.C o r r e l a t i o n b e t w e e n b r o t h m i c r o d i l u t i o n a n d d i s k d i f f u s i o n m e t h o d s f o r a n t i f u n g a l s u s-c e p t i b i l i t y t e s t i n g o f c a s p o f u n g i n,v o r i c o n a z o l e,a m p h o t e r i-c i n B,i t r a c o n a z o l e a n d f l u c o n a z o l e a g a i n s t C a n d i d a g l a b r a t aJ.J M i c r o b i o l M e t h o d s,2 0 1 0,8 2(2):1 3 6-1 4 0.7 C L S I.E p i d e m i o l o g i c a l c u t o f f v a l u e s f o r a n t i f u n g a l s u s c e p t i-b i l i t y t e s t i n g.3 r d e d.C L S I s u p p l e m e n t M 5 9S.W a y n e,P A:C l i n i c a l a n d L a b o r a t o r y S t a n d a r d s I n s t i t u t e,2 0 2 0.8 C L S I.P e r f o r m a n c e s t a n d a r d s f o r a n t i f u n g a l s u s c e p t i b i l i t y t e s t i n g o f y e a s t s.2 n d e d.C L S I s u p p l e m e n t M 6 0S.W a y n e,P A:C l i n i c a l a n d L a b o r a t o r y S t a n d a r d s I n s t i t u t e,2 0 2 0.9 李琰冰,陆旻雅,肖盟,等.中国临床重要真菌监测的工作进展J.中国合理用药探索,2 0 2 2,1 9(8):8-1 1.1 0 L I U W,T AN J,S UN J,e t a l.C h i n a-S C AN t e a m.I n v a-s i v e c a n d i d i a s i s i n i n t e n s i v e c a r e u n i t s i n C h i n a:i n v i t r o a n t i-f u n g a l s u s c e p t i b i l i t y i n t h e C h i n a-S C AN s t u d yJ.J A n t i m i-c r o b C h e m o t h e r.2 0 1 4,6 9(1):1 6 2-1 6 7.(下转第5 2 5页)605 中国真菌学杂志 2 0 2 3年1 2月 第1 8卷 第6期 C h i n J M y c o l,D e c e m b e r 2 0 2 3,V o l 1 8,N o.6 参 考 文 献1 汪复,张婴元.实用抗感染治疗学M.第2版.北京:人民卫生出版社,2 0 0 4:6 6 3-6 6 7.2 L I E K W,YU Y L,C HE N G I K,e t a l.C r y p t o c o c c a l i n-f e c t i o n o f t h e l u m b a r s p i n eJ.J R S o c M e d,1 9 8 9,8 2(3):1 7 2-1 7 3.3 AM I T A,S UD I S H K,P O P L E I K.P r i m a r y c a l v a r i a l c r y p t o c o c c a l o s t e o m y e l i t i s i n a p a t i e n t w i t h i d i o p a t h i c l y m-p h o p e n i aJ.A c t a N e u r o c h i r u r g i c a,2 0 0 8,1 5 0(7):7 1 3-7 1 4.4 C HE N S,S O R R E L L T,N I MMO G,e t a l.E p i d e m i o l o g y a n d h o s t-a n d v a r i e t y-d e p e n d e n t c h a r a c t e r i s t i c s o f i n f e c t i o n d u e t o C r y p t o c o c c u s n e o f o r m a n s i n A u s t r a l i a a n d N e w Z e a l-a n dJ.C l i n I n f e c t D i s,2 0 0 0,3 1(2):4 9 9