碘酸钠诱发视网膜色素变性大...的生理指标和组织病理学分析_谭莹.pdf

实验动物与比较医学 Laboratory Animal and Comparative MedicineApr.2023,43(2)DOI:10.12300/j.issn.1674-5817.2022.149王京昆，云南白药集团股份有限公司中央研究院院长助理，云南白药集团股份有限公司药品事业部首席医学官，云南省药物研究所药物安全性评价中心主任，云南省中药和民族药新药创制企业重点实验室主任。同时是云南省云岭产业技术领军人才、云南省有突出贡献中青年技术专家、云南省技术创新人才、云南中医药大学和大理大学硕士生导师，以及国家科技部科技专家库专家、国家科技奖励专家库专家、国家药品监督管理局和国家农业农村部GLP机构检查专家。兼任中国毒理学会药物毒理与安全性评价专业委员会常务委员，中国毒理学会中药与天然药物毒理专业委员会常务委员，中国实验动物学会实验动物与毒理学专业委员会常务委员、中国药学会中药临床评价专业委员会委员。主要从事中药新药研究、药物安全性评价研究、药物临床医学研究等工作。获得10项国家及省级科技奖励，其中国家科技进步一等奖1项（排名第4），云南省科技进步特等奖1项（排名第5）。谭 莹，云南省药物研究所药物安全性评价中心副主任，一般毒理研究室负责人，一般毒理学、安全药理学、神经毒力研究专题负责人，生理信号分析检测负责人，中国毒理学会安全药理学专业委员会委员，昆明市药学会专家库专家，作为核心成员负责和参与完成国家级、省部级研究课题20余项。深耕药物临床前安全性评价研究工作的十余年间，按我国药物非临床研究质量管理规范、美国联邦法规（21CFR Part 58）和中/美新药申报审评和相关技术指导原则要求完成40余个不同类型受试物的临床前安全性评价研究50余项，在中药、天然药物和外用制剂的临床前安全性评价研究中积累了丰富经验。以第一作者和通信作者在国家级专业核心期刊发表论文20余篇。碘酸钠诱发视网膜色素变性大鼠模型的生理指标和组织病理学分析谭莹1,2,廖文平1,2,高启龙3,李 勇1,2,史新辉1,2,王京昆1,2(1.云南省药物研究所,昆明 650011;2.云南省中药和民族药新药创制企业重点实验室,昆明 650011;3.昆明市中医医院,昆明 650031)摘要 目的全面评价碘酸钠腹腔注射对SD大鼠生理指标和视网膜组织病理学特征的影响。方法选取64只SD大鼠随机分为阴性对照组和模型组，每组32只，雌雄各半。模型组以10 mL/kg剂量腹腔注射碘酸钠（6 mg/mL）1次，阴性对照组以10 mL/kg剂量腹腔注射生理盐水注射液1次。每天观察大鼠一般体征，注射当天（0天）和注射后第2、6、9、13、16、20、23、27、29、36、43、50、57天称量所有存活大鼠体质量；注射后第3、7、21、28、41、62天随机选取大鼠（第28天为12只/组，其余为4只/组，均为雌雄各半）进行血清生化学指标检测，系统解剖摘取脏器称重，然后对主要脏器和组织进行HE染色，以及眼HE和TUNEL染色；注射后第28、62天进行血常规指标检测。结果注射碘酸钠后，模型组88%的大鼠出现一过性稀便，观察期间大鼠体质量增长稍缓且以雄鼠较明显。注射后第28天模型组雌鼠红细胞容积（red blood cell volume，RDW）和雄鼠尿素氮（urea nitrogen，BUN）、网织红细胞计数（reticulocyte count，Retic#）及百分比（reticulocyte percentage，Retic%）均升高，与阴性对照组比较的差异均有统计学意义（均P0.05）。雌雄鼠白细胞（white blood cells，WBC）、红细胞（red blood cells，RBC）、血红蛋白（hemoglobin，HGB）、红细胞比容（hematocrit，HCT）均有降低趋势，但组间差异均没有统计学意义（均P0.05）。模型组雄鼠胸腺重量、系数除注射后第7天大于阴性对照组外，其余时间点均小于阴性对照组，但组间差异均没有统计学意义（均P0.05）。组织病理学检查可见模型组大鼠视网膜由波浪状改变逐步发展为 人类疾病动物模型 Animal Models of Human Diseases基金项目 云南省重大科技专项“灯盏花口服类制剂新适应症和毒性作用系统研究”（2017ZF002-08）第一作者 谭 莹（1979），女，博士，正高级工程师，研究方向：药物安全性评价研究。E-mail：。ORCID：0009-0007-3084-9020通信作者 王京昆（1969），男，学士，正高级工程师，研究方向：新药研发和药物安全性评价研究。E-mail：。ORCID：0009-0006-9724-6286124实验动物与比较医学 Laboratory Animal and Comparative MedicineApr.2023,43(2)异常心电图样改变，各层排列紊乱，外核层局灶性变薄，视网膜外核层细胞凋亡；病变发生率、病变评分和凋亡细胞数量均明显高于或多于同时期的阴性对照组，第28天的组间差异有统计学意义（均P0.01）。结论碘酸钠腹腔注射除可使大鼠视网膜变性外，对血清生化、血常规部分指标也有一定程度的影响，还出现大鼠体质量增长略缓慢和一过性粪便性状改变的现象。因此，在使用该模型开展药物安全性评价时，应关注造模试剂对动物的影响。关键词 碘酸钠；生理指标；视网膜组织病理；视网膜色素变性模型；大鼠中图分类号 Q95-33；R-332 文献标志码 A 文章编号 1674-5817（2023）02-0124-12Physiological Indexes and Histopathology Analysis of Sodium Iodate-Induced Retinitis Pigmentosa in RatsTAN Ying1,2,LIAO Wenping1,2,GAO Qilong3,LI Yong1,2,SHI Xinhui1,2,WANG Jingkun1,2(1.Yunnan Institute of Materia Medica,Kunming 650011,China;2.Yunnan Province Company Key Laboratory for TCM and Ethnic Drug of New Drug,Kunming 650011,China;3.Kunming Traditional Chinese Medicine Hospital,Kunming 650031,China)Correspondence to:WANG Jingkun(ORCID:0009-0006-9724-6286),E-mail:ABSTRACT Objective To evaluate the effects of intraperitoneal injection of sodium iodate on the physiological indexes and retinal histopathological characteristics of SD rats comprehensively.Methods A total of 64 rats were randomly divided into negative control group and model group,half male and half female.The model group was intraperitoneally injected with 6 mg/mL sodium iodate once at the dose of 10 mL/kg and the negative control group was injected with 10 mL/kg 0.9%NaCl once.The body weight of all surviving rats was detected on the day of injection(0 day)and the 2nd,6th,9th,13th,16th,20th,23rd,27th,29th,36th,43rd,50th and 57th days after injection.On the 3rd,7th,21st,28th,41st and 62nd days after injection,the rats were randomly selected(12 rats in each group on the 28th day,and 4 rats in each group at other time points,those in each group were half male and half female)for serum biochemical indexes detection.The organs were dissected and weighed,and then the main organs and tissues were stained with HE,and the eyes were stained with HE and TUNEL.Blood routine indexes were detected on the 28th and 62nd day after injection.Results After injection of sodium iodate,88%of the rats in the model group had transient loose stools.During the observation period,the body weight of the rats increased slightly and was more obvious in male rats.On the 28th day after injection,compared with the negative control group,the red blood cell volume(RDW)of female rats and blood urea nitrogen(BUN),reticulocyte count(Retic#)and reticulocyte percentage(Retic%)of male rats in the model group increased significantly(all P0.05).The white blood cell(WBC),red blood cell(RBC),hemoglobin(HGB)and hematocrit(HCT)of male and female rats showed decreasing trends,but there were no significant differences between the two groups(all P 0.05).The thymus weight and coefficient of male rats in the model group were smaller than those in the negative control group except for the 7th day after injection,but there were no significant differences between the two groups(all P 0.05).Histopathological examination showed that the retina of the model group gradually developed from wavy changes to abnormal electrocardiogram(ECG)-like changes,with disordered arrangement of each layer,focal thinning of the outer nuclear layer,and apoptosis of the outer nuclear layer of the retina.The incidence of lesions,lesion score and the number of apoptotic cells in the model group were significantly higher than or more than those in the negative control group at the same time,and the difference between the groups on the 28th day was statistically significant(all P0.01).Conclusion In addition to retinal degeneration in rats,intraperitoneal injection of sodium iodate also had a certain degree of influence on serum biochemical and blood routine indexes,and also showed a slight slow growth of body weight and transient changes in fecal traits.Therefore,when using this model to evaluate drug safety,the effects of modeling reagents on animals should be paid to attention.Key words Sodium iodate;Physiological indexes;Retinal histopathology;Retinis pigmentosa model;Rats125实验动物与比较医学 Laboratory Animal and Comparative MedicineApr.2023,43(2)近年来将模型动物用于药物临床前安全性评价已成趋势。根据待评价药物的特点和临床适应症等选择合适的模型一直是备受关注的技术难题。根据药物临床前安全性评价研究的目的和相关技术指导原则的要求1-2，安全性评价所涉及的内容非常宽泛。碘酸钠诱发的视网膜色素变性（retinitis pigmentosa，RP）动物模型因具有制备简单、病变稳定等特点，被广泛用于RP药物/细胞治疗、机制探索和再生医学领域3。经查阅国内外文献，未见碘酸钠对除视网膜外其他组织器官功能、形态等影响的相关报告，局限了该经典模型在毒理学领域的使用。本研究通过观察和检测注射碘酸钠后9周内多个时间点SD大鼠的一般体征、体质量，血清生化和血常规指标，脏器重量和系数，主要脏器、器官和眼的外观形态及组织病理学检查，全面评价碘酸钠对SD大鼠的整体影响，以期补充和完善对该模型的认识，为其用于药物安全性评价研究提供参考。1材料与方法1.1实验动物SPF级SD大鼠80只，雌雄各半，购入时56周龄，雌鼠体质量为（127.579.79）g，雄鼠体质量为（144.2610.03）g，均由北京维通利华实验动物技术有限公司提供SCXK（京）2016-0006，动物质量合格证号为1100112011024706（雌）和1100112011024707（雄）。动物饲养于云南省药物研究所药物安全性评价中心屏障环境设施SYXK（滇）K2017-0004，温度23.524.6，相对湿度46%64%，昼夜各半循环照明。实验期间动物自由摄食、饮水，动物饲料、垫料、饮用水和环境技术指标均符合国家规范。本研究所有动物实验操作及饲养环境条件等均通过云南省药物研究所实验动物福利伦理委员会审查批准 编号：动（伦）IACUC-2020-011-01，所有实验流程均严格遵照云南省药物研究所药物安全性评价中心相关标准操作规程进行。1.2主要试剂与仪器碘酸钠购自美国 SIGMA-ALDRICH 公司（批号MKCG6491）；氯化钠注射液购自浙江国镜药业有限公司（批号A19091901B）；白细胞鞘液（Perox Sheath），白细胞分类试剂（Perox 1、2、3），红细胞、血小板、血红蛋白、网织红细胞等血常规指标检测试剂均购自德国Simenes Healtheare Diagnostics 公司；丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶、总胆红素、-谷氨酰转移酶、总胆固醇、三酰甘油、肌酸激酶、乳酸脱氢酶、肌酐、尿素氮检测试剂/试剂盒均购自美国Beckman Coulter公司，肌酸激酶同工酶测定试剂盒购自意大利Sentinel CH.SpA公司。ADVIA 2120血液分析仪为德国Siemens Healthcare Diagnoseics 公 司 产 品；Unicel DxC600全自动生化分析仪为美国Beckman Coulter公司产品；ASP200/ASP300S 脱水机、RM2255 切片机、HI1210 摊片机、ST5020 染色机、CV5030 盖片机、EG1160包埋机和DM6000B显微镜均为德国Leica公司产品；CX21FSI显微镜为日本奥林巴斯株式会社产品。1.3动物分组及用药经检疫合格后，选择状况良好的SD大鼠64只，用随机分组法分为阴性对照组和模型组，每组32只，雌雄各半。阴性对照组雌雄大鼠体质量分别为（158.948.04）g、（197.588.29）g，模型组雌雄大鼠体质量分别为（159.177.60）g、（197.627.74）g。完成适应性饲养后，大鼠约6.57.5周龄，模型组以10 mL/kg的剂量，腹腔注射质量浓度为6 mg/mL的碘酸钠溶液1次；阴性对照组以相同容积和频次，腹腔注射生理盐水注射液。1.4一般体征观察、体质量称量腹腔注射用药后9周内，每天观察各组大鼠的外观、活动及精神状态等。注射当天和注射后第128天每周称重2次（即注射后第2、6、9、13、16、20、23、27天各1次），之后每周称重1次（即注射后第29、36、43、50、57天各1次）。1.5血清生化、血常规指标检测注射后第3、7、21、28、41和62天，随机选取各组大鼠，经异氟烷麻醉后，腹主动脉采血，检测血清生化指标；第 28、62 天检测血常规指标 1 次。除第 28 天每组选取12只（雌雄各半）外，其余时间点均为每组4只（雌雄各半）。血清生化指标包括天冬氨酸氨基转移酶（aspartate aminotransferase，AST）、丙氨酸氨基转移酶（alanine aminotransferase，ALT）、总胆红素（total bilirubin，TBIL）、-谷氨酰转移酶（-glutamyltransferase，GGT）、总 胆 固 醇（total cho-lesterol，CHOL）、三酰甘油（triglyceride，TG）、肌酸激 酶（creatine kinase，CK）、肌 酸 激 酶 同 工 酶（creatine kinase isoenzyme，CKMB）、乳 酸 脱 氢 酶（lactate dehydrogenase，LDH）、肌 酐（creatinine，CREA）、尿素氮（urea nitrogen，BUN）。血常规指标126实验动物与比较医学 Laboratory Animal and Comparative MedicineApr.2023,43(2)包括白细胞（white blood cell，WBC）、红细胞（red blood cell，RBC）、血红蛋白（hemoglobin，HGB）、红细胞容积（red blood cell volume，RDW）、红细胞比容（hematocrit，HCT）、平 均 红 细 胞 容 积（mean corpuscular volume，MCV）、血小板（platelet，PLT）、网织红细胞计数（reticulocyte count，Retic#）及百分比（reticulocyte percentage，Retic%）。1.6系统解剖及脏器称重注射后第3、7、21、28、41和62天，各组大鼠（除第28天每组选取12只外，其余时间点均为每组4只，各时间点均为雌雄各半）经异氟烷麻醉后腹主动脉采血，然后进行系统解剖，摘取眼球（含哈氏腺）、胸腺、心、肝、脾、肾，称重。计算脏器系数脏体比=脏器湿重g/体质量g1 000。1.7组织病理学检查眼球用质量分数为 4%的多聚甲醛溶液和改良Davidsons 固定液固定后进行 HE 和 TUNEL 染色。胸腺、心、肝、脾、肾用体积分数为4%的中性缓冲甲醛溶液固定后进行HE染色。用江丰KF-PRO-005数字病理切片扫描仪截取和采集图片。根据眼HE染色的半定量分级镜检结果量化评分：（1）视网膜没有呈波浪状改变计0分，轻微改变计1分，轻度改变记2分，中度改变记3分，重度改变记4分；（2）视网膜是否呈异常心电图样改变，各层排列是否紊乱，外核层是否局灶性变薄，均按（1）的对应病变等级分数乘以2来计分。总分为（1）+（2）的总和。采用Image Pro Plus 6.0图像分析系统计算视网膜外核层TUNEL染色阳性细胞总数。HE染色评分和TUNEL染色阳性细胞数均以各组平均值作为最终结果。1.8统计学分析除组织病理学检查外，其余雌、雄大鼠检测数据分开处理。样本数=6时，使用IBM SPSS 24进行统计分析，计量数据组间比较用独立样本t检验，组间病变发生率比较用2检验，组间病变程度比较用秩和检验，检验水准=0.05，双侧检测。样本数=2时，仅用均值进行描述。P0.05表示差异有统计学意义。2结果2.1用药后各组大鼠的一般体征和体质量变化阴性对照组所有32只大鼠（雌雄各16只）均未见异常。模型组中有28只动物（雌鼠12只，雄鼠16只）注射碘酸钠后16 min至1 h 34 min陆续出现稀便（发生率为88%），其中24只动物（雌鼠11只，雄鼠13只）注射后4 h 8 min至4 h 23 min稀便症状消失，剩余4只（雌鼠1只，雄鼠3只）注射次日恢复正常。腹腔注射碘酸钠当天（0 天）和注射后第 2、6、9、13、16、20、23、27、29、36、43、50、57天，阴性对照组和模型组大鼠的体质量均随着时间推移持续增长，其中模型组雌雄鼠体质量略轻于阴性对照组，但仅雄鼠注射后第2天与阴性对照组之间比较差异有统计学意义（P0.05，图1）。2.2用药后各组大鼠的血清生化和血常规指标变化腹腔注射碘酸钠后第3、7、21、28、41和62天，模型组雌雄鼠的肝胆功能指标 AST、ALT、TBIL、GGT，脂质代谢指标 CHOL、TG，心功能指标 CK、CKMB、LDH，以及肾功能指标BUN、CREA，均随着时间推移出现不同程度的波动，但仅第28天雄鼠的BUN与阴性对照组之间比较差异有统计学意义（P注：模型组一次性腹腔注射质量浓度为6 mg/mL碘酸钠溶液10 mL/kg；阴性对照组以相同容积和频次腹腔注射生理盐水注射液。各时间点两组大鼠数量分别为单性别16、16、14、12、12、12、12、10、10、4、4、2、2、2只；与阴性对照组间比较，P0.05。Note：The model group was intraperitoneally injected with 6 mg/mL sodium iodate solution once at the dose of 10 mL/kg；the negative control group was intraperitoneally injected with normal saline at the same volume and frequency.The number of rats in the two groups at each time point was 16，16，14，12，12，12，12，10，10，4，4，2，2，2 respectively for single sex.Compared with the negative control group，P0.05.图1 碘酸钠注射后雌雄鼠体质量变化曲线图Figure 1 Body weight curve of male and female rats after sodium iodate injection127实验动物与比较医学 Laboratory Animal and Comparative MedicineApr.2023,43(2)0.05，图2）。腹腔注射碘酸钠后第28天，模型组雌鼠的 RDW 以及雄鼠的 Retic#和 Retic%均高于阴性对照组，组间比较差异有统计学意义（P0.01）；与阴性对照组相比，第 28 天雌雄鼠的 WBC、RBC、HGB、HCT，以及第62天雄鼠的WBC、HCT均呈降低趋势，但组间差异无统计学意义（P0.05，图3）。2.3用药后各组大鼠的脏器质量及系数腹腔注射碘酸钠后第3、7、21、28、41和62天，模型组雌雄大鼠心、肝、脾、肾质量和系数均为无规律小幅度波动，组间差异无统计学意义（P0.05）。注射后第3、21、28、41和62天，模型组雄鼠的胸腺质量和系数均小于阴性对照组，注射后第7天模型组雄鼠的胸腺质量和系数大于阴性对照组，但组间差异均无统计学意义（P0.05，图4）。2.4用药后各组大鼠的各脏器组织病理学变化经肉眼观察和HE染色后的组织病理学检查发现，各组大鼠的胸腺、心、肝、脾、肾等脏器及其组织均未见异常。眼HE染色结果显示，阴性对照组大鼠的视网膜色素上皮层、视杆视锥层、外核层、内核层、神经节细胞层等形态结构完整且边界清晰，各层细胞排列整齐且密度均匀。模型组大鼠在腹腔注射碘酸钠后第3天视网膜呈波浪样改变，局部脱落、色素上皮损伤；随时间延长，以上病变程度加重，第7天视网膜各层结构紊乱，分界不清，心电图呈异常改变，色素上皮层正常结构消失；第21天开始，视细胞内外节可见明显注：模型组一次性腹腔注射质量浓度为6 mg/mL碘酸钠溶液10 mL/kg；阴性对照组以相同容积和频次腹腔注射生理盐水注射液。各时间点两组大鼠数量分别为单性别2、2、2、6、2、2只；与阴性对照组比较，P0.05。Note：The model group was intraperitoneally injected with 6 mg/mL sodium iodate solution once at the dose of 10 mL/kg；the negative control group was intraperitoneally injected with normal saline at the same volume and frequency.The number of rats in the two groups at each time point was 2，2，2，6，2，2 respectively for single sex.Compared with the negative control group，P0.05.图2 碘酸钠注射后雌雄鼠血清生化指标变化Figure 2 Changes of serum biochemical indexes of male and female rats after sodium iodate injection128实验动物与比较医学 Laboratory Animal and Comparative MedicineApr.2023,43(2)损伤，视杆视锥层细胞肿胀，局灶坏死缺失，外核层局灶性变薄、萎缩，节细胞层细胞数量减少，病变持续至第61天仍未恢复。视网膜病变的发生率在碘酸钠注射后第21、28天达到峰值，至第42天略有下降，其中第28天与阴性对照组相比有统计学意义（P 0.01，图5）。同样，视网膜病变评分在碘酸钠注射后第28天达到最高，与阴性对照组相比有统计学意义（P0.01，图5），之后评分逐渐降低。眼TUNEL染色结果显示，阴性对照组腹腔注射生理盐水后第28天时个别大鼠的视网膜偶见凋亡细胞。模型组腹腔注射碘酸钠后第3天时视网膜外核层开始出现凋亡细胞，第7天达到峰值，至第62天仍可见凋亡细胞（图6）。图像分析结果与镜下观察一致，阴性对照组凋亡细胞数量远少于同时期模型组，其中注射后第28天的组间差异有统计学意义（P0.01）。3讨论碘酸钠是一种无机氧化剂，对视网膜色素上皮（retinal pigment epithelium，RPE）有较强的选择性3，可在体内外诱导多种属动物（如小鼠4、大鼠5-10、兔11、犬12）和人13视网膜色素变性，其机制主要为引发视网膜细胞氧化应激反应14，阻碍视网膜色素上皮糖代谢的酶反应，造成RPE变性15，直接损伤神经视网膜16。研究普遍认为，碘酸钠对除眼以外的注：模型组一次性腹腔注射质量浓度为6 mg/mL碘酸钠溶液10 mL/kg；阴性对照组以相同容积和频次腹腔注射生理盐水注射液。各时间点两组大鼠数量分别为单性别2、2、2、6、2、2只；与阴性对照组间比较，P0.01。Note：The model group was intraperitoneally injected with 6 mg/mL sodium iodate solution once at the dose of 10 mL/kg；the negative control group was intraperitoneally injected with normal saline at the same volume and frequency.The number of rats in the two groups at each time point was 2，2，2，6，2，2 respectively for single sex.Compared with the negative control group，P0.01.图3 碘酸钠注射后雌雄鼠血常规指标变化Figure 3 Changes of blood routine indexes of male and female rats after sodium iodate injection129实验动物与比较医学 Laboratory Animal and Comparative MedicineApr.2023,43(2)全身其他组织和器官没有明显毒性作用17。但碘酸盐毒理研究发现，大鼠或家兔经口或腹腔给予生理剂量的碘酸盐后，肝、肾、心、大脑、肌肉、小肠、胃、睾丸、颌下腺、皮肤、毛发和甲状腺组织中均有分布；小鼠经口摄入碘酸盐的半数致死量（median lethal dose，LD50）范围为5001 100 mg/kg，经胃肠外途径给药的LD50范围为100120 mg/kg；家兔碘酸盐最低致死剂量为75 mg/kg18。以上结果说明碘酸盐具有全身暴露风险和一定的毒性。此外，碘酸钠的氧化作用可能诱发机体的氧化应激反应，而氧化应激生成的过氧化物和自由基会导致全身毒性作用，与多种疾病的发生发展密切相关，涉及的脏器和系统非常广泛，包括但不限于脑19、肝20、肾21、肺22、骨23、口腔24，心血管系统25-26、神经系统27、生殖系统28、脂质和糖代谢29等。因此，研究碘酸钠是否会对动物全身组织器官和系统产生影响是有价值和意义的。基于此，本研究根据相关文献30-31和预实验结果，在保证动物RPE出现典型病变的基础上，全面评价单次腹腔注射60 mg/kg碘酸钠对SD大鼠可能产生的影响。在本实验条件下，腹腔注射碘酸钠对大鼠一般体征、体质量和生理指标均可产生一定影响且有性别差异。（1）注射当天88%的大鼠出现稀便，以雄鼠数量居多，且恢复时间较雌鼠略长；观察期间雄鼠体质量注：模型组一次性腹腔注射质量浓度为6 mg/mL碘酸钠溶液10 mL/kg；阴性对照组以相同容积和频次腹腔注射生理盐水注射液。各时间点两组大鼠数量分别为单性别2、2、2、6、2、2只。Note：The model group was intraperitoneally injected with 6 mg/mL sodium iodate solution once at the dose of 10 mL/kg；the negative control group was intraperitoneally injected with normal saline at the same volume and frequency.The number of rats in the two groups at each time point was 2，2，2，6，2，2 respectively for single sex.图4 碘酸钠注射后雌雄鼠各脏器质量及系数变化图Figure 4 Changes of organ weight and coefficient of male and female rats after sodium iodate injection130实验动物与比较医学 Laboratory Animal and Comparative MedicineApr.2023,43(2)增长缓慢较雌鼠明显。在以大鼠作为实验系统和碘酸钠致RP的同类研究中3-12均未见碘酸钠使动物粪便性状一过性改变或产生胃肠系统功能紊乱相关症状的报告，但在本研究中腹腔注射生理盐水注射液的阴性对照组大鼠未见类似症状，基本排除了注射方式导致动物出现稀便的可能性；另外，据文献报告碘酸盐腹腔注射后在肠内有分布18，因此推测该症状的出现与碘酸钠相关。（2）雌雄鼠除心脏功能指标（CK、CK-MB）均于注射后第7天开始升高外，雌鼠的其他指标波动均早于雄鼠（雌鼠 TBIL、GGT、AST、ALT 和BUN、CREA注射后第7天开始升高，雄鼠上述指标的升高时间分别为第 21 天和第 28 天；雌鼠和雄鼠注：模型组一次性腹腔注射质量浓度为6 mg/mL碘酸钠溶液10 mL/kg；阴性对照组以相同容积和频次腹腔注射生理盐水注射液。各时间点两组大鼠数量分别为单性别2、2、2、6、2、2只。a示模型组注射后第3天视网膜呈波浪样改变；b示模型组注射后第7天视网膜呈异常心电图样改变，各层排列紊乱；图cf分别示模型组注射后第21、28、41、62天视网膜呈异常心电图样改变，各层排列紊乱、外核层局灶变薄；g示阴性对照组视网膜正常；h-i为两组大鼠的视网膜病变发生率及HE评分比较（病变1为视网膜呈波浪样改变，病变2为视网膜呈心电图样改变）与阴性对照组比较，P0.01。图中比例尺大小均为50 m。Note：The model group was intraperitoneally injected with 6 mg/mL sodium iodate solution once at the dose of 10 mL/kg；the negative control group was intraperitoneally injected with normal saline at the same volume and frequency.The number of rats in the two groups at each time point was 2，2，2，6，2，2 respectively for single sex.a shows the retina of the model g