化验设备操作规程文件版模板.doc

生物技术管理性文件文件编号：JC/C001-标题：化验设备操作规程生效日期：-11-08页 号：第1页 共 68 页目标: 建立仪器操作规程，方便检测工作进行，确保立即正确对样品进行分析，对仪器合理操作能够有效延长一起使用寿命，确保生产连续进行。目录：1、 PCR仪22、 超净工作台.33、 尘埃粒子计数器.44、 氮吹仪.145、 分光光度计.146、 高效液相色谱仪.157、 高压灭菌锅.178、 恒温干燥箱.229、 恒温水浴.2510、 离心机2511、 培养箱2612、 天平.2713、 细胞粉碎机2914、 显微镜3315、 血小板聚集仪3416、 移液器4517、 马弗炉4518、 恒温振荡器4719、 摇床4820、 微波萃取、消解仪4821、 酶标仪4822、 层析试验冷柜5123、 三用紫外分析仪5224、 PH计.5225、 离子计5426、 电导率仪5427、 水分测定仪5428、 超声波清洗器5529、 电泳槽5930、 低温冷却循环泵6231、 凝胶成像仪6332、 真空泵6433、 液态罐6534、 低温恒温反应浴槽6635、 数字旋光仪671PCR仪PCR仪使用说明：1、开机：打开开关，视窗上显示“SELF TEST”，显示10秒中后，显示RUN-ENTER菜单：“-RUN ENTER PROGRAMPROGRAM ”准备实施程序。2、放入样本管，关紧盖子。3、假如要运行已经编好程序，则直接按Proceed，用箭头键选择已储存程序，按Proceed，则屏幕显示：“-ENABLE DISABLEHEATED LID” 按Proceed选择ENABLE，则开始实施程序。4、假如要输入新程序，则在RUN-ENTER菜单上用箭头键选择ENTER PROGRAM，按Proceed，屏幕显示“ -NEW LIST EDIT DELET”，按Proceed，1）选择NEW，命名新程序，最多8个字母，输入后按Proceed确定。2）输入程序步骤：名字输入后，显示“ STEP1_TEMP GOTO OPITONEND”，按Proceed则能够输入温度（0100），按Proceed确定后，则能够输入孵育时间，用Select键移动光标，输入数字，完成后按Proceed确定，跳到下一步，输入方法同上。3）选择GOTO，输入循环步骤时链接到第几步（循环数最多可达9999次）（为实际循环数-1)。4) 选择option，显示“STEP EXTENDI NCREMENT SLOPE ”再选择increment，按Proceed确定，输入初始温度，确定后输入时间，按Proceed确定，然后输入每个循环增加或降低温度，增加用正值，降低用负值（-0.16），按Proceed确定。选择extend，按Proceed确定，输入每个循环增加或降低时间（-6060秒），按Proceed确定。选择slop（指温度上升或下降速率），输入温度改变值（-0.11.5）按Proceed确定，然后输入加热或致冷速度，按Proceed确定。4）选择End，输入结束步骤。5、输入完成程序后，到RUN-ENTER菜单，选择新程序，开始运行。6、其它：用pause能够暂停一个运行程序，再按一次继续程序。用stop或Cancel可停止运行程序。编辑程序：1、能够用Cancel键删除输错值，输入新值后按Proceed确定。2、对于未输完程序，要先输入END，按Proceed将程序储存后才能删除。3、删除已经储存程序：从RUN-ENTER菜单中选择RUNPROGRAM，按Proceed，显示主菜单，选择DELET，用Select选择删除。4、查看程序步骤：在主菜单上选择LIST，按Proceed，用Select将选择名称，再按Proceed，显示程序第一步，用Select键向前、向后翻页查看，此时不能改变程序值。编辑已经有程序：1、从RUN-ENTER菜单中选择RUNPROGRAM，按Proceed，显示主菜单，选择EDIT，按Proceed确定，用Select键选择要编辑程序，按Proceed显示程序第一步。2、用Select键将光标移到要改变温度或循环值上，键入新值，按Proceed确定，按Cancel删除键入值，出现空格，键入新值后确定。注：一旦值被改变或删除，原来值不能恢复，必需重新键入。3、编辑时间值：必需重新键入小时、分钟、秒，按Proceed。怎样设置一个PCR体系：通常分为8步：1、预变性：可用9495，210min，通常见5min。2、变性：通常见94，30s2min，通常45s1min。3、退火：温度自定，30s2min。4、延伸：7075，通常72，对于2kb，1min；2kb，每增加1kb加1min。5、循环数：通常2535个循环。6、最终延伸：72，515min。7、保留：10，时间设为0。8、END。2超净工作台超净工作台使用方法及注意事项使用方法使用工作台时，应提前50分钟开机，同时开启紫外杀菌灯，处理操作区内表面积累微生物，30分钟后关闭杀菌灯（此时日光灯即开启），开启风机。对新安装或长久未使用工作台，使用前必需对工作台和周围环镜先用超静真空吸尘器或用不产生纤维工具进行清洁工作，再采取药品灭菌法或紫外线灭菌法进行灭菌处理。操作区内不许可存放无须要物品，保持工作区洁净气流流型不受干扰。操作区内尽可能避免作用显著扰乱气流流型动作。操作区使用温度不能够超出60。超净工作台依据环境洁净程度，可定时（通常23个月）将粗滤布（涤纶无纺布）拆下清洗或给更换。定时（通常为一周）对环境周围进行灭菌工作，同时常常见纱布沾酒精或丙酮等有机溶剂将紫外线杀菌灯表面擦洁净，保持表面清洁，不然会影响杀菌效果。当加大风机电压已不能使风速达成0.32m/s时必需更换高效空气过滤器。更换过滤器时，可打开顶盖，更换时应注意过滤器上箭头标志，箭头指向即为层流气流向。更换高效过滤器后，应用尘埃粒子计数器四面围框密封是否良好，调整风机电压，使操作区平均风速保持在0.32-0.48m/s范围内，再用尘埃粒子计数器检验洁净度。超净工作台注意事项超净工作台接通超净工作台电源旋开风机开关，使风机开始正常运转，这时应检验高效过滤器出风面是否有风送出。检验照明及紫外设备能否正常运行，如不能正常运行则通知工程部检修。工作前必需对工作台周围环境及空气进行超净处理，认真进行清洁工作，并采取紫外线灭菌法进行灭菌处理。净化工作区内严禁存放无须要物品，以保持洁净气流流动不受干扰。3尘埃粒子计数器一、用途 Y09-301型激光尘埃粒子计数器（以下简称仪器）用于测量洁净环境中单位体积空气内尘埃粒子大小及数目，可直接检测洁净度等级为三十万级至十级洁净环境。本仪器采取半导体激光光源，液晶屏显示，其体积小、重量轻、检测精度高、功效操作简单明了，电脑控制，可贮存、打印采样结果，测试洁净环境十分便利。广泛应用于电子、光学、化学、食品、化妆品、医药卫生、生物制品、航空航天等部门。二、关键技术参数外形尺寸 280236126mm3（宽深高）质量 4.5kg最大功耗 10 W供电电源 直流电源16.8V粒径通道 0.3、0.5、1、3、5、10（m）采样流量 2.83L/min使用环境条件 温度：1030 湿度：20%75% 大气压力：86kPa106kPa许可最大采样浓度35000颗/L（尘埃颗粒粒径小于0.5m），采样空气中不得含有酸碱等腐蚀性气体9 自净时间 20min三、工作原理本仪器采取光散射原理，当空气中悬浮粒子经过光敏区时，散射出和其粒径成一定百分比光通量，经光电转换、放大及处理后得到被采集粒子当量直径和数量。四功效前面板含有液晶屏及九个功效键：“复位”、“清零”、“采样”、“打印”、“退出”、“增”、“减”、“确定”、“循环”。液晶屏显示内容由电脑控制，其程序以下：1：开机画面开机画面见图 （一）Y09-301型激 光 尘 埃 粒 子 计 数 器图（一）2：设置画面按“确定”键进入设置画面 数据测量日期：09月06日时间：08时05分周期T：01分 报警级：0置信度状态：0 测点数：0点测量位置：000清除数据：0数据查询设置画面见图（二） 图（二）每按一次“减”键，光标依次下移，每按一次“增”键，光标依次上移，并伴有“吡”声。当光标移至日期，按“确定”键进入调整日期界面，09月06日，表示调整位，按“增”键依次增加（0-9），每按一次 “减”键，光标依次向后移并循环。按“确定”键保留目前设置并退出。其它功效设置同上操作相同。注：周期T：代表采样周期，可在10分钟之间选择。报警级为0-3，0代表无报警功效，1代表百级报警，2代表千级报警，3代表万级报警。环境超出设置等级,采样周期结束时发出“嘟”报警声。置信度状态：“0”表示置信度状态关，置信度状态：“1”表示置信度状态开。测点数为要测量地点数，可在之间设定（计算时用）。测量位置：000-999任意可调，000表示不关心位置，其它可自己设定。清除数据：为清除内存数据，不清除内存，若要清除内存则将调到后按“确定”键数字变为表示内存全部清除（轻易不可置）。参数设置完成，须将“”光标移至数据测量，按确定键进入测量界面。3：查询画面“” 光标移至数据查询，按确定键进入查询界面图（三）查询 日期：09月06日开始查询图（三）每按一次“减”键，光标依次下移，每按一次“增”键，光标依次上移，并伴有“吡”声。当光标移至日期，按确定键进入调整日期界面，09月06日，表示调整位，按增键依次增加（0-9），每按一次减键，光标依次向后移并循环。按确定键退出目前设置并保留目前设置。光标移至开始查询，按确定键开始查询，过2-3秒后屏幕显示要查询数据。如查找无数据，则显示没有数据。按退出键，返回设置画面。光标移至数据测量，按确定键进入测量界面。4：测量界面测量画面见图（四）UCL：OFF F：0.00L/min0.3m 5 0.5m 3 1.0m 0 3.0m 0 5.0m 010.0m 0L:000 T:060 05/09/05 10:34W:OFF P:OFF S:OFF R:0086/1000图（四）屏左上角UCL：OFF表示置信度计算功效关闭。屏右上角F：0.00L/min表示采样泵关闭。0.3、0.5、1、3、5、10（m）表示采样粒子颗粒粒径，后面数值表示颗粒数。L:000 表示地址号为0，T:060表示采样周期为60秒，05/09/05表示最终一次采样保留日期，10:34表示最终一次采样保留时间。W:OFF表示观察功效关闭。 P:OFF表示打印功效关闭，按“打印”键打开（ON）。S:OFF表示存放功效关闭，按“确定”键打开（ON）。R:0086/1000表示最多存放1000条数据中存放了86条数据。在不采样情况下，按“循环”键，屏幕显示粒子数在每个周期内粒子数（颗/采样周期采样量）见图4及浓度（颗/立方米）见图（五）之间切换。按“增”或“减”键可观看存放测量数据。按“采样”键后，屏幕中F：0.00L/min变为F：2.83L/min（采样流量）。T:060变为T:001/060（001-060递增改变），此时按“循环”键能打开W:ON，表示观察功效开启，屏上实时显示目前周期内采样粒子数目标改变见图六， “循环”键功效在三种显示方法之间切换，即图（四）周期内总粒子数，图（五）粒子浓度及图六实时显示。UCL：OFF F：2.83L/min0.3m 1765/m3 0.5m 1059/m3 1.0m 0/m3 3.0m 0/m3 5.0m 0/m310.0m 0/m3L:000 T:060 05/09/05 10:34W:OFF P:OFF S:OFF R:0086/1000图（五）图（五）为仪器所显示粒子浓度。UCL：OFF F：2.83L/min0.3m 10 0.5m 3 1.0m 0 3.0m 0 5.0m 010.0m 0L:000 T:005/060 06/03/20 10:34W:OFF P:OFF S:OFF R:0086/1000 图（六）注意：进入数据测量后第一状态为上次关机时最终一次保留数据。4：置信度（测点数）使用在图（）下，将置信度状态设位，测点数之间任定（依据房间面积及洁净度等级），测量位置自己编号，现举例说明，一号房间测点：首先：调整参数为以下状态， 数据测量日期：09月06日时间：08时05分周期T：1分 报警级：0置信度状态：1 测点数：3点测量位置：101清除数据：0数据查询第二：按“确定”进入UCL： F：0.00L/min 0.5m 0 5.0m 0L:101 T:060 05/09/05 10:34W:ON P:OFF S:OFF R:0086/1000第三：按“采样”键打开采样泵，进行第一点测量，此时画面为UCL： F：2.83L/min 0.5m 3 5.0m 0L:101 T:005/060 05/09/05 10:34W:ON P:OFF S:OFF R:0086/1000若采样数据理想，则按“确定”键保留（屏下方：），此时屏上方（）伴随采样次数而变，通常情况（N=4）即可按“采样”键停止采样。值必需大于1，即最少采样一个周期，测量才有效。UCL： 3 F：2.83L/min 0.5m 3 5.0m 0L:101 T:009/060 05/09/05 10:34W:ON P:OFF S:ON R:0088/1000 数据测量日期：09月06日时间：08时10分周期T：1分 报警级：0级置信度状态：1 测点数：3点测量位置：102清除数据：0数据查询换另一地点采样，若没关机，直接按“退出”键将图（）设定为 若关机，也必需将图（）设定为上述状态。反复上述第二、第三步骤。 数据测量日期：09月06日时间：08时15分周期T：1分 报警级：0级置信度状态：1 测点数：3点测量位置：103清除数据：0数据查询换第三地点，将图（）设定为反复上述第二、第三步骤。此时三点测量已全部完成，画面显示为测量结果 。： Max:PCM0.5m: 353 5.0m: 70 UCL:PCM 0.5m: 4615.0m 92 CLASS:1000注意：在最终一点采样关闭前，按“打印”键，令P:ON，则结束时打印置信度值。在采样过程中若打开“打印”键打印则是目前周期内粒子数或浓度值(视显示方法)。若不关心测量位置，可不退回参数设置画面，在测量界面直接“采样”打开关闭，即为完成一地址点测量。在置信度采样过程中，若要中止采样重新开始，则退到图2设置画面，将置信度设置状态设为“0”按“确定”键，然后重新将置信度状态置“1”按“确定”键，再进入测量界面即可。5：各功效键介绍“复位”：仪器进入图（）状态。“确定”：仪器进入图（）状态，当在数据测量时，按此键进入图（）状态，当在图（）其它情况下，此键为参数设定开始及结束键。在图（）状态时，此键为采样数据存放开关键，令：或。“退出”：仪器由测量界面退回到参数设置界面。由查询状态退回到参数设置界面。“清零”：重新开始一个周期采样。“采样”：采样泵开或关，画面显示：2.83L/min或0.00L/min.“打印”：打印状态开或关，画面显示P: OFF或ON。当测量数据显示方法为浓度时打印浓度，其它情况下，打印对应周期内粒子数。“循环”：在测量界面下，若采样泵打开，此键实施三种显示状态之间转换，观察状态，W：ON，粒子数不停累加，直至采样周期结束，重新开始新周期。W：OFF，显示上一周期内总采样粒子数。W：OFF，显示上一周期内采样粒子浓度（颗/米3）。若采样泵不打开，此键只能实施两种显示状态间转换，即观察状态关闭。“增”： 在参数设置画面，令上移，另一功效是改变需要修改参数值。在测量界面，“增”键向上翻看存放历史数据。“减” 在参数设置画面，令下移，另一功效是移动下划线至需要修改参数处。在测量界面，“减”键向下翻看存放历史数据。后面板开关：电源开关电源插座：连接电源适配器(220V交流输入，16.8V直流输出)RS232：连接计算机采样口：接采样管自净口：采样口和此连接，仪器处于自净状态。五、操作说明准备操作打开后面板上电源开关，按“确定”键将屏幕调至图（四）测量界面，观看电池符号，若电池电量不足，则将电源适配器插入“电源插座”，给电池充电，同时仪器也可正常操作使用。开机预热10分钟左右。过滤器自净口和采样口相连，按“确定”两次进入测量界面，打开“采样”，使仪器自净清零。操作步骤将采样管接在“采样口”处。在参数设置界面下按 “增”“减”及“确定“键，设定所需工作参数。若数据库清零，将光标移至数据清零处，按“增”令数字由“0”改成“5”然后按“确定”键，数字变成“9”即可。若不修改工作参数，直接按“确定”键进入测量界面。按“确定”键进入测量界面后，按“采样”键，打开泵源进行采样测试，采集数据。若采样结果理想，则按“确定”键，令液晶屏下方“Rec”为ON，存贮采样数据，不然就按“确定”键，令“Rec”为OFF。按“循环”键，转换显示方法。按“增”“减”键，在第一、第三状态可翻动观察以前某周期采样统计。再按“采样”键，则为关。在测试界面时，若需改变工作参数，按“退出”键退回到参数设置状态进行。打印：采样泵开启时，在测量界面浓度显示方法下，按“打印”键，令“Prt”为ON，即每个周期结束时打印数据为测量浓度（颗/米3），不需打印时再按“打印”键令“Prt”OFF。在其它显示方法下则每七天期结束时打印对应周期内粒子数。置信度设定状态下，最终打印置信度值及洁净等级。采样泵关闭时，按“增”“减”键调至需打印起始页，按“打印”键即从这一页开始打印，直至不需打印时再按“打印”键,打印结束。不受屏幕下方“Prt”ON或OFF影响。查询数据打印：在非置信度情况下，将查询数据调到需打印地方，按“打印”键即开始打印，不需打印时再按“打印”键停止打印，打印内容为对应周期内粒子数。在置信度情况下，将查询数据调到需打印地方，按“打印”键即开始打印，不需打印时再按“打印”键停止打印，打印内容为置信度结果。为确保仪器测量精度，关机前反复准备操作第三步，用短管将采样口和进气口相连，打开“采样”，使仪器自净23min，计数趋近于0，然后关机。注意：为延长泵寿命，不采样时随时关泵。假如仪器受干扰功效不正常，请按“复位”键。六、 打印机注意事项(1)安装纸卷：仪器出厂时已安装了大约可打印200组数据纸卷。用户可直接使用。纸卷用完后，可按以下过程进行装纸：向上拨开打印机上盖按扭，将纸卷放入打印机纸兜内，打印面朝上，轻轻拉出部分打印纸，再盖上打印机盖板即可。（注意热敏纸正反面，可用手指划线判定，有黑色线条为打印面）。(2)装好纸后，不可用力拽纸。(3)热敏打印机打印数据，不宜长久保留，如需长久保留，请复制数据。4氮吹仪氮吹仪使用方法氮吹仪使用方法： 氮吹仪安装好后，底盘支撑在恒温水浴内，打开水浴电源，设定水浴温度，水浴开始加热。 提升氮吹仪，将需要蒸发浓缩样品分别安放在样品定位架上，并由托盘托起，其中托盘和定位架高低可依据试验样品试管大小调整。 打开流量计针阀，氮气经流量计和输气管抵达配气盘，配气后送往各样品位上方针阀管。 然后，经过调整针阀管针阀，氮气经针阀管和针头吹向液体样品试管，可经过调整锁紧螺母能够上下滑动针阀管，调整针头高度，以样品表面吹起波纹，样品又不溅起为好。 最终，将氮吹仪放于水浴中，直到蒸发浓缩完成。5分光光度计1调整 （1） 在接通电源前，应对仪器安全性进行检验，电源线接线应牢靠，接地线通地要良好，各个调整旋钮起始位置应该正确，然后再接通电源。（2） 将灵敏度旋钮调至“1”档（放大倍率最小）。调波长调整器至所需波长。（3） 开启电源开关，指示灯亮，选择开关置于“T”，调整透光率100%T旋钮使数字显示100.0左右，预热20min .依据溶液浓度大小，选择液层厚度适宜吸收池。2校正 ！）打开吸收池暗室盖（光门自动关闭），调整0% T旋钮，使数字显示为“00.0”，盖上吸收池盖，将参比溶液置于光路，使光电管受光，调整透光率100% T 旋钮，使数学显示为“100.0”。（2）假如显示不到“100”，则可合适增加电流放大器灵敏度档数，但应尽可能使用低级数，这么仪器将有更高稳定性。当改变灵敏度 后必需重新校正“0”和“100”。（3）按（1）连续几次调整“00.0”和“100.0”后，如将选择开关置于“A”，调整吸光度调零旋钮，使数字显示为“.000”，即可进行下面吸光度A测量；如将选择开关置于“C”，将标准溶液推入光路，调整浓度旋钮，使得数字显示值为已知标准溶液浓度数值，即可进行下面浓度c测量。3测定 （） 吸光度测量。将要测试样溶液推入光路，显示值即为待测样品吸光度值。（） 浓度c测量。将要测c试样溶液推入光路，即可读出待测样品浓度值c。4结束 测量完成，关闭电源，将各调整旋钮恢复至初始位置。取出吸收池洗净，晾干，存于专用盒内。注意事项：（） 使用前，使用者应该首先了解本仪器结构和原理，和各个旋钮之功效。（） 仪器接地要良好，不然显示数字不稳定。（） 假如大幅度改变测试波长时，在调整“00.0”和“100”后稍等片刻（因光能量改变急剧，光电管受光后响应缓慢，需一段光响应平衡时间），当稳定后，重新调整“00.0”和“100”即可工作。（） 仪器左侧下角有一只干燥剂筒，应保持其干燥，发觉干燥剂变色应立即更新或烘干后再用。（） 当仪器停止工作时，关掉电源，电源开关需同时切断，并罩好仪器6高效液相色谱仪高效液相色谱法(HPLC)是现在应用广泛分离、分析、纯化有机化合物(包含能经过化学反应转变为有机化合物无机物)有效方法之一。 在已知有机化合物中，约有80%能用高效液相色谱法分离、分析，而且因为此法条件温和，不破坏样品，所以尤其适合高沸点、难气化挥发、热稳定性差有机化合物和生命物质。HPLC系统通常由输液泵、进样器、色谱柱、检测器、数据统计及处理装置等组成。其中输液泵、色谱柱、检测器是关键部位。有仪器还有梯度洗脱装置、在线脱气机、自动进样器、和柱或保护住、柱温控制器等，现代HPLC仪还有微机控制系统，进行自动化仪器控制和数据处理。制备型HPLC仪还备有自动馏分搜集装置。现在常见HPLC仪生产厂家国外有Waters 企业、Agilent 企业(原HP企业)、岛津企业等，中国有上海伍丰科学仪器，上海禾工科学仪器，大连依利特企业、北京创新通恒、北京温分等。一、输液泵1.泵结构和性能输液泵是HPLC系统中最关键部件之一。泵性能好坏直接影响到整个质量和分析结果可靠性。输液泵应含有以下性能:流量稳定，其RSD应小于0.5%，这关系到定性定量正确性;流量范围宽，分析型应在0.110ml/min范围内连续调，制备型应能达成100ml/min;输出压力高，通常应能达成150300KG/CM2:液缸容积小;密封性能好，耐腐蚀。泵种类很多，按输液性质可分为恒压泵和恒流泵。恒流泵按结构又可分为螺旋注射泵、柱塞往复泵和隔往复泵。恒压泵受柱阴影响，流量不稳定;螺旋泵缸体太大，这两种泵己被淘汰现在应用最多是柱塞往复泵。柱塞往复泵液缸容积小，可至0.1ml，所以易于清洗和更换流动相，尤其适合于再循环和梯度洗脱;改变电机转速能方便地调整流量，流量不受柱压影响;泵压可达400KG/CM2。ADW关键缺点是输出脉冲性较大，现多彩采取双泵系统来克服。双泵按连接方法可分为并联式和串联式，通常说来并联泵流量重现性很好(RSD为0.1%左右，串联泵为0.20.3%)，但出现故障机会较多(因多了单向阀)，价格也较贵。二、进样器通常HPLC分析常见六通进样阀(以美国RHEODYNE企业7725和7725I型最常见)，其关键部件由圆形密封垫子(转子)和固定底座(定子)组成。耐高压(3540MPA)，进样量正确，反复性好(0.5%)，操作方便。六通阀进样方法有部分装液法和完全装液法两种。用部分装液法进样时，进样量应小于定量环体积50%(最多75%)，并要求每次进样体积正确、相同。此法进样正确度和反复性决定于注器取样熟练程度，而且易产生由进样引发峰展宽。用完全装液法进样时，进样量应大于定量环体积510倍9最少3倍，这么才能完全置换定量环内和流动相，消除管壁效应，确保进样正确度及反复性。三、色谱柱色谱是一个分离分析手段，分离是关键，所以担负分离作用色谱柱是色谱系统心脏。对色谱柱要求是柱效高、选择性好，分析速度快等。市售用于HPLC多种微粒填料好多孔硅胶和以硅胶为基质键合相、氧化铝、有机聚合物微球(包含离子交换树脂)、多孔碳等，其粒度通常为3，5，7，10UM等，柱效理论值可达516万/米。对于通常分析只需5000塔板数柱效;对于同系物分析，只要500即可;对于较难分离物质对则可采取高达2万柱子，所以通常1030CM左右柱长就能满足复杂混合物分析需要。柱效受柱内外原因影响，为使色谱柱达成最好效率，除柱外死体积要小外，不要有合理柱结构(尽可能降低填充床以外死体积)及装填技术。即使最好装填技术，在柱中心部位和沿管壁部位填充情况总是不一样，靠近管壁部位比较疏松，易产生沟流，流速较快，影响冲洗剂流形，使谱带加宽，这就是管壁效应。这种管壁区大约是从管壁向内算起30倍料径厚度。在通常液相色谱系统中，柱外效应对柱效影响远远大于管壁效应。四、检测器HPLC检测器分为两类:通用型检测器和专用型检测器。1.通用型检测器可连续测量色谱柱流出物全部特征改变，通常采取差分测量法，这类检测器包含示差折光检测器、介电常数检测器、电导检测器等，通用检测器适用范围广，但因为对流动相有响应，所以易受温度改变、流动相和组分改变影响，噪声和漂移全部比较大，灵敏度较低，不能用梯度洗脱。2.专用型检测器用以测量被分离样品组分某种特征改变。这类检测器对样品中组分某种物理或化学性质敏感，而这一性质是流动相所不含有，或最少在操作条件下不显示。这类检测器包含紫外检测器、荧光检测器、放射性检测器等。试验内容和原理:贮备器中流动相被高压泵打入系统，样品溶液经进样器进入流动相，被流动相载入色谱柱(固定相)中;因为样品溶液中各组分在两相中含有不一样分配系数，在两相中作相对运动时，经过反复数次吸附-解吸分配过程，各组分在移动速度上产生较大差异，被分配成单个祖坟依次从柱内流出，经过哦检测器时，样品浓度被转换成电信号传送到统计仪，数据以图谱形式打印出来。在适宜条件下，高效液相色谱可分离溶液中不一样组分，样品进高效液相色谱仪，经反相C18液相色谱分离后，以色谱峰保留时间定性，利用色谱峰面积在一定范围内和浓度成线性关系进行定量。本试验采取内标法，用-胡萝卜素标准品分析未知浓度类胡萝卜素产物相关含量。试验步骤:1、样品和标准品溶解和过滤:用丙酮作溶剂，溶解-胡萝卜素标准品和类胡萝卜素样品。用滤膜(0.45um)过滤，备用。2、开机，依次经过各分离单元、检测器、计算机电源。3、流动相脱气，确定全部溶剂管路全部充满溶剂。4、开启溶剂管理系统，冲洗自动进样器和进样针，装入样品和转盘，编辑分析方法及实施样品分析表。5、样品测定:色谱条件，色谱柱(C18，4.6mm*250mm，5um);流动相，甲酸;乙腈;异丙醇=5:4:1(v/v);流速 1ml/min;检测波长，480nm。单位内标法定量:取混合使用液20ul注入高效液相色谱仪进行分离。统计各个峰峰面积。按下式计算相对含量。q样品=(q标准品*A样品)/A标准品6、关机，使用完成后，按要求用合适溶剂冲洗色谱柱、系统管路、自动进样器、进样针和柱塞杆密封垫，关闭电源开关。数据采集完成后，关闭紫外检测器电源开关。处理数据后，关闭计算机电源开关，并做使用登记。7高压灭菌锅高压灭菌器使用方法高压灭菌器使用方法以博迅YXQ-LS-50SII为例一、适用范围本灭菌器是利用加压饱和蒸汽对医疗器械、敷料、器皿、药液等进行灭菌设备，适适用于医疗卫生单位使用。二、结构特点外形为方形立式结构。外壳（除后封板处）、灭菌器外桶、灭菌网篮选择不锈钢材料制成。装有安全阀，桶内压力达成0.23Mpa时，安全阀能自动起跳，释放过高压力，性能可靠。压力表含有压力、温度对应指示，观察清楚。 装相关门连锁装置，确保安全使用。本容器含有自动保护功效，当容器内缺水干烧时，将自动切断加热器电路，并停止灭菌器工作，有效保护设备使用，同时蜂鸣器响，提醒用户立即补充水量。温度、时间采取单片机技术新型智能数显调整仪。用户可依据不一样要求，经过操作控制面板触摸键对温度立即间进行设定、调整达成灭菌目标。三、技术参数a.灭菌器容积：50L、75L； b. 控温范围：109135；c.电源电压：交流220V10%，50HZ1%；d.加热器功率：3200VA；3500VA；e.工作最高压力：0.212MPa；温度：135；f.环境温度：5-40；相对湿度80%RH。四、安装要求使用前具体阅读本说明书，并严格按说明书要求操作。警告语“汽未放尽，不得开启”：在灭菌器灭菌结束后，当压力表未恢复零位前，不得开启容器盖，不然易造成高温蒸汽灼伤。本设备为固定安装设备，为确保安全使用，用户必需在电源电路中安装熔断器或过流保护器。熔断器容量为25安培。用户按产品铭牌和使用说明书要求参数将设备按电路接线图接至要求电源上，同时设备应可靠接地。五、使用方法A堆放： 1、旋转手轮（1）拉开外桶盖（3）取出灭菌网篮（14）取出挡水板（13）。 2、关紧放水阀，在外桶（11）内加入清水，水位至灭菌桶搁脚（12）处（挡水板下）。连续使用