LC-20AT高效液相色谱仪验证方案.doc

LC-20AT高效液相色谱仪验 证 方 案规格型号LC-20AT设备编号023使用岗位中药制剂室药检岗位制造厂商岛津企业管理(中国)有限公司目录1. 参与验证的相关部门及其职责21.1验证小组成员及职责21.2验证方案起草21.3验证方案批准22. 验证目的23. 验证依据判断标准：33.1验证依据33.2验证评判标准34.验证内容34.1安装环境的确认34.2运行确认44.3性能确认54.4 柱温箱温度设定值误差TS和控温稳定性TC的检定64.5 紫外检测器84.6整机性能95.验证结果及分析评价106.再验证要求106.1再验证周期106.2 再验证内容10本公司所用的LC-20AT高效液相色谱仪是由工作站软件（N2000）、二元泵(LC-20AT)、手动进样器（20微升定量环）、控制器(CBM-20A)、柱温箱(IN-150)、紫外检测器（SPD-20AT）以及相关管路等组成。主要用于本公司在药物含量检测。1. 参与验证的相关部门及其职责1.1验证小组成员及职责部门验证人员职务验证分工药检科温铭刚组长负责起草验证方案审核、组织协调验证王凯化验员负责撰写LC-20AT型高效液相色谱仪及验证报告刘丹妮化验员保证设备正常运转1.2验证方案起草起草部门签名日期药检科 年 月 日1.3验证方案批准批 准 人签 名日 期药剂科主任 年 月 日2. 验证目的确认LC-20AT高效液相色谱仪的运行环境、性能等各项指标符合器所设计的性能指标。确保使用该仪器的所检测数据真实可靠，为日常检验提供准确的检测结果。3. 验证依据判断标准：3.1验证依据3.1.1药品GMP指南2010年版3.1.2LC-20AT型高效液相色谱仪标准操作规程3.1.3LC-20AT型高效液相色谱仪安装使用说明3.1.4中国药典2010年版二部附录3.2验证评判标准3.2.1安装环境确认判断标准确认安装符合LC-20AT型高效液相色谱仪安装使用说明说明书要求。3.2.2运行确认判断标准安装确认认可后，在不使用试样的条件下，确认该仪器运行正常。3.2.3性能确认判断标准使用样品检测符合中国药典2010年版二部附录要求和LC-20AT型高效液相色谱仪性能指标。4.验证内容4.1安装环境的确认项 目要 求检查情况位 置应无强震动源,无强电磁干扰源,通风良好，无明火环境洁净度室内应保持清洁,无腐蚀性气体温度1535，全天温度变化较小光线无阳光直射相对湿度4585%电路电源AC220V22V、50HZ1HZ接地应接地单项结论：_ 检测人： 日期： 年 月 日 复核人： 日期： 年 月 日4.2运行确认：严格按LC-210AT高效液相色谱仪标准操作规程进行操作，对仪器进行运行试验，确认其运转性能，并将检查结果填于下表中。操作 步骤合 格 标 准结 果操作前准备1.打开电源，仪器自动完成初始化2.将排液阀旋钮逆时钟旋转180以打开排液阀，按“purge”，泵运行，泵指示灯亮3.清洗完成后，按一次“func”，以改变流速，将流速设定为5ml/min,顺时针方向旋转排液阀旋钮关闭排液阀4.按“pump”，泵运行，泵指示灯亮；约15分钟后，再次按“pump”，泵停止，泵指示灯灭5.以上程序完成后，操作的准备工作完成检查压力值1.将流动相倒入贮液瓶，吸滤头放入贮液瓶中，排液管的一端放入废液瓶中2.打开排液阀，逆时钟方向旋转排液阀旋钮180，按“CE”返回初始屏幕，检查显示压力值是否在-0.3至0.3MPa之间3.检查压力上下限的值是否合适，必要时更改这些值到符合要求4.按“purge”以记录的流速开始送液，观察从排液管末端流出的流动相约10秒钟，流动相应持续流动且没有气泡，按“purge”泵停止，泵指示灯灭单项结论： 检测人： 日期： 年 月 日 复核人： 日期： 年 月 日4.3性能确认4.3.1 泵性能确认1) 流量准确性确认泵流量设定值误差SS、流量稳定性误差SR 流量设定值（ml/min）0.51.02.0测量次数333流动相收集时间（min）1055允许误差SS5%3%2%SR3%2%2%启动仪器，按上表的要求设定流量，压力稳定后，在流动相出口处用事先清洗称重过的容量瓶收集流动相，同时用秒表计时，收集上表规定时间流出的流动相，在分析天平上称重，按式（1）、（2）计算SS和SR，结果记录在下表中；流量（ml/min）次数W1W2W2-W1SSSR0.51231.01232.0123注：Ss=(-Fs)/Fs100% 式（1）SR=(Fmax-Fmin)/ 100% 式（2）式中：Fm Fm=(W2-W1)/(t)，流量实测值，ml/min；W2 容量瓶+流动相的质量，g；W1 容量瓶的质量，g； 试验温度下流动相的密度，g/mL；t 收集流动相的时间，min； 同一组测量的算术平均值，mL/min；FS 流量设定值，mL/min；Fmax 同一组测量中流量最大值，mL/min；Fmin 同一组测量中流量最小值，ml/min。单项结论： 检测人： 日期： 年 月 日 复核人： 日期： 年 月 日2) 压力范围可执行标准：0.2MPa设定值测试方法：在进样阀的出口接一个两通，再将两通的另外一端用OD1.6的盲管封住。启动泵，使压力升至所设定的压力，观察仪器是否自动停泵。次数设置压力（Mpa）停止压力（Mpa）误差（Mpa）110220330单项结论： 检测人： 日期： 年 月 日 复核人： 日期： 年 月 日4.4 柱温箱温度设定值误差TS和控温稳定性TC的检定将温度计（已校验，分度值为0.1）放置在柱温箱内，选择35、40和45进行检定，按仪器说明书操作，通电升温，待温度稳定后，记下温度计读数并开始计时，以后每隔10min记录一次读数，共计7次，求出平均值，平均值与设定值之差为TS，7次读数中最大值与最小值之差为控温稳定性TC，结果记录在下表，柱温箱温度设定值误差TS3，TC1；设定温度（）次数首测温度（）平均温度（）TS（）TC结 果351234567401234567451234567单项结论： 检测人： 日期： 年 月 日 复核人： 日期： 年 月 日4.5 紫外检测器4.5.1 基线噪音和基线漂移选用C18色谱柱，以100%甲醇为流动相，流量为1.0ml/min，二极管阵列检测器的波长设定为254nm，待仪器稳定后，记录基线30min，由检测器的衰减倍数和测得的基线峰峰高对应的记录仪标度，计算基线噪音，用检测器自身的物理量（AU）作单位表示，基线噪音应不超过510-4；衰减倍数测得的基线峰峰高对应的记录仪标度基线噪音结 果注：Nd=KB式中：K：衰减倍数；B：测得的基线峰峰高对应的记录仪标度基线漂移在1h内偏离原点的值为 （AU/h），应不超过510-3AU/h。单项结论： 检测人： 日期： 年 月 日 复核人： 日期： 年 月 日4.5.2最小检测浓度采用依替巴肽分析色谱条件，进样量20l；取适量的依替巴肽，用甲醇稀释制成110-6g/ml的溶液，连续进样6次，记录依替巴肽/甲醇溶液的色谱图，由色谱峰高和基线噪声峰峰高，按下式来计算最小检测浓度（CL），应不超过110-6g/ml，结果记录在下表；依替巴肽的称样量稀释倍数依替巴肽的色谱峰高平均峰高最小检测浓度结 果注：CL=2NdcVH20式中：Nd：基线噪声峰峰高；c：标准溶液浓度；H：标准溶液的色谱峰高；V：进样体积单项结论： 检测人： 日期： 年 月 日 复核人： 日期： 年 月 日4.6整机性能在4.4.2所记录的色谱图中，按下式计算Rsd值，Rsd2.0%，并将结果记录在下表中；品 名称样量项目指标实 验 结 果结 果分离度（R）1.5Rsd2%图谱文件名峰面积（A）平均数（M）Rsd值结 果注：M=(A1+A2+An)/n Rsd= 式中：M：峰面积平均数；A：峰面积；n：测量次数单项结论： 检测人： 日期： 年 月 日 复核人： 日期： 年 月 日5.验证结果及分析评价结论： 检测人： 日期： 年 月 日 复核人： 日期： 年 月 日6.再验证要求6.1再验证周期6.1.1 设备大修后需再校验。6.1.2 由于检修、调整、迁移或其它原因，可能对设备的安装情况、主要技术参数和功能有影响时，应进行再验证。6.1.3 高效液相色谱仪的验证周期为一年，更换部件或对仪器性能有怀疑时，应随时验证。6.2 再验证内容进行设备的再校验，可针对设备性能中部分必须的项目进行再验证，而不一定要进行全面的验证。验证证书名称：LC-20AT高效液相色谱仪编号：023经验证：LC-20AT高效液相色谱仪各项技术指标符合要求，准许投入生产。总负责人：时 间：LC-20AT高效液相色谱仪验 证 方 案规格型号LC-20AT设备编号023使用岗位中药制剂室药检岗位制造厂商岛津企业管理(中国)有限公司目录1. 参与验证的相关部门及其职责21.1验证小组成员及职责21.2验证方案起草21.3验证方案批准22. 验证目的23. 验证依据判断标准：33.1验证依据33.2验证评判标准34.验证内容34.1安装环境的确认34.2运行确认44.3性能确认54.4 柱温箱温度设定值误差TS和控温稳定性TC的检定64.5 紫外检测器84.6整机性能95.验证结果及分析评价106.再验证要求106.1再验证周期106.2 再验证内容10本公司所用的LC-20AT高效液相色谱仪是由工作站软件（N2000）、二元泵(LC-20AT)、手动进样器（20微升定量环）、控制器(CBM-20A)、柱温箱(IN-150)、紫外检测器（SPD-20AT）以及相关管路等组成。主要用于本公司在药物含量检测。1. 参与验证的相关部门及其职责1.1验证小组成员及职责部门验证人员职务验证分工药检科温铭刚组长负责起草验证方案审核、组织协调验证王凯化验员负责撰写LC-20AT型高效液相色谱仪及验证报告刘丹妮化验员保证设备正常运转1.2验证方案起草起草部门签名日期药检科 年 月 日1.3验证方案批准批 准 人签 名日 期药剂科主任 年 月 日2. 验证目的确认LC-20AT高效液相色谱仪的运行环境、性能等各项指标符合器所设计的性能指标。确保使用该仪器的所检测数据真实可靠，为日常检验提供准确的检测结果。3. 验证依据判断标准：3.1验证依据3.1.1药品GMP指南2010年版3.1.2LC-20AT型高效液相色谱仪标准操作规程3.1.3LC-20AT型高效液相色谱仪安装使用说明3.1.4中国药典2010年版二部附录3.2验证评判标准3.2.1安装环境确认判断标准确认安装符合LC-20AT型高效液相色谱仪安装使用说明说明书要求。3.2.2运行确认判断标准安装确认认可后，在不使用试样的条件下，确认该仪器运行正常。3.2.3性能确认判断标准使用样品检测符合中国药典2010年版二部附录要求和LC-20AT型高效液相色谱仪性能指标。4.验证内容4.1安装环境的确认项 目要 求检查情况位 置应无强震动源,无强电磁干扰源,通风良好，无明火环境洁净度室内应保持清洁,无腐蚀性气体温度1535，全天温度变化较小光线无阳光直射相对湿度4585%电路电源AC220V22V、50HZ1HZ接地应接地单项结论：_ 检测人： 日期： 年 月 日 复核人： 日期： 年 月 日4.2运行确认：严格按LC-210AT高效液相色谱仪标准操作规程进行操作，对仪器进行运行试验，确认其运转性能，并将检查结果填于下表中。操作 步骤合 格 标 准结 果操作前准备1.打开电源，仪器自动完成初始化2.将排液阀旋钮逆时钟旋转180以打开排液阀，按“purge”，泵运行，泵指示灯亮3.清洗完成后，按一次“func”，以改变流速，将流速设定为5ml/min,顺时针方向旋转排液阀旋钮关闭排液阀4.按“pump”，泵运行，泵指示灯亮；约15分钟后，再次按“pump”，泵停止，泵指示灯灭5.以上程序完成后，操作的准备工作完成检查压力值1.将流动相倒入贮液瓶，吸滤头放入贮液瓶中，排液管的一端放入废液瓶中2.打开排液阀，逆时钟方向旋转排液阀旋钮180，按“CE”返回初始屏幕，检查显示压力值是否在-0.3至0.3MPa之间3.检查压力上下限的值是否合适，必要时更改这些值到符合要求4.按“purge”以记录的流速开始送液，观察从排液管末端流出的流动相约10秒钟，流动相应持续流动且没有气泡，按“purge”泵停止，泵指示灯灭单项结论： 检测人： 日期： 年 月 日 复核人： 日期： 年 月 日4.3性能确认4.3.1 泵性能确认3) 流量准确性确认泵流量设定值误差SS、流量稳定性误差SR 流量设定值（ml/min）0.51.02.0测量次数333流动相收集时间（min）1055允许误差SS5%3%2%SR3%2%2%启动仪器，按上表的要求设定流量，压力稳定后，在流动相出口处用事先清洗称重过的容量瓶收集流动相，同时用秒表计时，收集上表规定时间流出的流动相，在分析天平上称重，按式（1）、（2）计算SS和SR，结果记录在下表中；流量（ml/min）次数W1W2W2-W1SSSR0.51231.01232.0123注：Ss=(-Fs)/Fs100% 式（1）SR=(Fmax-Fmin)/ 100% 式（2）式中：Fm Fm=(W2-W1)/(t)，流量实测值，ml/min；W2 容量瓶+流动相的质量，g；W1 容量瓶的质量，g； 试验温度下流动相的密度，g/mL；t 收集流动相的时间，min； 同一组测量的算术平均值，mL/min；FS 流量设定值，mL/min；Fmax 同一组测量中流量最大值，mL/min；Fmin 同一组测量中流量最小值，ml/min。单项结论： 检测人： 日期： 年 月 日 复核人： 日期： 年 月 日4) 压力范围可执行标准：0.2MPa设定值测试方法：在进样阀的出口接一个两通，再将两通的另外一端用OD1.6的盲管封住。启动泵，使压力升至所设定的压力，观察仪器是否自动停泵。次数设置压力（Mpa）停止压力（Mpa）误差（Mpa）110220330单项结论： 检测人： 日期： 年 月 日 复核人： 日期： 年 月 日4.4 柱温箱温度设定值误差TS和控温稳定性TC的检定将温度计（已校验，分度值为0.1）放置在柱温箱内，选择35、40和45进行检定，按仪器说明书操作，通电升温，待温度稳定后，记下温度计读数并开始计时，以后每隔10min记录一次读数，共计7次，求出平均值，平均值与设定值之差为TS，7次读数中最大值与最小值之差为控温稳定性TC，结果记录在下表，柱温箱温度设定值误差TS3，TC1；设定温度（）次数首测温度（）平均温度（）TS（）TC结 果351234567401234567451234567单项结论： 检测人： 日期： 年 月 日 复核人： 日期： 年 月 日4.5 紫外检测器4.5.1 基线噪音和基线漂移选用C18色谱柱，以100%甲醇为流动相，流量为1.0ml/min，二极管阵列检测器的波长设定为254nm，待仪器稳定后，记录基线30min，由检测器的衰减倍数和测得的基线峰峰高对应的记录仪标度，计算基线噪音，用检测器自身的物理量（AU）作单位表示，基线噪音应不超过510-4；衰减倍数测得的基线峰峰高对应的记录仪标度基线噪音结 果注：Nd=KB式中：K：衰减倍数；B：测得的基线峰峰高对应的记录仪标度基线漂移在1h内偏离原点的值为 （AU/h），应不超过510-3AU/h。单项结论： 检测人： 日期： 年 月 日 复核人： 日期： 年 月 日4.5.2最小检测浓度采用依替巴肽分析色谱条件，进样量20l；取适量的依替巴肽，用甲醇稀释制成110-6g/ml的溶液，连续进样6次，记录依替巴肽/甲醇溶液的色谱图，由色谱峰高和基线噪声峰峰高，按下式来计算最小检测浓度（CL），应不超过110-6g/ml，结果记录在下表；依替巴肽的称样量稀释倍数依替巴肽的色谱峰高平均峰高最小检测浓度结 果注：CL=2NdcVH20式中：Nd：基线噪声峰峰高；c：标准溶液浓度；H：标准溶液的色谱峰高；V：进样体积单项结论： 检测人： 日期： 年 月 日 复核人： 日期： 年 月 日4.6整机性能在4.4.2所记录的色谱图中，按下式计算Rsd值，Rsd2.0%，并将结果记录在下表中；品 名称样量项目指标实 验 结 果结 果分离度（R）1.5Rsd2%图谱文件名峰面积（A）平均数（M）Rsd值结 果注：M=(A1+A2+An)/n Rsd= 式中：M：峰面积平均数；A：峰面积；n：测量次数单项结论： 检测人： 日期： 年 月 日 复核人： 日期： 年 月 日5.验证结果及分析评价结论： 检测人： 日期： 年 月 日 复核人： 日期： 年 月 日6.再验证要求6.1再验证周期6.1.1 设备大修后需再校验。6.1.2 由于检修、调整、迁移或其它原因，可能对设备的安装情况、主要技术参数和功能有影响时，应进行再验证。6.1.3 高效液相色谱仪的验证周期为一年，更换部件或对仪器性能有怀疑时，应随时验证。6.2 再验证内容进行设备的再校验，可针对设备性能中部分必须的项目进行再验证，而不一定要进行全面的验证。10第 10 页 共 10 页