仿生提取ICP-MS法测定冬虫夏草8种重金属含量及健康风险评价.pdf

第 43 卷第 3 期2024 年 3 月中 国 野 生 植 物 资 源Chinese Wild Plant ResourcesVol.43 No.3Mar.2024仿生提取ICP-MS法测定冬虫夏草8种重金属含量及健康风险评价马金梅1，2，3，肖远灿2，3*，郜靓2，3，魏立新2，3，杨仕兵1*（1.青海大学 医学部药学系，青海 西宁 810001；2.中国科学院 西北高原生物研究所 青海省藏药药理学和安全性评价研究重点实验室，青海 西宁 810008；3.中国科学院 藏药研究重点实验室，青海 西宁 810008）摘要 目的：建立冬虫夏草中铅（Pb）、镉（Cd）、汞（Hg）、砷（As）、铜（Cu）、银（Ag）、锡（Sn）和锑（Sb）8种重金属的仿生提取含量测定方法，并对其健康风险进行评价。方法：采用人工胃液、人工肠液仿生提取冬虫夏草中可溶性重金属，ICP-MS法测定重金属含量，靶标危害系数（THQ）法评价健康风险。结果：8种重金属在各自质量浓度范围内线性关系良好（R2 0.997 0），平均回收率84.05%114.71%（RSD 2.9%4.9%）。冬虫夏草中As、Hg、Cu、Cd、Sb、Pb、Ag总量均值依次为12.122、0.644、15.828、0.095、0.027、0.636、0.075 mg kg-1，未检出Sn。As、Hg、Cu、Cd、Pb、Ag在人工胃液溶出率大于人工肠液，其在人工胃液中的溶出率均值为19.69%52.62%，在人工肠液中的溶出率均值为0%16.05%；Sb在人工肠液的溶出率25.54%大于人工胃液的溶出率14.68%。健康风险评价结果显示，As、Hg、Cu、Cd、Pb、Ag、Sb的THQ均 0.997 0），respectively.Averaged recoveries were 84.05%-114.71%（RSD 2.9%-4.9%）.The averaged contents of As，Hg，Cu，Cd，Sb，Pb，and Ag in C.sinensis were 12.122，0.644，15.828，0.095，0.027，0.636，and 0.075 mg kg-1，respectively，in which Sn was not detected.The dissolution rate of As，Hg，Cu，Cd，Pb，and Ag in artificial gastric juice emerged to be higher than in artificial intestinal juice.The averaged dissolution rate of As，Hg，Cu，Cd，Pb，and Ag in artificial gastric juice was 19.69%-52.62%，The averagde dissolution rate in artificial intestinal juice was calculated asthe range of 0%-16.05%.The dissolution rate of Sb in artificial intestinal fluid was 25.54%，which was higher than that in artificial gastric fluid（14.68%）.The results of health risk assessment indicated that the THQ of As，Hg，Cu，Cd，Pb，Ag，and Sb were all less than 1，indicating that the aforementioned eight heavy metals in C.sinensis showed rare posibility to cause obvious health hazards to human body.Conclusion：The established method was simple，accurate，and reliable，the acquired data indicated the established method was apporpriate for the determination and health risk assessment of the aforementioned 8 heavy metals in C.sinensis.The enrichment data of 8 heavy metals in C.sinensis and the healthy evaluation results based on the data might provide quantified date for the in-depth study on safty assessment of heavy metals in C.sinensis.Key words Cordyceps sinensis；Heavy metals；Bionic extraction；ICP-MS method；Health risk assessment冬虫夏草为麦角菌科真菌冬虫夏草菌 Cordyceps sinensis（Berk.）Sacc.寄生在蝙蝠蛾科昆虫幼虫上的子座和幼虫尸体的干燥复合体，具有改善肾功能、免疫调节、抗氧化、抗肿瘤等药理作用1-3。近年来，冬虫夏草的安全性，特别是砷的安全性备受关注，2016 年原国家食品药品监督管理总局发布“关于冬虫夏草的消费提示”，提示冬虫夏草粉末及产品砷含量为4.4 9.9 mg kg-1，消费者长期摄入可能存在较高风险4。重金属对人体毒性明确，过量摄入Hg、Pb、Cu、Cd等重金属会损害人体肾、中枢神经及骨骼5。因而，冬虫夏草中重金属的健康风险也引起了人们的广泛关注。目前，对冬虫夏草中重金属的研究以 As、Hg、Pb、Cu、Cd等 5种重金属总量测定为主6-8。然而，胃肠消化是重金属溶出的关键步骤，只有在胃肠中溶出，才能被机体吸收。所以，采用体外人工胃肠实验模拟重金属在胃肠的消化情况，用重金属在胃肠溶出量评价冬虫夏草健康风险，能更合理地说明冬虫夏草重金属的安全性。但是，到目前为止，基于冬虫夏草中重金属仿生提取测定及健康风险评价报道极少9。本研究根据现行 中国药典 中对重金属检验的元素种类和限量要求，采用仿生提取法提取并测定冬虫夏草中As、Hg、Cu、Cd、Sb、Pb、Ag和Sn等8种重金属含量，并结合人体健康风险THQ模型评价冬虫夏草重金属的健康风险，为冬虫夏草中8种重金属安全性深入研究提供参考。1仪器与试剂1.1仪器Nexion 350D 电感耦合等离子体质谱仪（美国 Perkin Elmer公司）；BSA224S型万分之一电子天平（赛多利斯科学仪器有限公司）；KQ-2500E型超声波清洗器（昆山超声仪器科技有限公司）；SHA-BA恒温水浴振荡器（常州朗越仪器制造有限公司）；MASTER高通量微波消解仪（上海新仪微波化学科技有限公司）；ECH-20微机控温电热板（上海新仪微波化学科技有限公司）；MILLIPORE 超纯水系统（美国MILLIPORE公司）。1.2试剂铅（GBW08619）、汞（GBW08617）、铜（GBW08615）、砷 GBW（E）080125、锡（GBW08691）、镉（GBW08612）、银（GBW（E）080116）、铟 GBW（E）080270 均为100 mgL-1单元素标准溶液，锑 GBW（E）080545 为1 000 mgL-1单元素标准溶液，均来源于中国计量科学研究院。硝酸（UPS级）购自晶瑞电子材料股份有限公司，胃蛋白酶（批号：C11669773）和胰酶（批号：C1-946300）来自上海麦克林公司。1.3样品信息收集产自青海省玉树藏族自治州6县市的13批次冬虫夏草样品，S1 S6、S7 S12、S13购买时间分 21中 国 野 生 植 物 资 源第 43 卷别为2016年6月、2021年6月和2022年6月。详细信息如表1所示。所有样品经青海大学医学部药学系中药资源教研室杨仕兵副教授鉴定为冬虫夏草。采用超纯水清洗后在40条件下烘至恒重，粉碎，备用。2方法2.1标准工作曲线及内标溶液的制备精密吸取8种重金属的标准溶液适量，先用3%HNO3溶液配置各元素的储备液，As、Cu 配置为1 000 g L-1；Hg、Pb配置为100 g L-1；Ag、Sn、Sb、Cd配置为10 g L-1；再用3%HNO3溶液配制成混合标准曲线系列溶液，其中As、Cu的质量浓度为100、50、20、10、5 g L-1；Hg、Pb为10、5、2、1、0.5 g L-1；Ag、Sn、Sb、Cd为 1、0.5、0.2、0.1、0.05 g L-1。另精密吸取铟单元素标准溶液适量，用3%HNO3溶液稀释，配置为10 g L-1的内标溶液。2.2人工胃肠液的制备将10.0 g胃蛋白酶溶解于800 mL超纯水中，后加入16.4 mL稀盐酸，加超纯水定容至1 000 mL，即得pH 1.8的人工胃液。将6.8 g磷酸二氢钾溶于500 mL超纯水中，用0.1mol L1氢氧化钠调节pH至6.8。另取10 g胰酶加适量超纯水溶解，合并上述2种溶液，用超纯水定容至1 000 mL，即得pH 6.8人工肠液。2.3重金属总量测定溶液制备精密称取样品0.2 g，置于聚四氟乙烯微波消解罐中，加3 mL硝酸，盖密封静置过夜，加1 mL过氧化氢溶液，静置4 h，将样品按表2中消解程序进行消解。消解完成后，上述溶液于120赶酸40 min。待溶液放冷后，转入25 mL容量瓶中，用少量超纯水洗涤，洗液合并于离心管中，定容至刻度，混匀，0.45 m微孔滤膜过滤，即得冬虫夏草8种重金属总量供试品溶液。试剂空白按照同样方法制备。以样品实际情况进行适当稀释后，进样测定。2.4冬虫夏草仿生胃肠提取液制备精密称取样品0.2 g于50 mL离心管中，加入人工胃液 10 mL，37震荡（100 r min-1）提取 2 h，3 000 r min-1 离心10 min，取上清液，即得人工胃液提取溶液。精密称取样品0.2 g于50 mL离心管中，加入人工肠液 10 mL，37震荡（100 r min-1）提取1 h，3 000 r min-1 离心10 min，取上清液，即得人工肠液提取溶液。同时制备试剂空白溶液。取上述胃肠仿生提取样品溶液各 5 mL 于15 mL离心管，加3 mL硝酸，于120电热板密闭加热消解 40 min。放冷后用超纯水定容至 10 mL，0.45 m微孔滤膜过滤，即得仿生胃肠提取液的消解溶液供试品。同法制备试剂空白溶液。2.5ICP-MS仪器工作参数射 频 发 生 器 功 率 1 500 W，雾 化 器 流 量0.9 L min-1，采样锥孔径0.9 mm；进样冲洗时间50 ms，读数延迟时间15 s，扫描方式跳峰，扫描次数20，重复次数3，蠕动泵转速25 r min-1。2.6测定方法依次将对各个浓度的混合标准品溶液中进行测定，以每一浓度与铟元素的响应为纵坐标，相应元素标准溶液浓度为横坐标，绘制标准曲线，并进行方法学考察。再对胃肠仿生提取样品溶液和重金属总量测定供试品溶液进行进样测定，从标准曲线上计算得相应的浓度扣除相应试剂的空白值，计算样品中8种重金属元素的含量，并对样品中8种重金属的含量进行比较分析。2.7冬虫夏草8种重金属健康风险评价方法采用靶标危害系数（THQ）评价人体通过食物摄取重金属风险的方法10-12，公式如下。表1样品信息Tab.1Samples information编号S1S2S3S4S5S6S7S8S9S10S11S12S13产地玉树市曲麻莱县杂多县治多县称多县囊谦县玉树市曲麻莱县杂多县称多县治多县囊谦县杂多县表2微波消解程序Tab.2Microwave digestion procedure步骤1234时间（min）510320温度（）130130180180压力（Pa）1 5001 5001 5001 500 22第 3 期马金梅，等：仿生提取ICP-MS法测定冬虫夏草8种重金属含量及健康风险评价THQ=C EF ED IRDBA AT RFD（1）式（1）中 EF为每年暴露于毒物（此处指冬虫夏草中砷）的天数，定为 30 d；ED为暴露于毒物（此处指冬虫夏草）的年数，定为30年；AT为平均接触非致癌毒物（此处指冬虫夏草）的时间，定为平均人均寿命70年 365 d13。RFD为参考剂量，按照USEPA提供的参考剂量（每日）As、Cu、Pb、Cd、Hg、Ag、Sb分别为 0.000 3、0.04、0.003 5、0.001、0.000 3、0.005、0.000 4 mg kg-1进行计算。3结果3.1线性关系考察以质量浓度（ugL-1）为横坐标，待测元素和内标元素的计数比值为纵坐标，绘制8种元素的标准曲线并计算相关系数R2，以空白样品连续进样11次测定后的质量浓度标准偏差的3倍和10倍为检出限和定量限。结果表明，测定方法的线性和灵敏度良好（表3）。3.2精密度试验取质量浓度为 As 20 ng mL-1、Hg 2 ng mL-1、Pb 2 ng mL-1、Cu 20 ng mL-1、Cd 0.2 ng mL-1、Sn 0.2 ng mL-1、Sb 0.2ng mL-1、Ag 0.2 ng mL-1的混合对照品溶液，按照“2.5”下仪器条件连续进样6次，计 算 RSD 分 别 为 3.44%、2.62%、3.34%、2.69%、2.46%、1.71%、3.06%、4.53%，8 种重金属 RSD 值均小于5%，表明仪器精密度良好。3.3重复性实验精密称取样品S4粉末0.2 g，采用“2.3”项下方法平行制备 6 份供试品溶液，进样测定，As、Cu、Hg、Cd、Sn、Sb、Pb、Ag 的 RSD 分 别 为 2.420%、1.960%、2.050%、3.914%、3.473%、3.054%、3.510%、3.485%，8种重金属RSD值均小于5%，表明方法重复性良好。3.4准确性考察精密称取样品S4粉末6份，每份0.1 g，加入适量的混合标准溶液储备液。按照“2.3”项下方法制备供试品溶液，按照“2.5”项下仪器条件进行检测，计算回收率，结果见表4。表48种元素回收率试验结果Tab.4Test results of recovery rate of 8 elementsAsCuHgS4-1S4-2S4-3S4-4S4-5S4-6S4-1S4-2S4-3S4-4S4-5S4-6S4-1S4-2S4-3S4-4S4-5S4-60.100 50.101 20.100 40.100 80.100 70.099 50.100 50.101 20.100 40.100 80.100 70.099 50.100 50.101 20.100 40.100 80.100 70.099 51 120.521 219.541 131.391 156.701 178.431 229.051 676.931 757.921 649.101 685.461 763.631 700.1510.0412.0111.7010.0711.9511.601 1701 1701 1701 1701 1701 1701 7001 7001 7001 7001 7001 7009.809.809.809.809.809.802 428.332 379.972 399.642 416.332 416.712 373.373 602.413 440.103 543.913 537.153 568.383 414.5520.5221.9821.3821.2221.8521.99111.7899.18108.40107.66105.8497.81113.2698.95111.46108.92106.16100.85106.94101.7098.77113.78101.05106.05105.11106.60104.724.774.924.72元素样品名称称样量（g）样品含量（ng）加标量（ng）加标后（ng）回收率（%）平均回收率（%）RSD（%）表3标准曲线、检出限、定量限试验结果Tab.3Standard curve，detection limit，quantitative limit test results序号12345678元素AsCuHgCdSnSbAgPb线性方程y=0.06x+0.004y=0.026x+0.020y=0.013x+0.040y=0.008x+0.000y=0.239x+0.005y=0.026x+0.000y=0.033x+0.001y=0.079x+0.127线性范围（gL-1）5 1005 1000.5 100.05 10.05 10.05 10.05 10.5 10R20.999 50.999 50.999 80.984 20.999 40.999 80.999 20.999 7检出限（gL-1）0.036 90.032 60.028 70.011 20.004 10.004 00.006 00.251 7定量限（gL-1）0.122 90.108 80.095 80.037 30.013 60.013 50.019 90.839 0 23中 国 野 生 植 物 资 源第 43 卷CdSbPbSnAgS4-1S4-2S4-3S4-4S4-5S4-6S4-1S4-2S4-3S4-4S4-5S4-6S4-1S4-2S4-3S4-4S4-5S4-6S4-1S4-2S4-3S4-4S4-5S4-6S4-1S4-2S4-3S4-4S4-5S4-60.100 50.101 20.100 40.100 80.100 70.099 50.100 50.101 20.100 40.100 80.100 70.099 50.100 50.101 20.100 40.100 80.100 70.099 50.100 50.101 20.100 40.100 80.100 70.099 50.100 50.101 20.100 40.100 80.100 70.099 57.687.767.997.927.878.383.143.083.023.153.072.9944.7549.1145.7749.6250.5054.850.000.000.000.000.000.001.281.301.171.281.301.167.707.707.707.707.707.703.03.03.03.03.03.06161616161612.002.002.002.002.002.001.501.501.501.501.501.5013.9614.1214.4914.2014.6615.006.396.396.636.676.466.55115.17118.86116.23120.68117.66117.132.111.862.011.931.862.012.792.742.622.632.822.6581.5882.6284.4081.5088.1286.08108.05110.37120.62117.39113.17118.68115.44114.35115.52116.49110.10102.10105.5893.25100.4896.3593.22100.41100.5295.6296.1490.01101.8399.4084.05114.71112.33104.5297.252.893.964.464.424.04续表元素样品名称称样量（g）样品含量（ng）加标量（ng）加标后（ng）回收率（%）平均回收率（%）RSD（%）3.5冬虫夏草8种重金属总量由表5可知，对13批冬虫夏草中重金属的总含量测定，As、Sb和Ag含量均值分别为12.122、0.027、0.075 mg kg-1，未检出Sn。Cu、Pb、Cd 3种重金属除编号为 S2 样品中 Cu 含量为 20.935 mg kg-1，超过2020年版 中华人民共和国药典 限量值20 mg kg-1，其余样品中 Cu、Pb、Cd 含量为 10.239 18.625、0.291 1.374、0.070 0.161 mg kg-1，均未超过 20、5、1 mg kg-1的 限 量 值。除 S8 样 品 Hg 含 量 为4.259 mg kg-1，其 余 样 品 含 量 范 围 为 0.055 1.337 mg kg-1，Hg 含量均值为 0.644 mg kg-1，超过限量值0.2 mg kg-1。3.6冬虫夏草胃肠仿生提取液中8种重金属含量13批冬虫夏草胃肠仿生提取液中8种重金属含量对比结果如图1。除Sn未检出外，其余7种重金属元素在仿生胃肠液中溶出含量存在差异。As、Hg、Cu、Cd、Pb和Ag在人工胃液中的重金属溶出量大于人工肠液，其中As和Cu在胃肠溶出情况接近，人工胃液中As、Cu溶出量平均值是人工肠液中溶出量平均值的 2.6 和 3.9 倍。人工胃液中 Cd、Pb、Hg、Ag 溶 出 量 均 值 分 别 为 0.052、0.160、0.121、0.020 mg kg-1，人工肠液中Cd、Pb溶出量均值分别为 0.006、0.003 mg kg-1，未检出 Hg 和 Ag，Cd、Pb、Hg、和Ag在胃肠液溶出量均值均未超过限量标准。而 Sb 在 胃 液、肠 液 含 量 平 均 值 分 别 为 0.004、0.006 mg kg-1，在人工肠液中含量平均值高于胃液中含量平均值的1.5倍，Sb在肠液中更易溶出。与冬虫夏草上述重金属总量相比，人工胃肠液中溶出的重金属含量显著降低。此外，人工肠液pH值近中性，药材重金属在人工肠液中的溶出量比人工胃液少。24第 3 期马金梅，等：仿生提取ICP-MS法测定冬虫夏草8种重金属含量及健康风险评价3.7冬虫夏草胃肠仿生提取液中8种重金属溶出率由表6可知，Cu、As、Cd和Pb在胃阶段溶出率平 均 值 比 在 肠 阶 段 溶 出 率 分 别 高 出 38.58%、26.58%、45.98%、26.59%；Hg和Ag的溶出率在胃阶段分别为27.64%、19.69%，在肠阶段未检出；尤其是Cd在胃液中的溶出率明显高于其在肠液中的溶出率。除Sb以外大部分重金属在人工胃液的溶出率一般大于在人工肠液溶出率，Sb在肠阶段溶出率平均值比在胃阶段高10.86%。3.8冬虫夏草8种重金属健康风险评价结果为评价冬虫夏草重金属潜在健康风险，除未检出 Sn 外，对冬虫夏草中可检测到的 7 种重金属计算平均 THQ（成人），结果见图 2。从重金属总量的THQ值可得出，不同重金属的THQ值相差较大。总 As 的 THQ 最大，范围为 0.036 0.229；其次为总 Cu、Hg、Pb，其 THQ 值范围为 0 0.03；总Ag、Cd 和 Sb 的 THQ 值均 0.006。7 种重金属在人工胃肠液的 THQ 值均 1，其中在肠液中 Ag、Hg、Pb几乎接近0，则认为冬虫夏草的重金属对人体健康造成的影响不明显。此外，冬虫夏草重金属总量、胃肠提取液总量的 THQ 值存在差异，故用冬虫夏草总量 THQ 值代替人工胃肠提取液总量的 THQ 值评价冬虫夏草重金属安全性存在不合理性。表5冬虫夏草8种重金属总量测定结果Tab.5The total amounts of 8 heavy metals in C.sinensis（单位：mg kg-1）编号S1S2S3S4S5S6S7S8S9S10S11S12S13均值As12.36111.80318.83011.69020.22412.8797.38813.0058.07917.1366.3636.73511.09612.122Cu17.18420.93518.26516.80015.94016.31413.47517.92414.58110.23913.49714.81615.79115.828Hg0.0850.1980.43100.0950.2370.1400.1504.2590.3791.3370.2500.7490.0550.644Cd0.0930.1020.0830.0780.0840.0700.0870.0980.0890.1610.0770.0910.1180.095SnNDNDNDNDNDNDNDNDNDNDNDNDNDNDSb0.0240.0350.0350.0310.0250.0280.0230.0240.0160.0280.0190.0290.0350.027Pb0.6051.0400.6880.4220.5290.5640.5391.3740.2910.6050.3920.5980.6290.636Ag0.0130.0120.0340.0120.0190.0360.0540.1790.3610.0830.0230.0880.0370.075注：ND表示低于检出限。图1冬虫夏草仿生胃肠提取液中8种重金属含量Fig.1Contents of 8 heavy metals in gastrointestinal fluid of C.sinensis表6人工胃肠溶出率结果Tab.6Gastrointestinal dissolution rate results名称S1S2S3S4S5S6S7S8S9S10S11S12S13均值AsW36.1339.1537.3935.5334.2155.4752.2052.2947.8935.0143.7732.0753.1442.63C12.3714.9415.4813.6517.4415.5318.6915.9418.1718.8216.4915.2315.9316.05CuW44.3041.6447.6546.7343.3457.0658.8157.3645.0236.0943.9588.3169.0052.25C8.7310.6413.578.9714.1012.8215.9811.4115.3115.3312.9825.3512.5513.67HgW38.2133.6812.3035.4522.6440.6610.6969.0150.403.0220.959.1913.1627.64CNDNDNDNDNDNDNDNDNDNDNDNDNDNDCdW64.4858.4546.518.4282.2047.6053.0457.2362.3755.0760.5555.8532.3552.62C4.884.287.576.018.346.438.846.875.209.185.618.075.116.64SnWNDNDNDNDNDNDNDNDNDNDNDNDNDNDCNDNDNDNDNDNDNDNDNDNDNDNDNDNDSbW13.0820.5123.8020.2710.9217.186.8513.0712.4310.476.1021.6914.4314.68C6.5412.3139.6711.5861.8817.1841.0817.4328.9931.4248.783.6111.5425.54PbW25.1023.9524.4232.7225.1641.8427.7840.8219.1511.3523.0021.5034.5027.02CND2.31ND0.582.08ND0.17NDND0.87NDNDND0.43AgW16.0836.4820.7823.718.4649.6013.6627.700.5630.431.3810.8116.2619.69CNDNDNDNDNDNDNDNDNDNDNDNDNDND注：W表示胃液溶出率（%）=胃液溶出含量/总量；C表示肠液溶出率（%）=肠液溶出含量/总量；ND表示低于检出限。25中 国 野 生 植 物 资 源第 43 卷4讨论4.1待测元素的选择参考 药用植物及制剂进口绿色行业标准 和中国药典 2020年版四部通则中药有害残留物限量的指导原则1，14，选择Cd、Pb、Hg、As、Sb、Cu、Sn、Ag作为本研究的目标元素。4.2样品处理方法和检测方法的选择近年来，对中药材中的重金属研究主要采用体外仿生提取的方式研究中药重金属在胃肠仿生消化行为，体外仿生实验不仅符合中医配伍和临床用药的特点和口服药物在胃肠道转运吸收的特点，而且其具有不受伦理学约束、设计简单、可靠等优点。利用消化酶模拟胃肠消化过程，使提取过程更接近于重金属在人体胃肠道的溶出过程。故本文采用了微波消解法、人工胃液、人工肠液3种处理方法，测定冬虫夏草胃肠溶出情况，在一定程度上更能反映冬虫夏草中重金属胃肠溶出情况。4.3样品含量分析比较采用微波消解-ICP-MS 法测定 8 种重金属总量，As总量均值为12.122 mg kg-1，As含量较高，高于文献中产自青海的冬虫夏草总含砷量均值在2.12 9.70 mg kg-1 15，但与王维恩16和左甜甜等17测定冬虫夏草总As的含量均值11.42、11.33 mg kg-1接近。总Hg均值为0.644 mg kg-1，存在Hg超标现象，高于樊雪艳等18和王君等19测得总 Hg 为 0 0.003、0.032 mg kg-1，但低于左甜甜等17测定冬虫夏草总Hg含量均值1.23 mg kg-1。冬虫夏草中Pb、Cd、Cu、Pb 和 Ag 含 量 未 超 标，Pb 含 量 均 值 为0.636 mg kg-1，低于文献16-171.73 2.33 mg kg-1的平均含量；Cu含量均值为15.828 mg kg-1，低于王维恩16测 定 结 果 17.4 mg kg-1；Cd 含 量 均 值 为0.095 mg kg-1，与左甜甜等17的测定结果 0.09 mg kg-1近似。本研究得出的在人工胃液中的溶出率，图2冬虫夏草重金属平均THQ值Fig.2The average THQ of heavy metals in C.sinensis 26第 3 期马金梅，等：仿生提取ICP-MS法测定冬虫夏草8种重金属含量及健康风险评价As 为 42.63%、Cd 为 52.62%，低 于 Zhou 等9的49.24%和 76.92%，Pb、Hg 和 Cu 溶 出 率 分 别 为27.02%、27.64%、52.25%，均分别高于 Zhou 等9的11.25%、10.09%和41.00%。4.4健康风险分析由于冬虫夏草摄入人群主要是成人，故本研究对冬虫夏草中 Pb、Hg、Cd、Cu、As、Ag、Sb等 7种重金属运用 THQ（成人）模型进行风险评价，以 Pb、Cd、Cu、As、Hg 计，THQ 均值别为 0.001 3、0.000 5、0.002 2、0.229 2、0.001 2，均 低 于 Zhou 等9采 用BTHQ 得 到 的 0.004 0、0.002 0、0.004 1、0.533 4、0.000 5 的值。结果表明，冬虫夏草中 Hg、Pb、Cd、Cu、As、Ag、Sb等7种重金属的THQ均 1，实验所用冬虫夏草样品中的8种重金属对人体不存在明显的健康风险。5结论本文采用仿生提取ICP-MS法对13批青海不同产地冬虫夏草中8种重金属进行分析，并开展了健康风险评价。所建立的检测方法准确、可靠，冬虫夏草中Cu、Cd和Pb含量低于限量值20、1、5 mg kg-1，总砷含量超过了 药用植物及制剂进口绿色标准 的限定值 2 mg kg-1，部分总 Hg 含量超过了 中国药典的 限 定 值 0.2 mg kg-1，Ag 和 Sb 含 量 小 于1.374 mg kg-1，未检出 Sn。应用美国 EPA 模型，以冬虫夏草中8种重金属总量、人工胃液溶出量和人工肠液溶出量计算，冬虫夏草中8种重金属不会对人体造成明显的健康危害。冬虫夏草8种重金属仿生提取测定的含量数据及基于该数据的健康评价结果可为冬虫夏草重金属安全性深入研究提供参考。参考文献:1 国家药典委员会.中华人民共和国药典（一部）M.北京：中国医药科技出版社，2020：1192 Wong K L，Wong R N S，Zhang L，et al.Bioactive proteins and peptides isolated from Chinese medicines with pharmaceutical potential J.Chinese Medicine，2014，9（1）：1-143 He L，Ji P F，Cheng J W，et al.Structural characterization and immunostimulatory 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