高效液相色谱外标法检测人血...平及单羟奥卡西平的血药浓度_王亮.pdf

作者简介:王亮,男,技师,主要从事药物浓度监测及相关代谢基因研究。论 著D O I:1 0.3 9 6 9/j.i s s n.1 6 7 2-9 4 5 5.2 0 2 3.0 4.0 1 1高效液相色谱外标法检测人血清中拉莫三嗪、卡马西平及单羟奥卡西平的血药浓度王 亮郑州大学附属洛阳中心医院医学检验科,河南洛阳 4 7 1 0 0 0 摘 要:目的 建立同时检测人血清中卡马西平、拉莫三嗪及单羟奥卡西平浓度的高效液相色谱外标法。方法 采用高效液相色谱外标法进行血药浓度测定,血清样品用甲醇去除蛋白,用C 1 8色谱柱(4.6 mm2 5 0.0 mm,5.0 m)分析,流动相为甲醇水溶液(其比例为6 04 0),流速为1.0 m L/m i n,柱温为3 5,检测波长为2 4 0 n m。同时考察该方法的专属性、标准曲线及最低检测限、精密度与回收率、稳定性及重复 性。结果 卡马西平、拉莫三嗪、单羟奥卡西平浓度分别在0.2 54.0 0 g/m L(Y=1 5 0 3 2.4X+2 2 9 1 8.4,r=0.9 9 6),0.2 54.0 0 g/m L(Y=1 7 2 4 9.7X+5 2 9 5 4.8,r=0.9 9 2)及0.7 51 2.0 0 g/m L(Y=6 2 6 8.6 5X+2 8 6 3 1.3,r=0.9 9 5)线性关系良好。卡马西平、拉莫三嗪、单羟奥卡西平的方法回收率均为9 5%1 0 6%,日内和日间精密度均5%。结论 该方法操作简便、准确、灵敏度高,可用于卡马西平、拉莫三嗪及单羟奥卡西平血药浓度监测。关键词:拉莫三嗪;卡马西平;单羟奥卡西平;高效液相色谱外标法;血药浓度中图法分类号:R 9 1 7文献标志码:A文章编号:1 6 7 2-9 4 5 5(2 0 2 3)0 4-0 4 8 1-0 4D e t e r m i n a t i o n o f c o n c e n t r a t i o n s o f l a m o t r i g i n e,c a r b a m a z e p i n e a n d m o n o h y d r o x y o x c a r b a z e p i n e i n h u m a n b l o o d b y e x t e r n a l s t a n d a r d H i g h P e r f o r m a n c e L i q u i d C h r o m a t o g r a p h y m e t h o d o f H P L CWANG L i a n gD e p a r t m e n t o f C l i n i c a l L a b o r a t o r y,L u o y a n g C e n t r a l H o s p i t a l A f f i l i a t e d t o Z h e n g z h o u U n i v e r s i t y,L u o y a n g,H e n a n 4 7 1 0 0 0,C h i n aA b s t r a c t:O b j e c t i v e T o e s t a b l i s h a n e x t e r n a l s t a n d a r d H i g h P e r f o r m a n c e L i q u i d C h r o m a t o g r a p h y m e t h o d t o d e t e r m i n a t e t h e c o n c e n t r a t i o n s o f l a m o t r i g i n e,c a r b a m a z e p i n e a n d m o n o h y d r o x y o x c a r b a z e p i n e s i m u l t a n e-o u s l y i n h u m a n b l o o d.M e t h o d s T h e p r o t e i n s i n t h e s e r u m w e r e r e m o v e d w i t h m e t h a n o l,t h e i r c o n t e n t s w e r e d e t e r m i n e d b y u s i n g t h e e x t e r n a l s t a n d a r d H i g h P e r f o r m a n c e L i q u i d C h r o m a t o g r a p h y m e t h o d.T h e m e t h o d w a s p e r f o r m e d o n t h e C 1 8 c o l u m n(4.6 mm2 5 0.0 mm,5.0 m).T h e m o b i l e p h a s e c o n s i s t e d o f m e t h a n o l-w a t e r(6 04 0),t h e f l o w r a t e w a s 1.0 m L/m i n a n d t h e d e t e c t i n g w a v e l e n g t h w a s 2 4 0 n m.T h e m e t h o d w a s i n-s p e c t e d i n t h e a s p e c t s o f s p e c i f i c i t y,l o w e r l i m i t o f q u a n t i f i c a t i o n,p r e c i s i o n,r e c o v e r y r a t e,s t a b i l i t y a n d r e p e a t-a b i l i t y.R e s u l t s T h e l i n e a r r a n g e o f l a m o t r i g i n e,c a r b a m a z e p i n e a n d m o n o h y d r o x y o x c a r b a z e p i n e w e r e f r o m 0.2 5 t o 4.0 0 g/m L(Y=1 5 0 3 2.4X+2 2 9 1 8.4,r=0.9 9 6),0.2 5 t o 4.0 0 g/m L(Y=1 7 2 4 9.7X+5 2 9 5 4.8,r=0.9 9 2)a n d 0.7 5 t o 1 2.0 0 g/m L(Y=6 2 6 8.6 5X+2 8 6 3 1.3,r=0.9 9 5)r e s p e c t i v e l y.T h e r a n g e o f e x t r a c-t i o n r e c o v e r y r a t i o n s w e r e a l l b e t w e e n 9 5%a n d 1 0 6%.T h e i n t r a a n d i n t e r-d a y p r e c i s i o n w e r e a l l l e s s t h a n 5%.C o n c l u s i o n T h e m e t h o d i s s h o w n t o b e s i m p l e,a c c u r a t e a n d s e n s i t i v e,w h i c h c o u l d b e a p p l i e d i n t h e d e-t e r m i n a t i o n o f c o n c e n t r a t i o n o f l a m o t r i g i n e,c a r b a m a z e p i n e a n d m o n o h y d r o x y o x c a r b a z e p i n e i n h u m a n b l o o d.K e y w o r d s:l a m o t r i g i n e;c a r b a m a z e p i n e;m o n o h y d r o x y c a r b a z e p i n e;e x t e r n a l s t a n d a r d H i g h P e r f o r m-a n c e L i q u i d C h r o m a t o g r a p h y m e t h o d;b l o o d d r u g c o n c e n t r a t i o n 癫痫俗称“羊角风”或“羊癫疯”,是由于大脑神经元高度同步化异常放电而导致短暂的大脑功能障碍的一种慢性疾病,临床表现具有发作性、短暂性、重复性和刻板性的特点。由于异常放电的起始部位、波及范围和传递方式的不同,癫痫发作的临床表现复杂多样,可表现为发作性运动,以及感觉、自主神经、意识、精神障碍,或兼有之。引起癫痫的发病原因多种多样,据统计,中国约有9 0 0万癫痫患者,其中5 0 0万至6 0 0万是活动性癫痫患者,该病已成为神经科仅次于头痛的第2大常见病1。拉莫三嗪是新型广谱抗癫184检验医学与临床2 0 2 3年2月第2 0卷第4期 L a b M e d C l i n,F e b r u a r y 2 0 2 3,V o l.2 0,N o.4痫药物,临床常用于顽固性癫痫的治疗。卡马西平主要通过降低细胞膜对N a+、C a2+的通透性,从而使细胞兴奋性下降,并增加氨基丁酸的抑制功能,阻止脑部异常电位活动向周围脑组织扩散,能阻止癫痫的发作,是临床常用的抗癫痫药物。奥卡西平是卡马西平的衍生物,在体内迅速转化为具有生物活性的代谢产物单羟奥卡西平而发挥作用2-4。由于上述3种药物口服吸收慢,药物代谢易受年龄、合并用药等因素的影响,导致治疗效果不佳或产生不良反应。因此,临床上需要监测药物浓度,并根据药物浓度进行药物疗效的评价,确定个体化给药方案。本研究建立了简便的高效液相色谱外标法可同时监测上述3种药物的血药浓度,现报道如下。1 材料与方法1.1 仪器与药品、试剂 L C-2 0 1 0 AHT高效液相色谱仪购自日本岛津公司。高速冷冻离心机5 4 2 4 R购自美国E p p e n d o r f公司;大容量S T 1 6-4 0离心机购自美国T h e r m o F i s h e r公司;旋涡混合器购自上海医科大学仪器有限公司;微量加样器购自美国E p p e n d o r f公司;KQ-3 0 0 D E数控超声波发生器购自昆山超声仪器有限公司;ME 1 0 4 E型分析天平购自梅特勒托利多集团。色谱级甲醇购自天津科密欧化学试剂有限公司。拉莫三嗪、卡马西平和单羟奥卡西平标准品由中国食品药品检定研究院提供。1.2 测定条件及标本处理1.2.1 色谱条件 色谱柱:岛津C 1 8色谱柱(4.6 mm2 5 0.0 mm,5.0 m);流动相:甲醇水=6 04 0;柱温:3 5;流速:1.0 m L/m i n;检测波长:2 4 0 n m;进样量:2 0 L。1.2.2 溶液配制 称取卡马西平、拉莫三嗪对照品各4 m g,加甲醇1 0 0 0 m L溶解,得到4 g/m L的卡马西平及拉莫三嗪标准液;称取单羟奥卡西平对照品1 2 m g,加甲醇1 0 0 0 m L得到1 2 g/m L的单羟奥卡西平标准液。标准液于4 下保存。1.2.3 标本处理 取血清标本2 0 0 L放置于1.5 m L离心管中,加入6 0 0 L甲醇(漩涡充分混匀后加入),1 5 0 0 0 r/m i n离心1 0 m i n,取上清液4 0 0 L加入液相小瓶进行分析。1.3 方法学考察1.3.1 专属性 分别取卡马西平、拉莫三嗪、单羟奥卡西平标准溶液、服药患者的血清,按“样品处理”项操作,测定并记录色谱图。1.3.2 标准曲线 取空白血清,加入不同浓度的3种药品标准溶液,分别配制成含有拉莫三嗪浓度为0.2 5、0.5 0、1.0 0、2.0 0、4.0 0 g/m L,卡马西平浓度为0.2 5、0.5 0,1.0 0、2.0 0、4.0 0 g/m L,单羟奥卡西平浓度为0.7 5、1.5 0、3.0 0、6.0 0、1 2.0 0 g/m L的标准血样,按“样品处理”操作,用外标法峰面积定量,测定拉莫三嗪、卡马西平、单羟奥卡西平线性回归方程。1.3.3 精密度与回收率 取人空白血清分别加入拉莫三嗪、卡马西平、单羟奥卡西平标准溶液,分别配制成含拉莫三嗪浓度为0.2 5、1.0 0、4.0 0 g/m L,卡马西平浓度为0.2 5、1.0 0、4.0 0 g/m L,单羟奥卡西平浓度为0.7 5、3.0 0、1 2.0 0 g/m L的低、中、高 3个浓度质控样品。每种浓度平行配制5份,按“样品处理”操作并测定,由标准曲线求出各样品的浓度,并计算回收率。以 1 d 内重复5次测定的每种药物浓度计算日内精密度,另以1周内重复5次测定的每种药物浓度计算日间精密度。1.3.4 稳定性 取低、中、高浓度拉莫三嗪、卡马西平、单羟奥卡西平血清质控样品3份,分别考察提取前室温放置3 h,提取后4 放置 2 4 h,2 0 反复3次冻融和2 0 冰冻放置1个月的稳定性。1.3.5 重复性试验 本实验室其他工作人员按拟订方法绘制标准曲线,得到回归方程,分别测定5份拉莫三嗪、5份卡马西平及5份单羟奥卡西平血样,根据所得结果判定其重复性。1.3.6 最低检测限确定 以信噪比S/N=3来确定拉莫三嗪、卡马西平和单羟奥卡西平的最低检测限。1.4 方法学应用 收集本院神经内科及儿科规律服药癫痫患者1 8 2例,均在血药浓度达到稳态后于早上服药前(服药后1 2 h)空腹采集血液标本进行检测。其中单用拉莫三嗪1 0 1例,单用卡马西平5 6例,单用奥卡西平1 4例;拉莫三嗪与卡马西平合用6例,拉莫三嗪与奥卡西平合用5例,卡马西平与奥卡西平合用0例;拉莫三嗪、卡马西平及奥卡西平3种药物合用0例。采用本文建立的方法测定患者血清中拉莫三嗪、卡马西平及单羟奥卡西平的血药浓度。列举两例长期服用拉莫三嗪的患者加以说明。患者男起始维持剂量为每次1 0 0 m g,检测后维持剂量调整为每次7 5 m g;患者女起始维持剂量为每次7 5 m g,检测后维持剂量调整为每次5 0 m g。二者均为每日服药两次,服药间隔1 2 h。两例患者调药后维持治疗两周再进行检测。监测结果与金域公司检验结果进行比较。2 结 果2.1 方法学评价结果2.1.1 专属性验证结果 拉莫三嗪、卡马西平、单羟奥卡西平3种药物分离效果良好,各色谱峰无重叠,峰形好,且保留时间分别为4.1 6、7.5 7、4.5 9 m i n。2.1.2 标准曲线结果 拉莫三嗪的直线回归方程为Y=1 5 0 3 2.4X+2 2 9 1 8.4(r=0.9 9 6),结果表明,拉莫三嗪浓度为0.2 54.0 0 g/m L,与峰面积积分值线性关 系 良 好;卡 马 西 平 的 直 线 回 归 方 程 为Y=1 7 2 4 9.7X+5 2 9 5 4.8(r=0.9 9 2),结果表明,卡马西284检验医学与临床2 0 2 3年2月第2 0卷第4期 L a b M e d C l i n,F e b r u a r y 2 0 2 3,V o l.2 0,N o.4平浓度为0.2 54.0 0 g/m L,与峰面积积分值线性关系良 好;单 羟 奥 卡 西 平 的 直 线 回 归 方 程 为Y=6 2 6 8.6 5X+2 8 6 3 1.3(r=0.9 9 5),结果表明,单羟奥卡西平浓度为0.7 51 2.0 0 g/m L,与峰面积积分值线性关系良好。2.1.3 精密度与回收率试验结果 拉莫三嗪、卡马西平、单羟奥卡西平的日内和日间精密度均5%,回收率均为9 5%1 0 6%,见表1。表1 拉莫三嗪、卡马西平和单羟奥卡西平的精密度和 回收率试验结果(n=5)药物浓度(g/m L)回收率(%)均值(%)精密度(%)日内日间拉莫三嗪0.2 51 0 3.21 0 1.7 03.84.01.0 01 0 2.73.94.14.0 09 9.24.53.8卡马西平0.2 59 8.31 0 2.0 04.04.21.0 01 0 3.63.94.14.0 01 0 4.14.23.7单羟奥卡西平0.7 51 0 1.11 0 1.9 73.93.93.0 09 9.64.04.21 2.0 01 0 5.23.63.92.1.4 稳定性验证结果 含有拉莫三嗪、卡马西平、单羟奥卡西平的血样在测试过程中和本次储存条件下较稳定,相对误差(R E)均在1 5%。2.1.5 重复性试验结果 本实验室其他工作人员按拟订方法绘制标准曲线,得到线性回归方程,并分别检测5份拉莫三嗪、5份卡马西平及5份单羟奥卡西平血样,所得结果与本研究结果相差不大,重复性良好。2.1.6 最低检测限确定结果 以信噪比S/N=3拉莫三嗪、卡马西平和单羟奥卡西平的最低检测限分别为0.2 5、0.2 5、0.7 5 g/m L。2.2 方法学应用结果 在本院神经内科及儿科收集的规律服药癫痫患者中,检测结果大多处于正常血药浓度或较低血药浓度,很少出现不良反应(高于正常值)。当测得患者血药浓度低于或者超出治疗药物浓度时,告知临床医生改变用药策略,使得血药浓度回归到药物浓度治疗窗范围。下面举例说明利用本文建立的方法监测血药浓度的例子。某癫痫患者,男,1 6岁,长期服用抗癫痫类药物拉莫三嗪,2 0 2 0年1 0月8日检测血药浓度为5.1 9 g/m L,降低服药剂量后2 0 2 1年1月9日血药浓度达到4.2 1 g/m L,仍然控制在有效治疗浓度范围内,通过本文建立的方法对患者血药浓度的监测使医生和患者掌握血药浓度,使患者在服用较少剂量药物下仍达到有效治疗浓度范围,控制癫痫发作的同时,减少了不良反应。某癫痫患者,女,2 8岁,长期服用癫痫类药物拉莫三嗪(有效血药浓度范围为31 5 g/m L),2 0 2 1年1 0月8日检测血药浓度为9.8 1 g/m L(正常高值),降低服药剂量后2 0 2 1年1 1月1 1日血药浓度达到8.4 3 g/m L,再次降低服药剂量后2 0 2 1年1 2月1 6日血药浓度达到了6.4 0 g/m L,仍然控制在有效治疗浓度范围内。见表2。表2 1 8 2例服用拉莫三嗪、卡马西平及奥卡西平患者血药浓度监测结果(g/m L)用药方案n拉莫三嗪卡马西平单羟奥卡西平拉莫三嗪1 0 10.3 51 8.2 7-卡马西平5 6-1.3 41 5.1 1-单羟奥卡西平1 4-8.4 94 0.7 4拉莫三嗪+卡马西平61.2 31 1.4 81.5 89.6 4-拉莫三嗪+单羟奥卡西平51.1 41 0.4 7-7.9 72 8.7 7卡马西平+单羟奥卡西平0-拉莫三嗪+卡马西平+单羟奥卡西平0-注:-为未服用该药,未检测该药浓度。3 讨 论目前监测拉莫三嗪、卡马西平和单羟奥卡西平血药浓度的方法有高效液相色谱(H P L C)法、荧光偏振免疫(F P I A)法5。F P I A法需使用试剂盒,且我国常用的试剂盒为国外进口,有效期短,对于患者不多的医院,成本相对较高。笔者参考文献6-7 建立了简便、准确的高效液相色谱外标法,可同时测定拉莫三嗪、卡马西平和单羟奥卡西平的血药浓度,具有成本低、选择性好、灵敏度高、精密度高等优点,适合于临床常规监测这3种药物的血药浓度。临床应用拉莫三嗪、卡马西平及奥卡西平治疗癫痫患者时常联合用药,其血药浓度与临床疗效相关,对其进行血药浓度监测对于提高疗效和减少不良反应有重要意义,也应在临床中推荐使用。此方法在本院经历了两年多的临床应用,当测得患者血药浓度低于或者超出治疗药物浓度时,告知临床医生改变用药策略,使得血药浓度回归到药物浓度治疗窗范围,实践证明本文提供的方法可行。(下转第4 8 9页)384检验医学与临床2 0 2 3年2月第2 0卷第4期 L a b M e d C l i n,F e b r u a r y 2 0 2 3,V o l.2 0,N o.44 1(4):2 2 2-2 2 6.2 0李世荣,苏园园,黄颖珊.H e p s i n及HMG B-1在宫颈癌组织中的表达与侵袭性相关性分析J.河北医学,2 0 1 6,2 2(5):7 7 4-7 7 6.2 1李玛俊.宫颈癌组织中HMG B-1、P C NA的表达变化特征分析J.临床研究,2 0 1 8,2 6(1 0):1 7-1 8.2 2胡冬至.HMG A 1在宫颈癌和宫颈上皮内瘤变中的表达及其意义D.长沙:中南大学,2 0 0 9.2 3郝权,杜晓琴,付欣,等.高迁移率族蛋白1及晚期糖基化终产物受体在宫颈鳞状细胞癌中的表达及临床意义J.中华肿瘤杂志,2 0 0 8,3 0(4):2 9 2-2 9 5.2 4官世红.宫颈癌组织中HMG B-1、P C NA的表达变化及临床意义研究J.大医生,2 0 2 0,5(1 5):1 1 6-1 1 8.2 5高晗,宋晓玲,蔡鸿宁,等.高迁移率族蛋白的表达与子宫颈鳞状细胞癌的关系J.中国妇产科临床杂志,2 0 1 6,1 7(2):1 6 4-1 6 6.2 6付 欣,杜 晓 琴,郝 权.宫 颈 鳞 癌 组 织 高 迁 移 率 族 蛋 白HMG B 1表达及其临床意义的研究J.中华肿瘤防治杂志,2 0 0 8,1 5(5):3 5 7-3 5 9.2 7付方方.HMG A 1对宫颈癌增殖和淋巴结转移的作用及相关机制研究D.武汉:华中科技大学,2 0 1 8.2 8丁文清.高迁移率族蛋白B 1和增殖细胞核抗原在宫颈癌组织中的表达及其相关因素分析J.中国 当代 医 药,2 0 1 6,2 3(5):5 0-5 2.2 9X U Y,CHE N Z,Z HANG G,e t a l.HMG B(1)o v e r e x-p r e s s i o n c o r r e l a t e s w i t h p o o r p r o g n o s i s i n e a r l y-s t a g e s q u a m o u s c e r v i c a l c a n c e rJ.T u m o r B i o l,2 0 1 5,3 6(1 1):9 0 3 9-9 0 4 7.3 0P AN G X A,Z HAN G Y,Z HAN G S L.H i g h-m o b i l i t y g r o u p b o x 1 i s o v e r e x p r e s s e d i n c e r v i c a l c a r c i n o m a a n d p r o m o t e s c e l l i n v a s i o n a n d m i g r a t i o n i n v i t r oJ.O n c o l o-g y R e p o r t s,2 0 1 7,3 7(2):8 3 1-8 4 0.3 1CHE NG H,WAN G W,Z HAN G Y,e t a l.E x p r e s s i o n l e v-e l s a n d c l i n i c a l s i g n i f i c a n c e o f h e p s i n a n d HMG B 1 p r o-t e i n s i n c e r v i c a l c a r c i n o m aJ.O n c o l L e t t,2 0 1 7,1 4(1):1 5 9-1 6 4.3 2G OO DW I N G H,S AN D E R S C,J OHN S E W.A n e w g r o u p o f c h r o m a t i n-a s s o c i a t e d p r o t e i n s w i t h a h i g h c o n-t e n t o f a c i d i c a n d b a s i c a m i n o a c i d sJ.E u r J B i o c h e m,1 9 7 3,3 8(1):1 4-1 9.3 3R E A G C M,C A R Y P D,C R AN E-R O B I N S ON C,e t a l.S o l u t i o n s t r u c t u r e o f a D NA-b i n d i n g d o m a i n f r o m HMG 1J.N u c l e i c A c i d s R e s,1 9 9 3,2 1(1 5):3 4 2 7-3 4 3 6.3 4S T R O S M,S TOK R OVA J,THOMA S J O.D NA l o o p i n g b y t h e HMG-b o x d o m a i n s o f HMG 1 a n d m o d u l a t i o n o f D NA b i n d i n g b y t h e a c i d i c C-t e r m i n a l d o m a i nJ.N u c l e i c A c i d s R e s,1 9 9 4,2 2(6):1 0 4 4-1 0 5 1.3 5HANAHAN D,WE I N B E R G R A.H a l l m a r k s o f c a n c e r:t h e n e x t g e n e r a t i o nJ.C e l l,2 0 1 1,1 4 4(5):6 4 6-6 7 4.3 6P O S E R I,G O L O B M,B U E T T N E R R,e t a l.U p r e g u l a-t i o n o f HMG 1 l e a d s t o m e l a n o m a i n h i b i t o r y a c t i v i t y e x-p r e s s i o n i n m a l i g n a n t m e l a n o m a c e l l s a n d c o n t r i b u t e s t o t h e i r m a l i g n a n c y p h e n o t y p eJ.M o l C e l l B i o l,2 0 0 3,2 3(8):2 9 9 1-2 9 9 8.3 7朱芳,吴佳捷.高迁移率族蛋白B 1对宫颈癌细胞化学治疗敏感性的影响及其机制J.中南大学学报(医学版),2 0 1 8,4 3(1):1 4-2 1.(收稿日期:2 0 2 2-0 5-3 1 修回日期:2 0 2 2-1 0-1 0)(上接第4 8 3页)本研究方法能够在短时间内同时测定拉莫三嗪、卡马西平和单羟奥卡西平的血药浓度,色谱峰分离度好,无内源性杂质干扰,分析快速、准确、简便,且样品处理简单,适用于临床血药浓度的检测和药物代谢动力学的研究。本院所收集的癫痫患者虽没有3种药物同时服用者,但所建立的方法可大大缩短不同药物血药浓度监测中前期冲洗柱子所用时间;此外,本方法为高效液相色谱外标法,检测准确、方便,且样本处理过程相对简便,为日常工作带来方便。参考文献1 徐善森,张媞,周敬凯,等.高效液相色谱法测定人血浆中拉莫三嗪、奥卡西平及其代谢物浓度J.中国临床药理学杂志,2 0 1 5,3 1(1 2):1 1 7 6-1 1 7 9.2 GA L ANO P O L OU A S,B U C KMAN S T E R P S,S T A L E Y K J,e t a l.I d e n t i f i c a t i o n o f n e w e p i l e p s y t r e a t m e n t s:i s-s u e s i n p r e c l i n i c a l m e t h o d o l o g yJ.E p i l e p s i a,2 0 0 2,5 3(3):5 7 1-5 8 2.3 F L E S CH G.O v e r v i e w o f t h e c l i n i c a l p h a r m a c o k i n e t i c s o f o x c a r b a z e p i n eJ.C l i n D r u g I n v e s t i g,2 0 0 4,2 4(4):1 8 5-2 0 3.4 P O D E L L M.A n t i e p i l e p t i c d r u g t h e r a p y a n d m o n i t o r i n gJ.T o p C o m p a n i o n A n i m M e d,2 0 1 3,2 8(2):5 9-6 6.5 朱艺芳,华雯妍,张全英.高效液相色谱-质谱联用法测定人血浆中拉莫三嗪的浓度研究J.中国临床药理学杂志,2 0 1 5,3 1(2 1):2 1 3 7-2 1 3 9.6 王强,库丽.反相高效液相色谱外标法测定卡马西平和茶碱的血药浓度J.中国药业,2 0 1 2,2 1(1 8):3 5-3 6.7 张颖.特殊类型癫痫患者1 2 0例应用拉莫三嗪的疗效分析J.中南医学科学杂志,2 0 1 6,4 4(3):3 4 1-3 4 4.(收稿日期:2 0 2 2-0 5-0 4 修回日期:2 0 2 2-1 0-2 0)984检验医学与临床2 0 2 3年2月第2 0卷第4期 L a b M e d C l i n,F e b r u a r y 2 0 2 3,V o l.2 0,N o.4