年产15000吨基因重组纤维素酶系列产品项目建设可行性研究报告.pdf

一、项目建设的意义和必要性1、国内外现状及技术发展趋势20世纪70年代以来，市场这只“看不见的手”使传统的工业文明达到了鼎 盛时期。工业化在创造传统工业文明的同时，也对现代经济社会发展的生态基础 造成了根本性的破坏，资源、环境和生态危机日益严重，其直接原因是18世纪以 来造成人与自然尖锐对立的非持续的工业生产技术，其本质在于单纯的市场调节 已无力减少技术发展的边际外部费用递增趋势。生物技术革命将促使有害生态环境的技术向无害化并能保护生态环境的方 向发展，从而引起了社会生产技术体系的变化和飞跃。生物技术创新及其产业化,将为人类社会创造新的、更高水平的文明开辟了广阔的空间。运用生物工程技术,将使经济发展投入的资源少，利用率高，产出的产品或服务多，废弃物少，因此,人类将对生物工程技术产品的需求也将不断增加，生物技术在产业结构调整中的 作用也将不断提高，生物工程技术创新将日益被重视，生物技术产品的市场将越 来越广阔。生物酶制剂作为现代工业不可或缺的催化剂，主要技术一直为西方发达国家 所垄断，尤其是高活力的纤维素酶，基因重组工程菌株一直被丹麦诺维信和美国 杰能科等少数西方发达国家的企业所垄断，我国迄今为止尚无使用基因重组工程 菌株进行产业化生产的企业。构建具有自主知识产权的基因重组纤维素酶工程菌 株，生产高活力、热稳定性好的纤维素酶是目前我国酶制剂行业的发展方向，因 此，国务院办公厅颁发生物产业发展“十一五”规划（国办发200723号）明确强调支持纤维素酶和半纤维素酶基因工程菌株技术开发及产业化应用，也是 国家科技部科技支撑计划“生物技术产品中试与规模化生产配套技术与工艺的研 究与示范”重点支持项目。2、基因重组纤维素酶项目对相关产业发展的作用与影响2.1 提升酶制剂行业整体水平由于该项目是我国酶制剂行业第一个采用具有自主知识产权的工程菌株进 5行产业化生产的项目，因此，对提高我国酶制剂行业和国外企业的竞争能力，提 升行业整体水平具有积极意义。2.2 提高用户产品质量、降低生产成本采用该项目产品，对提高我国纺织行业、饲料行业、中药行业产品质量，降低生产成本，增强产品的市场竞争能力具有重要作用。3、该 项目对关联产业的影响3.1 促进非粮燃料酒精尽快实现产业化，化解能源危机,保障粮食安全近年来，由于能源紧缺和技术手段的缺乏，我国不得不以粮食作为原料生 产燃料酒精，但是由于保障粮食安全的需要，发展非粮燃料酒精是现阶段解决能 源短缺的必由之路。秸秆燃料酒精的产业化生产，必须使用纤维素酶，因此，该 项目的产业化是非粮燃料酒精产业化生产的关键因素之一，非粮燃料酒精的产业 化对缓解能源危机、保障粮食安全具有重要的战略意义。3.2 推动农业产业结构的调整该项目生产的主要原材料是秸秆，由于原料在产地必须进行初发酵，因此，在农村将产生新的初发酵行业，同时，基因重组纤维素酶面市后，在农村还将产 生以纤维素酶作为催化剂，生产秸秆糖化饲料的发酵企业。因此，该项目对地方 农业产业结构调整，加快社会主义新农村建设，拉动农民致富，加快农村小康社 会进程具有积极意义。3.3推动地方经济的发展吉林市地处边疆近海省，自然环境优越，是我国最具魅力的城市之一，是 福布斯排行榜评价最适合发展工业的城市,是吉林省玉米,水稻的主要产区之一。但是，吉林市经济发展不平衡，缺少生物工程高新技术项目。引进生物工程高新 技术企业，扶持地方农业产业化龙头项目是吉林市经济发展的重大举措之一，因 此，该项目成为吉林市政府和吉林高新技术产业开发区重点招商引资项目。3.4有利于资源再利用、发展循环经济、提高资源经济价值玉米及其它粮食秸秆多年以来一直作为废弃物或燃料，其经济价值几乎趋于 零。基因重组纤维素酶项目采用的主要原料是玉米秸秆。这一资源是可再生资源，经过粗加工，每吨玉米秸秆价格可以达到600900元，而制成纤维素酶，以粗 加工的秸秆为基数，每吨秸秆产生的价值可提升十倍左右，提高了资源利用率，6提升了资源的经济价值。4、市场分析该项目产品的主要应用领域为饲料、麻棉纺织、制药、生物发酵等行业，该 项目产品是上述行业产品生产过程中不可或缺的添加剂。据不完全统计，国内市场纤维素酶年需求大约12万吨以上，05年至06年 该类产品年需求增幅为38%；国际市场年需求大约40万吨，主要集中在欧美地 区，占国际市场总消耗量的70%,而且需求量正在以每年8%的速度增长。此外，除燃料酒精行业外，用户直接使用的是复合酶，纤维素酶在复合酶中添加比例一 般为80%左右，因此，纤维素酶市场需求量的统计一般以复合酶用量为依据。复合酶年用量统计如下（详见附件）：4.1 饲料行业：我国年产饲料1亿吨左右，按每吨饲料添加0.5公斤复合酶 计算，年复合酶用量约为5万吨左右，其中纤维素酶添加量为4万吨左右。4.2 麻棉纺织行业：我国洗涤复合酶年用量2万吨左右，其中纤维素酶添加 量为1.6万吨左右。4.3 啤酒行业：我国年产啤酒3500万吨左右，需大麦或小麦160万吨，按每 吨添加1.5公斤计算，啤酒复合酶年用量2.4万吨左右，其中纤维素酶添加量为 2万吨左右。4.4 燃料酒精行业：该行业为纤维素酶潜在的巨大市场。目前我国年产燃料 酒精160万吨，预计2020年年产量将达到800900万吨。纤维酶是生产非粮燃 料酒精必须使用的催化剂，按每6吨原料生产1吨燃料酒精计算，预计2020年，秸秆等非粮原料年用量最少4800万吨，纤维素酶投料比按每吨原料3%。计算，年需求量将达到14万吨左右。4.5产品销售酶制剂生产厂家一般不直接面对终端用户，只面对销售代理商。因此，我公 司现阶段只向相关代理商销售产品并已签订了意向协议，相关情况如下：国内销售：我公司已经和最大的销售商夏盛集团签订了意向销售合同，夏 盛集团还出具了产品包销承诺书及该公司和用户签订的销售合同及供货计划。产品出口：我公司正在和杰能科公司、嘉吉公司进行接洽，公司经营副总 曾任杰能科公司技术负责人，熟悉国外市场，产品出口前景广阔。75、与国家高技术产业化专项总体思路、原则、目标等关联情况该项目属于生物技术类，是国务院办公厅生物产业发展“十一五”规 划（国办发200723号）微生物技术专项重点支持项目；是国家科技部科技支 撑计划“生物技术产品中试与规模化生产配套技术与工艺的研究与示范”重点支 持项目；该项目2007年已经列入吉林省科技发展计划，分别被评为重大和重点 项目并获得省长基金支持；该项目是地方农业产业化龙头项目，是国债资金重点 支持的项目。二、项目技术基础1、项目成果来源及知识产权情况1.1 科大公司与中国科技大学易元生物技术有限公司合作，取得了基因重 组纤维素酶原始菌株构建技术和菌株的使用权（详见附件专利的专有技术使用 合同）。1.2 由科大公司提供原始菌株、菌株构建技术及工艺方案，与吉林农业大 学合作，取得了基因重组纤维素酶第二代工程菌株及菌株构建技术的所有权（详 见附件技术合同）。2、已完成的研究开发工作及中试情况和鉴定年限2.1 本项目已完成基因重组纤维素酶工程菌株构建，该菌株现保存于吉林农 业大学食品科学与工程学院实验室深冻冰箱中。2.2 2008年初已经在吉林农业大学完成了中试，中试结果与实验室试验结 果一致（详见吉林农业大学生化实验室检测报告）。2.3 中试及小规模生产样品已交付用户使用，用户已出具使用报告（详见宁 夏夏盛果汁果酒酶有限公司传真函）。2.4科大公司技术专家已经针对基因重组纤维素酶生产工艺条件开发了连 续发酵等生产工艺。止匕外，公司技术专家有十年以上纤维素酶生产经验，已经掌 握了成熟的纤维素酶生产工艺，因此，可以实现产业化生产。2.5公司专家已经设计了纤维素酶系列产品生产线，主体设备及内部构件和 管路连接已经完成。配套设备及GM P装饰工程完工后即可投入生产。82.6必要的说明。纤维素酶工程菌株的构建采用的是国际前沿的生物工程技 术及基因打靶技术，但是，酶制剂生产工艺是公知技术。止匕外，生产过程的发酵 条件优于实验室条件，因此，只要中试设定条件与生产工艺条件一致，那么，所 生产出来的产品性能将优于中试。3、技术或工艺特点以及与现有技术或工艺比较所具有的优势3.1技术原理3.1.1纤维素酶自然界中纤维素的降解需要内切葡聚糖酶和外切葡聚糖酶共同作用。纤维素 降解过程首先被外切纤维素酶的CBD吸附到不溶性纤维素表面，使结晶结构的纤 维素长分子链开裂，聚集结构解聚，长链分子末端部分发生游离从而为纤维素水 解酶类的作用提高了可及性和反应性，从而使纤维素易于水化；之后内切酶作用 于经外切活化的纤维素，分解其B-1,4键，产生纤维二糖、三糖等短链低聚糖。在内切葡聚糖酶、外切葡聚糖酶和B-1,4葡萄糖甘酶的协同作用下，纤维素的 BT,4糖昔键逐步水解，形成纤维寡糖和葡萄糖。其催化机理与溶菌酶相似，糖甘配基的脱去涉及2个保守竣基氨基酸分别作为质子供体和亲核试剂执行酸 碱催化的双置换反应；谷氨酸位于细菌和真菌CBH,EG及葡萄糖甘酶的活性位点。协同作用其作用顺序不是绝对按各酶的功能也不是简单固定的。CBH和EG都能 引起纤维素的分散和脱纤化，因此纤维素的结晶结构被打乱导致变形，使纤维素 酶能深入纤维素分子界面之间，从而使纤维素孔壁、腔壁和微裂隙壁的压力增大，水分子的介入又使纤维素分子之间的氢键被破坏，产生部分可溶性的纤维的微结 晶，利于进一步降解。3.1.2基因的同源重组技术基因的同源重组技术(homologous recombination),又称基因打靶(gene targeting),指外源D NA与受体细胞染色体D NA上的同源序列之间发生重组并整 合在预定位点上，从而改变细胞遗传特性的方法。根据重组后靶基因的特征可以分为两种类型：由于外源序列的引入或部分取代，靶基因原有结构被破坏，此即为基因破 坏或剔除；靶基因的全部序列为新的基因所取代。这一新兴技术已被证明为目前能精 确的修饰基因组的最有效方法，从理论上讲它将使人类能按设计对极其复杂的细 胞基因组结构进行定点、定量的改变，从而定向的改变细胞的遗传结构和特征。同源重组技术的特点为：同源重组技术能把外源基因引入染色体D NA的特定片段上，在设计合理的 情况下，同源重组技术可对宿主细胞染色体基因进行精细的改造；同源重组后被击中的基因或新引入的基因随染色体D NA的复制而稳定复 制。3.2技术特点或创新点3.2.1本项目由于在CBH H上游加入不受葡萄糖抑制的真核启动子PKI A,使CBH H不再受到培养基中葡萄糖影响，获得高效表达，从而促进其他纤维素 酶基因的协同表达，较大幅度提高菌株在发酵过程中的产纤维素酶的能力。3.2.2几乎所有已克隆的纤维素酶基因都已在大肠杆菌中得到表达。但是这 9一体系表达率低，产生的酶多数不能分泌到胞外。本项目成果使纤维素酶在原木 霉宿主菌中获得稳定高效表达，可以用于大规模培养及工业化生产。3.2.3本项目对基因工程菌株的培养及产酶条件进行了摸索，尝试进行液体 培养基深层发酵，通过分段控制pH值、温度和溶解氧进行发酵，发酵72小时左 右酶活达到最高，为工业化大规模生产纤维素酶提供了参考。3.3技术研制报告纤维素酶属诱导型酶类其多个酶组分的表达调控是一个非常复杂的过程，其中CBH II具有关键的作用。据报道(Seiboth et al.1997),当CBH II基因 缺失时，会影响纤维素酶系其它酶的表达，而缺失CBHL EG I H等基因时，只 影响自身的表达。另有研究表明CBH H是木霉纤维素酶系统中最先表达的酶，其产物进一步诱导纤维素酶其他酶如CBH I,EG等酶基因的表达。而CBH H基 因的表达又受到葡萄糖的抑制(Sternberg&M andel,1979),因此要提高木霉的 纤维素酶的产酶能力就可以通过木霉CBH H基因克隆，将其构建在不受葡萄糖 抑制的真核启动子下游如PKL cD NAl等启动子，使CBHH不再受到培养基中葡 萄糖影响而得到高效表达，从而促进其他纤维素酶基因的协同表达，较大幅度提 高菌株在发酵过程中的产纤维素酶的能力。由于木霉菌属于半知菌，缺乏有性阶段，对其杂交育种有一定困难。原生质 体育种是一种非常有效的方法，木霉的转化系统与其他真菌转化系统相似，多为 使用细菌来源的质粒构建的载体，在聚乙二醇(PEG),山梨醇和氯化钙作用下把 目的基因或D NA片段引入受体原生质体，经过再生和选择获得转化子。选用一 个稳定的选择标记对建立木霉转化系统是非常必要的，木霉转化的选择标记包括 营养缺陷型标记和显性标记两类。前者常用的如PyrG或Pyr-4,后者常用的有 HmR,benA,和 amdso本成果采用先进的分子生物学技术，构建成功高活力纤维素酶工程菌体，超 过国内目前使用的生产菌体的产酶能力，达到了国际先进水平。3.3.1供试菌种 绿色木霉G104中国科学技术大学生命科学学院基因工程 实验室保藏。3.3.2 启动子选择 PKI A(0.4Kb)o3.3.3载体pU T2Kb)中国科学技术大学生命科学学院基因工程实验 室构建，包含Ben A显性标记。3.3.4培养基及培养条件 麦芽汁液体培养基pH 5.0,30,220r/min培 养 24ho3.3.5 试剂 pGEM-T-easy-vector Kit 购自 Promega 公司，Taq plus D NA polymerase 购自上海生工公司，限制性内切酶购自Promega公司。3.3.6真菌总D NA的提取离心收集菌体，加入400口 1 D NA提取液(50mmol/L Tris-HCl,PH9.0；12.5mmol/L ED TA,pH8.0)；充分振荡后加入100p 1 10%SD S及300p 1氯化革振荡混匀，50c保温lh,每隔10min振荡一次；加入50口 1 3mol/L醋酸钠，离心，收集上清，用异丙醇沉淀得到总D NA。3.3.7 PCR 扩增 CBH II 序列根据已知绿色木霉cD NA序列，设计PCR引物，由上海生工公司合成；PCR扩增：用标准PCR反应体系进行PCR反应。PCR循环条件：预变性94c 3min,94 变性50s,51 复性50s,72延伸 10lmin20s,35个循环后再延伸8nlin。3.3.8重组质粒载体pU T-CBH的构建用Gel extraction试剂盒从胶中回收PCR产物，得到约1.6Kb的CBH II 片段，将其用Klenow酶补平后回收纯化。将PU T质粒载体在多克隆位点用EcoR I限制性内切酶消化，产生的3 粘性突出末端用Klenow酶补平并将其回收纯化，将上述两个片段以合适的比例 建立反应体系，转化大肠杆菌D H5a,获得重组质粒载体pU T-CBH。对筛选到的重 组质粒用内切酶和PCR进行鉴定分析，所扩增的片段含有完整的CBH H序列。CBH H(1.6KB)3.3.9重组质粒载体PU T-CE的构建将pU T-CBH质粒载体在用EcoR V限制性内切酶消化，产生的3粘性突出 末端用Klenow酶补平并将其回收纯化，与PKI A片段以合适的比例建立反应体 系，转化大肠杆菌D H5a,获得具有PKI A启动子的重组质粒载体pU T-CE。11CBH HEcoR VpUT-CBH10.8KbBenAPKIA3.3.10 pU T-CE重组质粒的转化及重组菌的筛选将构建的重组质粒电转化宿主菌G104,利用Ben A显性标记进行初筛；而 后进一步采用液体摇瓶培养检测发酵液复筛，获得一株表达量较高的重组菌，命 名为 G104-CE。3.3.11液体培养基深层发酵在10 L的通气机械搅拌发酵罐中，接种量为10%,发酵过程采取分段控制 pH值、温度和溶解氧的工艺，发酵72h左右酶活力最高，实验室样品酶活力达 到：液体 3200u/ml。3.4 技术的先进性蛋白质基因同源重组技术是国家863计划项目，863计划项目在技术上均为 国际领先或先进技术。基因重组纤维素酶菌株构建是863计划蛋白质基因重组技 术的延续。本项目采用的基因打靶技术是国际先进技术，纤维素酶的技术指标中 热稳定性高于国外同类产品水平。3.5 产品的技术性能、生产成本、销售价格优势12由于本项目在菌株改造上采用了世界先进的基因重组技术，所生产的纤维素酶在技术及其它方面具有以下优势：3.5.1产品技术性能优势第一、高活力。诺威信公司的同类产品酶活为2800u/ml,该公司产品的发酵液活力可达3200u/ml；第二、热稳定性。美国杰能克公司产品的热稳定性在55c以下，该公司产品的热稳定性可达85O3.5.2生产成本优势据了解，国外厂家2万活力纤维素酶生产成本在12000元/吨以上，该公司 的生产成本可控制在8000元/吨以下。3.5.4价格优势国外同类产品市场售价为4.6万元/吨，可研及本报告中该公司产品出厂价为液态酶1.4万元/吨，固态酶1.5万元/吨。4、该重大关键技术的突破对行业技术进步的重要意义和作用4.1 提高酶制剂行业整体水平。该项目是我国第一个采用有自主知识产权 的基因重组工程菌株进行产业化生产的项目，对提升我国酶制剂行业总体水平，提高我国酶制剂行业和国外企业的竞争能力具有积极的意义。4.2基因重组纤维素酶菌株构建技术的成熟将对耐高温糖化酶菌株构建及 其它酶制剂的基因重组具有借鉴意义。4.3采用具有自主知识产权的工程菌株进行产业化生产将对我国酶制剂行 业的自主创新具有积极的示范作用。三、项目建设方案1、建设规模根据吉林市的资源状况、自然环境和市场调查情况，结合生产实际情况、建 厂条件、资金情况、原辅材料供应等各种因素，该项目纤维素酶生产规模确定为年产15000吨。2、建设的主要内容2.1项目建设组成表序建(构)筑物名称建筑面积(m2)层数备注1原料处理问59242层2生产综合楼37494新建制种间发酵车间干躁车间提取精制车间133包装车间90643-4层4成品库90642层5机（电、仪）修车间1501新建6污水处理站601新建7锅炉房4001新建8车库3001新建9原辅材料库59212层10地中衡661新建11蓄水池800m3新建12水处理站100m3新建13变电室2001T13新建14综合办公楼325442层15研发中心550043-4层16中试中心118443-4层17收发室201新建18厂区道路11501新建19厂区围墙700m1新建20电动大门2扇1新建21厂区绿化22001新建2.2产品方案序号名 称规格年产量备注1纤维素酶粉吨100002纤维素酶液吨50002.3产品规格及质量标准纤维素酶产品质量标准表项目液体剂型固体剂型食品级工业级b食品级工业级b总酶活力“u/g 或 u/mLFPA300CM CA-D NS2000CM CA-VI S500pH(25)4.(T7.0-a食品级产品也可用作饲料添加剂.用作饲料添加剂的纤维素酶制剂还应符合其 他相关标准法规的要求b工业级产品不得用于食品工业及饲料添加剂（食用酒精和蒸镭酒类除外）.c可根据需要任意标注一种酶活.14纤维素酶的卫生指标2.4卫生标准项目液体剂型固体剂型重金属（PA Pb计），mg/kg食品级工业级食品级.工业级铅，mg/kg3030碑，mg/kg W55菌落总数,cfu/g W5X10.5X10.大肠菌群,M PN/t W3X1033X103沙门氏菌（25g样）不得检出不得险出a食品级产品也可用作饲料添加剂.用作饲料添加剂的纤维素酶制剂还应符合其 他相关标准法规的要求b工业级产品不得用于食品工业及饲料添加剂（食用酒精和蒸储酒类除外）.c可根据需要任意标注一种酶活.3、采用的工艺技术路线与技术特点3.1工艺流程简图肿子制备卜 卜仁级种子培养|原 料处理卜I过 滤bI浓 缩卜|气流干燥|喷雾造粒|I|流化床干燥|粉碎|混粉|3.2生产工艺过程简述由菌种室通过摇瓶机培养出合格种子，然后经一级、二级种子罐培养至种子 成熟后转入发酵罐培养，发酵结束后，将发酵液放入后处理车间回收。3.2.1液体产品发酵液经板框过滤后的滤液进行浓缩至合格后，加入防腐剂进入贮罐冷藏,出厂前检测酶活，合格后包装出厂。3.2.2固体产品一种是发酵液经板框过滤后，滤饼用气流和流化床两步干燥后至水分合格，15经粉碎后，进行混粉至合格酶活后包装入库；另一种是发酵液直接经喷雾干燥、造粒至合格水分和颗粒度，然后混合至合格后包装入库。4、设备选型主要设备选型是在研究和初步确定技术方案的基础上，对所需要的主要设 备、辅助设备之间的能力、设备配套的可靠性、设备成熟性、保证产品质量等诸 多因素进行比选，最终采用招标的形式购置。主要生产设备一览表序号设备名称规格与型号单位数量1主要生产设备1.1原料处理间粉碎机lt/hr台21.2制种间不锈钢纯水设备5t/hr套1不锈钢超净工作台台2摇床台6电子显微镜架2自动酶分析仪台1灭菌设备台2电子分析天平台1培养箱台4干燥箱台3深冻冰箱台1普通冰箱台2全自动PH计台2精密天平台2分光光度计台1水浴锅台1恒温空调机套1液和分析仪11.3发酵车间不锈钢种子罐0.2m：?个2不锈钢种子罐2ma个2不锈钢二级种子罐151T13个2不锈钢玉米浆罐10ms个2不锈钢液氨贮罐10m3个116不锈钢配料罐5ma个2不锈钢絮凝罐50m3个2不锈钢盐析罐50m3个2不锈钢中间罐40m3个1变频调速系统套8不锈钢盐罐5ms个8全自动PH计台10不锈钢发酵罐35ms个4不锈钢发酵罐501n3个2不锈钢发酵罐120nl3个2XS操作系统套1专家诊断系统套11.4干燥车间气流干燥器0.5t/hr套1固体干燥塔0.16t/hr套1喷雾造粒干燥0.5t/hr套11.5提取精制车间不锈钢板框过滤机100ms台8不锈钢混液罐10m3个1不锈钢超滤循环罐201T13个2不锈钢全自动超滤机300m2套6不锈钢浓酹液配方罐151T13个1不锈钢精滤板框40m2台1不锈钢二滤板框601n2台11.6包装车间液体罐装机套2混粉机5m3台3固体包装机台25、主要技术经济指标主要技术经济指标表序号指标名称单位指标备注171建设规模及产品方案t15000a纤维素酶粉t10000CM CA-D NS 2000b纤维素酶液t5000CM CA-D NS 20002年工作日d3303生产班次班34总定员人1505主要原材料a粗加工桔杆t45000b玉米淀粉t3000c玉米t7500d款皮t7500e其它辅料t3525f淀粉酶t6006燃料动力消耗a煤t14000b水m3300000c电万 kW,h11507建筑面积、占地面积a总占地面积m29176b建筑皿积m2159588年运输量t/a71520a运进t/a41520b运出t/a300009总资金万元12000.10a建设投资万元8500.46b流动资金万元3499.6410资金来源a企业自有资金万元5997.92b申请银行长期资金贷款万元3499.94申请银行流动资金贷款万元2502.2411销售收入万元22000正常年份含税12年总成本万元12236.64正常年份含税13年利润总额万元6571.34正常年份14年净利润万元4928.51正常年份15财务评价指标18a投资利润率%54.76正常年份b投资利税率%68.30正常年份c总投资收益率%52.04生产期平均d资本金净利润率%70.03正常年份e全员劳动生产率万元/人-年151.67现价f全部投资财务内部收益率%88.31所得税后g投资回收期a3.98所得税后6、建设地点6.1厂区位置吉林高新技术开发区三号路151号6.2 厂址土地权属类别及占地面积本项目厂址土地权属为国家所有，由吉林市科大实用技术开发有限责任公司 向吉林市政府征用。6.3 土地利用现状项目征地9164.81平方米土地，是当地政府规划的工业用地。6.4 厂区建设条件6.4.1地理位置吉林高新技术产业开发区依山傍水，环境优美，三面临靠松花江，地势平坦，气候宜人，距松花湖风景区仅14公里，与市体育场、冰上运动中心和江北、江 南、龙潭山三大公园以及亚洲距城区最近的滑雪场一北大湖国际滑雪场毗邻。吉 林高新区属市区范围，有多条公交线路贯穿，并与市中心主干道相连。距火车站、长途汽车站最远的仅3公里，最近的仅一桥之隔。距吉林飞机场15公里，机场 可以起落各类大、中型客机，国内各主要大中城市均有航班。区内水、电供应充 足，通讯设施完备，医疗、教育条件优越，高等院校、科研机构密集，智力、人 力资源丰富。6.4.2工程地质、水文地质条件吉林市地处松花江I级阶地，地势平坦，海拔高度为181.5-183.5米。地层 结构自上而下分别由耕土、粉土、粉质粘土（fo=135kPa）、中粗砂（埋深4.5-5.5 米，fo=160-180kPa）、卵砾石（埋深5.5-8.0米，fo=600kPa）及花岗岩（埋深1927-29米）构成。场区场地土类型为中硬，建筑场地类型为II类。地震基本烈 度为7度。近50年无灾害性地质现象发生，场地稳定，适合作为重要工业建筑 场地。根据开发区抗震防灾规划，设计设防烈度为7度。根据吉林市水利水电勘测设计研究院的报告，松花江吉林高新技术开发区段 多年平均流量为4881n3/s,河道平均坡度为0.341%。，百年一遇设计洪峰流量为 Q=8300ms/s,百年一遇洪水位为182.10米，最低枯水位为176.27米，冬季由于 丰满电厂发电泄流，该江段很少结冰。地下水类型为孔隙潜水，埋深7.5米左右。6.4.3自然、气象条件吉林市的气候类型属于温带大陆性季风气候，四季分明。春季少雨干燥，夏 季温热多雨，秋季凉爽多晴，冬季漫长而寒冷。全区年平均气温3-5,气温 受地形影响，由西、西北向东、东南气温逐渐降低。一月份平均气温最低，一般 在零下18-20,七月平均气温最高，一般在21-23,极端最高气温36.6。山区无霜期120天，平原区可达130-140天。全年降雨量约700毫米左右。全区 日照时数2400-2600小时，全年总辐射量为1150千卡/平方毫米。6.4.4交通运输条件铁路吉林市区内有国家干线铁路长图线及九站联络线通过，并有吉林铁路 枢纽的两个中间站（九站、新九站）位于吉林市区内。吉林市区内现有铁路专用线约24.5公里，目前区内现有吉林燃料乙醇公司、吉 林化纤集团公司等铁路专用线，均在新九站接轨，可满足项目铁路专用线需求。公路现基本实现了“三横两纵”的干路网格局，主干道红线宽度60米，并 与南侧的长一吉一辉高速公路、西侧的吉长北线公路、北侧的吉孤公路、吉林市 城市道路松江北路相连，由此可进入吉林市及全国路网，公路运输条件极佳。机场吉林高新区距长春龙嘉国际机场仅65公里，空中客货运极为便利。6.5厂址及建设条件综合评价厂区地势较平坦，自然环境幽雅，排水状况良好，公路、铁路运输非常方便。厂区周围无工业污染，高压线路和通讯线路皆在厂区旁边经过，厂址选在此处，有利于厂区总体规划，加快建设速度，减少建设投资。该厂址从自然条件、社会 经济条件及其区域代表性等各个方面都适宜发展酶制剂产业，是建设该项目的理 20想地点。吉林高新技术产业开发区享有国家、省、市的各项优惠政策和省级审批权限。开发区实行封闭管理，开放服务的运行管理体制，党工委、管委会对区内党务、行政、经济及社会事物负全责。区内设有管委会办公室、党工委办公室、经济发 展局、招商局、国土资源局、规划建设环保局、财政局等机构。同时还设立了税 务、公安、工商、技术监督、金融、保险等分支机构和办事处。开发区在用人、分配等方面实行按需定岗、按岗定酬、按酬聘人的全新的管理机制。实行统一管 理、一个窗口对外，一个漏斗对内，“一条龙”服务，“一站式”办公，“全天候”服务。7、建设工期和进度安排7.1 2007年8月-9月，完成可行性研究报告的编写、论证及批复工作；7.2勘察设计2007年10月-2008年3月完成初步设计、施工图设计，同时派专业人员进 行设备考察及订购。7.3施工准备与施工进度2008年4月-12月进行土建施工。7.4设备验收、安装、调试及试生产2009年12月完成设备安装及调试，并进行产前准备及原材料采购。7.5人员培训2010年1月-2月进行人员培训7.6项目投产进度2010年3月-5月联合试车。7.7 2010年6月止式生产。项目实施进度表序号时间项目2007 年2008 年2009 年2010 年8-910-121-34-121-22-34-56-89-121-23-56211可行性报告的编写、论证及批复2初步设计，施工图设计3土建施工4设备安装调试5人员培训6联合试车7正式生产8、建设期管理8.1主要建（构）筑物的建筑特征和结构类型主要建（构）筑物明细表序建（构）筑物名称建筑面积（m2）层数备注1原料处理间5924框架2生产综合楼37494框架制种间发酵车间干躁车间提取精制车间3包装车间9064框架4成品库9064框架5机（电、仪）修车间1501砖混6污水处理站601框架7锅炉房4001框架8车库3001砖混9原辅材料库5921框架10地中衡661框架11蓄水池800m3钢混2212水处理站100 m3框架13变电室200m3框架14综合办公楼32544框架15研发中心55004框架16中试中心11844框架17收发室201框架18厂区道路11501混凝土19厂区围墙700m1铁艺20电动大门2扇1不锈钢21厂区绿化220018.2 土建工程设计依据8.2.1建筑设计防火规范（2001年版）8.2.2 工业企业设计卫生标准GBZ 1-20028.2.3 各工艺对土建的要求8.2.4 厂区的综合情况8.3建筑设计生产车间的建筑设计体现高科技含量酶制剂生产行业的建筑特征，美化生 产环境，满足相关行业规范要求，在设计中以技术先进、安全实用、经济美观的 原则，并按照使用性质、生产类别充分考虑建筑对噪声控制、采光、通风、日照、消防、卫生以及其它特殊要求。在满足生产工艺同时严格执行国家现行的有关规 范、标准，并充分考虑与周围建筑的协调，力求建成一个环境优美，又具有时代 特征的新颖的企业形象。8.4结构本着满足生产工艺、安全实用、经济合理、建筑造型符合时代特点的要求，生产厂房拟采用简洁、建筑内部分隔灵活、耐久性好的结构形式。本项目生产主 厂房拟采用框架结构形式，具有施工周期短，造价低等优点。厂区各车间形式是 根据生产工艺和使用功能，结合厂区现状，地势特点布置而成，其布局紧凑、流 程合理、与仓库、包装车间联系方便。8.5结构设计依据8.5.1 基本风压：0.6KN/m28.5.2 基本雪压：0.2KN/m28.5.3 防震裂度：VII度8.5.4 冻结深度：1.7米8.5.5 其它地质详细资料等238.6建设期管理的基本原则8.6.1规范管理。按国家有关工程建设的相关法律、政策、规范，严格设计、严格施工、严格监理。8.6.2节约资金、降低成本。减少不必要的建设内容，在保证生产需要的前 提下，节约资源，降低工程成本，提高经济效益。四、项目投资1、项目总投资估算依据1.1 投资项目可行性研究指南；1.2 国家计委建设项目经济评价方法与参数第二版及第三版；1.3 中国轻工总会轻工业建设项目投资估算办法及轻工业工程设计概算编制办法;1.4 中国轻工总会建设项目经济评价方法轻工行业实施细则;1.5 设备购置费依据厂家报价和现行市场价格估算，引进设备拟从国内的代 理公司购买；1.6建筑工程费依据吉林省建筑工程预算定额和类似建筑工程造价指标 进行估算；1.7 安装及其它工程费，依据轻工业工程设计概算编制方法和地方有关 规定编制；1.8 投资估算主要根据项目建设实际需要，建筑材料、原材料等按市场价格 计算，前期开办费及其他工程费根据实际情况估算；1.9本项目在吉林市高新技术产业开发区新购置土地91761n2,根据高新区相 关规定土地购置费192.70万元；1.10根据建设单位提供的资料研发及专利费为80万元；1.11基本预备费按第一、二部分费用之和的10%列计。1.12涨价预备费按第一、二部分之和的3%估算。2、投资估算2.1 项目总投资估算本项目总投资为12000.10万元，其中建设投资8500.46万元，流动资金3499.64 万元。2.2建设投资构成建设投资8500.46万元,建筑工程费用：设备购置费：安装工程费用：工器具生产家具其它费用：其构成如下：2109.32 万元2732.76 万元396.67万元40.27万元631.70万元基本预备费750.407万元，建设期利息246.05万元。2.3流动资金估算根据分项详细估算法，正常年份需要流动资金3499.64万元。3、投资使用方案 24本项目建设期为三年，建设期第一年主要完成主体建筑工程建设和设备订购，建设期第二年主要完成主体设备安装工程，建设期第三年主要完成配套设备订购、安装工程及装饰工程。计划建设期第一年使用建设投资4000万元；建设期第二年使用建设投资1200.46万元；建设期第三年使用建设投资3300万元;流动资金按生产负荷投入,详见投资计划与资金筹措表。4、资金筹措方案4.1 项目总投资项目总投资来源：科大公司股东自筹 申请农业发展银行贷款12000.10 万元6255.10 万元，占 52.13%5000.00 万元，占 41.67%（其中固定资产贷款3000万元，流动资金贷款2000万元）吉林银行贷款交通银行贷款国家已匹配扶持性资金4.2 项目建设资金 总资金中建设投资 已投入建设资金总额4.3 流动资金总资金中流动资金 来源：科大公司500.00 万元，150.00 万元，95万元,8500.46 万元5800.00 万元3499.64 万元占 4.16%占 1.25%占 0.79%占建设投资62.32%1499.64 万元,占 42.85%申请农业发展银行短期借款 2000.00万元，占57.15%5、项目资本金构成比例5.1项目资本金本项目资本金为6255.10万元。5.2项目资本金构成比例项目资本金为科大公司出资。6、项目资金落实情况6.1 科大公司股东投入已经落实到位公司实收资本已经到位。详见评估报告股东出资余额已经落实到位，详见银行存款证明。6.2 银行贷款5650万元、国家资助95万元已经落实到位。吉林银行500万元贷款已经落实到位，详见贷款合同。交通银行150万元贷款已经落实到位，详见贷款合同。农业发展银行贷款5000万元已经落实到位，详见贷款批复。6.3 国家扶持性资金95万元已经落实到位，详见有关文件。7、已完成建设资金投入该项目已完成建设资金投入5800万元（其中实收资本427万元，吉林银 行贷款500万元，交通银行贷款150万元，国家扶持性资金95万元，余额见明 细表），占建设资金投入总额68.23%。8、申请国债资金理由、申请额度和资金实用方案8.1申请国债资金理由该项目符合国家产业政策，是国家重点支持的项目，项目产业化条件成熟,25技术经济效益显著，社会效益显著，是国债资金重点支持的项目。匹配国债资金 目的是促使项目尽快实现产业化生产，缩短还贷期限，减轻企业财务负担，提高 企业盈利水平。8.2 国债资金申请额度申请国债资金额度：1810.75万元。国债资金占项目总投资比例：15.1%。8.3 国债资金使用方案本次申请国债资金的使用为配套设备及中试中心设备订购，详见下表：配套设备购置表单位：万元序号设备名称规格型 号单位数量单价（万元）投资 额（万元）小计、已完成的配套设备1不锈钢管线（含泵、管 件）1502不锈钢阀门及专用阀 门个600653超滤机台32575.00704基本空压机系统套11818185沸腾干燥设备0.5T/H套212.5256固体干燥塔附属设备11.91.97空气总过滤器台25.5011.0011.08强力板框压滤机台1111111合计351.9二需完成的设备(-)配套设备1全自动超滤机（分子 筛）套198982发酵设备台11101401103锅炉水处理系统台1554铠装电缆套1150.5150.5（二）自动化控制系统1全自动PH仪梅特勒台120.5662D o控制仪梅特勒台1255603过滤空气流量计台100.808.008.004过滤空气流量计台20.1600.1600.35变频器台102.0020.0020.00（三）干燥1喷雾干燥塔主设备0.5T/H台150.005