水质氨氮的测定纳氏试剂分光光度法.docx

Jenny was compiled in January 2021

水质氨氮的测定纳氏试剂分光光度法

实验三水质氨氮的测定——纳氏试剂分光光度法
仪器和药品：
天平、称量纸、玻璃棒、手套、擦镜纸
可见分光光度计：具20mm比色皿（6只）
比色管：50mL，40支；25mL，40支
移液管：20mL，5支；10、5、1mL各5支
容量瓶：250、500mL和1000ml5个；100mL，10个
烧杯：200mL，5个
量筒100ml，5个
聚乙烯瓶、棕色瓶各5个
加热装置
氢氧化钠、碘化钾、碘化汞、酒石酸钾钠、氯化铵
一、目的和意义
水中的氨氮来源于生活污水中含氮有机物受微生物作用分解产物、某些工业废水以及农田排水。水中氨氮含量与人们的生产和生活有密切的关系，如果水中氨氮浓度过高会造成鱼类死亡，水质变臭，无法达到人们正常饮用和使用的标准。
掌握纳氏试剂光度法测定水中氨氮的原理和方法。
二、方法原理
以游离态的氨或铵离子等形式存在的氨氮与纳氏试剂反应生成淡红棕色络合物，该络合物的吸光度与氨氮含量成正比，于波长420nm处测量吸光度。
水样中含有悬浮物、余氯、钙镁等金属离子、硫化物和有机物时会产生干扰。若样品中存在余氯，可加入适量的硫代硫酸钠溶液去除，用淀粉-碘化钾试纸检验余氯是否除尽。在显色时加入适量的酒石酸钾钠溶液，可消除钙镁等金属离子的干扰。若水样浑浊或有颜色时可用预蒸馏法或絮凝沉淀法处理。
三、溶液配制
1、纳氏试剂【碘化汞-碘化钾-氢氧化钠溶液】
称取16.0g氢氧化钠，溶于50ml水中，冷却至室温。称取7.0g碘化钾和10.0g碘化汞，溶于水中，然后将此溶液在搅拌下，缓慢加入到上述50ml氢氧化钠溶液中，用水稀释至100ml。贮于聚乙烯瓶内，用橡皮塞或聚乙烯盖子盖紧。
2、酒石酸钾钠溶液，ρ=500g/L。
称取50.0g酒石酸钾钠（KNaC4H6O6·4H2O）溶于100ml水中，加热煮沸以驱除氨，充分冷却后稀释至100ml。
3、氨氮标准溶液氯化铵分子量53.46
氨氮标准贮备溶液，ρN=1000mg/L。
称取3.8190g氯化铵（优级纯，在100～105℃干燥2h），溶于水中，移入1000ml容量瓶中，稀释至标线。
氨氮标准工作溶液，ρN=10mg/L。吸取5.00ml氨氮标准贮备溶液于500ml容量瓶中，稀释至刻度。
四、分析步骤
1、校准曲线
在8个25ml比色管中，分别加入0、0.3、0.5、1、2、3、4和5ml氨氮标准工作溶液，其所对应的氨氮含量分别为0、3、5、10、20、30、40和50μg，加水至标线。加入0.5ml酒石酸钾钠溶液，摇匀，再加入纳氏试剂0.5ml，摇匀。放置10min后，在波长420nm下，用20mm比色皿，以水作参比，测量吸光度。
以空白校正后的吸光度为纵坐标，以其对应的氨氮含量（μg）为横坐标，绘制校准曲线。
曲线斜率一般在0.007~0.008之间
2、样品测定
直接取水样25ml，按与校准曲线相同的步骤测量吸光度。
五、结果计算
水中氨氮的质量浓度按式计算：
式中：ρN——水样中氨氮的质量浓度（以N计），mg/L；
As——水样的吸光度；Ab——空白试验的吸光度；
a——校准曲线的截距；
b——校准曲线的斜率；
V——试料体积，ml。