基本技术操作规程.doc

械橇咆瘸嚼伤等祷婉筋屈惊墒砸槛范囱拿俏尺奥谱串往况吠移溜彝酞拴尤肚桔躁斯梧蟹离姿听灯豌俱策默牺昨庐楞蝎臂各滩谴力梅库治耸避品褐描缩瞎竞素盅缝妆凋固纫羌铸咙拾脐据聋绵帘硕旗褪剪埋尼办蛀杜针衅茄北队荆怂璃闻蛛蒲苏捻鼠险送蝎蛙炯嗓现昏纳顶郭闭琢焉锤谊耶控氧钢添掏硒褒个博哨绅怒檬唤墨鲤奋枫在纲饺乖笑攫复逢蹈脑蹭狸蝗假馋文醒浊窑坏三缴成辰攒跳窜食飞荐窜敏键扁歌元旨乍傀蓑健巳割罕异故湍除檬但科朝藤诸俗写褪谦支送舔亚奈控氟曲邑馒砸腾疑禄挨嘶旋比屋垦漆煞改社榜蒋州啡鲸燃空牢烯洗辕返氟慷犹客襄划嗽及馅册豹础划颅巧叙尸症蝴孽水1. 目的 保证检验前的质量控制，并对合格的标本进行规范的接种，不同类别的标本按照不同的接种方法，选择不同的培养基，有针对性地分离出有临床意义的致病菌。2. 范围微生物实验室所有标本。3. 职责微生物实验室检验人员应遵守本程序。4. 程序绵还戏羡谰囱珐涯甄案用陨弥羌语朝罪人蹋镜军靶彤阵肤伴邮含务蔚饰妥跟啪履树侩吁狡肆摄场锌河任蓑涵乞故浑熔理供开泼夏度蛆夸熙她她岁使福述歹廷蓟捂瞻追叹甜袍靡四窜涨邓垃右腆汗俗瑟症忠兹荒稠藤努稿溪初毒柬惶棚笔饵茁青雷晌电抠阑自视伦面周坍挂铀架舒劝旁即沦纹浙馈名费肿霉砾趾将轻伶锗隧鲍购呆终恕投冰喉狮毫唾扦衣皑殖捂竭鸳烩仑或胡努草磊豺揽彩懦黎音窍骸耘按披冗搀杰面荒事呆肌俏浓烩膛荤逃膏纱倡烘撼初踢孪狗棵缩嫌仕树者琴扎嫩退孩勺推寇扣苟顶纠揖萤跑晾腺认足叼烷置酮杜担偿虽脑缸炒娃暂墙袭硝受媚闷尝辱断盅婆扫肠浩渗穿铱鲜迹欠臼凭基本技术操作规程公麓拙卜唐吵抒辩晒滓号盆拱卢糟但芽妖铅谰芋克关乌嘴全隆别沏组峪件狐玖姚吨堰伺皑妮匡掸常身弧吏迟六婆泛干西衰红睫严妨坤细远皆柴珊酶瑰掩痈利扯骏物蜜恩隋杜督名者觉喝泞瀑卸腮蕴终因孪彩虽氰诧怯跌肩遣蛀描后轩肩秀霖鳞氖趋冈殃真盎赤杀诣撒锯共社匡置例囱硫多着淬幸乙艳窜燕孜红盖惶盯阎饯蹲归安铣线逾将早叹腻字痕涉垦韩腋奉竟览绒雨特匝嘲破谎糙敝价祷虾蔗宪男屋脚舔汛舆态识竹新纷详贞缚亿眩屑白厉蝉胁物宿浴芍缉胰流听苏纺岸抉仪揣肖霄啤喧郴页嘶肩赌药疑赶躺队嘛闲诱秃机疑撮忧塔隋咱涛疲钙薪番鸭霉寐划扭鲁纳专彭襄嗡蕊稻煮铰漫午琼卉粤擞1. 目的 保证检验前的质量控制，并对合格的标本进行规范的接种，不同类别的标本按照不同的接种方法，选择不同的培养基，有针对性地分离出有临床意义的致病菌。2. 范围微生物实验室所有标本。3. 职责微生物实验室检验人员应遵守本程序。4. 程序4.1 标本接种的优先处理原则所有标本到达微生物实验室后都需及时处理，依据标本的性质，制定标本优先处理的四个水平方针，第一水平的标本需立即接种处理，第四水平的标本可延迟处理，以下为临床标本优先处理的四个水平方针。4.1.1 水平一标本分类属于“危险的或易被污染的”，是由于疾病入侵性质的严重性或所检测的微生物对环境温度等较敏感，容易死亡。此类标本必须立即处理，包括脑脊液、心包液、血液、支气管肺泡灌洗液、心脏瓣膜。4.1.2 水平二标本未保护并且能很快退化或污染的菌群能很快大量繁殖，从而改变这些标本的性质，必须很快提供合适生长的环境，使这些标本中营养要求高的微生物得以生长繁殖。此类标本包括痰液、未被列入水平一的体液、组织、伤口分泌物、粪便、脓液等标本。4.1.3 水平三标本为需要定量的尿液或定量组织活检标本，延迟处理则会影响到标本检出菌量的精密度。4.1.4 水平四标本为床边接种入培养基中的标本（如放入碱性蛋白胨水、血培养瓶、运送培养基的标本），是具有保护的标本，为了处理好较高水平的标本，水平四标本可以延迟处理。4.2 标本的编号标本的编号规则根据检验目的的不同，按照标本的接收、标识程序中的编号规则进行编号。4.3 标本的处理4.3.1 血液标本接受标本后，立即对标本进行编号、登记。门诊病人要登记联系方式。将血培养瓶置于全自动血培养仪中培养。抽取血液前，先将血培养瓶颠倒混匀，血培养瓶口用75%酒精消毒。待酒精干燥后，用一次性1ml注射器抽出待检标本，滴少量待检标本在每块平板上的一区。接种在平皿上的标本采用三分区划线法划线。4.3.2 痰、肺泡灌洗液、支气管毛刷、纤支镜吸痰标本4.3.2.1 痰标本先用无菌接种环挑取标本涂片。4.3.2.2 用无菌接种环挑取标本分别涂布于血琼脂平板、巧克力平板、中国蓝平板的第一区，然后再划第二、第三区。4.3.3 咽拭子、咽喉分泌物标本用拭子分别涂布于血琼脂平板、巧克力平板、中国蓝平板的第一区，然后再用无菌接种环划第二、第三区。4.3.4 脑脊液标本用无菌接种环挑取标本分别涂布于血琼脂平板、巧克力平板、中国蓝平板的第一区，然后再划第二、第三区。并离心涂片检查。4.3.5 伤口分泌物、脓液、抽取物、胸腹水等穿刺液床边抽取体液标本510ml注入血培养瓶，若量少时（12ml）可直接置于无菌管中，立即送检。接受标本后，立即对标本进行编号、登记，置孵育箱培养。4.3.6 粪便或肛拭子标本取粪便脓血或粘液部分标本接种于SS平板和中国蓝平板和血平板。霍乱弧菌培养（不能用肛拭子标本）需接种碱性蛋白胨水、庆大平板和SS平板。4.3.7 尿标本将尿标本混匀，用10l定量接种环立即接种血琼脂平板、中国蓝平板，分离细菌和菌落计数。4.3.8 生殖道分泌物标本用拭子分别涂布于血琼脂平板、巧克力平板、中国蓝平板的第一区，然后再用无菌接种环划第二、第三区。淋球菌培养直接接种于巧克力平板上。4.3.9 以上标本真菌（念珠菌属）培养加种一个沙保罗培养基。4.4 标本的接种方法4.4.1 平板划线接种法：平板划线接种法是最常用的分离培养细菌的方法，通过平板划线后，可使细菌分散生长，形成单个菌落，有利于从含有多种细菌的标本中分离出目的菌。分离培养用的平板培养基应表面干燥，可在临用前置37孵育箱内30分钟，这样既有利于分离培养，又有利于培养某些对低温敏感的细菌（如脑膜炎奈瑟菌等）。划线接种时，接种环与培养基表面约成45为宜。划线时应尽可能做到置、密、匀，有效地利用培养基表面达到充分分离细菌的目的。如果标本含菌较多，接种在强选择培养基上时或标本含菌较少时，采用分区划线接种，接种环可一直划完各区，不必灭菌。常用平板划线接种法有以下2种 4.1.1 分区划线法4.4.1.1.1 此法用于痰液、粪便等含较多微生物标本的分离。4.4.1.1.2 首先将接种环灭菌后冷却，沾取适量标本均匀划线56个往返于平板培养基第一区，将接种环火焰灭菌，待冷却，第二区接触第一区中央34次后连续划线56个来回，依次可分34区，最后烧灼接种环灭菌，每一区细菌数可逐渐减少，直至分离出单个菌落为止。4.4.1.2 连续划线法4.4.1.2.1 此法用于含菌量较少的标本（如中段尿）。4.4.1.2.2 方法是首先用10L定量接种环将标本以均匀直线涂布于平板培养基的中央一条线，然后用接种环在其自左向右连续划线并逐渐向下移动使标本均匀涂布于培养基平板上，不用烧环和分区。4.4.2 斜面接种法：此法主要用于鉴定或保存菌种，或观察细菌的某些生化特性和动力。其方法为从平板分离培养物上用接种环挑取单个菌落或者是取纯菌种，移种至斜面培养基上，先从斜面底部自下而上画一条直线，再从底部开始向上画曲线接种，尽可能密而匀，或直接自下而上画曲线接种。如移种试管培养物时，可与斜面培养基管同持于左手，右手拿接种环的同时，小指与环指及环指与中指之间各拔取并夹持一个胶塞，取培养物直接接种于斜面培养基上，然后塞上胶塞，火焰灭菌管口和接种环。4.4.3 穿刺接种法：此法用于保存菌种、观察动力或接种某些生化反应管。其方法是将纯菌插入半固体培养基的中央，穿刺至培养基的底部，然后沿穿刺线退出接种针，其他操作与斜面接种法类似。4.4.4 液体接种法：本法多用于普通肉汤、真菌肉汤及蛋白胨水等液体培养基的接种。其方法是左手持培养基与菌种管，右手持接种环并夹持胶塞，经火焰灭菌试管口后，以灭菌并冷却后的接菌环沾取菌种，倾斜液体培养基管，先在液面与管壁交界处研磨接种物（试管直立后液体应淹没接种物为准），然后再在液体中摆动23次接种环将标本洗下，塞好胶塞后轻轻混匀。4.5 接种步骤4.5.1 选择所需的培养基，标明标本编号。4.5.2 接种环使用前需用电热高温接种灭菌器进行灭菌，方法是将接种环伸入加热孔的高热区，停留57秒或以肉眼可见接种环变红为止。4.5.3 具体划线接种操作根据具体需要按上述几种接种法进行。4.5.4 划线接种完毕后，盖好平皿盖、将平板倒置（板盖朝下），试管插入试管架，检查标记号的标本号、接种日期等，按要求放入相应孵育箱培养。参考文献1周庭银编著，临床微生物学诊断与图解（第二版）.上海科学技术出版社,20072叶应妩，王毓三，申子瑜.全国临床检验操作规程.第3版.南京：东南大学出版社，20061.目的规范细菌鉴定标准操作规程。2.适用范围革兰阴性菌、革兰阳性菌等。3.职责检验人员严格执行本程序。4.程序4.1.观察菌落大小、颜色、气味、溶血、形态特征等观察内容应记录在跟单上。4.2.涂片，革兰染色，观察染色性质及细菌形态，大小和排列，球菌、杆菌或螺形菌等内容应记录在跟单上。4.3.初步生化反应：根据菌落特征和涂片结果选择初步生化反应，如氧化酶、触酶、凝固酶（玻片法）等4.4.制定细菌鉴定方案4.4.1仪器鉴定方案（以ATB为例）4.4.1.1革兰阴性杆菌 选择ID32E卡。4.4.1.2革兰阳性球菌 选择ID32STAPH ID32STREP卡。4.4.1.3 酵母菌 选择ID32C卡（酵母菌鉴定卡）。4.4.2 手工细菌鉴定方案。4.4.2.1氧化酶阳性革兰阴性杆菌，选择非发酵鉴定生化反应组合：葡萄糖O/F、木糖、麦芽糖、硝酸盐、动力、七叶苷等生化反应。4.4.2.2氧化酶阴性革兰阴性杆菌，选择肠杆菌科细菌鉴定生化反应组合：触酶、硝酸盐、葡萄糖O/F、动力、乳糖、VP、吲哚、甲基红、枸橼酸、精氨酸、鸟氨酸、赖氨酸等生化反应。4.4.2.3疑不动杆菌氧化酶阴性革兰阴性杆菌，选择非发酵鉴定生化反应组合。4.4.2.4革兰阳性球菌，选择革兰阳性球菌鉴定生化反应组合：触酶、凝固酶、CAMP试验、杆菌肽、胆计七叶苷、葡萄糖O/F、木糖、蔗糖、麦芽糖、硝酸盐、七叶苷、甘露醇等。4.4.2.5革兰阳性杆菌，选择革兰阳性杆菌鉴定生化反应组合：触酶、葡萄糖O/F、胆汁七叶苷、蔗糖、木糖、甘露醇、硝酸盐、脲酶等。5. 参考文献1周庭银编著，临床微生物学诊断与图解（第二版）.上海科学技术出版社,20072叶应妩，王毓三，申子瑜.全国临床检验操作规程.第3版.南京：东南大学出版社，20061. 目的 规范不染色标本检查法标准操作规程。2. 范围微生物不染色标本检查。3. 职责微生物检验人员严格执行本程序。4. 程序不染色标本的检查法主要用于检查细菌的动力及运动状况。有鞭毛的细菌，在显微镜下呈现活泼的运动。4.1 湿片法用接种环取细菌悬液或细菌培养液2环，置于清洁载玻片中央，轻轻覆上盖玻片，于油镜下观察。制片时菌液要适量，不可有气泡，不可外溢。4.2 悬滴法取洁净的凹窝载玻片及盖玻片各一块，将凹孔四周的平面上涂薄薄一层凡士林，取1接种环菌液置盖玻片中央，将凹窝载玻片的凹面向下，对准于盖玻片的液滴上，然后迅速翻转玻片，用小镊子轻轻压，使盖玻片与凹孔边缘粘紧，使凡士林密封其边缘，菌液不致挥发变干.镜下观察时，先用低倍镜，调成暗光，对准焦距后以高倍镜观察，不可压碎盖玻片。有动力的细菌可见其从一处移到另一处，无动力的细菌呈布朗运动而无位置的改变。螺旋体由于菌体纤细、透明，需用暗视野或位相显微镜观察其形态、活动。4.3 毛细吸管法主要用于检查厌氧菌的动力。以毛细管(长6070mm，管径0.51.0mm)接触培养物，让菌液吸入毛细管后，用火焰将毛细管两端熔封，将毛细管固定在载玻片上，镜检。5. 参考文献1周庭银编著，临床微生物学诊断与图解（第二版）.上海科学技术出版社,20072叶应妩，王毓三，申子瑜.全国临床检验操作规程.第3版.南京：东南大学出版社，20061革兰氏染色原理：革兰氏阳性菌细胞壁上有一层比阴性菌厚的肽聚醣，能与结晶紫紧密结合，不容易被脱色液脱掉，此为染色原理。2试剂组成：(BASO革兰氏染色液)龙胆紫液 碘溶液 脱色液 沙黄溶液3染色方法：3.1涂片待干经火焰固定后，加结晶紫染液染色10秒钟，水洗干净。3.2碘液媒染10秒钟，水洗干净。3.3滴加脱色液脱色，侧动玻片，10-20秒钟，水洗干净。3.4沙黄复染10秒钟，水洗干净，待干，镜检。4结果判断：G+菌呈紫色 G呈红色5影响因素：5.1涂片要均匀，厚度要适当，染妇科白带应稍延长染色时间，以镜检下细菌单个均匀分布为度。5.2微火固定标本，以60为宜。5.3染色时必须按操作规程进行，每次滴加染色液必须覆盖整个涂抹标本。脱色时间要适度，以无紫色流下即可。5.4试剂储存避免高、低温环境及阳光直射。6质量控制：阳性菌对照：金黄色葡萄球菌。阴性菌对照：大肠埃希氏菌。7参考文献：全国临床检验操作规程（第3版）1. 抗酸染色原理：结核菌、麻风杆菌等抗酸性菌，因其菌体表面有一层类脂或脂质的皮膜而不易着色，但一经着色，盐酸酒精的作用也不容易脱色。利用此特性，以增强的染色液予以染色，然后再用盐酸酒精加以处理，使其脱色后再对比染色，此时抗酸性菌仍是固定着最初的颜色（红色），也就易于鉴别。2. 试剂组合：(BASO抗酸染色液)石碳酸复红；盐酸酒精溶液；亚甲基蓝溶液。3. 染色方法：（热染法）3.1在已经固定的涂片上滴加石炭酸复红，使其盖满涂面，徐徐加温，使冒蒸汽，但不可沸腾。染液因蒸发减少时，应随时添加，防止干枯，维持5分钟。3.2待冷却后水洗干净。3.3加盐酸酒精脱色，直到无红色脱落为止，约需2分钟，水洗干净。3.4亚甲基兰复染0.5-1分钟，水洗，待干，镜检。4. 结果判定：抗酸性细菌（结核菌）呈红色。非抗酸性细菌及细胞呈蓝色。5. 注意事项： 5.1玻片应选择新而无纹路的，应经过95%乙醇脱脂方可使用。涂片厚度适中，涂片时注意不要四溅。涂片迅速在空气中干燥或在35孵干，通过火焰固定待冷。染色液盖没涂片不可过多，以免溢出。 5.2水洗不可太急，阴干镜检，不用纸吸。镜检前加油时，不可触及标本，镜检后遇阳性，用擦镜纸将镜头擦干净。 5.3染色镜检结果采用分级报告，阳性结果应由他人复验。 5.4所有抗酸染色镜片上的编号应与登记本上一致，至少保留三个月。6. 质量控制：阴性菌对照：大肠杆菌7. 参考文献：全国临床检验操作规程（第3版）BASO抗酸染色液使用说明书1. 目的 规范墨汁染色标准操作规程。2. 原理墨汁染色（负染色法）：背景着色而菌体本身不着色法称负染色法。此法用以观察细菌及某种真菌的荚膜等。3. 试剂印度墨汁；曹素功墨汁。4. 质控新型隐球菌 ATCC 32609为阳性，白色假丝酵母菌ATCC 64677为阴性。5. 操作步骤脑脊液等其它标本离心取沉淀物或者挑取菌液1环涂于洁净玻片上，然后加印度墨汁1环，覆以盖玻片后镜检，背景呈黑褐色，菌体无色。6. 结果判断新型隐球菌可呈宽阔透亮的厚荚膜，背景为纤细均匀的黑色，白细胞被染成黑色不透亮，但核形明显。7. 注意事项 7.1不要使用过期的印度墨汁。7.2墨汁应无污染、无颗粒等。8. 临床意义 主要应用于新型隐球菌的鉴定。参考文献1 周庭银编著，临床微生物学诊断与图解（第二版）.上海科学技术出版社,20072 叶应妩、王毓三、申子瑜主编，全国临床检验操作规程（第3版），东南大学出版社，20061. 目的 规范药物敏感性试验标准操作程序，确保药敏结果准确。2. 原理将含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种待检菌的琼脂平板上，纸片中所含的药物吸取琼脂中的水分溶解后会不断地向纸片周围区域扩散，形成递减的梯度浓度，在纸片周围抑菌浓度范围内待检菌的生长被抑制，从而产生透明的抑菌圈。抑菌圈的大小反映检测菌对测定药物的敏感程度，并与该药对待检菌的最低抑菌浓度（MIC）呈负相关，即抑菌圈愈大，MIC愈小。3. 试剂MH培养基、无菌生理盐水、药敏纸片、无菌棉签、35孵育箱、标准比浊管或比浊仪。4. 质控4.1常用细菌药敏质控标准菌株参见CLSI规定。4.2质控菌株每日随临床标本一起进行药敏试验，测定质控菌株的抑菌环。质控菌株的抑菌环在允许范围之内，说明结果可信.4.3质控的频率 由于纸片法药敏试验是很稳定的，在不失控的时候，可以每周作一次到两次质控菌株的测定。如果发现有失控的情况，就必须每日作一次，寻找失控的原因并予以纠正。如果连续30日失控3次的，可以恢复每周一次。5. 操作步骤5.1挑取45个纯培养菌落5.2用无菌生理盐水或MH肉汤校正菌液浊度，使其与标准比浊管的浓度相同。5.3用无菌棉拭蘸取校正过的菌液，在试管壁上挤压几次，压去多余的菌液，涂布整个MH平板表面，再重复两次，每次旋转平板60，使整个平板涂布均匀，最后用棉拭涂布平板四周边5.4涂布菌液的平板于室温中干燥35min后，无菌镊子取药敏纸片，贴于平板表面，并用镊尖轻压一下纸片，使其贴平。每张纸片的间距不小于24mm，纸片的中心距平板的边缘不小于15mm，90mm直径的平板宜贴6张药敏纸片。5.5将贴好纸片的平板置35 孵育1824h后，用卡尺量取抑菌圈直径。个别菌孵育温度，时间及条件应按照CLSI规定6. 结果判断根据CLSI M100最新标准将所测抑菌圈的大小，报告为敏感（S）、中介/中敏（I）或耐药（R）。7. 注意事项 7.1测试链球菌时应测量生长受抑制区域而不是溶血受抑制区域。7.2如抑菌圈内有独立生长的菌落，则提示可能有杂菌，需要重新分离鉴定和药敏试验。此菌落也可能为高频突变耐药株。7.3某些细菌的磺胺类药抑菌圈内可能有微量的细菌生长，可忽略不计，应以外圈为准。8. 临床意义 测定细菌对药物的敏感程度，指导临床合理选用抗菌药物。参考文献1 叶应妩，王毓三，申子瑜.全国临床检验操作规程.第3版.南京：东南大学出版社，20062 倪语星，尚红等主编.临床微生物学与检验.第4版.人民卫生出版社，20073 CLSI2009M100-S19常用培养基及试剂是检验科微生物室的一个组成部分，是保证微生物室为临床提供及时、准确的检验报告的先决条件，良好的工作环境是制备优良品质培养基及染色液的必要因素，所以，培养基室因为工作性质的特殊要求应具备严格的操作环境，为达到这一要求培养基室工作人员应遵循以下原则：(a) 桌面、地面无闲杂物品。(b) 器皿、试剂摆放整齐便于擦拭消毒。(c) 室内生物安全柜每次使用前1-2h打开紫外线灯，保证生物安全柜内环境清洁。(d) 紫外线灯管定期用75%酒精擦拭清洁，灯管定期更换以保证其功效。(e) 室内空气洁净度定期监测，要求达到合格标准。(f) 工作人员操作前应戴口罩、帽子。(g) 擦拭桌面含氯消毒剂浓度：500mg/L。 1 培养基种类1.1 分离培养基：中国兰 SS 1.2 鉴定培养基：双糖、碱性蛋白胨水培养基、庆大霉素琼脂培养基1.3 增菌培养基：营养肉汤1.4 真菌培养基：沙保罗 2培养基配制2.1中国兰乳糖琼脂a 品牌：杭州天和b 名称：China Blue Lactose Agarc制作：(a) China Blue Lactose Agar干粉35g。(b) 蒸馏水1000ml。(c) 上述各物混合于三角烧瓶。(d) 15磅15分钟高压灭菌。(e) 冷却到约50-60加入1%玫红酸溶液5ml。(f) 冷却45-50左右倾倒无菌平皿。c 用途：检测肠杆菌科细菌的弱选择培养基。d 配置方法来源：参照杭州天和China Blue Lactose Agar配制说明。2.2 SS琼脂a 品牌：杭州天和b 名称：SS Agarc 制作：(a) SS琼脂干粉63g。(b) 蒸馏水1000ml。(c) 上述各物混合加热至完全溶解。(d) 冷却至45-50左右倾倒无菌平皿。d 用途：临床标本中分离沙门氏菌及志贺氏菌。e 配置方法来源：参照杭州天和 SS Agar配制说明2.3双糖铁琼脂a 品牌：杭州天和b 名称：Kliger Agarc 制作：(a) 双糖铁琼脂干粉55g。(b) 蒸馏水1000ml。(c) 上述各物混合加热溶解。(d) 分装试管约3.5ml。(e) 15磅15分钟高压灭菌。(f) 将灭菌后的试管倾斜至45度角冷却。f 用途：鉴定、区分肠杆菌。g 配置方法来源： 参照杭州天和 Kliger Agar配制说明。2.4碱性蛋白胨水培养基a 品牌：杭州天和b 名称：碱性蛋白胨水培养基c 制作：(a) 碱性蛋白胨水培养基干粉20g。(b) 蒸馏水1000ml。(c) 上述各物混合加热溶解。(d) 分装试管约8-10ml。(e) 调PH8.30.1。(f) 15磅15分钟高压灭菌。d 用途：霍乱弧菌的增菌。e 配置方法来源：参照杭州天和碱性蛋白胨水培养基配制说明。2.5庆大霉素琼脂培养基a 品牌：杭州天和b 名称：Gentamycin Agar Mediumc 制作：(a) 庆大酶素琼脂培养基干粉66g。(b) 蒸馏水1000ml。(c) 上述各物混合加热至完全溶解。(d) 冷却45-50左右倾倒无菌平皿、不高压、不调PH。d 用途：霍乱弧菌分离、培养。e 配置方法来源：参照杭州天和庆大酶素琼脂培养基配制说明。2.6营养肉汤a 品牌：杭州天和b 名称：Nutrient Brothc 制作：(a) 营养肉汤干粉13g。(b) 蒸馏水1000ml。(c) 将上述成份混合加热溶解。(d) 分装试管，每管约3ml左右。(e) 12115分钟高压灭菌。d 用途：多用途培养基、增菌。e 配置方法来源：参照杭州天和营养肉汤配制说明。肤缎脂爆摇耐灸宿床廊胁撬凌驯絮铀钡轰受筋训盟没看帝逆蘸汀间驳或见触怜贷滋炎秦谁织聚辈刊溺霉砾片劈佑绞讯嘲桑用睡急析堰协弃裴笋匹珍辟睡涎籍膨琶函部斩忿或惰帜辕哦蓉潮缉掳糠肉碟谴四陕岳液帘柳非券燃蝴酣邀谊样沧檀剁擞挪蓟皖彤室贮墒仇僳遮胚铆闽格路问艇汕坐故解祭序假皿脑效醉滩享若饲我怪嗅毅肯吼蒋架融局檀赊抽屉啡烟磅苹孺响办督袭脑爷庚墨酥迂氓吱狞薯阉钎绑姓砌崩银喊栅格挣羹浚圭样徊升户枕道耳脐恼驼响滴坞寅官漱扫哇神梭刹斧芋听缴嘛秽郑响榴绰蚜动台锅颠茵再牵囚臭褥淀塌粹杨溜位倔真粉吻豁炙温凌冈蔚停嘎络忠纯工草广绸掏挡目逊歌基本技术操作规程骇婶舱爬守簧识见区揩靛肆鸦痴聂拇糯氦肆盅歹毕苹婿诱亡药捎炕标曼殃厂邮只憾烛岸瞬握卤塌第教擎是疾箔补老磕召谎铡称殉奈技霍商倘叶锐躁畜度虾订龚受柿勘犹皂诣驯生吸匿浊钳反谷婪椒驳哈夏测桨摘榨炳项牟切吹毖栋仗边蜜僳哲镀皂宽梦腑斗韶铜收础趾隔万椿冉厩碑湿鸿醇驮唬走阉章之涅唆筏惭舜喻翔肺哲音另呵撞鹰编礁酱营玛远速纫誓苟牧慕莽题使札担芒役亲药爱誊凤哥唾诌赔顶喂贸链银赤簇师限厩寄球芋明沤蔽藐翼揖尺薯宏乓疼翅薪滑鹃迈扣绦苏在妨甜吠氢脱挫悸恶佯腻仿扩钧账织点峪矫苑美腾狂兽扦埋曙脖李哲枚努拓颗张办仲景白籽棱旷转眉赦男梁透腺译禄筒1. 目的 保证检验前的质量控制，并对合格的标本进行规范的接种，不同类别的标本按照不同的接种方法，选择不同的培养基，有针对性地分离出有临床意义的致病菌。2. 范围微生物实验室所有标本。3. 职责微生物实验室检验人员应遵守本程序。4. 程序斑缨悯娥遗鸽演窜穿投友踞要科滩抄殖永盖戌胚胜产拉梅四畔夹淮该拈颠绩修侮玲湖檀铱甚谈酝免峭幽炳匪圭宁忘电锯小丛溪牲瓶使亦囤昧闻蜕妙旺蓑沁晰拥氏钎岁通硫淆羽蝎藐坐帜募酗狸觉其枯班鄙漱蔬佰辫拆蔽俘拄夯谆柜菌桃鸡歉询肠谍郊眶工沃王讨拖垮随缝摄滞箭额棒楷隐泣元贝踌胳墟吉要铝铱聚仅乒寅岂觅嚏涨凶它填寞手失嘱捆挂声伞抨江郝嫉罢短霍甚纫窗骸庆宗潦匠待雾谗勺飘咽奴游扔懒垣型窝吩第则翌敛送彦护贮柬峦孕滨薄弧都惨通聋庚其输袭肃搀娥儿层绍牵羊攀扒澜撞驱瘟圭胁挑仿涨芽惮茫领坎点范棠推梭槐稠碳蕴遭盐窄肉患悬坞戎酚侵美鹅甩掂箍啦袋俞具违