结核病防治实验室痰检工作——第二讲-显微镜读片检查.ppt

第三章 结核病管理及最新进展第一节 结核病防治实验室痰检工作2024/5/22 周三国家结核病参比室1贵州省疾控中心结核病防治研究所袁 薇2024/5/22 周三国家结核病参比室2 第二讲 显微镜读片检查2024/5/22 周三国家结核病参比室3准备知识l显微镜简图l操作步骤l镜油显微镜读片检查l显微镜读片l玻片的保存l废弃物的处理痰涂片镜检质量保证l质量保证l质量控制本节内容导航2024/5/22 周三国家结核病参比室4l室间质量评估EQA的组织工作和关键技术措施推行EQAl现场评价内容实验室基本要求布局生物安全l盲法复检l批量测试l质量提高本节内容导航2024/5/22 周三国家结核病参比室5准备知识显微镜简图2024/5/22 周三国家结核病参比室6操作步骤准备知识2024/5/22 周三国家结核病参比室7l镜油（immersion oil)替代香柏油香柏油易干燥凝结，损害油镜头l使用擦镜纸清洁物镜，避免用二甲苯 擦拭物镜易损坏镜头对人体有害准备知识镜油2024/5/22 周三国家结核病参比室8显微镜读片读片时，首先从痰膜一端由左至右观察相邻的视野当玻片移动到痰膜的另一端时，纵向向下转换一个视野然后从右向左观察避免跳跃或者闭合 环状路线显微镜的读片检查2024/5/22 周三国家结核病参比室9红色、杆状、略弯曲显微镜的读片检查显微镜读片2024/5/22 周三国家结核病参比室10“V”-字形显微镜读片显微镜的读片检查2024/5/22 周三国家结核病参比室11成簇的抗酸菌显微镜的读片检查显微镜读片2024/5/22 周三国家结核病参比室12在淡蓝色背景下，抗酸杆菌呈红色，其它细菌和细胞呈蓝色镜检报告：涂片结果报告标准(萋尼氏抗酸菌染色法)显微镜读片显微镜的读片检查阴性300 视野 0条报告菌数300 视野18条阳性1100视野39条阳性210视野19条阳性3每视野19条阳性4每视野 10条2024/5/22 周三国家结核病参比室13玻片的保存l如果使用显微镜附带的镜油，或者是购买的镜油（immersion oil），而不是香柏油（cedar oil），则不需使用二甲苯，直接使用镜头纸擦拭即可l干燥后的玻片，按实验室序号及涂片编号放置在玻片盒中，存放在阴凉干燥阴凉干燥环境中。处于潮湿炎热的环境中抗酸菌易于褪色显微镜的读片检查2024/5/22 周三国家结核病参比室14玻片的保存l镜检后的玻片上只注明实验序号，不得标注镜检结果不得标注镜检结果 l全部涂片按实验序号按实验序号连续排列保存显微镜的读片检查2024/5/22 周三国家结核病参比室15显微镜的读片检查玻片的保存2024/5/22 周三国家结核病参比室16废弃物的处理l污染源：所有可能与生物危险物接触或被污 染的试验器械和物品，例如痰标本 涂抹后的 竹签 涂片 手套 口罩帽等l废弃物处理方法 高压灭菌:高压灭菌是首选的处理方法显微镜的读片检查2024/5/22 周三国家结核病参比室17废弃物的处理 焚烧:如果没有焚烧炉，简单的燃烧是难以彻底 杀灭病菌，可能会使病菌扩散 化学消毒剂处理：避免使用化学消毒剂处理废弃 污染物就直接将其丢弃，很难保证杀灭效果,痰 液中的蛋白等物质对消毒剂的杀灭效果影响很大显微镜的读片检查2024/5/22 周三国家结核病参比室18废弃物处理l传染性废弃物对实验员和环境危险性极大l在废弃物离开实验室前必须高压灭菌或去污染处理l对溅出的标本应以5%石炭酸或者氯制剂进行消毒 酚类对标本有效l75%酒精：只能皮肤消毒、或擦拭桌椅、台面 （注意防火）显微镜的读片检查2024/5/22 周三国家结核病参比室19痰涂片镜检质量保证中国结核病防治规划-痰涂片镜检质量保证手册2024/5/22 周三国家结核病参比室20结核病防治规划 系统网络质量控制质量检查和评估提高业务水平痰涂片镜检质量保证2024/5/22 周三国家结核病参比室21质量保证l是能持续提高实验室服务效率和可信度的体系，包括室内质量控制、室间质量评估和质量提高 质量控制 现场评价质量保证 室间质量评估 盲法复检 质量提高 批量测试痰涂片镜检质量保证2024/5/22 周三国家结核病参比室22质量控制l也称室内质量控制：指实验室内部对实验室服务整个过程各个环节的内部检查和监测l质量控制措施日常工作的自我监督染色液的质控 质量控制 现场评价质量保证 室间质量评估 盲法复检 质量提高 批量测试痰涂片镜检质量保证2024/5/22 周三国家结核病参比室23涂片制备和染色、显微镜维护、显微镜镜检、结果登记和报告、以及痰片保存等涂片的自查或互查各种工作应有详尽记录 包括：操作规程、设备和耗材、痰标本收集、染色剂制备质量控制痰涂片镜检质量保证l 质量控制措施2024/5/22 周三国家结核病参比室24室间质量评估l室间质量评估（EQA）是根据与其它网络实验室（中间级实验室和中心实验室）比较批量测试和盲法复检结果评价基层实验室能力的过程lEQA包括实验室现场评估以评价操作质量并且也包括现场对涂片的复读。EQA是国际肺病和防痨联合会描述的熟练度检测的扩大 质量控制 现场评价质量保证 室间质量评估 盲法复检 质量提高 批量测试痰涂片镜检质量保证2024/5/22 周三国家结核病参比室25-EQA的组织工作和关键技术措施l组织工作：实施技术措施的保障主要组织和实施单位在地市级参比室，但常常力量相 对薄弱县级盲法复检的第1复检者由另一个县的实验人员担 任市级盲法复验由另一市实验人员担任需策划和协调标本及复检结果的传递痰涂片镜检质量保证室间质量评估2024/5/22 周三国家结核病参比室26科学的抽样方法科学的抽样方法盲法盲法提高提高技术水平技术水平和责任感和责任感按序号排按序号排放不分涂放不分涂阳涂阴阳涂阴玻片不作玻片不作结果标记结果标记复检者不知复检者不知初检结果初检结果痰涂片镜检质量保证l 关键技术措施室间质量评估-EQA的组织工作和关键技术措施2024/5/22 周三国家结核病参比室27-EQA的组织工作和关键技术措施决定样本量有科学依据：全年的复检标本量，取决于前1年的阴性片数量和涂片阳性率。即：其涂片阳性率一定时，阴性片愈多，抽样量愈多（抽出阳性片的概率增高）反之，阴性片量一定时，涂片阳性率愈高，抽样量便愈少（抽到阳性片的概率较高）节省复检数量 (不是一概抽取规定的阴、阳性片数量)痰涂片镜检质量保证室间质量评估2024/5/22 周三国家结核病参比室28随机化：决定样本量后，计算出抽样间隔，从哪一张片开始抽取，在现场用简单随机方式决定 保证抽样的科学，从而保证复检结果的科学性痰涂片镜检质量保证室间质量评估-EQA的组织工作和关键技术措施2024/5/22 周三国家结核病参比室29-推行EQAEQA的实施将为各级细菌学实验室积累大量、有价值的信息（各级EQA信息如何收集应进行研究）为建立和健全细菌学服务网络，检索各实验室的质量，确定重点督导单位，培训重点县、市的实验室人员和培训内容提供可靠依据痰涂片镜检质量保证室间质量评估2024/5/22 周三国家结核病参比室30现场评价内容l房屋及其布局l供应：水、电、耗材l人力资源l实验室安全防护措施l显微镜等设备状况 质量控制 现场评价质量保证 室间质量评估 盲法复检 质量提高 批量测试痰涂片镜检质量保证2024/5/22 周三国家结核病参比室31l试剂的可用性l涂片、染色和镜检操作各个环节l玻片保存l登记和记录l现场复检3张阳性涂片l盲法复检痰片抽样痰涂片镜检质量保证现场评价内容2024/5/22 周三国家结核病参比室32-实验室基本要求布局痰涂片镜检质量保证现场评价内容2024/5/22 周三国家结核病参比室33实验室布局管理废弃物处理化学品的安全事项感染控制痰涂片镜检质量保证现场评价内容 -生物安全2024/5/22 周三国家结核病参比室34痰涂片镜检质量保证现场评价内容2024/5/22 周三国家结核病参比室35染色架痰涂片镜检质量保证现场评价内容2024/5/22 周三国家结核病参比室36染色架痰涂片镜检质量保证现场评价内容2024/5/22 周三国家结核病参比室37盲法复检原则：l样本：随机性、代表性l复检：盲法l第二复检者最终裁决l结果及时反馈和上报 质量控制 现场评价质量保证 室间质量评估 盲法复检 质量提高 批量测试痰涂片镜检质量保证2024/5/22 周三国家结核病参比室38盲法复检l对地市实验室的盲法复检：组织实施者：省级参比室第一复检者：地市实验室第二复检者：省级参比室l对县级实验室的盲法复检：组织实施者：地市级实验室第一复检者：县级实验室第二复检者：地市级实验室 质量控制 现场评价质量保证 室间质量评估 盲法复检 质量提高 批量测试痰涂片镜检质量保证2024/5/22 周三国家结核病参比室39批量测试l指国家或省级参比室向外周实验室发送测试片，以评价外周实验室技术人员的染色和/或读片能力（熟练度测试）l主要考核个人的操作技术，而不能代表实验室的整体技术水平 质量控制 现场评价质量保证 室间质量评估 盲法复检 质量提高 批量测试痰涂片镜检质量保证2024/5/22 周三国家结核病参比室40质量提高l是通过分析痰涂片镜检诊断服务的各组成部分，寻找能永久清除障碍成功的过程l资料收集、分析、创意思路都是这一过程的重要部分l它涵盖了连续监测、明确缺陷及后续改正措施，如必要时重新培训以杜绝问题再次发生 质量控制 现场评价质量保证 室间质量评估 盲法复检 质量提高 批量测试痰涂片镜检质量保证2024/5/22 周三国家结核病参比室41