生化药物质量标准中的生物检定及其进展.pdf

哇珈香宴瞬频蜀哇侨社实瞬中心www.bbi。ccm/bic/C，生化药物质量标准中的生 物检定及其进展中国药品生物制品检定所 生物秀论坛一学术交流、资源共享、互助社区 安全性检查(多组分生化药的原材料来源于人、动物的组织或者体 液，或者通过发酵而来。其组分不明确、按照化学药品 的质控方式很难控制其质量)多组分生化药注射剂基本技术要求：涉及到多组分生化药特性的指标应订入质量标准，如过 敏物质、降压物质、异常毒性等。活性测定也是反映产 品质量的重要指标，有时比含量测定更具专属性，建议 将活性测定收入标准生物秀论坛一学术交流、资源共享、互助社区 哇侨定斗出案瞬e心 www.bbi。,com/bi。/0/I生物检定(bioassay)按生物体分类：体内测定(in vivo)-整体动物 体外测定(in vitro)一离体器官、组织，微生物、酶和细胞(原代细胞、传代细胞)生物秀论坛一学术交流、资源共享、互助社区 哇侨定斗案瞬中心 www.bbi。,com/bi。/0/于国药距005版二谕中的生物检定用于生物活性测定的生化药物有21品种（约占我国生化药的10%）安全性检查-很多生化药物（无菌、微生物限度、热原、细菌内毒素、异常毒性、降压物质、过敏等）生物秀论坛一学术交流、资源共享、互助社区 10，生物检定针对的品种一多组分生化药 对无适当理化方法检定、常规化学测定方法 较难建立，不能控制其质量的药品-生物检定是反映产品质量的重要指标，具 有专属性-当前英国、美国及中国药典都有收载生物秀论坛一学术交流、资源共享、互助社区 哇侨定斗案瞬中心 www.bbi。,com/bi。/0/I生物检定的重要作用 新药研发初始阶段（体外测定筛选有效成 分、整体动物试验确认药效）生产阶段：评价产品批与批之间稳定性和 一致性 生产工艺验证（生物检定可监测不曾预料、不易发现的 构象变化，它是所有变化的综合效应）生物秀论坛一学术交流、资源共享、互助社区 10，I生产工艺验证的品种 DNA重组人生长激素、人胰岛素、人胰高 血糖素，降钙素等常规检定已用理化测定(HPLC)药典(BP、ChP)规定：在研发阶段，生 产过程中的产品必须用体内生物测定方法 测定其生物效价，直到生产稳定为止生物秀论坛一学术交流、资源共享、互助社区 测定（HCG、HMG、肝素）一干XE星-一定性生物秀论坛一学术交流、资源共享、互助社区 10，I活性测定一一半定量-半定量一当理化测定占主导地位，生物效价 测定降为辅助作用，只用于活性检查，设定限 值，采用半定量方法，不需精确的生物统计，尽可能减少实验动物用量 如治疗二型糖尿病新药重组人胰高血糖素类多 肽-1(7-36)质量标准中采用半定量方法(限 值为小鼠血糖降低应大于20%)进行活性检查生物秀论坛一学术交流、资源共享、互助社区 定的产品，生物测定从主导地位的定量测定降 为次要的鉴别项的定性测定，只用较少的动物 例如USP2 9版：缩宫素(oxytocin)子宫收缩 法用于鉴别；升压素(Vasopressin)大鼠血 压升高法用于鉴别，效价测定均采用HPLC法 ChP2 005版二部缩宫素仍用定量生物测定法生物秀论坛一学术交流、资源共享、互助社区 10，I生化药标准中的体内生物检定（1）生化药名生测方法应用收载标准HMG尿促性素FSH大鼠卵巢增重法 LH大鼠精囊增重法鉴别效价测定ChP 2005HCG绒促T煤雌幼小鼠子宫增重法效价测定ChP 2005垂体后叶大鼠血压升高法效价测定ChP 2005促皮质素大鼠肾上腺内维C降低效价测定14th 册地标升国标小牛脾提取物家兔升高白细胞法活性检查9th册灵杆菌多糖家兔升高白细胞法活性检查9th册生物秀论坛一学术交流、资源共享、互助社区 哇侨定斗案瞬中心 www.bbi。,com/bi。/0/I生化药标准中的体内生物检定（2）生化药名生测方法应用收载标准rhGH重组人生长 激素去垂体大鼠体重法和 胫骨法工艺验证ChP 2005降钙素大鼠血钙法工艺验证ChP 2005孕马血清促性腺 激素雌幼大鼠卵巢增重法效价测定BP2007升压素大鼠血压升高法鉴别USP29人胰高血糖素兔血糖升高法工艺验证BP2007人红细胞生成素小鼠网织红细胞计数效价测定ChP 2005生物秀论坛一学术交流、资源共享、互助社区 www.bbi。,com/bi。/0/生化药标准中的体外生物检定（1）离体动物器官、细胞培养、生化酶促反应、免疫学活性等测定法生化药名生测方法应用收载标准缩宫素大鼠子宫收缩 法效价测定 鉴别ChP 2005USP29肝素家兔血，兔、猪血浆凝固法效价测定ChP 2005低分子肝素酶促反应的分 光光度法效价测定BP2005硫酸鱼精蛋白家兔血，兔猪 血浆凝固法效价测定ChP 2005甘露聚糖肽补体结合法检查免疫原性16th 册地标升国标生物秀论坛一学术交流、资源共享、互助社区 10，生化药标准中的体外生物检定（2）离体动物器官、细胞培养、生化酶促反应、免疫学活性等测定法生化药名生测方法应用收载标准胸腺肽脱E受体法活性检查16th 册地标升国标转移因子脱E受体法活性检查16th 册抗肿瘤免疫核糖 核酸小鼠脾细胞黏附率法活性检查16th 册抗乙肝免疫核糖 核酸小鼠脾细胞黏附率法活性检查16th 册促肝细胞生长素SMMC-7721肝癌细 胞增殖MTT比色法活性检查9th册牛胎肝提取物SMMC-7721肝癌细 胞增殖MTT比色法活性检查9th册生物秀论坛一学术交流、资源共享、互助社区 10，基因重组技术产品体外生物检定多采用相对快速重复性好的细胞培养测定法，收载ChP 2005生化药名生测方法原理应用干妹(IFN)Wish细胞病变抑制/结晶紫染 色法间接保护细胞效价测定粒细胞集落刺激因子(G-CSF)NFS-60细胞/MTT比色法促进细胞生长效价测定粒细胞-巨嗜细胞集落刺 激因子(GM-CSF)TF-1细胞/IVHT比色法促进细胞生长效价测定表皮生长因子(EGF)3T3细胞/MTT比色法促进细胞生长效价测定白细胞介素-2(IL-2)CTLL-2细胞/MTT比色法促进细胞生长效价测定肿瘤坏死因子(TNF)L929细胞/结晶紫染色法抑制细胞生长效价测定碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)3T3细胞/MTT染色法促进细胞生长效价测定生物秀论坛一学术交流、资源共享、互助社区 哇侨定斗案瞬中心 www.bbi。,com/bi。/0/实验设计与反物统讦生物测定（无论体内、体外）的实验误差比理化 测定要大控制实验误差尤为重要试验控制（良好实验操作、试验材料一致性）合理的实验设计运用生物统计生物秀论坛一学术交流、资源共享、互助社区 10，例如肝素含片质量标准（9th册地标升国标）内为低分子肝素:LMWH,对FXa效价测定采用体外 酶促反应的分光光度法实验设计为标准曲线法对其相关系数（r）和每一浓度重复次数均未作要求 本实验室增加要求r 0.98和每一浓度至少重复2次 对同一批号肝素含片产品测定其抗FXa效价，结果误 差仍大，重现性差，波动大，缺乏可比性生物秀论坛一学术交流、资源共享、互助社区 哇侨定斗出案瞬e心 www.bbi。,com/bi。/0/改为量反应平行线原理的44实验设计 并结合生物统计 要求实验可靠性测验通过：直线回归P0.05 P 结果较平稳，误差小，重现性好 肝素含片内LMWH不是化学纯品，是一定分子量范围内的 多相性成分的分布，其相对分子量、糖链长度、硫酸化数 目和位置、结构的不均一性对显色反应的分光光度法均有 一定误差生物秀论坛学术交流、资源共享、互助社区 提高实验的准确度和精密度%*匕宏或蛔京排 标准曲线法4 4 法标准曲线法与量反应平行线44法测定同一批肝素含片产品抗FXa效价比较生物秀论坛一学术交流、资源共享、互助社区 检测技术、结构分析水平的提高 产品纯度生产工艺的成熟、完善，产品达到高纯 生物测定繁琐、实验周期长、准确度差、误差大、耗 费大量人力、物力 随着对动物保护、对实验动物减少、替代、优化(3R)的呼声越来越高，生物测定已不适应现代科学技术的发展生物秀论坛一学术交流、资源共享、互助社区 缩短实验周期，提高实验准确度、精密度和稳定性 检测方法的in vitro代替in vivo 简单代替繁琐-生物测定正从主导地位的定量测定降为辅助作 用的半定量、定性测定，直至被取代生物秀论坛一学术交流、资源共享、互助社区 www.bbi。,com/bi。10/胰岛素（动物胰腺提取）生物检定 USP29版胰岛素生物鉴别试验（Bioidentity test）半定量的8只家兔血糖法（SH、SL,TH、TL组，每组2 只），生物效价不得低于15 USPU/mg 定量的生物效价测定需用24只家兔血糖法（SH、SL,TH、TL组，每组6只）定量法用于胰岛素标准品标定、新制剂稳定性的考察、胰岛素类似物特异性活性的测定，而不用于常规检定 BP2007版胰岛素采用HPLC法 ChP2005版二部，动物胰腺提取的胰岛素定量生物测定生物秀论坛一学术交流、资源共享、互助社区 10，中国药典2 010年版二部生化药品专业科研项目1、药品中氨基酸分析方法的研究（归纳分类）。（中检所负责）2、蛋白质含量测定方法的规范化研究，增订附录。（上海所负责）3、人工肠液和胃液中所用酶试剂的标准化研究。（中检所和北京所负责）4、缩宫素、降钙素等品种用HPLC法替代生物测定法的研究。（各品种起草 单位）。5、等电聚焦电泳法的规范化研究，增订附录（中检所负责）6、体外生物活性测定法标准化研究。（中检所负责）7、多合成肽（8、14、28、3、4、9肽）的相关物、不相关物的分析。（中 检所负责）8、硫酸软骨素、香菇多糖、低分子肝素等多糖类药物的分子量及分布的标准 物质的研究。（中检所）9、多烯酸乙酯的相关物、不相关物的分析。（北京所）10、氨基酸原料药中其他氨基酸检查方法的考察。（河南所牵头，中检所复 核，各品种起草单位参加）生物秀论坛一学术交流、资源共享、互助社区 11、降压物质（组胺、类组胺）质谱检测与动物实验相关性的研 究。（中检所负责，上海所、广州所、天津所参与）12、应用PCR对人源性药品原材料残留病毒核酸的研究。（中山 大学负责）13、生化药注射剂、滴眼剂的可见异物检查研究。（北京所牵 头，各品种起草单位参加）14、生化药品过敏原的研究。（中检所负责）15、辅酶A HPLC法与效价测定法的相关验证。（河南所负责）16、磷测定方法的方法学研究。（上海所负责）17、多酶片的质量标准提高。（陕西所负责）18、复方氨基酸注射液等输液中铝元素考察及检查方法的建立。（辽宁所牵头）19、修订分子排阻色谱法中生物大分子聚合物分子量与分子量分 布的测定法（增订普适校正法和宽分布标样法）。（中检所）生物秀论坛一学术交流、资源共享、互助社区 www.bbi。,com/bi。10/在本实验室已用理化测定代替生物测定 两种方法间具有良好相关性(Po.oi)的品种生化药名生物测定方法理化测定方法收载质量标准rhGH重组人生长激素去脑垂体大鼠的体 重法和胫骨法HPLCChP2005BP2007重组人胰岛素小鼠或家兔血糖法HPLCChP2005BP2007降钙素大鼠血钙法HPLCChP2005BP2007低分子肝素血浆凝固法或家兔 全血凝固法分光光度法BP2007生物秀论坛一学术交流、资源共享、互助社区 10，在本实验室已用理化测定代替生物测定 两种方法间具有良好相关性(Po.oi)的品种生化药名生物测定方法理化测定方法收载标准伟素(Sulodexide)大鼠血脂清除率法分光光度法企业标准重组绒促性素(rHCG)幼小鼠子宫增重法HPLC企业标准重组卵泡刺激 素(rFSH)幼大鼠卵巢增重法HPLC企业标准重组黄体生成 素(rLH)幼大鼠精囊增重法HPLC企业标准生物秀论坛一学术交流、资源共享、互助社区 10，I发展方向 取代在今后药品质量标准中生物测定逐渐被先进 的理化方法、或能保证临床用药安全有效的其它 方法所取代，或只存在于生产研究阶段 WHO国际药典及药品专家委员会第42次专家会议（2007年10月）讨论对于胰岛素、缩宫素等由原来 生物测定转化为理化测定的提议生物秀论坛一学术交流、资源共享、互助社区 www.bbi。,com/bi。10/安全性检查(safetytest)一般原则：注射液为肌内注射：异常毒性、过敏反应物质等 检查项。原料和工艺易污染热原且用量较大者应 考虑设热原检查项 注射液为静脉注射必需设异常毒性、热原(细菌 内毒素)、过敏反应物质检查、降压反应物质检 查、溶血与凝聚检查等所有安全性检查项 多组分生化药注射剂基本技术要求：由于原材料为生物来源，成品中含有各种生化物 质，为保证注射给药的安全，一般须进行过敏物 质、降压物质、异常毒性等检查生物秀论坛学术交流、资源共享、互助社区 灵抱多糖注射液 灭菌前列腺素E2溶液 脱氧核甘酸钠注射液 垂体后叶注射液 垂体前叶肾上腺皮质-蜂毒毒性试验、过敏试验分子量分布、热原热原、异常毒性、过敏试验过敏试验、热原异常毒性、考查高分子物质内毒素、异常毒性、过敏试验、有关物质过敏试验生物秀论坛一学术交流、资源共享、互助社区 量测定制法、安全性试验内毒素生物秀论坛一学术交流、资源共享、互助社区 2005年版第二部分（辅料）鉴别：磷脂酰胆碱的TLC、检查项：过氧化值，溶血性磷脂溶血与凝聚、异常毒性、过敏试验等将热原改为内毒素、透渗压及抗氧剂的含量测定 安全性试验异常毒性、过敏试验、有关物质、pH值 pH值、内毒素、异常毒性、溶血与凝聚、过敏试验、颜色、有关物质、含量测定异常毒性、过敏试验、有关物质、按EP修订五肽胃泌素注射液内毒素、含量测定改HPLC生物秀论坛一学术交流、资源共享、互助社区 10，生化药名注射用醋酸丙氨瑞林 注射用糜蛋白酶 注射用糜胰蛋白酶 注射用抑肽酶 眼氨肽注射液 氨碘肽注射液 辅酶Q10注射液 复方骨肽注射液 骨肽注射液 骨瓜提取物注射液 肝水解肽注射液考虑增订的项目细菌内毒素、考查有关物质无菌、内毒素、过敏试验、异常毒性、有关物质热原等安全性试验无菌、过敏试验、异常毒性制法、过敏试验、考查肽含量、增加中间体控制制法、热原、有效成分定量、高分子物质内毒素制法、考查神经毒、高分子物质安全性试验、分子量范围安全性试验高分子物质、安全性试验生物秀论坛一学术交流、资源共享、互助社区 10，生化药名肌氨肽背注射液注射用、科博肽注射液鹿瓜多肽注射液脑蛋白水解物注射液脑背肌肽注射液曲克芦丁脑蛋白水解物注射液金葡菌毒素注射液水解蛋白注射液注射用降纤酶硫酸软骨素注射液硫酸软骨素A钠注射液考虑增订的项目制法、高分子物质或过敏试验考查出血毒、神经毒、热原制法、安全性试验制法异常毒性其他加质提高标油、过敏试验制法、安全性试验制法、安全性试验安全性试验制法、渗透压不同蛇种的活性 安全性试验 安全性试验生物秀论坛一学术交流、资源共享、互助社区 10，考虑增订的项目:考查有关物质 注射用、三磷酸腺汗二钠注射液 盐酸精氨酸注射液 谷氨酸钾注射液 注射用、细胞色素C注射液 注射用尿促性素 注射用绒促性素 注射用玻璃酸酶 注射用尿激酶 注射用门冬酰胺酶 甲硫氨酸维B1注射液渗透压更昔洛韦氯化钠注射液利巴韦林氯化钠注射液小 儿复方氨基酸注射液（18AA-I）小 儿复方氨基酸注射液（19AA-I）右旋糖酎20、40、70氯化钠注射液右旋糖酎20、40、70葡萄糖注射液生物秀论坛一学术交流、资源共享、互助社区 toxicity)定义异常毒性是检查药品在生产制造、制剂过程 中外来引入的异物或药物降解产生的不正常毒性反 应,与生产工艺水平有关,而不是检查药物本身毒 性。限值异常毒性限值剂量的设置一般在低于药物最 低致死量(LD5),在药物本身的安全剂量范围内 问题：限值定的过大，(VLD50)概念混淆，国大多数生化药注射用或注射液标 准中都有异常毒性检查，有些品种易忽略不是考察药 品本身毒性这一特性，应予以纠正。生物秀论坛一学术交流、资源共享、互助社区 哇侨定斗案瞬中心 www.bbi。,com/bi。/0/ChP2005 概念痛淆的品种 例如右旋糖酎铁注射液 异常毒性检查:每只小鼠静脉注射5mg(Fe),5 日内死亡数10只中不得过3只；这实际上是考 察药品本身(游离铁有毒)的毒性,而不应称为 异常毒性。BP2 007称该项为不当毒性(undue toxicity)USP2 9 称该项为急毒(Acute toxicity)生物秀论坛一学术交流、资源共享、互助社区 药品BP2007 药品ChP2005生物制品BP2007生物制品动物5只小鼠5只小鼠5只小鼠5只小鼠动物体重g17 2017 2217 2017-20静脉给药速度4 5秒1530秒4 5秒4 5秒给药途径静脉、腹腔、皮下、口服静脉腹腔注射腹腔注射观察时间48h24h7d7d结果判断不得有死亡不得有死亡健存、无异 常、体重增加不得有一只死 亡或不健康生物秀论坛一学术交流、资源共享、互助社区 哇侨定斗案瞬中心 www.bbi。,com/bi。/0/番药瘪径：静脉晶药速度静脉注射速度iv过快,小鼠心脏压力骤增，也是造 成死亡原因之一，因此应缓慢注射给药途径异常毒性检查针对多为注射用或注射液 一般动物试验给药途径应与临床给药途径 因此不应设定口服给药途径皮下注射给药吸收速度慢、差异较静脉注射大 即使临床为非注射给药，也应M以便更易于发现毒 物的混入;iv给药线性关系好、斜率大是较常用的 给药途径。生物秀论坛一学术交流、资源共享、互助社区 10，番典中异常毒性检查法仅ChP和BP有收载 BP2007异常毒性检查 4个生化药：抑肽酶、抑肽酶浓缩液、盐酸鱼精蛋 白、硫酸鱼精蛋白 7个抗菌素品种作该项检查 其余30多品种为抗血清、疫苗等生物制品 ChP 2005版二部已有42个品种（组份和杂质明确）删除了异常毒性 但目前我国大多数生化药物注射用或注射液标准中都 有异常毒性检查生物秀论坛学术交流、资源共享、互助社区 www.bbi。,com/bi。10/USP29 安全(Safety)检查急毒(Acute toxicity)USP29版安全(Safety)检查和急毒(Acute toxicity)与异常 毒性大致相同，限度稍宽(允许1-2只死亡)安全(Safety)检查收载3个生化药：右旋糖酎40、右旋糖酎70、HMG(HMG：5只小鼠1822g,iv 1.0ml,观察48h,1-2只死亡，10只重试)其余10多种为疫苗、生物技术产品等生物制品 急毒(Acute toxicity)收载2个生化药HCG和右旋糖酎铁(HCG:5只小鼠18-22g,iv 0.5ml，观察48h,12只有毒性症状或死亡，10只重试)生物秀论坛一学术交流、资源共享、互助社区 哇侨定斗案瞬中心 www.bbi。,com/bi。/0/乙妾异常毒性检查而争议 国外文献认为它缺乏专属性和科学性，当初是在没有实施 GMP的情况下，为以防万一而设 其结果各实验室间差异极大，与产品质量、添加物、所用 动物都毫无关联，不足以反映产品质量，不易与药品本身 引起的毒性反应相区别 对动物福利、3R、现在已实施GMP等因素的考虑 微量杂质或毒物的混入，已可用理化分析方法定量测定 欧洲各国药厂和检验部门检查异常毒性从未不合格，因此重 点应放在考察生产过程,尤其新建厂对每一生产步骤监控直 到正常生产 结论：不应再在终产品质量标准中设定异常毒性检查项，异常毒性检查应当取消生物秀论坛一学术交流、资源共享、互助社区 www.bbi。,com/bi。10/我国大多数生化药物注射用或注射液 标准中都有异常毒性检查国情不同，虽然实施GMP但仍有漏洞（由于我国生化药物多为多组分来源复杂和工艺过 程的变化使生化药注射剂有可能污染剧毒物质和 成分，从而引起急性毒性反应，因此，目前对生化 药注射剂设异常毒性检查项目是必要的，以后真 正实施GMP,才可考虑取消）药典会有关高风险品种（多组分生化药）注射 剂质量标准提高，增加安全性检查项目 某些生化药物过去没有该项的反而增加异常毒 性检查生物秀论坛一学术交流、资源共享、互助社区 哇侨定斗案瞬中心 www.bbi。,com/bi。/0/降压物质(depressor substances)我国一些脏器提取生化药物静脉注射剂进行该检查 定义降压物质检查是确定供试品对麻醉猫能否引起 血压下降及与组胺对照品比较其下降程度 ChP和BP收载降压物质检查 BP2 007附录有降压物质检查和组胺检查法具体品种都没有 ChP过去减少，ChP2 005版二部已有30个品种删除(组份和杂质明确)生物秀论坛一学术交流、资源共享、互助社区 哇侨定斗案瞬中心 www.bbi。,com/bi。/0/降压物质底查存在的而题-猫给药途径静脉推注，使组织胺样物质产生急性 降压而临床给药为静脉滴注或肌肉注射 猫的来源 复杂、个体差异大，致使有的产品降压物质检查与临床应用不符如复方氨基酸注射液降压物质检查不合格，而临 床应用未见织胺样物质产生急性降压或类似过敏 反应生物秀论坛一学术交流、资源共享、互助社区 哇侨定斗案瞬中心 www.bbi。,com/bi。/0/降压物质底查存在的而题 猫的给药剂量降压物质检查猫的剂量设定只能小，不能高于人 临床给药剂量（无论按kg体重比还是按体表面积 比折算）猫剂量过小，不足以考察药的安全性，但当增加 猫的给药剂量时则不合格，而临床应用药却是安 全的（能大于临床剂量一定倍数则更加安全，一般认为，按 动物和人之间毒性反应的差异为10、人与人之间差异 为10计算，安全性限值应至少大于临床体重剂量的 100倍以上）生物秀论坛学术交流、资源共享、互助社区 10，I降压物质检查中猫的给药剂量生化药名收载标准猫剂量猫剂量是人 用剂量的注射用抑肽酶ChP20051.5 U/kg32%复方氨基酸注射液（6AA）9th册（地升国）1ml/k g24%肝水解肽注射液9th册（地升国）0.1mg/kg6%鹿瓜多肽注射液16th册（地升国）0.1ml/kg50%生物秀论坛一学术交流、资源共享、互助社区 10，替代降压物质检查的方法 虽然降压物质检查不能反映产品质量又与 临床脱节 国情：实施GMP的漏洞、我国生化药物多 组分暂时不能取消降压物质检查 研究理化分析方法（质谱）可定量检测微 量组织胺，取代动物实验生物秀论坛一学术交流、资源共享、互助社区 11、降压物质（组胺、类组胺）质谱检测与动物 实验相关性的研究。（中检所负责，上海所、广 州所、天津所参与）生物秀论坛一学术交流、资源共享、互助社区 鼠体内致敏，间隔一定时间后静脉注射供试品进行 激发,观察豚鼠出现过敏反应的情况，以此判定供 试品是否符合规定 多组分注射液为肌内注射设异常毒性、过敏反 应物质等检查项 几乎所有多组分生化药注射液都有该项生物秀论坛一学术交流、资源共享、互助社区 哇侨定斗案瞬中心 www.bbi。,com/bi。/0/过敏滨应物质瘾查存在向题 过敏反应检查是指I型又称速发过敏性反应，还有II型细胞毒或溶细胞型，III型免疫复合物 型或血管炎型，IV型迟发型或结核菌素型 豚鼠过敏性试验有一定的局限性，不能与临床 一致，不能检出所有各种类型的过敏物质 检验周期长会影响生产周期。但目前检测过敏性反应最常用的方法生物秀论坛一学术交流、资源共享、互助社区 物活性测定还是安全性检查）逐渐被先进的理化方法 或能保证临床用药安全有效的其它方法所取代 或只存在于生产研究阶段。生物秀论坛一学术交流、资源共享、互助社区