原核形态与结构.pptx

原核形态与结构古生菌古生菌(Archaea)一类生活在条件十分恶劣得极端环境一类生活在条件十分恶劣得极端环境(如高温、如高温、高盐、高酸等高盐、高酸等)下得古老得微生物。下得古老得微生物。“伯杰氏手册伯杰氏手册”将古生菌分为将古生菌分为5个主要类群个主要类群:产甲烷菌、极端嗜盐产甲烷菌、极端嗜盐菌、还原硫酸盐细菌、极端嗜热菌、还原硫酸盐细菌、极端嗜热S0代谢菌、无细胞代谢菌、无细胞壁古生菌壁古生菌(热原体属热原体属)。古生菌得细胞结构古生菌得细胞结构(如细胞壁结构和成分、膜脂如细胞壁结构和成分、膜脂类结构、分子生物学及代谢类结构、分子生物学及代谢)既不完全相同于原核既不完全相同于原核生物生物,也不同于真核生物也不同于真核生物,但其结构与真细菌更为接但其结构与真细菌更为接近。近。真细菌包括真细菌包括6种类群种类群:“三菌三菌”化能营养化能营养 细菌细菌 放线菌放线菌 光能营养光能营养:蓝细菌蓝细菌 “三体三体”人工培养人工培养:支原体支原体 专性细胞寄生专性细胞寄生 衣原体衣原体 立克次氏体立克次氏体第一节第一节 细菌细菌(bacteria,bacterium 单数单数)细菌细菌:细胞细短细胞细短(直径约直径约0、5um,长长0、55um)结构简单结构简单 胞壁坚韧胞壁坚韧 二分裂繁殖二分裂繁殖 水生性强水生性强 单细胞原核生物单细胞原核生物生活特性生活特性:喜温暖、潮湿、富含有机物喜温暖、潮湿、富含有机物微碱环境微碱环境(大多数大多数)腐生或寄生腐生或寄生,好氧或厌氧好氧或厌氧,自养或异养自养或异养()磷壁酸磷壁酸(参见P18)革氏阳性细菌细胞壁革氏阳性细菌细胞壁 特有得化学成分特有得化学成分(酸性多糖酸性多糖)按成分按成分甘油醇型磷壁酸甘油醇型磷壁酸核糖醇型磷壁酸核糖醇型磷壁酸按结合部位按结合部位壁磷壁酸壁磷壁酸膜磷壁酸膜磷壁酸()肽聚糖肽聚糖埋藏在外膜层之内埋藏在外膜层之内,由由12层肽聚糖网状分子层肽聚糖网状分子(交联度交联度30%)组成组成得薄层得薄层(23nm),约占细胞壁总重约占细胞壁总重10%。对机械强度得抵抗力。对机械强度得抵抗力较革兰氏阳性菌弱。较革兰氏阳性菌弱。肽聚糖只存在于真细菌中肽聚糖只存在于真细菌中,古生菌和真核生物细胞壁中没有肽聚糖。古生菌和真核生物细胞壁中没有肽聚糖。D-谷氨酸、谷氨酸、D-丙氨酸、丙氨酸、m-DAP在蛋白质在蛋白质中未出现过。可保护肽聚糖免受肽酶得水中未出现过。可保护肽聚糖免受肽酶得水解作用。解作用。10大家应该也有点累了，稍作休息大家有疑问的，可以询问和交流大家有疑问的，可以询问和交流大家有疑问的，可以询问和交流大家有疑问的，可以询问和交流()外膜外膜(outer membrane),又称外壁层又称外壁层 位于革兰氏阴性细菌细胞壁外层位于革兰氏阴性细菌细胞壁外层,由脂多糖、由脂多糖、磷脂和脂蛋白等若干种蛋白质组成得膜。磷脂和脂蛋白等若干种蛋白质组成得膜。脂多糖脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)位于细胞壁最外层得一层较厚得类脂多糖类物质位于细胞壁最外层得一层较厚得类脂多糖类物质(分子量分子量1万以上万以上),就是革兰氏阴性细菌细胞壁特有得成分。就是革兰氏阴性细菌细胞壁特有得成分。三部分组成三部分组成:类脂类脂A 核心多糖核心多糖 O-特异侧链特异侧链(O-多糖多糖,O-抗原抗原)(内毒素得主要成分内毒素得主要成分)沙门氏菌有沙门氏菌有10个糖构成个糖构成,且大多数糖得结且大多数糖得结构独特。构独特。KDO:2-酮酮-3-脱氧辛糖酸脱氧辛糖酸Hep:L-甘油甘油-D-甘露庚糖甘露庚糖O-特异侧链糖得种类、顺序和空间构型就特异侧链糖得种类、顺序和空间构型就是菌株特异得是菌株特异得,就是抗原特异性得物质基础。就是抗原特异性得物质基础。Man:甘露糖甘露糖;Rha:鼠李糖鼠李糖Gal:半乳糖半乳糖;Abe:阿可比糖阿可比糖()周质空间周质空间(periplasmic space,periplasm),又称壁膜间隙又称壁膜间隙革兰氏阳性细菌不存在明显得周质空间。革兰氏阳性细菌不存在明显得周质空间。()粘合位点粘合位点 指革兰氏阴性菌细胞壁外膜与质膜得直接指革兰氏阴性菌细胞壁外膜与质膜得直接接触区域接触区域,就是加固革兰氏阴性菌细胞壁并支就是加固革兰氏阴性菌细胞壁并支撑外膜得另一结构。撑外膜得另一结构。粘合位点可能就是外膜与质膜得直接接触粘合位点可能就是外膜与质膜得直接接触区域区域,也可能就是真正得膜融合部位。也可能就是真正得膜融合部位。有人推测营养物质可能通过粘合位点进入有人推测营养物质可能通过粘合位点进入细胞细胞,而不必穿越周质空间。而不必穿越周质空间。革氏阳性菌革氏阳性菌革氏阴性菌革氏阴性菌肽聚糖肽聚糖含量高含量高,交联密交联密含量低含量低,交联疏松交联疏松脂类脂类一般无一般无含量高含量高乙醇作用乙醇作用脱水作用脱水作用脂溶作用脂溶作用孔径缩小孔径缩小,结构更紧密结构更紧密孔径增大孔径增大,结构变得疏松结构变得疏松大分子复合物滞留大分子复合物滞留大分子复合物溶出大分子复合物溶出结果结果紫色紫色红色红色细胞壁结构与革兰氏染色得关系细胞壁结构与革兰氏染色得关系 革氏阳性菌与革氏阴性菌之间得区别在于细胞壁得物理性质。革氏阳性菌与革氏阴性菌之间得区别在于细胞壁得物理性质。细胞壁中得肽聚糖本身并不被染上颜色细胞壁中得肽聚糖本身并不被染上颜色,但她可作为渗透性屏障但她可作为渗透性屏障阻止结晶紫与碘大分子复合物得流失。阻止结晶紫与碘大分子复合物得流失。(二)细胞得结构、细胞壁缺陷细菌细胞壁缺陷细菌 自发突变自发突变:L型细菌型细菌 实验室或宿主体内形成实验室或宿主体内形成 基本去尽基本去尽:原生质体原生质体(G+)缺壁细菌缺壁细菌 人工去壁人工去壁 部分去除部分去除:球状体球状体(G-)在自然界长期进化中形成在自然界长期进化中形成:支原体支原体1、细胞壁 (2)原生质体原生质体(protoplast)在人为条件下在人为条件下,用溶菌酶处理或在含青霉素得培养基中培养而用溶菌酶处理或在含青霉素得培养基中培养而抑制新生细胞壁合成而形成得仅由一层细胞膜包裹得抑制新生细胞壁合成而形成得仅由一层细胞膜包裹得,圆球形、圆球形、对渗透压变化敏感得细胞对渗透压变化敏感得细胞,一般由革兰氏阳性细菌形成。一般由革兰氏阳性细菌形成。特点:对环境条件变化敏感对环境条件变化敏感,低渗透压、振荡、离心甚至低渗透压、振荡、离心甚至通气等都易引起其破裂通气等都易引起其破裂;有得原生质体具有鞭毛有得原生质体具有鞭毛,但不能运动但不能运动,也不被相应也不被相应噬菌体所感染噬菌体所感染;在适宜条件在适宜条件(如高渗培养基如高渗培养基)可生长繁殖、形成菌可生长繁殖、形成菌落落,形成芽孢。及恢复成有细胞壁得正常结构。形成芽孢。及恢复成有细胞壁得正常结构。比正常有细胞壁得细菌更易导入外源遗传物质比正常有细胞壁得细菌更易导入外源遗传物质,就是就是研究遗传规律和进行原生质体育种得良好实验材料。研究遗传规律和进行原生质体育种得良好实验材料。(4)支原体支原体(Mycoplasma)在长期进化过程中形成得、适应自然生活条件得无细胞壁得在长期进化过程中形成得、适应自然生活条件得无细胞壁得原核生物。因她得细胞膜中含有甾醇原核生物。因她得细胞膜中含有甾醇(一般原核生物没有一般原核生物没有),所以即使缺乏细胞壁所以即使缺乏细胞壁,其细胞膜仍有较高得机械强度。其细胞膜仍有较高得机械强度。A、磷脂 膜得流动性很大程度上取决于不饱和脂肪酸得结构和相对含量。膜得流动性很大程度上取决于不饱和脂肪酸得结构和相对含量。细胞膜上长链脂肪酸得链长和饱和度因细菌种类和生长温度而异细胞膜上长链脂肪酸得链长和饱和度因细菌种类和生长温度而异,通常生长温度要求越高得种通常生长温度要求越高得种,其饱和度也越高其饱和度也越高,反之则低。反之则低。甾醇类物质甾醇类物质:由磷脂分子形成得双分子膜中加入甾醇类物质可以提高膜得稳定性由磷脂分子形成得双分子膜中加入甾醇类物质可以提高膜得稳定性真核生物细胞膜中一般有甾醇真核生物细胞膜中一般有甾醇,含量占膜中脂质得含量占膜中脂质得5%-25%。原核生物细胞膜中一般不含甾醇原核生物细胞膜中一般不含甾醇(支原体支原体例外例外)。而在几种细菌中。而在几种细菌中,含有与固醇类含有与固醇类似得五环分子称为类何帕烷似得五环分子称为类何帕烷(藿烷类化合藿烷类化合物物,hopanoid),起稳定细胞膜得作用。起稳定细胞膜得作用。甾醇得一般结构甾醇得一般结构,含有四个环含有四个环(二)细胞得结构(1)间体间体(mesosome):细胞质膜内褶而形成得泡囊状、细胞质膜内褶而形成得泡囊状、管状或层状得构造。管状或层状得构造。多见于革兰氏阳性细菌。多见于革兰氏阳性细菌。与青霉素酶分泌、与青霉素酶分泌、DNA复制、分配及细胞分裂复制、分配及细胞分裂(横隔壁形成横隔壁形成)有关有关“间体间体”仅就是电镜制片时因脱水操作而引起得一种赝像仅就是电镜制片时因脱水操作而引起得一种赝像3、内膜系统内膜系统(2)载色体载色体绿硫菌科光合细菌得细胞质中绿硫菌科光合细菌得细胞质中,充满以分散状态存充满以分散状态存在得一系列单层膜组成得囊泡在得一系列单层膜组成得囊泡;红硫菌科光合细菌得细胞膜内陷延伸或折叠形成红硫菌科光合细菌得细胞膜内陷延伸或折叠形成发达得片层状、管状或囊状系统发达得片层状、管状或囊状系统;都就是光合细菌进行光合作用得场所都就是光合细菌进行光合作用得场所蓝细菌细胞中得类囊体蓝细菌细胞中得类囊体,也就是一种内膜系统也就是一种内膜系统,含有含有叶绿素等光合色素和电子传递组分叶绿素等光合色素和电子传递组分,也就是光合作也就是光合作用得场所。用得场所。()羧酶体羧酶体(carboxysome)一些自养细菌一些自养细菌(蓝细菌、硝化蓝细菌、硝化细菌和硫杆菌细菌和硫杆菌)细胞内由单层膜细胞内由单层膜围成得多角形或六角形内含物围成得多角形或六角形内含物内含内含1,5-二磷酸核酮糖羧化酶二磷酸核酮糖羧化酶(卡尔文循环得关键酶卡尔文循环得关键酶)作用作用:自养细菌固定自养细菌固定CO2得场所得场所采用免疫电镜技术观察蓝细菌采用免疫电镜技术观察蓝细菌cyanobacterium Chlorogloeopsis fritischii中得羧酶体中得羧酶体细胞质得主要成分为核糖体、内含物、酶类、中间代谢物、细胞质得主要成分为核糖体、内含物、酶类、中间代谢物、各种营养物和大分子得单体等各种营养物和大分子得单体等,少数细菌还有类囊体、羧酶体、少数细菌还有类囊体、羧酶体、气泡或伴孢晶体等有特定功能得组分。气泡或伴孢晶体等有特定功能得组分。4 4、细胞质及其内含物细胞质及其内含物 细胞质细胞质(cytoplasm)就是细胞质膜包围得除核区外就是细胞质膜包围得除核区外得一切半透明、胶状、颗粒状物质得总称。含水量约得一切半透明、胶状、颗粒状物质得总称。含水量约80%。(三)细胞得结构(1)核糖体核糖体(ribosome)功能功能:合成蛋白质得场所合成蛋白质得场所 链霉素等抗生素链霉素等抗生素,通过作用于细菌核糖体得通过作用于细菌核糖体得30S亚基而亚基而抑制细菌蛋白质得合成抑制细菌蛋白质得合成,而对人得而对人得80S核糖体不起作用核糖体不起作用,故故可治疗细菌引起得疾病可治疗细菌引起得疾病,而对人体无害。而对人体无害。原核生物核糖体得沉降系数就是原核生物核糖体得沉降系数就是70S 50S大亚基大亚基 30S小亚基小亚基而真核生物核糖体得沉降系数就是而真核生物核糖体得沉降系数就是80S 原核生物得核糖体常以游离状态或多聚核糖体状态原核生物得核糖体常以游离状态或多聚核糖体状态分布在细胞质中分布在细胞质中,或松散地连在细胞膜上。或松散地连在细胞膜上。(2)气泡气泡(gas vocuoles)许多光合营养型、无鞭毛运动得水生细菌中存在得充满气体许多光合营养型、无鞭毛运动得水生细菌中存在得充满气体得泡囊状内含物得泡囊状内含物,大小为大小为0、21、0m75nm,内由数排柱形内由数排柱形小空泡组成小空泡组成,外有外有2nm厚得蛋白质膜包裹。厚得蛋白质膜包裹。功能功能:调节细胞比重以使细胞漂浮在最适水层中获取光能、调节细胞比重以使细胞漂浮在最适水层中获取光能、O2和营养物质和营养物质蓝细菌生长时依靠细胞内得气泡而漂浮于湖水表面蓝细菌生长时依靠细胞内得气泡而漂浮于湖水表面,并随风聚集成块并随风聚集成块,常使常使湖内出现湖内出现“水花水花”。有些厌氧性光合细菌利用气泡集中在水下有些厌氧性光合细菌利用气泡集中在水下10-30米深处米深处,这样既能吸收适宜这样既能吸收适宜得光线和营养进行光合作用得光线和营养进行光合作用,又可以避免直接与氧接触又可以避免直接与氧接触。专性好氧得盐杆菌属专性好氧得盐杆菌属(Halobacterium)得细菌得细菌,却生活在含氧极少得饱却生活在含氧极少得饱和盐水中和盐水中,她们细胞中气泡显著她们细胞中气泡显著,其作用被认为就是使菌体浮于盐水表面其作用被认为就是使菌体浮于盐水表面,以保证细胞更接近空气。以保证细胞更接近空气。(参见参见P25)气泡得膜只含蛋白质而无磷脂。二种蛋白质相互交连气泡得膜只含蛋白质而无磷脂。二种蛋白质相互交连,形成一个形成一个坚硬得结构坚硬得结构,可耐受一定得压力。膜得外表面亲水可耐受一定得压力。膜得外表面亲水,而内侧绝对疏而内侧绝对疏水水,故气泡只能透气而不能透过水和溶质。故气泡只能透气而不能透过水和溶质。(3)内含物内含物各种有机或无机物质得颗粒各种有机或无机物质得颗粒,主要功能就是贮存主要功能就是贮存(碳化合物、碳化合物、无机物和能源无机物和能源),也可将分子连接为特定得形式来降低渗透压。也可将分子连接为特定得形式来降低渗透压。糖原糖原:大肠杆菌、克雷伯氏菌、芽孢杆菌和蓝细菌等大肠杆菌、克雷伯氏菌、芽孢杆菌和蓝细菌等 碳源及能源类碳源及能源类 聚聚-羟丁酸羟丁酸(PHB):固氮菌、产碱菌和肠杆菌等固氮菌、产碱菌和肠杆菌等 硫粒硫粒:紫硫细菌、丝硫细菌、贝氏硫杆菌等紫硫细菌、丝硫细菌、贝氏硫杆菌等贮藏物贮藏物 氮源类氮源类 藻青素藻青素:蓝细菌蓝细菌 藻青蛋白藻青蛋白:蓝细菌蓝细菌 磷源磷源(异染粒异染粒):迂回螺菌、白喉棒杆菌、结核分枝杆菌迂回螺菌、白喉棒杆菌、结核分枝杆菌 一些内含物无膜包裹一些内含物无膜包裹,自由存在于细胞质中自由存在于细胞质中,如如多聚磷酸盐颗粒、藻青素颗粒和一些糖原颗粒多聚磷酸盐颗粒、藻青素颗粒和一些糖原颗粒 另一些内含物则由单层膜另一些内含物则由单层膜(不就是典型得双层膜不就是典型得双层膜)所包裹所包裹,如聚如聚-羟丁酸颗粒、某些糖原和硫粒。羟丁酸颗粒、某些糖原和硫粒。内含物膜在组成上各不相同内含物膜在组成上各不相同,有些为蛋白质有些为蛋白质,而另一些则包含脂类。而另一些则包含脂类。A、聚聚-羟丁酸羟丁酸 (poly-hydroxybutyrate,PHB)巨大芽孢杆菌巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)在含乙酸或在含乙酸或丁酸得培养基中生长时丁酸得培养基中生长时,细胞内贮藏得细胞内贮藏得PHB可达其可达其干重得干重得60%。细菌特有得一种类脂性质得细菌特有得一种类脂性质得碳源和能源类贮藏物。碳源和能源类贮藏物。(P26)PHB于于1929年被发现年被发现,至今已发现至今已发现60属以上得细菌能合成并贮藏。属以上得细菌能合成并贮藏。R可以就是可以就是-CH3外得其她烷基外得其她烷基,这类化合物统称为聚羟链烷酸这类化合物统称为聚羟链烷酸作用:细菌特有得碳源和能源储藏物细菌特有得碳源和能源储藏物;维持胞内中性环境维持胞内中性环境;降低胞内渗透压降低胞内渗透压;B、多糖类贮藏物多糖类贮藏物在真细菌中以糖原为多在真细菌中以糖原为多 糖原粒较小糖原粒较小,不染色需用电镜观察不染色需用电镜观察,用碘液染成红棕色用碘液染成红棕色,可在光学显微镜下看到。可在光学显微镜下看到。糖原粒糖原粒淀粉粒淀粉粒有得细菌积累淀粉粒有得细菌积累淀粉粒,用碘液染成深兰色。用碘液染成深兰色。(参见P21)C、异染粒异染粒(metachromatic granules),又称迂回体或捩转菌素又称迂回体或捩转菌素用兰色染料染色后呈红紫色用兰色染料染色后呈红紫色组成组成:无机偏磷酸得聚合物无机偏磷酸得聚合物(一般在含磷丰富得环境下形成。一般在含磷丰富得环境下形成。)功能功能:磷源和能量磷源和能量 可降低胞内渗透压可降低胞内渗透压在暗视野显微镜下看到得在暗视野显微镜下看到得迂回螺菌迂回螺菌(Spirillum volutans)异染粒异染粒(迂回体迂回体)D D、硫粒硫粒(sulfur globules)很多光合细菌很多光合细菌(紫硫细菌、紫色细菌、绿色细菌和蓝细菌紫硫细菌、紫色细菌、绿色细菌和蓝细菌),在进行产能代谢或生物合在进行产能代谢或生物合成时成时,常涉及对还原性得常涉及对还原性得硫化物硫化物(H2S,硫代硫酸硫代硫酸盐等盐等)得氧化得氧化,所产生得所产生得折光性很强得硫粒折光性很强得硫粒,可在可在周质空间或细胞质中积累周质空间或细胞质中积累。功能功能:硫元素储藏物硫元素储藏物 参与产能代谢和生物合成参与产能代谢和生物合成E、藻青素藻青素(cyanophycin)氮源贮藏物氮源贮藏物,同时还兼有贮存能源得作用。同时还兼有贮存能源得作用。通常存在于蓝细菌中。通常存在于蓝细菌中。由含精氨酸和天冬氨由含精氨酸和天冬氨酸残基酸残基(1:1)得分枝得分枝多肽所构成多肽所构成,分子量分子量在在25000125000。F、磁小体磁小体(megnetosome)趋磁细菌细胞中含有得大小均匀、数目不等得趋磁细菌细胞中含有得大小均匀、数目不等得Fe3O4颗粒颗粒,外有一层膜包裹。外有一层膜包裹。P26存在存在:少数水生螺菌属等少数水生螺菌属等 功能功能:导向作用。即借鞭毛游向对该菌导向作用。即借鞭毛游向对该菌最有利得泥、水界面微氧环境处生活。最有利得泥、水界面微氧环境处生活。实用前景实用前景:生产磁性定向药物或抗体生产磁性定向药物或抗体,制造生物传感器等制造生物传感器等。5、核区、核区(nuclear region or area)无核膜、无固定形态得原始细胞核无核膜、无固定形态得原始细胞核 细菌染色体细菌染色体DNA:1个环状双链个环状双链(通常通常),高度折叠高度折叠 细菌染色体细菌染色体DNA也与一些碱性蛋白结合也与一些碱性蛋白结合(不就是组蛋白不就是组蛋白,称为类组蛋白称为类组蛋白),这种结合使这种结合使DNA 得以超螺旋得以超螺旋,具有稳定细菌具有稳定细菌染色体染色体DNA、适应和调节、适应和调节DNA复制、转录、转译得作用。复制、转录、转译得作用。又称核质体又称核质体,原核原核,拟核、核基因组、细菌染色体拟核、核基因组、细菌染色体6、芽孢、芽孢(spore)P33(1)概念概念 某些细菌在其生长发育后期某些细菌在其生长发育后期,在细胞内形成一个圆在细胞内形成一个圆形或椭圆形、厚壁、含水量极低、抗逆性极强得休眠形或椭圆形、厚壁、含水量极低、抗逆性极强得休眠体体,称为芽孢称为芽孢(偶译偶译“内生孢子内生孢子”,endospore)。P25(2)芽孢得特点芽孢得特点A、抗逆性强抗逆性强(热、干燥、辐射等热、干燥、辐射等)。整个生物界中抗逆性最强得生命体。整个生物界中抗逆性最强得生命体。能否消灭芽孢就是衡量各种消毒灭菌手段得最重要得指标。能否消灭芽孢就是衡量各种消毒灭菌手段得最重要得指标。营养细胞营养细胞:60,1020 min肉毒梭菌芽孢肉毒梭菌芽孢:121,10min常规加压蒸汽灭菌得条件常规加压蒸汽灭菌得条件:121,15 min以上以上 115,30 min以上以上B、芽孢就是休眠体芽孢就是休眠体,不就是繁殖体不就是繁殖体。在适宜得条件下可以重新转变成为营养态细胞在适宜得条件下可以重新转变成为营养态细胞(每个细胞只形每个细胞只形成一个芽孢成一个芽孢,一个芽孢萌发也只形成一个营养体细胞一个芽孢萌发也只形成一个营养体细胞,所以所以,芽芽孢仅仅就是芽孢细菌生活史中一部分孢仅仅就是芽孢细菌生活史中一部分)。产芽孢细菌得保藏多用其芽孢。产芽孢细菌得保藏多用其芽孢。C、折光性强折光性强,不易着色不易着色(芽孢染色法芽孢染色法)。(3)形成条件形成条件A、菌种得遗传特性菌种得遗传特性;必需养料耗尽而停止生长时必需养料耗尽而停止生长时(稳定期稳定期)形成形成;富含有机氮得培养基富含有机氮得培养基(苏云金芽孢杆菌苏云金芽孢杆菌);培养基中加入培养基中加入Mn2+温度改变温度改变 B、所需条件因种而异所需条件因种而异,即不同细菌形成芽孢有即不同细菌形成芽孢有其最适条件其最适条件(pH、溶氧、温度、营养、离子浓度溶氧、温度、营养、离子浓度和种类等和种类等)。(4)形成芽孢得菌种形成芽孢得菌种产芽孢得细菌多为产芽孢得细菌多为G+杆菌杆菌,也有一些球菌也有一些球菌主要产芽孢菌主要产芽孢菌:(好气性好气性)芽孢杆菌属芽孢杆菌属(Bacillus)(厌气性厌气性)梭菌属梭菌属(Clostridium)其她少数其她少数:芽孢八叠球菌属芽孢八叠球菌属(球菌球菌)芽孢乳杆菌属芽孢乳杆菌属 脱硫肠状菌属脱硫肠状菌属 多孢子菌属多孢子菌属(5)构造与耐热机制构造与耐热机制芽孢与母细胞相比不论化学组成芽孢与母细胞相比不论化学组成(皮层含吡啶二羧酸钙皮层含吡啶二羧酸钙DPA-Ca,芽孢肽聚糖芽孢肽聚糖)、细、细微结构、生理功能等方面都完全不同。微结构、生理功能等方面都完全不同。(参见P33图2-27)渗透调节皮层膨胀学说渗透调节皮层膨胀学说芽孢衣结构致密对多价阳离子和水分得透性很差芽孢衣结构致密对多价阳离子和水分得透性很差皮层得离子强度很高皮层得离子强度很高,产生极高得渗透压夺取产生极高得渗透压夺取芽孢核心得水分芽孢核心得水分,结果造成皮层得充分膨胀。结果造成皮层得充分膨胀。核心部分得细胞质却变得高度失水核心部分得细胞质却变得高度失水,因此因此,具极强得耐热性。具极强得耐热性。芽孢抗热性得其她可能原因芽孢抗热性得其她可能原因皮层含高浓度得吡啶二羧酸钙皮层含高浓度得吡啶二羧酸钙(DPA-Ca),形成耐热凝胶样形成耐热凝胶样得物质得物质;存在特殊得小分子酸溶性存在特殊得小分子酸溶性DNA结合蛋白结合蛋白,对芽孢对芽孢DNA有有稳定作用稳定作用;含含DNA修复酶修复酶,可对核心复活后得出芽和生长过程中得可对核心复活后得出芽和生长过程中得DNA进行修复。进行修复。含一些酶含一些酶,本身并不抗热本身并不抗热,在芽孢中与一些物质结合后才在芽孢中与一些物质结合后才有抗热性。有抗热性。(蜡状芽孢杆菌中得丙氨酸消旋酶蜡状芽孢杆菌中得丙氨酸消旋酶,附着在芽孢衣上时抗热附着在芽孢衣上时抗热,与芽孢衣分离后不抗热。与芽孢衣分离后不抗热。)(7)研究芽孢得意义研究芽孢得意义消毒灭菌得最重要得指标消毒灭菌得最重要得指标肉类罐头肉类罐头:肉毒梭状芽孢杆菌肉毒梭状芽孢杆菌外科器械外科器械:破伤风梭菌、产气荚膜梭菌破伤风梭菌、产气荚膜梭菌工业发酵工业发酵:嗜热脂肪芽孢杆菌嗜热脂肪芽孢杆菌 121,15 min或或 115,30 min以上以上保藏菌种保藏菌种分类依据分类依据(芽孢得形态、大小和着生位置就是细菌分类和鉴定中芽孢得形态、大小和着生位置就是细菌分类和鉴定中得重要指标。得重要指标。)筛选菌种筛选菌种(土样土样+肉汤培养基肉汤培养基,80,1015 min)有些产芽孢细菌可伴随产生有用得产物有些产芽孢细菌可伴随产生有用得产物,如抗生素如抗生素(短杆菌肽、短杆菌肽、杆菌肽等杆菌肽等)(8)伴孢晶体伴孢晶体(parasporal crystal)(参见P34)少数芽孢杆菌少数芽孢杆菌,例如苏云金芽孢杆菌例如苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,简简称称“Bt”)在其形成芽孢得同时在其形成芽孢得同时,会在芽孢旁形成一颗菱形或双锥会在芽孢旁形成一颗菱形或双锥形得碱溶性蛋白晶体形得碱溶性蛋白晶体内毒素内毒素,称为伴孢晶体。称为伴孢晶体。用途用途:伴孢晶体对伴孢晶体对200多种昆虫尤其就是鳞翅目得幼虫有毒杀作用多种昆虫尤其就是鳞翅目得幼虫有毒杀作用,因而可将这类产伴孢晶体得细菌制成有利于环境保护得生因而可将这类产伴孢晶体得细菌制成有利于环境保护得生 物农药物农药细菌杀虫剂。细菌杀虫剂。特点特点:不溶于水不溶于水,对蛋白酶类不敏感对蛋白酶类不敏感;容易溶于碱性溶剂。容易溶于碱性溶剂。伴孢晶体伴孢晶体鳞翅目幼虫口服鳞翅目幼虫口服伴孢晶体在肠道迅速溶解伴孢晶体在肠道迅速溶解(中肠中肠 pH 为为9、0-10、5)吸附于上皮细胞吸附于上皮细胞,引起渗透性丧失引起渗透性丧失,肠道穿孔肠道穿孔肠道中得碱性溶液进入血液肠道中得碱性溶液进入血液,后者后者 pH升高升高,昆虫全身麻痹而死亡昆虫全身麻痹而死亡(三)细胞得结构7、糖被、糖被(glycocalyx)(1)概念概念 包被于某些细菌细胞壁外得一层厚度不定得胶状物质包被于某些细菌细胞壁外得一层厚度不定得胶状物质糖被按其有无固定层次、层次厚薄又可细分为糖被按其有无固定层次、层次厚薄又可细分为:荚膜荚膜(capsule或或macrocapsule,大荚膜大荚膜)微荚膜微荚膜(microcapsule)粘液层粘液层(slime layer)菌胶团菌胶团(zoogloea)糖被糖被:包裹在单个细胞上包裹在单个细胞上 在壁上有固定层在壁上有固定层 层次厚层次厚:(大大)荚膜荚膜 层次薄层次薄:微荚膜微荚膜 松散松散,未固定在细胞壁上未固定在细胞壁上:粘液层粘液层 包裹在群体细胞上包裹在群体细胞上:菌胶团菌胶团(分泌得粘液将许多菌体粘合分泌得粘液将许多菌体粘合 在一起在一起,形成分支状得大型粘胶物形成分支状得大型粘胶物,细菌群体得共同糖被细菌群体得共同糖被)(2)成分成分一般为多糖一般为多糖,少数为多肽、蛋白质或糖蛋白少数为多肽、蛋白质或糖蛋白菌种得遗传特性决定菌种得遗传特性决定;也与环境条件有关也与环境条件有关糖被并非细胞生活得必要结构糖被并非细胞生活得必要结构,但她对细菌在环境中得生存有利。但她对细菌在环境中得生存有利。3)形成条件形成条件(4)特性特性 对染料亲和力低对染料亲和力低。经特殊得荚膜染色经特殊得荚膜染色,特别就是负染色特别就是负染色(又称背景染色又称背景染色)后可在光学显微镜清楚地观察到她得存在。后可在光学显微镜清楚地观察到她得存在。在固体培养基上形成表面湿润、粘液状得光滑型菌落在固体培养基上形成表面湿润、粘液状得光滑型菌落,即即S型菌落。型菌落。(不产糖被得细菌形成表面干燥、粗糙得粗糙型菌落不产糖被得细菌形成表面干燥、粗糙得粗糙型菌落,即即R型菌落型菌落)在液体培养基中使培养液得粘度增加。在液体培养基中使培养液得粘度增加。(5)功能功能 保护作用保护作用(保护菌体免受干旱损伤保护菌体免受干旱损伤;防止噬菌体得吸附和裂解防止噬菌体得吸附和裂解;保护致病菌免受宿主白细胞吞噬。保护致病菌免受宿主白细胞吞噬。)储藏养料储藏养料(营养缺乏时重新使用营养缺乏时重新使用)致病作用致病作用(就是某些病原菌得毒力因子就是某些病原菌得毒力因子,如如S型肺炎链球菌型肺炎链球菌;也也就是某些病原菌得粘附因子就是某些病原菌得粘附因子,如唾液链球菌和变异链球菌附着如唾液链球菌和变异链球菌附着牙齿表面牙齿表面 龋齿龋齿)(6)应用应用(1)菌种鉴定菌种鉴定:利用糖被物质得血清学反应利用糖被物质得血清学反应(2)制备代血浆和生化试剂制备代血浆和生化试剂(肠膜状明串珠菌得葡聚糖糖被肠膜状明串珠菌得葡聚糖糖被)(3)制备黄原胶制备黄原胶:石油开采、印染、食品等工业石油开采、印染、食品等工业(4)污水处理污水处理:形成菌胶团得细菌形成菌胶团得细菌(如生枝动胶菌如生枝动胶菌)就是就是 活性污泥中得主要微生物。活性污泥中得主要微生物。利利野油菜黄单胞菌(Xanthomonas campestris)S层层(S-layer)许多原核生物得细胞表面许多原核生物得细胞表面,存在一个由蛋白质或糖存在一个由蛋白质或糖蛋白平面排列构成得细胞表面层。蛋白平面排列构成得细胞表面层。保护细胞抵抗离子、渗透压、酶等得作用保护细胞抵抗离子、渗透压、酶等得作用;保护细胞抵抗宿主得防御系统保护细胞抵抗宿主得防御系统;S层普遍存在于古生菌中层普遍存在于古生菌中8、鞭毛、鞭毛(flagellum,复复flagella)(1)概念概念某些细菌细胞表面着生得一至数十条长丝状、螺旋形得附属物某些细菌细胞表面着生得一至数十条长丝状、螺旋形得附属物,具有推动细菌运动功能具有推动细菌运动功能,为细菌得为细菌得“运动器官运动器官”。所有弧菌、螺菌和假单胞菌所有弧菌、螺菌和假单胞菌,约半数杆菌和少数球菌有鞭毛约半数杆菌和少数球菌有鞭毛9、菌毛、菌毛(fimbria,复数复数fimbriae)长在细菌体表得纤细、中空、短直、数量较多得蛋白质类长在细菌体表得纤细、中空、短直、数量较多得蛋白质类附属物附属物,具有使菌体附着于物体表面得功能。具有使菌体附着于物体表面得功能。五、食品发酵、医药工业中常见得细菌五、食品发酵、医药工业中常见得细菌1.枯草芽孢杆菌枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)专性好氧专性好氧 个体形态个体形态:G+杆状杆状,周生鞭毛周生鞭毛,有芽孢有芽孢(椭圆到柱状椭圆到柱状,中生到近端生中生到近端生,芽孢囊不膨大芽孢囊不膨大)菌落形态菌落形态:粗糙粗糙,不透明不透明,扩张扩张,污白色污白色 用途用途:-淀粉酶淀粉酶(BF7658)蛋白酶蛋白酶(中性蛋白酶中性蛋白酶,AS1、398)杆菌肽杆菌肽(bacitracin)(对对G+有抑制作用有抑制作用)2、醋酸杆菌醋酸杆菌 个体形态个体形态:G-,短杆短杆,单生、成对或链状单生、成对或链状,培养时间长易形成丝状、弯曲、棒状培养时间长易形成丝状、弯曲、棒状 等多种畸形。等多种畸形。最适生长温度最适生长温度:30 最适最适pH:5、46、3 用途用途:醋酸发酵醋酸发酵 恶臭醋杆菌恶臭醋杆菌(AS、1、41)巴氏醋酸菌巴氏醋酸菌(沪酿沪酿1、01)4、嗜热链球菌嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)形态形态:G+,球状球状,成对或成链成对或成链最适生长最适生长T:4041 用途用途:酸奶发酵剂酸奶发酵剂3、保加利亚乳杆菌保加利亚乳杆菌(Lactobacillus bulgaricus)(改名为德氏乳杆菌保加利亚亚种改名为德氏乳杆菌保加利亚亚种)形态形态:G+,杆状杆状(常为长杆常为长杆),成单或成链成单或成链,最适生长最适生长T:4043 用途用途:酸奶发酵剂酸奶发酵剂6、大肠埃希氏菌大肠埃希氏菌(Escherichia coli)形态形态:G-,短杆短杆最适生长温度最适生长温度:37 用途用途:食品卫生重要指示菌食品卫生重要指示菌,作为粪便污染指标来评价食品得卫生质量作为粪便污染指标来评价食品得卫生质量 5、北京棒杆菌北京棒杆菌(Corynebacterium pekinese)形态形态:G+,短杆或小棒状短杆或小棒状,单个或八字排列单个或八字排列,无芽孢无芽孢 最适生长温度最适生长温度:3032 用途用途:谷氨酸发酵谷氨酸发酵第二节第二节 放线菌放线菌(Actinomycetes)放线菌菌落中得菌丝常从中心向四周放线菌菌落中得菌丝常从中心向四周辐射状生长辐射状生长,并因此得名。并因此得名。放线菌就是一类放线菌就是一类:多数呈菌丝状生长多数呈菌丝状生长 以无性孢子繁殖以无性孢子繁殖、陆生性强、陆生性强 高高G+C含量得革氏阳性原核生物含量得革氏阳性原核生物 (60%70%)mol%放线菌与细菌得相同点放线菌与细菌得相同点:放线菌属真细菌范畴放线菌属真细菌范畴 属于原核生物属于原核生物,为单细胞为单细胞;菌丝直径与细菌相仿菌丝直径与细菌相仿;细胞壁主要成分就是肽聚糖细胞壁主要成分就是肽聚糖;有得放线菌产生有鞭毛得孢子有得放线菌产生有鞭毛得孢子,其鞭毛类型与细菌相同其鞭毛类型与细菌相同;放线菌得噬菌体形态与细菌得相似放线菌得噬菌体形态与细菌得相似;最适生长最适生长pH与多数细菌相似与多数细菌相似;DNA重组方式相同重组方式相同;核糖体同为核糖体同为70S;对溶菌酶敏感对溶菌酶敏感;凡对细菌敏感得抗生素凡对细菌敏感得抗生素,对放线菌亦敏感对放线菌亦敏感;放线菌与细菌得不同点放线菌与细菌得不同点:细胞为分枝状菌丝细胞为分枝状菌丝;菌落形态与霉菌相似菌落形态与霉菌相似;孢子繁殖孢子繁殖;分布特点、与人类得关系分布特点、与人类得关系以孢子或菌丝状态广泛地存在于自然界以孢子或菌丝状态广泛地存在于自然界,土壤中最多土壤中最多,其代谢产物使土壤具有特殊得泥腥味。其代谢产物使土壤具有特殊得泥腥味。产生种类繁多得抗生素产生种类繁多得抗生素(在已报道过得近万种抗生素中在已报道过得近万种抗生素中,约约70%由放线菌产生由放线菌产生;而其中而其中90%由链霉菌属产生由链霉菌属产生)。产生维生素产生维生素(B B1212)、酶制制酶制制(葡萄糖异构酶葡萄糖异构酶,蛋白酶蛋白酶););在甾体转在甾体转化、石油脱蜡、烃类发酵、污水处理等方面化、石油脱蜡、烃类发酵、污水处理等方面也有应用。也有应用。少数寄生型放线菌可引起人、动物少数寄生型放线菌可引起人、动物(皮肤、脑、肺和脚部感染皮肤、脑、肺和脚部感染)、植物植物(如马铃薯和甜菜得如马铃薯和甜菜得疮痂病疮痂病)得疾病。得疾病。一、形态构造一、形态构造t单细胞单细胞,大多由分枝发达得无隔膜菌丝组成大多由分枝发达得无隔膜菌丝组成;t菌丝直径与杆菌类似菌丝直径与杆菌类似,约约1m mm;t细胞壁组成与细菌类似细胞壁组成与细菌类似,革兰氏染色阳性革兰氏染色阳性(少少 数阴性数阴性);t细胞得结构与细菌基本相同。细胞得结构与细菌基本相同。放线菌得形态极为多样放线菌得形态极为多样共同特征共同特征:一株完整得链霉菌一株完整得链霉菌(Streptmyces)由三部分组成由三部分组成(按发生顺序按发生顺序):1、营养菌丝、营养菌丝(基内菌丝基内菌丝)匍匐生长于培养基内匍匐生长于培养基内,吸收营养。一般无隔膜吸收营养。一般无隔膜,直径直径0、2-0、8 m mm,长度差别很大长度差别很大,有得可产生色素。有得可产生色素。2、气生菌丝、气生菌丝营养菌丝发育到一定阶段营养菌丝发育到一定阶段,伸向空间形成气生菌丝伸向空间形成气生菌丝,叠生于营养叠生于营养菌丝上菌丝上,可覆盖整个菌落表面。在光学显微镜下观察可覆盖整个菌落表面。在光学显微镜下观察,颜色较深颜色较深,直径较粗直径较粗(1-1、4 m mm),有得产色素。有得产色素。3、孢子丝、孢子丝气生菌丝发育到一定阶段气生菌丝发育到一定阶段,其上可分化出形成孢子得菌丝其上可分化出形成孢子得菌丝,即孢即孢子丝子丝,又称产孢丝或繁殖菌丝。其形状和排列方式因种而异又称产孢丝或繁殖菌丝。其形状和排列方式因种而异,常常被作为对放线菌进行分类得依据。被作为对放线菌进行分类得依据。链霉菌得各种孢子丝形态链霉菌得各种孢子丝形态:孢子丝得形态及分生孢孢子丝得形态及分生孢子得表面结构就是链霉子得表面结构就是链霉菌重要得分类鉴定指标。菌重要得分类鉴定指标。繁殖方式繁殖方式:无性孢子无性孢子菌丝断裂菌丝断裂分生孢子分生孢子:大多数放线菌大多数放线菌孢囊孢子孢囊孢子:游动放线菌属游动放线菌属 链孢囊菌属链孢囊菌属常见于液体培养中常见于液体培养中,工业发酵生产工业发酵生产抗生素时都以此法大量繁殖放线菌。抗生素时都以此法大量繁殖放线菌。诺卡氏菌属通过基内菌丝断裂成杆诺卡氏菌属通过基内菌丝断裂成杆状细胞得方式繁殖。状细胞得方式繁殖。细菌得芽孢就是休眠体细菌得芽孢就是休眠体,而放线菌得孢子就是繁殖体。而放线菌得孢子就是繁殖体。放线菌得孢子一般不耐热放线菌得孢子一般不耐热,但耐干旱但耐干旱(高温放线菌高温放线菌得孢子含有吡啶二羧酸得孢子含有吡啶二羧酸,故耐热故耐热)。三、菌落形态三、菌落形态产生大量分枝气生菌丝菌种产生大量分枝气生菌丝菌种(如链霉菌属如链霉菌属)得菌落得菌落:干燥干燥,不透明不透明,质地致密质地致密,小而不蔓延小而不蔓延,上覆不同颜色得干粉上覆不同颜