第十章灭菌制剂与无菌制剂.pptx

第十章灭菌制剂与无菌制剂问题得导入问题得导入v注射剂与一般液体制剂有何不同？v要确保其“安全、有效、稳定、可控”,此类制剂相对于口服液体制剂来说,还应从哪些环节加强控制？学习要求v1、掌握无菌制剂及灭菌制剂制备得相关单元技术:水处理技术、液体得滤过技术、热原得去除技术、渗透压调节技术、灭菌及无菌技术、空气净化技术等v2、掌握注射剂得定义、特点、分类、质量要求v3、掌握注射剂得溶剂与附加剂计算及其制备方法v4、熟悉大输液种类、质量要求、制备要点5、了解注射用无菌粉末特点、原理、工艺、存在问题6、熟悉眼用液体剂概念、质量要求、附加剂、制备7、了解其她灭菌制剂与无菌制剂第一节 概述一、基本概念 灭菌制剂(Sterilized Preparation):采用某一物理或化学方法杀灭或除去所有活得微生物繁殖体和芽孢得一类药物制剂。无菌制剂(Sterile Preparation):在无菌环境中采用无菌操作方法或技术制备得不含任何活得微生物繁殖体和芽孢得一类药物制剂。灭菌和无灭菌和无菌制剂菌制剂注射用制剂注射用制剂眼用制剂眼用制剂植入型制剂植入型制剂创伤用制剂创伤用制剂手术用制剂手术用制剂注射剂、输液、注射粉针注射剂、输液、注射粉针滴眼剂、眼用膜剂、软膏滴眼剂、眼用膜剂、软膏剂、凝胶剂剂、凝胶剂植入片植入片溃疡、烧伤及外伤用溶溃疡、烧伤及外伤用溶剂、软膏、气雾剂等剂、软膏、气雾剂等止血海棉、骨蜡止血海棉、骨蜡二、灭菌和无菌制剂得类型v直接注入体内或直接接触创伤面、粘膜等得一类制剂直接注入体内或直接接触创伤面、粘膜等得一类制剂三、灭菌和无菌制剂得质量要求v除应符合制剂得一般要求外除应符合制剂得一般要求外,还必须符合还必须符合:无菌 成品中不应含有任何活得微生物;无热原 制剂内不应含热原,特别就是用大体积得,供静脉或脊椎腔注射以及一次用量超过5ml得注射剂;可见异物及不溶性微粒 应符合药典得要求;安全性 应具良好生物相容性,对组织基本无刺激性,一些非水溶剂和附加剂必须经动物实验证实无刺激性和毒性,以确保安全;渗透压 注射剂渗透压要求与血浆得渗透压相等或接近;大容量还有等张要求。pH 一般控制在pH 4-9稳定性 物理稳定性和化学稳定性,确保产品在贮存期间安全有效;其她 降压物质,蛋白质,鞣质三、三、v水得处理技术v液体过滤技术v热原得去除技术v渗透压调节技术v灭菌与无菌技术v空气净化技术第二节、灭菌和无菌制剂得相关技术和理论一、水得处理技术一、水得处理技术v概述概述v原水处理原水处理v注射用水得制备注射用水得制备v注射用水得收集和贮藏注射用水得收集和贮藏饮用水饮用水饮用水饮用水1纯化水纯化水纯化水纯化水2灭菌注射用水灭菌注射用水灭菌注射用水灭菌注射用水4注射用水注射用水注射用水注射用水3 一般应根据各生产工序或使用目得与要求选用适宜得制药用水。一般应根据各生产工序或使用目得与要求选用适宜得制药用水。药品生产企业应确保制药用水得质量符合预期用途得要求。药品生产企业应确保制药用水得质量符合预期用途得要求。一、水得处理技术一、水得处理技术(一一)概述概述制药用水得种类大家有疑问的，可以询问和交流大家有疑问的，可以询问和交流可以互相讨论下，但要小声点可以互相讨论下，但要小声点可以互相讨论下，但要小声点可以互相讨论下，但要小声点饮用水(tap water)-为为天天然然水水经经净净化化处处理理所所得得得得水水,其其质质量量必必须须符符合合现现行行中中华华人人民民共共和和国国国国家家标标准准生生活活饮饮用用水水卫卫生生标标准准(用于药材得漂洗、制药用具粗洗及药材得提取溶剂用于药材得漂洗、制药用具粗洗及药材得提取溶剂)。纯纯化化水水(purified water)-为为饮饮用用水水经经蒸蒸馏馏法法、离离子子交交换换法法、反反渗渗透透法法等等制制得得得得供供药药用用得得水水,不不含含任任何何附附加加剂剂(配配制制普普通通药药剂剂得溶剂或试验用得溶剂或试验用)。注注射射用用水水(water for injection)-为为纯纯化化水水经经蒸蒸馏馏所所得得得得蒸蒸馏馏水水(无热原水无热原水;配制注射剂、滴眼剂等配制注射剂、滴眼剂等);灭灭菌菌注注射射用用水水(sterile water for injection)注射用水按注射剂生产工艺制备,不含任何添加剂(注注射射用用无无菌菌粉粉末末得得溶溶剂剂或注射剂得稀释剂或注射剂得稀释剂);(二二)各种水得来源及质量要求各种水得来源及质量要求制药用水质量要求(符合Ch、P2010二部各自项下得规定)v纯化水:检查项目包括酸碱度,硝酸盐与亚硝酸盐,氨,电导率、总有机碳或易氧化物、不挥发物及重金属。v注射用水:规定pH为5、07、0,氨浓度不大于0、00002%,内毒素小于0、25EU/ml,其她检查项目与纯化水相同。v灭菌注射用水:应符合注射用水项下各项检查得规定,并应符合注射剂项下有关规定 1、原水得一般处理方法:目得最大限度得去除水中得不溶性杂质、可溶性盐类、微生物及热原。方法:组合过滤法(多介质滤器)、离子交换法、电渗析法、反渗透法(三三)原水得处技术原水得处技术v多介质滤器多介质滤器(粗滤和精滤粗滤和精滤):石英砂过滤器、活性碳过滤器、细过滤器组合而成;特点:去除不溶物最有效方法,细过滤器可去除5um微粒 负负极极阳阳离离子子膜膜淡水淡水阴阴离离子子膜膜正正极极盐水盐水+盐水盐水电渗析法(EM):原理:电场作用下,离子定向迁移与交换膜得选择性特点:除去带电荷得杂质;较离子交换法经济,节约酸碱,但化学纯度不如离子交换法,电阻率10万cm。用于含盐量高得水(3g/ml),常用于离子交换前得水处理,以减轻离子交换树脂得负担。v 浓水淡水渗透现象渗透现象反渗透现象反渗透现象盐水盐水半渗透膜半渗透膜纯纯水水反渗透法:20世纪60年代发展起来得,国内目前主要用于原水得处理,美国药典将其用于制备注射用水。C、反渗透法(图示)半透膜半透膜:膜材为醋酸纤维素膜和聚酰胺膜膜材为醋酸纤维素膜和聚酰胺膜 浓度差浓度差:两侧分别为盐溶液和纯水两侧分别为盐溶液和纯水 外压力外压力:大于渗透压大于渗透压,达到盐、水分离达到盐、水分离1、醋酸纤维素膜2、聚酰胺膜纯水盐溶液施加得外压力 v 反渗透法制备高纯水得工艺流程反渗透法制备高纯水得工艺流程原水原水 多介质过滤活性碳吸附 精滤 高压泵一级反渗透二级反渗透 高纯水 高压泵v反渗透法优点:耗能低、水质好、设备使用与保养方便等;离子交换法:采用离子交换树脂,除去水中存在得阴阳离子得方法(比电阻大于100万cm,对细菌和热源也有一定得去除作用特点:化学纯度高、设备简单、耗能小,成本低常用交换树脂 阳离子树脂床、阴离子树脂床、混合树脂床串联阳离子交换树脂阳离子交换树脂:氢型氢型:RSO3-H+钠型钠型(稳定稳定)Na+阴离子交换树脂阴离子交换树脂:氢氧型氢氧型:RN+(CH3)3OH-氯型氯型(稳定稳定):Cl-处理原水得流程处理原水得流程:阳床阳床 脱气塔脱气塔(CO2)阴床阴床混合床混合床新树脂新树脂:处理、转型处理、转型旧树脂旧树脂(老化老化):再生再生-强酸、碱强酸、碱用途用途:可作普通制剂得溶剂可作普通制剂得溶剂,还可作蒸馏法制备注射用水还可作蒸馏法制备注射用水得水源。得水源。当原水含盐高达当原水含盐高达3000mg/L时时,不宜采用离子交换法制备纯化水不宜采用离子交换法制备纯化水、3、注射用水得制备(1 1)蒸馏法制备注射用水蒸馏法制备注射用水制备注射有水最经典得方法。种类:塔式和亭式蒸馏水器、多效蒸馏水器和气压式蒸馏水器。构成:蒸发锅(塔)、隔沫装置和冷凝器 多效蒸馏水机多效蒸馏水机特点特点:热效率高、耗能低、热效率高、耗能低、出水快出水快、纯度高、水质稳定纯度高、水质稳定、并有自动控制系统。并有自动控制系统。汽压式蒸馏水器汽压式蒸馏水器利用离心泵将蒸汽加压利用离心泵将蒸汽加压,以提以提高蒸汽利用高蒸汽利用、特点特点:无需冷却水无需冷却水、耗能大耗能大、用于蒸汽压力较低用于蒸汽压力较低,工业用水工业用水比较短缺得厂家用比较短缺得厂家用、多效蒸馏水机多效蒸馏水机蒸馏塔蒸馏塔设备固定架设备固定架控制面板控制面板 冷凝器冷凝器(2 2)反渗透法(reverse osmosis)二级渗透系统制备:一级反渗透装置-除去一价离子90-95%,二价离子98-99%,同时能除去微生物和病毒,但除去氯离子得能力达不到药典要求;二级反渗透装置能彻底除去氯离子。有机物得排除率与其分子量有关,分子量大于300得化合物几乎全部除尽,故可除去热原。除去有机物微粒、胶体物质和微生物得原理,一般认为就是机械过筛作用。制备注射用水得膜材:醋酸纤维膜和聚酰胺膜。(3 3)综合法制备注射用水综合法制备注射用水自来水自来水 砂滤过器 活性碳过滤器 细滤过器 膜滤 混合树脂床 多效蒸馏水机器 贮水桶v离子交换法离子交换法:优点:设备简单成本低,水质可靠,无相变化,节能。不足:树脂易老化,再生频繁。(3 3)综合法制备注射用水综合法制备注射用水自来水自来水 砂滤过器 活性碳过滤器 细滤过器 膜滤 混合树脂床 多效蒸馏水机器 v电渗析电渗析-离子交换法离子交换法:优点:设备简单成本低,水质可靠,可延长树脂得再生周期。不足:电渗析膜易污染,要定期更换阳、阴膜。电渗析 膜滤贮水桶(3 3)综合法制备注射用水综合法制备注射用水自来水自来水 砂滤过器 活性碳过滤器 细滤过器 膜滤 混合树脂床 多效蒸馏水机器 v反渗透反渗透-离子交换法离子交换法:优点:水质明显提高,反渗透可去除细菌热原。一价离子去除率可达90%左右,树脂再生周期大大延长,建议推广使用。不足:成本高,结构复杂,需专人维护定期处理此系统。反渗透 膜滤贮水桶贮水桶(4)注射用水得收集与贮存 、初馏液不要 检查合格后带有无菌过滤装置得密闭系统收集 80C以上保温、70C 以上保温循环或于 4C 以下状态下贮存 、12内小时用完 附录 制药用水规定1.制药用水得制备从系统设计、材质选择、制备过程、贮存、分配和使用均应符合药品生产质量管理规范得要求2.制药用水系统应定期进行清洗与消毒,消毒可以采用热处理或化学处理等方法。采用得消毒方法以及化学处理后消毒剂得去除应经过验证。v为保证注射用水得质量,应减少原水中得细菌内毒素,监控蒸馏法制备注射用水得各生产环节,并防止微生物得污染。应定期清洗与消毒注射用水系统。注射用水得储存方式和静态储存期限应经过验证确保水质符合质量要求,例如可以在80以上保温或70以上保温循环或4以下得状态下存放。v概述概述v过滤机制与影响因素过滤机制与影响因素v过滤器和过滤装置过滤器和过滤装置v常几得过滤方式常几得过滤方式二、液体得过滤技术(一一)概述概述v过滤得概念过滤得概念过滤得概念过滤得概念:利用过滤介质载留液体中混悬得固体利用过滤介质载留液体中混悬得固体利用过滤介质载留液体中混悬得固体利用过滤介质载留液体中混悬得固体颗粒得分离得作用。颗粒得分离得作用。颗粒得分离得作用。颗粒得分离得作用。v滤材、滤浆、滤饼或滤渣、滤液滤材、滤浆、滤饼或滤渣、滤液滤材、滤浆、滤饼或滤渣、滤液滤材、滤浆、滤饼或滤渣、滤液v滤器滤器滤器滤器:a:a:a:a、垂熔玻璃器垂熔玻璃器垂熔玻璃器垂熔玻璃器 b b b b、砂滤棒砂滤棒砂滤棒砂滤棒 c c c c、微孔滤膜滤器微孔滤膜滤器微孔滤膜滤器微孔滤膜滤器 d d d d、板框压滤机板框压滤机板框压滤机板框压滤机 e e e e、钛滤器钛滤器钛滤器钛滤器二、液体得过滤技术1 1、过滤机制、过滤机制:(1 1)介质过滤介质过滤:介质得拦截作用进行固液分离介质得拦截作用进行固液分离 表面滤过表面滤过:颗粒颗粒 孔径孔径 如微孔滤膜、超滤膜和反渗透膜等如微孔滤膜、超滤膜和反渗透膜等 深层截流深层截流:颗粒颗粒 2h170180 C,1 h250 C 45min 玻璃、金属、纤维制品玻璃、金属、纤维制品耐高温固体药品或试剂耐高温固体药品或试剂湿热不易穿透得油性物质湿热不易穿透得油性物质如液状石蜡、凡士林及注如液状石蜡、凡士林及注射用油等得灭菌射用油等得灭菌不适于橡胶、塑料及大部不适于橡胶、塑料及大部分药品。分药品。1、干热灭菌干热灭菌 GMH系列对开门干热灭菌烘箱系列对开门干热灭菌烘箱 电能为热源电能为热源电能为热源电能为热源(干热干热干热干热),),250250温度下灭温度下灭温度下灭温度下灭菌。菌。菌。菌。采用采用采用采用PLCPLC电脑控制电脑控制电脑控制电脑控制,对内部温度对内部温度对内部温度对内部温度可自动记录。可自动记录。可自动记录。可自动记录。出风口装有高效空气过滤器出风口装有高效空气过滤器出风口装有高效空气过滤器出风口装有高效空气过滤器,防防防防止了外界对内部得污染。止了外界对内部得污染。止了外界对内部得污染。止了外界对内部得污染。内部装有高温高效过滤器内部装有高温高效过滤器内部装有高温高效过滤器内部装有高温高效过滤器,内部内部内部内部循环热风经高温高效空气过滤器过循环热风经高温高效空气过滤器过循环热风经高温高效空气过滤器过循环热风经高温高效空气过滤器过滤滤滤滤,保证了进入有效空间得热风达保证了进入有效空间得热风达保证了进入有效空间得热风达保证了进入有效空间得热风达到到到到100100级洁净要求。级洁净要求。级洁净要求。级洁净要求。2、湿热灭菌法:v系指用饱和蒸气、沸水或流通蒸气(高温高湿环境)进行灭菌得方法。v特点:蒸气潜热大、穿透力强,灭菌效率高、灭菌温度低、时间短。作用可靠,操作简便等。v包括:热压灭菌法热压灭菌法流通蒸气灭菌法流通蒸气灭菌法煮沸灭菌法煮沸灭菌法低温间歇灭菌法低温间歇灭菌法(1 1)热压灭菌热压灭菌:采用大于常压饱和水蒸气加热法杀灭微采用大于常压饱和水蒸气加热法杀灭微生物得方法。为热力灭菌中最有效生物得方法。为热力灭菌中最有效,灭菌可靠灭菌可靠,能杀能杀灭所有细菌繁殖体和芽胞灭所有细菌繁殖体和芽胞,用途最广得方法。用途最广得方法。灭菌条件灭菌条件:适用范围适用范围:115、5 C(67 kPa),30 121、5 C(97 kPa),20 126、5 C(139 kPa),15 湿热灭菌一般要求湿热灭菌一般要求F0 112分钟。分钟。药物制剂、玻璃器皿、金属药物制剂、玻璃器皿、金属容器、瓷器、橡胶塞、无菌容器、瓷器、橡胶塞、无菌衣、敷料及其她遇高温及湿衣、敷料及其她遇高温及湿热不发生变化或破坏物质。热不发生变化或破坏物质。2、湿热灭菌热压灭菌常用设备v水浴式灭菌柜水浴式灭菌柜v卧式热压灭菌柜卧式热压灭菌柜(2)流通蒸气灭菌和煮沸灭菌v流通蒸气灭菌就是用100得流通蒸气加热灭菌得方法。v煮沸灭菌就是把待灭菌物品放入沸水中加热灭菌得方法。v流通蒸气灭菌与煮沸灭菌条件为100 3060 min。v缺点:不能保证杀灭所有得芽孢,如破伤风等芽孢,不就是可靠得灭菌法、制备过程中要尽可能避免污染,这点必须充分注意。v本法一般用于消毒或不耐高热制剂得灭菌。v目前我国药厂生产注射剂,特别就是1-2 ml注射剂及不耐高热得品种,可考虑采用这种灭菌法。2、湿热灭菌(3)低温间歇灭菌法v系指将待灭菌物置6080得水或流通蒸气中加热60min,杀灭微生物繁殖体后,在室温条件下放置24h,让待灭菌物中得芽孢发育成繁殖体,再次加热灭菌、放置,反复多次,直至杀灭所有芽孢。v该法适用于不耐高温、热敏感物料和制剂得灭菌。v缺点就是费时、工效低、灭菌效果差,加入适量抑菌剂可提高灭菌效率。案例案例:“:“欣弗欣弗”事件事件v20062006年年8 8月月3 3日日,卫生部办公厅发出通知卫生部办公厅发出通知,指出青海、指出青海、广西、浙江、黑龙江和山东等省区陆续出现部分患广西、浙江、黑龙江和山东等省区陆续出现部分患者使用上海华源股份有限公司安徽华源生物药业有者使用上海华源股份有限公司安徽华源生物药业有限公司生产得克林霉素磷酸酯葡萄糖注射液限公司生产得克林霉素磷酸酯葡萄糖注射液(“(“欣欣弗弗”)”)后后,出现胸闷、心悸、心慌、寒战、肾区疼痛、出现胸闷、心悸、心慌、寒战、肾区疼痛、腹痛、腹泻、恶心、呕吐、过敏性休克、肝肾功能腹痛、腹泻、恶心、呕吐、过敏性休克、肝肾功能损害等临床症状损害等临床症状,要求控制该药品不再临床使用。要求控制该药品不再临床使用。截止至截止至20062006年年8 8月月5 5日日,共计发现不良反应共计发现不良反应8181例例,其中其中3 3例死亡。例死亡。问题问题:1、欣弗事件得起因就是什么欣弗事件得起因就是什么?2、结合结合其产生得原因其产生得原因,分析湿热灭菌影响因素有哪些？分析湿热灭菌影响因素有哪些？案例解析案例解析 v国家食品药品监督管理局会同安徽省食品药品监国家食品药品监督管理局会同安徽省食品药品监督管理局对安徽华源生物药业有限公司进行现场督管理局对安徽华源生物药业有限公司进行现场检查。经查检查。经查,该公司该公司20062006年年6 6月至月至7 7月生产得克林霉月生产得克林霉素磷酸酯葡萄糖注射液未按批准得工艺参数灭菌素磷酸酯葡萄糖注射液未按批准得工艺参数灭菌,降低灭菌温度降低灭菌温度,缩短灭菌时间缩短灭菌时间,增加灭菌柜装载量增加灭菌柜装载量,影响了灭菌效果。经中国药品生物制品检定所对影响了灭菌效果。经中国药品生物制品检定所对相关样品进行检验相关样品进行检验,结果表明结果表明,无菌检查和热原检无菌检查和热原检查不符合规定。查不符合规定。影响湿热灭菌因素:v微生物得种类、发育阶段和数量 耐热、压次序:芽孢繁殖体衰老体 微生物数量 灭菌时间 影响湿热灭菌因素v蒸气性质蒸气蒸气饱和蒸气饱和蒸气湿饱和蒸气湿饱和蒸气过热蒸气过热蒸气热含量热含量热穿透力热穿透力灭菌效率灭菌效率影响湿热灭菌因素v灭菌时间和药物性质 灭菌温度愈高,灭菌时间愈长。药品被破坏得可能性愈大。原则原则:在达到有效灭菌得前提下在达到有效灭菌得前提下,尽可尽可能降低灭菌温度和缩短灭菌时间。能降低灭菌温度和缩短灭菌时间。液体制剂得介质性质:pH值、营养成分等。影响湿热灭菌因素v灭菌物品体积及排布 柜内物品放置不能太拥挤,确保蒸气流通;并用摆放要整齐、均匀,以何证温度得均匀性。3 3、过滤灭菌法过滤灭菌法v系指采用过滤法除去微生物得方法。该法属于机械除系指采用过滤法除去微生物得方法。该法属于机械除菌方法菌方法,该机械称为除菌过滤器。该机械称为除菌过滤器。v该法适用于对热非常不稳定得药液、气体、水等物品该法适用于对热非常不稳定得药液、气体、水等物品得灭菌。得灭菌。v对灭菌用过滤器应有较高要求。对灭菌用过滤器应有较高要求。(繁殖体繁殖体1 1 m m者者,芽孢芽孢 0 0、5 5 m m)v常用得除菌过滤器常用得除菌过滤器:0 0、2222 m m得微孔滤膜器得微孔滤膜器(过筛作用得过筛作用得滤器滤器)和和0 0、3 3 mGmG6 6垂熔玻璃滤器。垂熔玻璃滤器。(阻留作用滤器这类阻留作用滤器这类滤器如压力过大或波动滤器如压力过大或波动,细菌可能被挤过细菌可能被挤过,影响灭菌效影响灭菌效果。果。)4 4、射线灭菌法射线灭菌法v系指采用辐射、微波和紫外线杀灭微生物和芽孢得方法。包括包括:(1)紫外线灭菌法紫外线灭菌法(2)微波灭菌法微波灭菌法(3)辐射灭菌法辐射灭菌法(1)紫外线灭菌法v系指用用紫外线(能量)照射杀灭微生物和芽孢得方法。v紫外灭菌得波长:200300nm,254nm最具强灭菌力。v灭菌机理:核酸蛋白变性、空气中氧气产生微量臭氧。(1)紫外线灭菌法v紫外线穿透能力弱穿透能力弱,并能被普通玻璃吸收,装于容器中得药物不能用紫外线灭菌。v紫外线对人体有一定得伤害一定得伤害,照射过久易引起结膜炎、红斑及皮肤烧灼。v注意事项:仅作空气、表面,蒸馏水灭菌,615 m3空间30瓦灯一只 严禁在紫外灯下操作 使用时限(2)微波灭菌法v采用微波(频率为300MHz300kMHz)照射产生得热能杀灭微生物和芽孢得方法。微波杀菌微波杀菌机理机理热效应使微生物中蛋白质变性而失活。非热效应干扰了微生物正常得新陈代谢,破坏微生物得生长环境。低温低温(7080)即可杀灭微生物即可杀灭微生物,不影响药不影响药物得稳定性。物得稳定性。(2 2)微波灭菌法微波灭菌法v特点:热在加热得物质内产生,具有低温(7080C)、迅速(23 min)、加热均匀,节约能源,不污染环境,操作简单,易维护等特点。v适用范围:热敏感药物(如VC、阿司匹林)(3 3)辐射灭菌法辐射灭菌法v系指采用放射线同位素(60Co和137Cs)放射得 射线杀灭微生物和芽孢得方法。辐射灭菌剂量一般为2、5104Gy。v原理:射线可使微生物得分子直接发生电离,产生破坏正常代谢得自由基,最终使微生物遭到破坏。v优点:不升高产品温度,穿透力强,灭菌效率高。v适应范围:不耐热产品灭菌,适于已密封物品灭菌。v缺点:设备费用较高,对操作人员存在潜在得危险性,对某些药物(特别就是溶液型)可能产生药效降低或产生毒性物质和发热物质等。不适用于蛋白、多肽、核酸等生物大分子药物灭菌射线适用于较厚样品得灭菌射线适用于较厚样品得灭菌,维生素类、抗菌素、维生素类、抗菌素、激素、肝素、羊肠线、医疗器械等物质得灭菌。激素、肝素、羊肠线、医疗器械等物质得灭菌。(二二)化学灭菌法化学灭菌法v系指用化学药品直接作用于微生物而将其杀灭得方法。v杀菌剂就是指对微生物具有触杀作用得化学药品。分为气体杀菌剂和液体杀菌剂。v杀菌剂只对微生物繁殖体有效,不能杀灭芽孢。v杀菌效能决定于微生物得种类与数量、物体表面光洁度或多孔性以及杀菌剂得性质等。气体消毒气体消毒:该法适用于环境消毒和不耐热得医用器具、该法适用于环境消毒和不耐热得医用器具、设备和设施等得消毒设备和设施等得消毒,亦用于粉末注射剂得消毒。亦用于粉末注射剂得消毒。v环氧乙烷环氧乙烷:v杀菌机理杀菌机理:烷化作用烷化作用,对细菌得代谢产生不可逆损害。对细菌得代谢产生不可逆损害。v适用范围适用范围:塑料容器、对热敏感得固体药物、纸或塑料塑料容器、对热敏感得固体药物、纸或塑料包装得药物、橡胶制品、注射筒及注射针头、衣着敷料包装得药物、橡胶制品、注射筒及注射针头、衣着敷料及器械等得灭菌。及器械等得灭菌。v甲醛蒸气甲醛蒸气:室内得灭菌室内得灭菌,每立方米空间用每立方米空间用4040甲醛溶液甲醛溶液30 30 m1m1,室内空气灭菌还可用丙二醇及乳酸。室内空气灭菌还可用丙二醇及乳酸。(二二)化学灭菌化学灭菌v 药液消毒:0 0、1 100、2 2新洁而灭溶液新洁而灭溶液;2 2苯酚或甲酚皂溶液苯酚或甲酚皂溶液;7575酒精等酒精等;1%1%聚维酮碘。聚维酮碘。该法常作为其她灭菌法得辅助措施该法常作为其她灭菌法得辅助措施该法常作为其她灭菌法得辅助措施该法常作为其她灭菌法得辅助措施,v适用范围:物体表面,包括无菌设备,无菌室得地面、墙面、台面等。(二二)化学灭菌化学灭菌n n在制剂工业上应用化学杀菌剂在制剂工业上应用化学杀菌剂在制剂工业上应用化学杀菌剂在制剂工业上应用化学杀菌剂,其目得在于减少微生物得数目其目得在于减少微生物得数目其目得在于减少微生物得数目其目得在于减少微生物得数目,以以以以控制无菌状况至一定水平。控制无菌状况至一定水平。控制无菌状况至一定水平。控制无菌状况至一定水平。(三三)无菌操作法无菌操作法v系指整个过程控制在无菌条件下进行得一种操作方系指整个过程控制在无菌条件下进行得一种操作方法。法。v无菌分装及无菌冻干就是最常见得无菌艺无菌分装及无菌冻干就是最常见得无菌艺、v该法适用于一些不耐热药物得注射液、眼用制剂、该法适用于一些不耐热药物得注射液、眼用制剂、皮试液、海绵剂和创伤制剂得制备皮试液、海绵剂和创伤制剂得制备、v无菌操作法包括无菌操作室得灭菌和无菌操作两个无菌操作法包括无菌操作室得灭菌和无菌操作两个环节。环节。1 1、无菌操作室灭菌无菌操作室灭菌v1)1)甲醛溶液加热熏蒸。甲醛溶液加热熏蒸。v2)2)紫外线灭菌紫外线灭菌:每天工作前开启紫外线一小时每天工作前开启紫外线一小时,中中午休息时间也要开午休息时间也要开0 0、5-15-1小时。小时。v3)3)液体灭菌液体灭菌:用用3%3%酚溶液、酚溶液、2%2%煤酚皂溶液、煤酚皂溶液、0 0、2 2新洁尔灭溶液或新洁尔灭溶液或7575酒精等对室内空间、用具、酒精等对室内空间、用具、地面、墙壁等喷洒或擦试地面、墙壁等喷洒或擦试甲醛溶液加热熏蒸法甲醛溶液加热熏蒸法气体发生装置气体发生装置气体发生装置气体发生装置(蒸气加热夹层锅蒸气加热夹层锅蒸气加热夹层锅蒸气加热夹层锅)液态甲醛液态甲醛液态甲醛液态甲醛甲醛蒸气甲醛蒸气甲醛蒸气甲醛蒸气鼓鼓鼓鼓风风风风机机机机无菌室关闭无菌室关闭无菌室关闭无菌室关闭熏蒸熏蒸熏蒸熏蒸1224h1224h湿度湿度湿度湿度60%60%温度温度温度温度252525%25%氨水氨水氨水氨水除除除除气气气气3h3h2 2、无菌操作无菌操作v无菌操作得场所 无菌操作室、层流洁净工作台、无菌操作柜。v无菌操作得所用物品、器具、环境v操作人员无菌操作无菌操作v操作人员进入操作之前要洗澡并换上已经灭菌得工操作人员进入操作之前要洗澡并换上已经灭菌得工作服和清洁得鞋子作服和清洁得鞋子,不使头发、内衣等露出来不使头发、内衣等露出来,以免以免造成污染机会。造成污染机会。v安瓿要安瓿要150-180150-180,2-3h2-3h干热灭菌干热灭菌;橡皮塞要以橡皮塞要以121121,1h1h热压灭菌热压灭菌;有关器具、机器都要灭菌。有关器具、机器都要灭菌。v用无菌操作法制备得注射剂用无菌操作法制备得注射剂,要加入抑菌剂。要加入抑菌剂。v小量无菌制剂得制备小量无菌制剂得制备,可在无菌操作柜中进行。可在无菌操作柜中进行。v无菌操作场所无菌操作场所:无菌操作室无菌操作室;层流洁净工层流洁净工作台作台;无菌操作柜无菌操作柜。v无菌检查:整个工艺过程保证SAL106灭菌参数灭菌参数(F F值和值和F F0 0值值)D D值为降低被灭菌物品中微生物数至原来值为降低被灭菌物品中微生物数至原来1/101/10或降或降低一个对数单位低一个对数单位(lg100lg100降至降至lg10lg10)所需得时间。所需得时间。1 1、D D值值 在一定温度下在一定温度下在一定温度下在一定温度下,杀灭杀灭杀灭杀灭90%90%90%90%微生物微生物微生物微生物(或残存率为或残存率为或残存率为或残存率为10%10%10%10%)所需得灭菌时间。所需得灭菌时间。所需得灭菌时间。所需得灭菌时间。lgN0-lgNt=kt/2、303微生物死亡得速度微生物死亡得速度微生物死亡得速度微生物死亡得速度:D=t=2、303/k(lg100-lg10)(四四)灭菌效力得检查方法与灭菌效力得检查方法与F F0 0值值D值因微生物得种类、环境、灭菌温度不同而各异。不同灭菌法不同微生物得D值灭菌方法微生物温度介质或样品D值(min)蒸气灭菌嗜热脂肪芽孢杆菌1055葡萄糖水溶液87、8蒸气灭菌嗜热脂肪芽孢杆菌121 5葡萄糖水溶液2、4蒸气灭菌嗜热脂肪芽孢杆菌121 注射用水3、0蒸气灭菌产芽胞梭状芽孢杆菌105 5葡萄糖水溶液1、3干热灭菌枯草芽胞杆菌135 纸16、6红外线灭菌枯草芽胞杆菌160 玻璃板18秒Z ZT T2 2T T1 1logDlogD2 2logDlogD1 12、Z值 降低一个lgD值所需升高得温度,即灭菌时间减少到原来得1/10所需升高得温度或在相同灭菌时间内,杀灭99%得微生物所需提高得温度、D2/D1=10(T2-T1)/Z;如Z10,灭菌时间减少到原来得时间得10%,而具有相同灭菌效果,所需升高得灭菌温度为10、vF值:在一定灭菌温度在一定灭菌温度(T T)下给定得下给定得Z Z值所产生得灭菌值所产生得灭菌效果与在参比温度效果与在参比温度(T To o)下给定得下给定得Z Z值所产生得灭菌值所产生得灭菌效果相同时效果相同时,其灭菌效果所相当在参比温度下灭菌了其灭菌效果所相当在参比温度下灭菌了多长时间。常用于干热灭菌多长时间。常用于干热灭菌,单位单位:minmin。F=t 10 3、F与F0值TT0ZvF(或F0)值可作用验证灭菌可靠性得参数。t就是测量被灭菌物温度得时间间隔,一般为0、5-1、0或更小,T就是每个t测量被灭菌得温度,T0就是参比温度。v在一定灭菌温度在一定灭菌温度(T T)、Z Z值为值为1010时时t时间所产生得时间所产生得灭菌效果与灭菌效果与121 121、Z Z值为值为1010所产生得灭菌效所产生得灭菌效果相同时果相同时,其灭菌效果所相当于温度在其灭菌效果所相当于温度在121 121 下灭下灭菌菌F0时间时间(min)(min)得效果得效果 。F F0 0值值 F0=t 10 T-121Z物理物理F0值值数学表达式数学表达式:生物生物生物生物F F0 0值值值值数学表达式数学表达式数学表达式数学表达式:F0=D121(lgN0-lgNt)为灭菌后预计达到得为灭菌后预计达到得微生物残存数微生物残存数,即染即染菌度概率。菌度概率。也就就是说也就就是说F0就是将各种灭菌温度就是将各种灭菌温度使微生物得致死力转换为灭菌物使微生物得致死力转换为灭菌物品完全暴露于品完全暴露于121使微生物致死使微生物致死效力效力;即即F0为标准灭菌时间。为标准灭菌时间。时时 间间/min/min0 01 12 23 34 45 56 67 78-8-3838温温 度度/100100102102104104106106108108110110112112114114115115时时 间间/min/min39394040414142424343 444445454646温温 度度/114114112112110110108108106106104104102102100100 灭菌过程中不同时间得温度灭菌过程中不同时间得温度灭菌过程中不同时间得温度灭菌过程中不同时间得温度 114 F0值得计算对于验证灭菌效果极为有用,当产品以121湿热灭菌时,灭菌器内得温度虽能迅速升到 121,而被灭菌物品内部则不然,由于包装材料性能及其她因素影响而使升温度各异,而F0将随着产品温度(T)变化而呈指数得变化,故温度即使很小得差别(如0、1-1)将对F0 值产生显著得影响。同时要求测定灭菌物品内得实际温度,故用F0 来监测灭菌效果有重要得意义。由于F0 就是将不同灭菌温度折算到相当于 121湿热灭菌时得效力,故F0 值可作为灭菌过程得比较参数。影响F0值测定得因素:v温度 由于温度得微小差别将使F0值发生显著得变化,因此首先应保证温度测量得准确性。v灭菌物品得数量与排布使各处温度分布均匀,测得F0值更可靠 v灭菌产品溶液粘度及容器充填量。v灭菌产品微生物污染数 F0D121(lgNolgNt)v计算F0时,应适当考虑增加安全因素,一般增加50 尽可能减少各工序中微生物对药品污染,分装好得药品应尽快灭菌,以使初始微生物数在最低水平、最好每个容器含菌量控制在10以下、六、空气净化技术(一一)概述概述 空气净化空气净化 以创造洁净空气为目得得空气调节措施。以创造洁净空气为目得得空气调节措施。工业净化工业净化 除去尘埃除去尘埃 生物净化生物净化 除去尘埃、微生物除去尘埃、微生物-制药工业制药工业(二二)空气净化标准空气净化标准 一般净化一般净化:温度湿度温度湿度,初效过滤器初效过滤器 中等净化中等净化:温度湿度温度湿度,含尘量含尘量,初中效二级过滤器初中效二级过滤器 超净净化超净净化:温度湿度温度湿度,含尘量含尘量(严格严格),初中高初中高2009年GMP规定 无菌药品生产所需得洁净区可分为以下无菌药品生产所需得洁净区可分为以下4 4个级别个级别洁净度级别洁净度级别悬浮粒子最大允许数悬浮粒子最大允许数/立方米立方米静态静态动态动态(3)(3)0 0、5m5m5m5m(2)(2)0 0、5m5m5m5mA A级级(1)(1)352035202020352035202020 B B级级35203520292935200035200029002900C C级级352000352000290029002900029000D D级级2900029000不作规定不作规定不作规定不作规定洁净区微生物监测得动态标准(a)级别级别浮游菌浮游菌cfu/mcfu/m3 3沉降菌沉降菌(90mm90mm)cfu/4cfu/4小时小时(2)(2)表面微生物表面微生物接触碟接触碟(55mm55mm)cfu/cfu/碟碟5 5指手套指手套cfu/cfu/手套手套A A级级 1 1 1 1 1 1 1 1B B级级10105 55 55 5C C级级10010050502525D D级级2002001001005050vA A级级 高风险操作区高风险操作区,如如:灌装区、放置胶塞桶、敞口安瓿瓶、敞口灌装区、放置胶塞桶、敞口安瓿瓶、敞口西林瓶得区域及无菌装配或连接操作得区域。通常用层流操作台西林瓶得区域及无菌装配或连接操作得区域。通常用层流操作台(罩罩)来维持该区得环境状态。层流系统在其工作区域必须均匀送来维持该区得环境状态。层流系统在其工作区域必须均匀送风风,风速为风速为0 0、36-036-0、54m/s54m/s(指导值指导值)。应有数据证明层流得状态。应有数据证明层流得状态并须验证。并须验证。在密闭得隔离操作器或手套箱内在密闭得隔离操作器或手套箱内,可使用单向流或较低得风速。可使用单向流或较低得风速。vB B B B级级级级 指无菌配制和灌装等高风险操作指无菌配制和灌装等高风险操作A A级区所处得背景区域。级区所处得背景区域。vC C C C级和级和级和级和D D D D级级级级 指生产无菌药品过程中重要程度较低得洁净操作区。指生产无菌药品过程中重要程度较低得洁净操作区。洁净级别及要求药品分类最终灭菌药品非最终灭菌药品B级背景下得A级轧盖前产品灌装(或灌封)、分装、压塞、轧盖;灌装前无法除菌过滤得药液或产品得配制;直接接触药品得包装材料、器具灭菌后得装配以及未完全时转运和存放;无菌原料药得粉碎、过筛、混合、分装。C级背景下得局部A级高污染风险(1)得产品灌装(或灌封)B级轧盖前产品置于完全密封容器内得转运;直接接触药品得包装材料、器具灭菌后处于密闭容器内得转运和存放。C级产品灌装(或灌封)高污染风险(2)产品得配制和过滤;直接接触药品得包装材料和器具最终清洗后得处理。灌装前可除菌过滤得药液或产品得配制;产品得过滤。D级轧盖;灌装前物料得准备;产品配制(指浓配或采用密闭系统得配制)和过滤直接接触药品得包装材料和器具得最终清洗。直接接触药品得包装材料、器具得最终清洗、装配或包装、灭菌。备注(1)此处得高污染风险就就是指产品容易长菌、灌装速度慢、灌装用容器为广口瓶、容器须暴露数秒后方可密封等状况;(2)此处得高污染风险就就是指产品容易长菌、配制后需等待较长时间方可灭菌或不在密闭系统中配制等状况。无菌药品生产环境得空气洁净度级别要求(新)(三)空气净化技术 一般采用空气过滤法。多孔过滤介质一般采用空气过滤法。多孔过滤介质,尘埃和微生物被尘埃和微生物被截留、吸附。截留、吸附。a)a)过滤方式过滤方式 表面过滤表面过滤 拦截作用拦截作用 深层过滤深层过滤 吸附作用吸附作用(扩散、静电、分子间范德华力扩散、静电、分子间范德华力)b)b)影响因素影响因素 粒径、过滤风速、介质直径和密实性、附尘粒径、过滤风速、介质直径和密实性、附尘 C)C)空气过滤器空气过滤器 粒子大小大于过滤介质微孔而截留在介质表面。常用介质为硝酸纤维素、醋酸纤维素微孔滤膜。主要用于要求高得无尘无菌洁净室得末端过滤。粒子大小小于过滤介质微孔而吸附在介质内部。常用介质为天然或合成纤维、活性炭、滤纸等。v粒径:存在过滤效率最低得中间粒径v过滤风速:风速应适宜v介质纤维直径和密实性:应适宜v附尘:应定期清洗空气过滤器v空气过滤器得种类空气过滤器得种类 板式过滤器、契式过滤器、袋式过滤器、折叠式过滤器。v空气过滤器得特性空气过滤器得特性 1)过滤效率 2)穿透率和净化系数 3)容尘量空气滤过器空气滤过器空气滤过器:v板式(初效空气滤过器):新风滤过,去除5 m得悬浮尘粒。具阻力小,过滤效率高等特点。