南医大药物分析第08章-对氨基苯甲酸酯类药物的分析ppt.ppt

对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药物的分析第一节 对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类药物的结构与性质本类药物的母体结构一、对氨基苯甲酸酯类药物的基本结构一、对氨基苯甲酸酯类药物的基本结构苯佐卡因苯佐卡因盐酸丁卡因盐酸丁卡因盐酸普鲁卡因胺盐酸普鲁卡因胺酰苯胺类药物酰苯胺类药物(苯胺的酰基衍生物苯胺的酰基衍生物)的的基本结构基本结构非那西丁（对乙酰氨基苯乙醚非那西丁（对乙酰氨基苯乙醚,解热镇痛药解热镇痛药）对乙酰氨基酚（扑热息痛）对乙酰氨基酚（扑热息痛）盐酸利多卡因盐酸利多卡因盐酸布比卡因盐酸布比卡因 盐酸罗派卡因盐酸罗派卡因(S)-N-(2,6-二甲基苯基)-1-正丙基哌啶-2-甲酰胺盐酸盐一水合物。一、结构与性质一、结构与性质（一）具有芳伯氨基或潜在的芳伯氨基，可用重氮化偶合反应鉴别或亚硝酸钠滴定法测定含量，可与芳醛发生缩合反应，易氧化变色。如酰氨基邻位存在甲基，空间位阻难于水解，较稳定。（三）具脂烃胺侧链，弱碱性，可与生物碱沉淀试剂发生沉淀反应进行鉴别或非水碱量法测定含量。水溶液无法直接滴定，需用非水滴定。（四）游离碱难溶于水，易溶于有机溶剂，其盐可溶于水。（二）酯键或酰胺键易水解（五）盐酸利多卡因（布比卡因，罗哌卡因）分子结构酰胺基氮可在水溶液中与铜离子或钴离子络合，生成有色配位化合物沉淀，沉淀可溶于氯仿显色。（六）UV（七）IR 二、鉴别试验（一）重氮化偶合反应 芳香第一胺类鉴别反应 盐酸普鲁卡因 直接：盐酸普鲁卡因、盐酸氯普鲁卡因、苯佐卡因、盐酸普鲁卡因胺苯佐卡因、盐酸普鲁卡因胺 间接：对乙酰氨基酚对乙酰氨基酚盐酸普鲁卡因盐酸普鲁卡因 ChP（2010）鉴别鉴别 （1）本品显芳香第一胺类的鉴别）本品显芳香第一胺类的鉴别反应（附录反应（附录）取供试品约取供试品约50mg，加稀盐酸，加稀盐酸1m1，必，必要时缓缓煮沸使溶解，放冷，加要时缓缓煮沸使溶解，放冷，加0.1mo1/L亚硝酸钠溶液数滴，滴加碱性亚硝酸钠溶液数滴，滴加碱性-萘酚试液萘酚试液数滴，视供试品不同，生成由橙黄到猩红数滴，视供试品不同，生成由橙黄到猩红色沉淀。色沉淀。对乙酰氨基酚对乙酰氨基酚 ChP（2005）鉴别鉴别 （2）取本品约）取本品约0.1g，加稀盐酸，加稀盐酸5m1，置水浴中加热，置水浴中加热40分钟，放冷；分钟，放冷；取取0.5m1，滴加亚硝酸钠试液，滴加亚硝酸钠试液5滴，摇滴，摇匀，用水匀，用水3ml稀释后，加碱性稀释后，加碱性-萘酚试萘酚试液液2m1，振摇，即显红色。，振摇，即显红色。盐酸丁卡因不具有芳伯氨基，分子结盐酸丁卡因不具有芳伯氨基，分子结构中的芳香仲胺在酸性溶液中与亚硝构中的芳香仲胺在酸性溶液中与亚硝酸钠反应，生成白色沉淀，与具有芳酸钠反应，生成白色沉淀，与具有芳伯氨基的同类药物区别。伯氨基的同类药物区别。（二）与金属离子反应（二）与金属离子反应 1.与铜和钴离子反应与铜和钴离子反应 苯佐卡因、盐酸普鲁卡因、盐酸氯普鲁卡因和盐酸丁卡因等苯佐卡因、盐酸普鲁卡因、盐酸氯普鲁卡因和盐酸丁卡因等不发生此反应。不发生此反应。与汞离子的反应与汞离子的反应 2羟肟酸铁盐反应羟肟酸铁盐反应（三）水解产物的反应 1.盐酸普鲁卡因盐酸普鲁卡因 ChP（2010）鉴别鉴别 （2）取本品约）取本品约0.1g，加水，加水2ml溶解溶解后，加后，加10氢氧化钠溶液氢氧化钠溶液1ml，即生成白，即生成白色沉淀；加热，变为油状物；继续加热，色沉淀；加热，变为油状物；继续加热，产生的蒸气，能使湿润的红色石蕊试纸变产生的蒸气，能使湿润的红色石蕊试纸变为蓝色；热至油状物消失后，放冷，加盐为蓝色；热至油状物消失后，放冷，加盐酸酸化，即析出白色沉淀。酸酸化，即析出白色沉淀。2.苯佐卡因苯佐卡因 ChP（2010）鉴别鉴别 （2）取本品约）取本品约0.1g，加氢氧化钠，加氢氧化钠试液试液5m1，煮沸，即有乙醇生成；加碘试，煮沸，即有乙醇生成；加碘试液，加热，即生成黄色沉淀，并发生碘仿液，加热，即生成黄色沉淀，并发生碘仿的臭气。的臭气。（四）制备衍生物测熔点（四）制备衍生物测熔点1三硝基苯酚衍生物三硝基苯酚衍生物 盐酸利多卡因盐酸利多卡因 ChP（2010）鉴别鉴别 取本品取本品0.2g，加水，加水20ml溶解。溶解。（1）取取溶溶液液10ml，加加三三硝硝基基苯苯酚酚试试液液10ml，即即生生成成沉沉淀淀；滤滤过过，沉沉淀淀用用水水洗洗涤涤后后，干干燥燥，依依法法测测定定（附附录录C），熔熔点点为为228232，熔融时同时分解。，熔融时同时分解。2.硫氰酸盐衍生物硫氰酸盐衍生物 盐酸丁卡因盐酸丁卡因 ChP（2010）鉴鉴别别 （1）取取本本品品约约0.1g，加加5%醋醋酸酸钠钠溶溶液液10ml溶溶解解后后，加加25%硫硫氰氰酸酸铵铵溶溶液液1ml，即即析析出出白白色色结结晶晶；滤滤过过，结结晶晶用用水水洗洗涤涤，在在80干干燥燥，依依法法测测定定（附附录录C），熔点约为），熔点约为131。盐盐 酸酸 布布 比比 卡卡 因因、盐盐 酸酸 普普 鲁鲁 卡卡 因因 胺胺 ChP（2010）鉴鉴别别 （2）取取本本品品，精精密密称称定定，按按干干燥燥品品计计算算，加加0.01mol/L盐盐酸酸溶溶液液制制成成每每1ml中中含含0.40mg的的溶溶液液，照照分分光光光光度度法法（附附录录A）测测定定，在在263nm与与271nm的的波波长长处处有有最最大大吸吸收收；其其吸吸收收度度分分别别为为0.530.58与与0.430.48。（五）（五）UV （六）（六）IR 盐酸布比卡因盐酸布比卡因 ChP（2005）鉴鉴别别 （3）本本品品的的红红外外光光吸吸收收图图谱谱与与对对照的图谱（光谱集照的图谱（光谱集324图）一致。图）一致。一一.盐酸普鲁卡因注射液中对氨基苯甲酸的检查盐酸普鲁卡因注射液中对氨基苯甲酸的检查 检查方法检查方法 HPLC 杂质对照品法杂质对照品法 杂质来源杂质来源 水解产生水解产生 第三节、特殊杂质与检查第三节、特殊杂质与检查供试液供试液:盐酸普鲁卡因盐酸普鲁卡因0.2mg/ml对照品对照品:对氨基苯甲酸对氨基苯甲酸1 g/ml溶液。溶液。固定相：固定相：C18流动相：流动相：0.1%庚烷磺酸钠的庚烷磺酸钠的0.05M KH2PO4（pH 3.0）-甲醇（甲醇（68:32）检测波长：检测波长：279 nm二二.盐酸氯普鲁卡因注射液中有关物质和光解产物盐酸氯普鲁卡因注射液中有关物质和光解产物的检查的检查杂质：杂质：4-氨基氨基-2-氯苯甲酸氯苯甲酸来源：生产、贮藏来源：生产、贮藏 【杂质检查杂质检查】USP30-NF25:HPLC-MS 分析色谱条件：色谱条件：Zobax SB-C18，流动相：，流动相：0.5%乙酸水溶液乙酸水溶液-0.5%乙酸乙腈溶液乙酸乙腈溶液(87:13),流速流速1 ml/min，检测波长：检测波长：254 nm质谱条件质谱条件:ESI(+),质量扫描范围质量扫描范围:80600,喷雾电压喷雾电压4000V,等等m/z:253,盐酸羟普鲁卡因盐酸羟普鲁卡因M+1+，盐酸氯普鲁卡因光水解产物，盐酸氯普鲁卡因光水解产物m/z:172,M+1+4-氨基氨基-2-氯苯甲酸准分子离子峰氯苯甲酸准分子离子峰（一）亚硝酸钠滴定法（一）亚硝酸钠滴定法 1.原理原理 具芳伯氨基的药物具芳伯氨基的药物四、含量测定四、含量测定 ChP(2010年年):苯佐卡因苯佐卡因,盐酸普鲁卡因及其注射液盐酸普鲁卡因及其注射液,盐酸盐酸普鲁卡因胺片剂及其注射液普鲁卡因胺片剂及其注射液 具游离芳伯氨基的药物可用本法直接测定。具游离芳伯氨基的药物可用本法直接测定。具潜在芳伯氨基的药物，如具酰胺基药物（对具潜在芳伯氨基的药物，如具酰胺基药物（对乙酰氨基酚、醋氨苯酚等）经水解，芳香族硝乙酰氨基酚、醋氨苯酚等）经水解，芳香族硝基化合物（如无味氯霉素）经还原，也可用本基化合物（如无味氯霉素）经还原，也可用本法测定。法测定。2.主要测定条件主要测定条件（1）加入适量）加入适量KBr加速反应加速反应 NaNO2+HClHNO2+NaClHNO2+HClNOCl+H2O 重氮化反应的机理为：重氮化反应的机理为：（1）K1（2）K2 K1 300 K2 加加入入KBr，可可增增大大溶溶液液中中NO+亚亚硝硝酰酰离离子子的浓度，加快重氮化反应速度的浓度，加快重氮化反应速度（2 2）酸的种类及其浓度）酸的种类及其浓度在不同酸中重氮化反应的速度为：在不同酸中重氮化反应的速度为：HBrHCl H2SO4 HNO3盐酸盐酸 1:2.56；加入盐酸：加入盐酸：重氮化反应速度加快；重氮化反应速度加快；重氮盐在酸性溶液中稳定；重氮盐在酸性溶液中稳定；防防止止生生成成偶偶氮氮氨氨基基化化合合物物，而而影影响响测定结果测定结果（3）室温条件下滴定）室温条件下滴定 1030（4）滴定速度：先快后慢）滴定速度：先快后慢 滴定管尖端插入液面下滴定管尖端插入液面下2/3处，滴处，滴定液一次大部分放下，近终点时方定液一次大部分放下，近终点时方改为慢速滴定改为慢速滴定 3.指示终点的方法指示终点的方法（1）永停滴定法）永停滴定法 ChP（2005）、）、BP永停滴定法（附录永停滴定法（附录A）调节调节R1使加于电极上的电压约为使加于电极上的电压约为50mV。取供试。取供试品适量，精密称定，加水品适量，精密称定，加水40ml与盐酸溶液与盐酸溶液（12）15ml，搅拌使溶解，再加溴化钾，搅拌使溶解，再加溴化钾2g，插入铂插入铂铂电极后，将滴定管的尖端插入液面铂电极后，将滴定管的尖端插入液面下约下约2/3处，用亚硝酸钠滴定液（处，用亚硝酸钠滴定液（0.1mol/L或或0.05mol/L）迅速滴定，至近终点时，将滴定管）迅速滴定，至近终点时，将滴定管的尖端提出液面，用少量水淋洗尖端，继续缓的尖端提出液面，用少量水淋洗尖端，继续缓缓滴定，至电流计指针突然偏转，并不再回复，缓滴定，至电流计指针突然偏转，并不再回复，即为滴定终点。即为滴定终点。亚硝酸钠永停滴定法原理亚硝酸钠永停滴定法原理终点前：无可逆电对，无电流产生，电终点前：无可逆电对，无电流产生，电流计指针停止在流计指针停止在“0”位位终点后：过量终点后：过量NaNO2阳极阳极：NO+H2OHNO2+H+eHNO2+H+e阴极：阴极：NO+H2O电路有电流通过，电流计指针突然偏转并不再回电路有电流通过，电流计指针突然偏转并不再回“0”（2）电位法）电位法 （3）外指示剂法）外指示剂法 KI淀粉糊剂或试纸淀粉糊剂或试纸2NaNO2+2KI+4HCl2NO+I2+2KCl+2NaCl+2H2O（4）内指示剂法）内指示剂法 中性红中性红 不可逆指示剂不可逆指示剂4.测定方法测定方法 盐酸普鲁卡因盐酸普鲁卡因 ChP（2005）取本品约取本品约0.6g，精密称定，照永停，精密称定，照永停滴定法（附录滴定法（附录A），在），在1525，用亚硝酸钠滴定液（用亚硝酸钠滴定液（0.1mol/L）滴定。）滴定。每每1ml亚硝酸钠滴定液（亚硝酸钠滴定液（0.1mol/L）相当于相当于27.28mg的的C13H20N2O2HCl（二）非水溶液滴定法（二）非水溶液滴定法脂烃胺侧链，具弱碱性脂烃胺侧链，具弱碱性.盐酸丁卡因盐酸丁卡因,盐酸利盐酸利多卡因，盐酸布比卡因侧链上的叔胺氮具有弱碱性，多卡因，盐酸布比卡因侧链上的叔胺氮具有弱碱性，均可采用非水溶液滴定法测定含量。均可采用非水溶液滴定法测定含量。原理原理:溶剂溶剂:醋酸或冰醋酸或酸酐醋酸或冰醋酸或酸酐标准溶液标准溶液:HClO:HClO4 4指示剂指示剂:结晶紫（或萘酚苯）结晶紫（或萘酚苯）结晶紫：紫色（碱式色）结晶紫：紫色（碱式色）终点终点:蓝色或绿色（黄绿色）蓝色或绿色（黄绿色）加入醋酸汞加入醋酸汞 作用作用:除去氢卤酸的干扰除去氢卤酸的干扰 蓝色、绿色、黄绿色、黄色（酸式色）pH滴滴定定盐盐酸酸丁丁卡卡因因时时，加加入入适适量量醋醋酐酐。因因醋醋酐酐解解离离生生成成的的醋醋酐酐合合乙乙酰酰氧氧离离子子比比醋醋酸酸合合质质子子的的酸酸性性还还强强，有有利利于于丁丁卡卡因因碱碱性性的的增增强强，使使滴滴定定突突跃敏锐。跃敏锐。2(CH2(CH3 3CO)CO)2 2 O O(CH(CH3 3CO)CO)3 3O O+十十CHCH3 3COOCOO【盐酸利多卡因的测定盐酸利多卡因的测定】取本品取本品0.2g，精密称定，加冰醋酸溶解后，精密称定，加冰醋酸溶解后，加醋酸汞加醋酸汞 5ml与结晶紫指示剂与结晶紫指示剂1滴，用滴，用HClO4滴定液（滴定液（0.1mol/L)滴至溶液显绿色，将滴定滴至溶液显绿色，将滴定的结果用空白试验校正。每的结果用空白试验校正。每1ml HClO4滴定滴定液（液（0.1mol/L)相当于相当于27.08mg 的的C14H22N2O.HCl 盐酸利多卡因非水溶液滴定法反应过程如下：盐酸利多卡因非水溶液滴定法反应过程如下：（三）紫外分光光度法（三）紫外分光光度法 对乙酰氨基酚在对乙酰氨基酚在0.4氢氧化钠溶液中，于氢氧化钠溶液中，于257nm波长处有最大吸收，其紫外吸收光谱特波长处有最大吸收，其紫外吸收光谱特征，可用于其原料及其制剂的含量测定。征，可用于其原料及其制剂的含量测定。对乙酰氨基酚对乙酰氨基酚 ChP（2005）取取本本品品约约40mg，精精密密称称定定，置置25ml量量瓶瓶中中，加加0.4氢氢氧氧化化钠钠溶溶液液5.0ml溶溶解解后后，加加水水至至刻刻度度，摇摇匀匀，精精密密量量取取5m1，置置100ml量量瓶瓶中中，加加0.4氢氢氧氧化化钠钠溶溶液液10m1，加加水水至至刻刻度度，摇摇匀匀，在在257nm的的波波长长处处测测定定吸吸收收度度，按按C8H9NO2的的吸收系数吸收系数 为为715 计算，即得。计算，即得。原料药原料药 吸收系数法吸收系数法 USP（25）对照法对照法 （四）高效液相色谱法（四）高效液相色谱法对乙酰氨基酚泡腾片对乙酰氨基酚泡腾片:色谱条件色谱条件:柱柱C18,流动相流动相:甲醇甲醇-水水(pH 4.5磷酸缓冲液磷酸缓冲液);检测波长检测波长:254取取10片片剂片片剂,称取其质量称取其质量 流动相溶解定容至流动相溶解定容至50 ml 过滤过滤 取续滤液取续滤液10 ml 定容至定容至50 ml,得供试液得供试液,精密精密量取量取10 l 进样进样,得得AX.取浓度取浓度100 g/ml对照品溶液对照品溶液,同同法测定法测定,得得AS.1.盐酸普鲁卡因胺常用的鉴别反应有（）A.重氮化偶合反应B.羟肟酸铁盐反应C.氧化反应D.磺化反应E.碘化反应 2采用亚硝酸钠法测定含量的药物有（）A.苯巴比妥B.盐酸丁卡因C苯佐卡因D盐酸去氧肾上腺素 3下列药物中不能用亚硝酸钠滴定法测定含量者（）A.乙酰水杨酸B.对氨基水杨酸钠C.对乙酰氨基酚D.普鲁卡因E.苯佐卡因 4.亚硝酸钠滴定法中，加KBr的作用是（）A.添加BrB.生成NO+Br,加快重氮化反应C生成HBrD.生成Br2 E.抑制反应进行 5亚硝酸钠滴定法中指示终点的方法为（）A.电位法 B.永停法C.外指示剂法 D.内指示剂法E.自身指示剂法 6亚硝酸钠滴定法中，滴定剂（）A.亚硝酸钠亚硝酸钠B.高氯酸C.氢氧化钠D.外指示剂法7.ChP（2010）亚硝酸钠滴定法测定盐酸普鲁卡因的含量时，指示滴定终点的方法为（）A.自身指示终点法B.电位法指示终点C.永停滴定法D.氧化还原指示剂法E.酸碱指示剂法 8.以下那种药物中应检查对氨基苯甲酸（）A.盐酸利多卡因B.盐酸普鲁卡因胺C.盐酸普鲁卡因注射液盐酸普鲁卡因注射液 D.盐酸普鲁卡因胺片9.盐酸普鲁卡因采用亚硝酸钠滴定法测定含量时的反应条件是（）A.强酸B.加入适量溴化钾C.室温（1030）下滴定D.滴定管尖端深入液面E.永停法指示终点