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-动物细胞工程动物细胞工程(课时课时)动物细胞培养的应用和概念：动物细胞培养的应用和概念：从动物有机体中取出相关的从动物有机体中取出相关的组织组织,将它分散成将它分散成单个细胞单个细胞,然后然后,放在适宜的培养基中放在适宜的培养基中,让这些细让这些细胞胞生长和增殖生长和增殖.动物细胞培养过程：动物细胞培养过程：动物胚胎或幼龄动动物胚胎或幼龄动物的组织、器官物的组织、器官细胞悬浮液细胞悬浮液胰蛋白酶胰蛋白酶10代细胞代细胞原代培养原代培养50代细胞代细胞传代培养传代培养细胞株细胞株无限传代无限传代细胞系细胞系单个细胞单个细胞加培养液加培养液遗传物质遗传物质未改变未改变遗传物质遗传物质已改变已改变动物组织细胞间隙中含动物组织细胞间隙中含有一定量的弹性纤维等有一定量的弹性纤维等蛋白质，将细胞网络起蛋白质，将细胞网络起来形成具有一定弹性和来形成具有一定弹性和韧性的组织和器官。韧性的组织和器官。（分解弹性纤维）（分解弹性纤维）细细胞胞悬悬浮浮液液细胞株细胞株10代代细细胞胞50代代细细胞胞细细胞胞系系无无限限传传代代原代培养原代培养传代培养传代培养遗传物质改变遗传物质改变概念：原代培养、传代培养、细胞株、细胞系概念：原代培养、传代培养、细胞株、细胞系1 1、无菌、无毒、无菌、无毒 2 2、全部的营养物质、全部的营养物质 3 3、适宜的温度和、适宜的温度和PHPH值值 4 4、必要的气体条件、必要的气体条件（添加一定量的抗生素，定期更换培养液）（添加一定量的抗生素，定期更换培养液）（葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等。（葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等。）保证细胞顺利的保证细胞顺利的生长增殖生长增殖36.5+36.5+（-）0.50.5度度,7.2-7.4,7.2-7.4O O2 2和和COCO2 2（95%95%空气和空气和5%CO5%CO2 2）3 3、条件：、条件：维持培养液的维持培养液的PH4.4.动物细胞培养技术的应用动物细胞培养技术的应用蛋白质生物制品的生产蛋白质生物制品的生产 如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体健康细胞培养健康细胞培养 培养健康细胞用于烧伤病人皮肤移植培养健康细胞用于烧伤病人皮肤移植细胞的生理、药理、病理研究细胞的生理、药理、病理研究 植物组织培养和动物细胞培养的比较植物组织培养和动物细胞培养的比较比比较项目目植物植物组织培养培养动物物细胞培养胞培养原理原理细胞的全能性胞的全能性细胞增殖胞增殖培养基性培养基性质固体培养基固体培养基液体培养基液体培养基培养基特有成分培养基特有成分蔗糖蔗糖 植物激素植物激素葡萄糖葡萄糖 动物血清物血清培养培养结果果植物体植物体细胞株、胞株、细胞系胞系培养目的培养目的快速繁殖、培育快速繁殖、培育无病毒植株无病毒植株获得得细胞或胞或细胞胞分泌蛋白分泌蛋白思考：思考：2、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料？培养材料？1、动物细胞培养液的主要成分是什么？较植物组培培养基有、动物细胞培养液的主要成分是什么？较植物组培培养基有何独特之处？何独特之处？3、为什么培养前要将组织细胞分散成单个细胞？、为什么培养前要将组织细胞分散成单个细胞？4、动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个、动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个体？体？主要成分：葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。主要成分：葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。独特之处有：独特之处有：1、液体培养基、液体培养基 2、成分中有动物血清等、成分中有动物血清等因为这些组织或器官上的细胞生命力旺盛，分裂能力强因为这些组织或器官上的细胞生命力旺盛，分裂能力强成块组织不利培养，分散了做成细胞悬浮液利于培养成块组织不利培养，分散了做成细胞悬浮液利于培养不能，动物细胞培养只能使细胞数目增多，不能发育成新的不能，动物细胞培养只能使细胞数目增多，不能发育成新的动物个体动物个体二、动物体细胞核移植技术和克隆动物二、动物体细胞核移植技术和克隆动物 动物核移植是将动物的一个细胞的细胞动物核移植是将动物的一个细胞的细胞核核,移如入一个已经去掉细胞核的卵母细胞移如入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中中.使其重组并发育成一个新的胚胎使其重组并发育成一个新的胚胎,这个这个新的胚胎最终发育为动物个体新的胚胎最终发育为动物个体.用核移植的方法得到的动物称为克隆动物用核移植的方法得到的动物称为克隆动物分类：分类：胚胎细胞核移植：体细胞核移植：细胞分化程度低，恢复全能性容易细胞分化程度低，恢复全能性容易细胞分化程度高，恢复全能性困难细胞分化程度高，恢复全能性困难卵细胞卵细胞母绵羊母绵羊母绵羊母绵羊乳腺细胞乳腺细胞细胞质细胞质细胞核细胞核细胞核移植细胞核移植早期胚胎早期胚胎卵裂卵裂C母绵羊子宫母绵羊子宫胚胎移植胚胎移植多莉羊多莉羊分娩分娩妊娠妊娠多多莉莉羊羊的的培培育育过过程程融合后的卵细胞融合后的卵细胞2.体细胞核移植技术的应用前景体细胞核移植技术的应用前景(1)在畜牧业中可以在畜牧业中可以加速家畜遗传改良的加速家畜遗传改良的进程进程(2)保护濒危物种保护濒危物种(3)医药卫生领域生医药卫生领域生产医用蛋白质及组织产医用蛋白质及组织器官的移植器官的移植体细胞核移植技术存在的问题体细胞核移植技术存在的问题 在研究方面，克隆动物基因组重新编程的机在研究方面，克隆动物基因组重新编程的机制尚不清楚，克隆技术效率低，克隆动物畸形率高、制尚不清楚，克隆技术效率低，克隆动物畸形率高、死亡率高、易出现早衰等问题。这些问题尚在研究死亡率高、易出现早衰等问题。这些问题尚在研究中。在应用上，生产克隆动物费用昂贵，距大规模中。在应用上，生产克隆动物费用昂贵，距大规模应用还有一定距离。应用还有一定距离。1.动物细胞工程技术的基础是：（）动物细胞工程技术的基础是：（）A动物细胞融合动物细胞融合B胚胎移植胚胎移植C动物细胞培养动物细胞培养D核移植核移植