2022年宁夏固原市肉用流产母牛病原血清学调查分析.pdf

中国牛业科学2 0 2 3,49（5）：7 7-8 0China Cattle Science调查研究调查研究2022年宁夏固原市肉用流产母牛病原血清学调查分析谢建亮，于有利2*,郭亚男,王景松,李珂3（1.宁夏固原市畜牧技术推广服务中心，宁夏固原7 56 0 0 0；2.宁夏农林科学院，宁夏银川7 50 0 0 2；3.宁夏大学，宁夏银川7 50 0 0 2）摘要：目的 为了明确宁夏固原地区肉用流产母牛4种流产相关病原的流行情况。【方法 试验选择宁夏固原市5个地区不同规模化肉牛养殖场，采集131份有流产史的母牛血清样品，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）分别对流产相关病原抗体/抗原进行检测和分析。结果 采集的131份血清样品中共检出10 9 份阳性血清，阳性率为8 3.2%。其中BVDV抗体阳性率为6 2.6%（8 2/131）、流产衣原体抗体阳性率为59.5%（7 8/131）、IBRV抗体阳性率为13.7%（18/131），布鲁氏菌抗体阳性率为0%（0/131）。结果表明，采集的131份血清样品中共检出10 9份阳性血清，阳性率为8 3.2%。其中BVDV抗体阳性率为6 2.6%（8 2/131）、流产衣原体抗体阳性率为59.5%（7 8/131）、IBRV抗体阳性率为13.7%（18/131），布鲁氏菌抗体阳性率为0%（0/131）。10 9份阳性样品中，最多出现3种病原混合感染。其中单一病原感染阳性样品占42.2%（46/10 9），以BVDV感染比例最大，与流产衣原体阳性率相比差异显著（P0.05）;2 种病原混合感染样品占56.9%（6 2/10 9），以BVDV和流产衣原体混合感染比例最大，与流产衣原体和IBRV混合感染阳性率、BVDV和IBRV混合感染阳性率差异极显著（P0.01）3种病原混合感染样本占4.6%（4/10 9），主要以BVDV、流产衣原体和IBRV混合感染为主。结论 宁夏固原地区流产母牛均存在以上3种疫病感染，其中主要以BVDV和流产衣原体单独或混合感染为主。关键词：宁夏固原；牛病毒性腹泻病毒；流产衣原体；传染性牛鼻气管炎病毒；布鲁氏菌；抗体检测中图分类号：S857.22；S8 58.2 3文献标识码：A文章编号：10 0 1-9111(2 0 2 3)0 5-0 0 7 7-0 4宁夏回族自治区固原市是回族主要聚居地，肉牛养殖业的发展势头强劲，是当地的主要支柱产业，发展潜力巨大。但是近几年肉牛生殖系统疾病非常严重,这为肉牛的繁殖及种群更新带来了很大挑战，也给当地经济发展造成了巨大的损失。引起肉牛生殖系统疾病的病原微生物极其复杂，但是，临床中危害最大的病原主要有牛病毒性腹泻（Bovine viral di-arrheavirus,BVDV）、传染性牛鼻气管炎病毒（Infec-tiousbovinerhinotracheitis，I BR V）、流产衣原体（Ch l a m y d i a _a b o r t u s）和布鲁氏杆菌（Brucella）等。BVDV感染后以高热、腹泻、免疫抑制、母畜流产、产死胎、持续性感染为主要特征,尤其是犊牛感染后死亡率极高，混合感染时传播迅速，被世界动物卫生组织(WOAH)列为B类传染病 1.2 。IBR牛传染性鼻气管炎又称为牛坏死性鼻炎、红鼻子病,是由IBRV感染家养牛、野牛的一种急性、热性、接触性传染病 3。IBRV感染后主要引发呼吸道症状以及成年牛生殖系统疾病和犊牛脑炎 4。牛衣原体病是由衣原体感染引起的一种人畜共患病,该病不仅对养殖业有着较大的威胁，也严重影响着人类的身体健康。牛衣原体病主要表现为肠炎、支气管炎、关节炎、角膜结膜炎等，怀孕母牛被流产衣原体侵袭后会收稿日期：2 0 2 3-0 8-0 7 修回日期：2 0 2 3-0 8-2 5基金项目：宁夏回族自治区重点研发项目（2 0 2 2 BBF03024,2022BBF03025），宁夏回族自治区青年拔尖人才项目作者简介：谢建亮（197 7 一），高级兽医师，本科，主要从事畜牧技术推广服务工作。*通讯作者：于有利（1991一），副研究员，博士，主要从事牛呼吸道和腹泻相关病原致病机制研究。78发生流产衣原体性早产、死产或产无活力特牛，公牛感染后则表现为精液品质下降伴有精囊炎的发生 5.6 。牛布鲁氏杆菌病是由牛布鲁氏杆菌感染引起的一种常见人畜共患性疾病，常引起家畜如牛、羊和猪等动物生殖器官和胎膜发炎，引起流产、不育和各种组织的局部病灶 7-8 。BVDV、流产衣原体、IBRV和布鲁氏杆菌这几种病原是当前我国开展“规模化牛场主要动物疫病净化示范场”和“规模化牛场主要动物疫病净化创建场”常见的几种主要疫病。目前宁夏固原市对这四种病原的感染流行情况尚缺乏系统的研究，本研究通过采集固原市部分地区具有流产史的肉用母牛血液样品，进行BVDV、流产衣原体、IBRV和布鲁氏菌四种病原的ELISA检测,以期为这几种疾病的诊断与防治提供数据参考。1材料与方法1.1材料1.1.1血清样品2 0 2 2 年2 月10 月从宁夏固原市5个地区9个不同规模的牛场共131头流产牛血清样品，其中西吉县17 份，隆德县13份，泾源县2 0份，彭阳县14份，原州区6 7 份（见表1）。1.1.2主要试剂BVDVp80/p125蛋白抗体ELISA试剂盒ELISA试剂盒（货号为10 0 6 1-0 2）、流产衣原体gG抗体ELISA试剂盒（货号为10 0 2 1-02）、多物种布鲁氏菌抗体试剂盒（货号为10 0 43-02）、I BR V g B蛋白抗体ELISA试剂盒（货号为10074-02)购自美国Biostone有限公司。1.1.3主要仪器微孔板恒温振荡器（型号为ST702），购自上海安亭科学仪器公司；洗板机（型号为WELLWASH4MK2），购自杭州米欧仪器有限公司；酶标仪（型号为MULTISKANMK3），购自上海赛默飞世尔仪器有限公司。1.2方法1.2.1血清采集买采用非抗凝血采血器从肉用流产母牛尾静脉采集5mL左右的血液，室温下凝固后，4条件下保存并运输至实验室。然后于350 0r/min离心10 min后,吸出血清至2 mL冻存管中，置于-8 0 保存备用检。1.2.2ELISA检测方法采用间接ELISA方法对宁夏固原市5个地区9个不同规模化肉牛场中131份有流产史的肉牛血清样品进行BVDV,IBRV，流产衣原体和和布鲁氏菌抗体检测，详细步骤参考美国Biostone有限公司试验操作说明书。1.2.4数据的统计分析利用SPSS23.0软件对试验数据进行统计分析，试验数据以“平均值标准误”表示。采用卡方检验对结果进行差异显著性中国牛业科学分析,P0.05表示差异显著,P0.05表示差异不显著。2结果2.17不同地区病原抗体阳性率对131份血液样品中BVDV、I BR V、流产衣原体和布鲁氏菌抗体情况进行统计分析。结果如表1所示,131份血清样品中有10 9 份呈阳性，检出率为83.2%，其中BVDV抗体阳性率为6 2.6%（8 2/131）流产衣原体抗体阳性率为6 0.3%（7 9/131）IBRV抗体阳性率为12.0%（14/131），布鲁氏菌抗体阳性率为0%（0/131）。BVDV和流产衣原体样品阳性率差异不显著（P0.05);BVDV和流产衣原体样本阳性率与IBRV样本阳性率差异极显著（P0.01）;布鲁氏菌样本阳性率与BVDV、流产衣原体和IBRV样本阳性率差异极显著（P0.01）。不同地区病原感染不同,其中西吉县、泾源县和原州区BVDV感染最严重，隆德县和彭阳县流产衣原体感染最严重（见表1）。不同地区牧场中均不存在布鲁氏菌感染。表1不同地区4种病原抗体检测结果病原地区样本数阳性数阝阳性率/%BVDV抗体西吉县17隆德县13泾源县20彭阳县14原州区67流产衣原体抗体西吉县17隆德县13泾源县20彭阳县14原州区67IBRV抗体西吉县17隆德县13泾源县20彭阳县14原州区67牛布鲁氏菌抗体西吉县17隆德县13泾源县20彭阳县14原州区67合计1312.2单一和混合感染抗体阳性率统计分析在检出的10 9份阳性样品中,单一感染阳性样品共46 份，占42.2%（46/10 9）。其中BVDV所占比例最大，占2 3.9%（2 6/10 9）；流产衣原体占第49卷1270.6323.11470.0428.64973.1953.0638.51260.0642.94668.7635.317.7210.000.057.500.000.000.000.000.010983.2第5期18.3%（2 0/10 9）。BV D V 阳性率与流产衣原体阳性率差异显著（P0.05）;2 种病原混合感染样品共62份，占56.9%（6 2/10 9）。其中BVDV混合流产衣原体感染占47.7%（52/10 9），比例最大；流产衣原体和IBRV混合感染占5.5%（6/10 9）；BVDV混合IBRV感染占3.7%（4/10 9）。BVDV和流产衣原体混合感染阳性率与流产衣原体和IBRV混合感染阳性率、BVDV和IBRV混合感染阳性率差异极显著（P0.01）。BV D V、流产衣原体和IBRV3种病原混合感染样品共5份，占4.6%（见表2）。表2 4种病原混合感染统计阳性样病原阳性数本总数/%BVDV109流产衣原体109合计109BVDV+流产衣原体109流产衣原体+IBRV109BVDV+IBRV109合计109BVDV+流产衣原体+IBRV109合计1094.6%3.7%5.5%1、BV D V 和流产衣原体混合阳性；2、IBRV和流产衣原体混合阳性；3、BV D V 和IBRV混合阳性；4、BVDV、流产衣原体和IBRV混合阳性。图1流产肉牛血清中不同病原抗体阳性的比例分布图3讨论肉牛产业是宁夏固原市精准脱贫的主导产业，为促使产业健康发展，做好重大动物疫病防控已成为重中之重。在肉牛养殖中,生殖系统疾病如母畜流产一直是困扰肉牛产业发展、制约牛群更新的难题。BVDV和IBRV作为引起牛呼吸道疾病综合征、流产和肠道腹泻的常见病原多以单重和混合感谢建亮，等：2 0 2 2 年宁夏固原市肉用流产母牛病原血清学调查分析26204652646255123447.7%79染形式存在,因其感染率高，常在血清、鼻拭子和生殖道拭子等样品中被检出 8-9。除直接致病外，BVDV和IBRV还可引起机体的免疫抑制，进而继发其他病原感染,降低牛群生产性能,严重的引起死亡 10 。另外,BVDV能在妊娠母牛早期穿过胎盘而导致胎儿持续感染，持续感染的动物如牛通常比短暂或急性感染的动物更容易传播，因其一生中能散播大量病毒,因而被认为是BVDV的主要宿主 。在本研究中,BVDV是四种病原中感染率最高的,也是单一感染病原中最高的,其也常与其他病原混合感染。流产衣原体在全球牛、羊养殖中广泛存在，遍阳性率布5大洲至少2 5个国家和地区 12 1，我国10 多个省份也有相关报道，且主要集中在中西部省份 6 。对23.9已报道的牛、羊流产衣原体阳性率进一步统计发现，18.3近10 年间，国外牛流产衣原体阳性率分别为4.42.257%48.0%，而我国牛流产流产衣原体阳性率分47.7别为1.10%6 7.98%6 ，在本研究中流产衣原体5.5的感染率高达6 0.3%（7 9/131），显著高于其他地区3.7如河南省37.43%（6 7/17 9）【13、新疆南疆地区13.56.971%（7 9/57 6）14)、广西地区38.50%（6 16/4.61600）15 等地区。布鲁氏菌作为一种呈全球分布的4.6人畜共患传染病危害极大,虽其致死率较低，但会严重影响牛羊正常生长，导致母畜流产，较长时间内无法正常受孕，公畜还会出现睾丸肿胀等问题,增加养殖场死淘率。在本研究中虽未检测到布鲁氏菌但不能排除该地区布鲁氏菌的感染，继续加强牛场饲养管理和疾病预防工作,重视血清学检测,做好布病高发区域牛羊健康的检测工作是防控布病的必要措施。本研究针对宁夏固原地区开展肉用母牛流产相关病原血清流行病学研究，为宁夏地区肉用母牛繁殖疾病防控技术研究提供科学依据。参考文献：1 RAN X H,CHEN X H,LIL W,et al.A systematic review andmeta-analysis of the epidemiology of bovine viral diarrhea virus(BVDV)infection in dairy cattle in ChinaJ.Acta Trop,2019,190:296-303.2OGUEJIOFOR C F,THOMAS C,CHENG Z,et al.Mechanismslinking bovine viral diarrhea virus(BVDV)infection with infertil-ity in cattleJ.Anim Health Res Rev,2019,20(1):72-85.3杨兰兰，吴海兴，金卫华，等.牛传染性鼻气管炎及病毒性腹泻流行病学调查及防控建议 J.中国畜禽种业，2 0 2 3，19（3）：117-120.4鲍显伟，李小龙，石亚楠，等.牛传染性鼻气管炎病毒和牛病毒性腹泻病毒双重PCR检测方法的建立与应用 J.中国动物检疫,2 0 2 3,40(1):115-12 0.5马新明,邢相利.牛衣原体病的综合防治措施J畜牧兽医科技信息，2 0 2 1（4）：10 8.806李韦，罗锐，赵占强，等.国内外动物流产衣原体流行情况分析J动物医学进展，2 0 2 2，43（11）;96-10 1.7古丽尼沙阿布都力.牛布氏杆菌病发病原因及防治措施J.农业科学，2 0 2 3，（4):3.8李海涛.牛布氏杆菌病与结核病的检疫与治疗思路构建 J.自然科学,2 0 2 2,6)：3.9吴志强,石悦萌，寇墨婷，等.牛呼吸道疾病病原BVDV,IBRV，BPIV3和牛支原体的分离鉴定J.当代畜禽养殖业，2 0 2 2，(5):12-16.10姜海宇,薛华平,李家奎.牛病毒性腹泻病毒（BVDV)的研究进展 J.养殖与饲料，2 0 2 2，2 1（9）：10 7-112.11KHODAKARMAM-TAFTli A,FARJANIKISH G H.Persistent中国牛业科学bovine viral diarrhea virus（BVD V）i n f e c t i o n i n c a t t l e h e r d sJ.Iran J Vet Res,2017,18(3):154-163.12AA H E,B M B,C M D,et al.Detection of Chlamydia abortusand risk factors for infection in small ruminants in Iran-Science-Direct J.Small Ruminant Research,2021,(1):197.13李峰，张德民，梁忠民。河南省部分牛场奶牛衣原体病的血清学调查 J.农业灾害研究，2 0 17，7（2）：3.14王淑琴，张成图，吴英，等西宁市牛衣原体病流行病学调查J.中国奶牛，2 0 2 0，（9):4.15 李军，吴翠兰，陶飞，等。广西部分地区牛羊三种人兽共患病的血清学调查与分析J.黑龙江畜牧兽医，2 0 2 0，（4）：66-70.第49卷Serological Investigation and Analysis of Pathogens in MeatAborted Cows in Guyuan City of Ningxia in 2022XIE Jian-liang,YU You-li*,CUO Ya-nan”,WANG Jinsong”,LI Ke(1.Guyuan Yuanzhou District Animal Husbandry Technology Promotion Service Center,Guyuan,756000;2.Institute of Animal Science,Ningxia Academy of Agriculture and Forestry Sciences,Yinchuan,Ningxia,750002;3.School of Agriculture,Ningxia University,Yinchuan 750021)Abstract:Objective To investigate the prevalence of 4 abortion-related pathogens in aborted cows for meatin Guyuan area of Ningxia.Methods 131 serum samples from cows with a history of abortion were collected from5 beef cattle farms in Guyuan City,Ningxia,and the abortion-related pathogen antibodies/antigens were detectedand analyzed by enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA).Results 109 of 131 serum samples were foundto be positive,with a positive rate of 83.2%.The positive rate of BVDV antibody was 62.6%(82/131),the pos-itive rate of Chlamydia abortis antibody was 59.5%(78/131),the positive rate of IBRV antibody was 13.7%(18/131),and the positive rate of brucella antibody was 0%(0/131).The results showed that 109 of 131 serumsamples were positive,the positive rate was 83.2%.The positive rate of BVDV antibody was 62.6%(82/131),the positive rate of Chlamydia abortis antibody was 59.5%(78/131),the positive rate of IBRV antibody was 13.7%(18/131),and the positive rate of brucella antibody was 0%(0/131).In 109 positive samples,mixed infec-tion of up to 3 pathogens was found.Among them,42.2%(46/109)were positive for single pathogen infection,and the proportion of BVDV infection was the largest,which was significantly different from the positive rate ofChlamydia abortus(P 0.05).The proportion of mixed infection samples was 56.9%(62/109),and the pro-portion of mixed infection with BVDV and Chlamydia abortus was the largest,and the positive rate of mixed infec-tion with Chlamydia abortus and IBRV,and the positive rate of BVDV and IBRV were significantly different(P0.01).The samples of mixed infection with 3 pathogens accounted for 4.6%(4/109),mainly BVDV,Chlamydiaabortus and IBRV mixed infection.Conclusion All aborted cows in Guyuan area of Ningxia were infected withthe above three kinds of diseases,and BVDV and chlamydia abortus were mainly infected alone or mixed.Key words:Guyuan of Ningxia;bovine viral diarrhea virus;chlamydia abortus;infectious bovine rhinotrache-itis virus;brucella;antibody testing