2019年高考生物一轮重要考点《基因工程(二)》练习卷.doc

2019年高考生物一轮重要考点《基因工程（二）》练习卷
基因工程（二）
1．下列关于目的基因导入受体细胞的描述，不正确的是
A．农杆菌转化法是将目的基因导入植物细胞最常用的方法
B．显微注射技术是转基因动物中采用最多的方法
C．大肠杆菌最常用的转化方法是用Ca2+使细胞的生理状态发生改变
D．基因枪法导入植物体细胞的方法比较经济有效
2．下表是基因工程操作中鉴定含目的基因植株的4种方法。请预测同一后代种群中，4种方法检出的含目的基因植株的比例最小的是
选项
方法
检验对象
检测目标
A
PCR扩增
基因组DNA
目的基因
B
分子杂交
总mRNA
目的基因转录产物
C
抗原—抗体杂交
总蛋白质
目的基因编码的蛋白质
D
喷洒除草剂
幼苗
抗除草剂幼苗
A．A B．B
C．C D．D
3．下图是利用基因工程培育抗虫植物的示意图。以下相关叙述，不正确的是

A．①→②利用两种不同限制酶处理，能避免抗虫基因的DNA片段自身环化
B．②→③可用氯化钙处理农杆菌，有助于促进重组Ti质粒转化到农杆菌细胞中
C．③→④用农杆菌侵染植物细胞，重组Ti质粒整合到植物细胞的染色体上
D．④→⑤用植物组织培养技术培养，具有抗虫性状的植株产生了可遗传变异
4．利用基因工程技术生产羧酸酯酶(CarE)制剂，用于降解某种农药的残留，基本流程如图。下列叙述正确的是

A．过程①的反应体系中需要加入逆转录酶和核糖核苷酸
B．过程②需使用限制酶和DNA聚合酶，是基因工程的核心步骤
C．过程③需要使用NaCl溶液制备感受态的大肠杆菌细胞
D．过程④可利用PCR技术鉴定CarE基因是否成功导入受体细胞
5．下图表示利用基因工程生产胰岛素的三种途径，据图判断下列说法错误的是

A．导入受体细胞C需要用Ca2+处理使大肠杆菌处于感受态
B．利用显微注射的方法将目的基因导入受体细胞A即乳腺细胞
C．受体细胞B通常为莴苣的体细胞，经脱分化、再分化形成个体
D．三种方法得到的胰岛素结构不完全相同
6．如图是生产转基因抗虫棉技术的流程图。已知卡那霉素抗性基因（kanR）常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。下列叙述正确的是

①为检测抗虫基因是否成功表达，将“离体棉花叶片组织”放在含卡那霉素的培养基上培养
②为了防止黏性末端任意连接，可将抗虫基因和质粒均用两种限制酶进行处理
③卡那霉素抗性基因（kanR）中可能存在限制酶的酶切位点
④生产抗虫棉的整个过程中只需要基因工程操作即可
A．②④ B．①②
C．②③ D．③④
7．下列不属于基因工程应用实例的是
A．培育出抗烟草花叶病毒的番茄植株
B．在大肠杆菌内获取人的干扰素
C．利用克隆技术保护珍稀动物
D．利用“工程菌”生产乙肝疫苗
8．北极比目鱼有抗冻基因，其编码的抗冻蛋白具有11个氨基酸的重复序列，该序列重复次数越多，抗冻能力越强。如图是获取转基因抗冻番茄植株的过程示意图，有关叙述正确的是

A．将多个抗冻基因编码区依次相连成能表达的新基因，不能得到抗冻性增强的抗冻蛋白
B．过程①获取的目的基因，可用于基因工程和比目鱼基因组测序
C．过程①需要的工具酶是RNA聚合酶
D．采用DNA探针可以检测转基因抗冻番茄植株中目的基因的存在及其完全表达
9．美国和澳大利亚的研究人员发现，从锥形蜗牛体内提取出的毒液有望帮助人类开发出超级速效的胰岛素。他们研究表明锥形蜗牛毒蛋白(Con-InsGl)能加速受体细胞信号转换，比人类胰岛素更加快速的发挥作用。因此制造这类“速效胰岛素”以及利用转基因技术实现批量生产成为Ⅰ型糖尿病治疗的新思路。请回答下列问题：
（1）利用基因工程制造Con-InsGl这种速效胰岛素过程中，构建的基因表达载体一般包括目的基因、启动子、标记基因、_________和复制原点，标记基因的作用是________________________。
（2）为了获得目的基因可以通过提取分析Con-InsGl毒蛋白中的__________序列推知毒蛋白基因的核苷酸序列，再用DNA合成仪直接大量合成。基因工程中需要DNA连接酶，根据酶的来源不同分为________两类。
（3）将人工合成的目的基因导入大肠杆菌体内，一般先用药物处理大肠杆菌使之成为____________细胞，再将重组DNA溶于____________中与该类细胞融合，在一定温度下促进细胞吸收重组DNA分子完成转化过程。
（4）经过目的基因的检测和表达，获得的Con-InsGl毒蛋白活性未能达到期待的“速效胰岛素”的生物活性，导致这种差异的原因可能是___________________________。
10．萝卜的蛋白A具有广泛的抗植物病菌作用，而且对人体没有影响。我国科学家欲获得高效表达蛋白A的转基因大肠杆菌作为微生物农药，做了相关研究。

（1）研究者用相同的_________酶处理蛋白A基因和pET质粒，得到重组质粒，再将重组质粒置于经_________处理的大肠杆菌细胞悬液中，获得转基因大肠杆菌。
（2）检测发现，转入的蛋白A基因在大肠杆菌细胞中表达效率很低，研究者推测不同生物对密码子具有不同的偏好，因而设计了与蛋白A基因结合的两对引物（引物B和C中都替换了一个碱基），并按图2方式依次进行4次PCR扩增，以得到新的蛋白A基因。
①这是一种定点的_________技术。
②图2所示的4次PCR应该分别如何选择图1中所示的引物？请填写以下表格（若选用该引物划“√”，若不选用该引物则划“×”）。

引物A
引物B
引物C
引物D
PCR1

PCR2

PCR3

PCR4

（3）研究者进一步将含有新蛋白A基因的重组质粒和_________分别导入大肠杆菌，提取培养液中的蛋白质，用_________方法检测并比较三组受体菌蛋白A的表达产物，判断新蛋白A基因表达效率是否提高。为检测表达产物的生物活性，研究者将上述各组表达产物加入到长满了植物病菌的培养基上，培养一段时间后，比较_________的大小，以确定表达产物的生物活性大小。
（4）作为微生物农药，使用时常喷洒蛋白A基因的发酵产物而不是转蛋白A基因的大肠杆菌，其优点是_________。
11．（2018·全国Ⅱ卷）某种荧光蛋白（GFP）在紫外光或蓝光激发下会发出绿色荧光，这一特性可用于检测细胞中目的基因的表达。某科研团队将某种病毒的外壳蛋白（L1）基因连接在GFP基因的5′末端，获得了L1-GFP融合基因（简称为甲），并将其插入质粒P0，构建了真核表达载体P1，其部分结构和酶切位点的示意图如下，图中E1~E4四种限制酶产生的黏性末端各不相同。

回答下列问题：
（1）据图推断，该团队在将甲插入质粒P0时，使用了两种限制酶，这两种酶是_________。使用这两种酶进行酶切是为了保证_______________，也是为了保证__________________。
（2）将P1转入体外培养的牛皮肤细胞后，若在该细胞中观察到了绿色荧光，则说明L1基因在牛的皮肤细胞中完成了________和_________过程。
（3）为了获得含有甲的牛，该团队需要做的工作包括：将能够产生绿色荧光细胞的_____________移入牛的____________中、体外培养、胚胎移植等。
（4）为了检测甲是否存在于克隆牛的不同组织细胞中，某同学用PCR方法进行鉴定。在鉴定时应分别以该牛不同组织细胞中的____________（填“mRNA”“总RNA”或“核DNA”）作为PCR模板。
12．（2018·海南卷）甜蛋白是一种高甜度的特殊蛋白质。为了改善黄瓜的品质，科学家采用农杆菌转化法将一种甜蛋白基因成功导入黄瓜细胞，得到了转基因植株。回答下列问题：
（1）用农杆菌感染时，应优先选用黄瓜＿＿＿＿（填“受伤的”或“完好的”）叶片与含重组质粒的农杆菌共培养，选用这种叶片的理由是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
（2）若在转基因黄瓜中检测到这种甜蛋白，则表明该重组质粒中＿＿＿＿已转移到植物细胞中且能够表达；用该转基因黄瓜的某一植株与一株非转基因植株杂交，发现子代中含甜蛋白个体数与不含甜蛋白个体数之比为1：1，则说明甜蛋白基因已经整合到＿＿＿＿（填“核基因组”“线粒体基因组”或“叶绿体基因组”）中。
（3）假设某种转基因作物因为受到病毒感染而减产，若要以该转基因作物为材料获得脱毒苗，应选用＿＿＿＿作为外植体进行组织培养。
（4）通常，基因工程操作主要有4个步骤，即目的基因获取、重组表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。因此，基因工程的含义可概括为＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。

参考答案
1．【答案】D
2．【答案】D
3．【答案】C
4．【答案】D
5．【答案】B
6．【答案】C
7．【答案】C
8．【答案】A
9．【答案】（1）终止子 鉴别和筛选含有目的基因的细胞
（2）氨基酸 E·coliDNA连接酶和T4DNA连接酶
（3）感受态 缓冲液
（4）大肠杆菌中基因表达获得的蛋白质未加工
10．【答案】（1）限制酶和DNA连接 CaCl2
（2）基因突变
（3）含有蛋白A基因的重组质粒、空质粒（pET质粒） 抗原—抗体杂交 抑菌圈
（4）对人、畜、农作物和自然环境安全；不会造成基因污染；有效成分纯度较高
11．【答案】（1）E1和E4　　甲的完整　　甲与载体正确连接
（2）转录　　翻译
（3）细胞核　　去核卵母细胞
（4）核DNA
12．【答案】（1）受伤的　　叶片伤口处的细胞释放出大量酚类物质，可吸引农杆菌移向这些细胞
（2）甜蛋白基因　　核基因组
（3）茎尖
（4）按照人们的愿望进行设计，并通过体外重组和转基因等技术，赋予生物新的遗传特性，创造出符合人们需要的新生物类型

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