DB61_T 968-2015 果汁及果脯糖浆中羟甲基糠醛的测定方法液相色谱法(陕西省).pdf

ICS 67.080.01 X24 陕西省地DB61 方标准DB 61/T 968-2015 果汁及果葡糖浆中搓甲基糠醒的测定方法液相色谱法Determination ofhydroxymethylfurfural in fruitjuice and仕uctosesyrup-Liquid chromatography 2015-05-25发布2015-07-01实施陕西省质量督局发布0861/T 968-2015 目IJJ=I 本标准按照GB!T1.1-2009给出的规则起草。本标准的附录A、附录B均为资料性附录。请注意本文件的某些内容可能涉及专利，本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本标准由陕西出入境检验检疫局提出。本标准由陕西省质量技术监督局归口。本标准由陕西出入境检验检疫局负责解释。本标准起草单位:陕西出入境检验检疫局。本标准主要起草人:孔祥虹、何强、李建华、包仁书、邹阳、张璐、付骋宇、李莹。本标准首次发布。联系信息如下:单位:陕西出入境检验检疫局:电话[phone];地址:西安市含光北路10号:邮编710068。I DB61/T 968-一2015果汁及果脯糖浆中经甲基糠酶的测定方法液相色谱法1 范围本标准规定了果汁及果葡糖浆中起甲基糠醒的液相色谱检测方法。本标准适用于苹果汁、梨计、石榴计等果汁及果葡糖浆中经甲基糠醒的测定。2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB!T 6682分析实验室用水规格和试验方法3 方法提要试样用水溶解稀释后，经聚苯乙烯二乙烯基苯共聚物固相萃取柱净化，用液相色谱法检测，外标法定量。4 术语和定义下列术语和定义适用于本标准。4.1 定量限Limit of Quantity 是指样品中被测物能被定量测定的最低量，其测定结果应具有一定的准确度和精密度。5 试齐IJ和材料5.1 除另有规定外，所用试剂均为分析纯，水为符合GB/T6682规定的一级水。5.2 甲醇:色谱纯。5.3 乙睛:色谱纯。5.4 甲醇-水c1+4,V/V):取100mL甲醇和400mL水，混合均匀。5.5 甲醇-水c1+9,V/V)取100mL甲醇和900mL水，混合均匀。5.6 控甲基糠醒标准物质Chydroxymethylfurfural.C6H603 CAS:67-47-0)纯度大于等于99%。5.7 经甲基糠醒标准储备溶液:准确称取适量的经甲基糠醒标准物质，用甲醇配制成1000g/mL的标准储备溶液，-18C保存。5.8 搓甲基糠匿标准工作溶液2测定时根据需要，用本标准5.5条要求的甲醇-水配制成适当浓度的标准工作溶液，4C保存。DB61/T 968-一.20155.9 聚苯乙烯-二乙烯基苯共聚物固相萃取柱500mg/6mL.或相当者，使用前依次用5mL甲醇、lOmL水活化。5.10 微孔滤膜0.2川，水系。6 仪器和设备6.1 液相色谱仪:配有紫外检测器。6.2 分析天平:感量O.01mg、O.01go6.3 涡旋混匀器。6.4 固相萃取装置。7 测定步骤7.1 样品处理7.1.1 一般果汁称取5g(精确至0.01g)试样于50mL容量瓶中，加入25mL甲醇-水(1+4,Y/y)稀释，用水定容至50.0mL，过0.2阳微孔滤膜，供高效液相色谱仪检测。7.1.2 浓缩果汁称取5g(精确至0.01g)试样于50mL具塞离心管中，加入20mL水，克分溶解混匀，将样品溶液全部上样于活化好的聚苯乙烯-二乙烯基苯共聚物固相萃取柱，用5mL水洗涤样品管，洗涤液也上样于固相萃取柱净化，再用5mL水淋洗固相萃取柱，弃去所有流出液，最后用25mL甲醇-水(1+4，y/y)洗脱，整个固相萃取过程保持流速2-3mL/min，收集洗脱液，用水定容至50.0mL，过0.2阳微孔滤膜，供高效液相色谱仪检测。7.2 测定7.2.1 液相色谱条件a)色谱柱C18柱(长250mm，内径4.6mm，粒径5阳)，或相当者:b)流动相:乙睛-水(8+92，y/y)等度洗脱:c)柱温35(;d)检测波长285nm;e)流速1.OmL/min;f)进样量10L注7.2.1为典型的高效液相色谱条件，采用超高效液相色谱仪时，可根据情况进行调整。7.2.2 液相色谱测定根据样液中提甲基糠酷的含量情况，选定浓度与样液相近的标准工作溶液，标准工作溶液和样液中起甲基糠酷的响应值均应在仪器检测范围内，如果样液中是甲基糠酷的含量超出检测范围，则稀释后再进样。对标准工作溶液和样液等体积分时段参插进样测定，以保留时间定性，外标法定量，在7.2.1给定的液相色谱条件下，提甲基糠醒标准溶液的液相色谱图参见附录A中图A.lo7.3 空白试验2 DB61/T 968-一2015除不加试样外，均按上述检测步骤进行。7.4 结果计算和表述7.4.1 用色谱数据处理机或按式(1)计算试样中挂甲基糠醒含量AU-AU-AU 俨L-nu-o-A V一-n 凸一h-A X.(I)式中:X 试样中经甲基糠醒的含量(mg/kg)A一一样液中经甲基糠酷的色谱峰面积:C，-标准工作液中经甲基糠醒的浓度(g/mL)Y一一样液最终定容体积(mL)A,标准工作液中挂甲基糠隘的色谱峰面积:m一一试样质量(g)。7.4.2 计算结果应扣除空白值，计算结果保留小数点后一位。8 检出限、定量限、回收率和精密度8.1 检出限、定量限本方法的检出限为O.3mg/kg，定量限为1.0mg/kg。8.2 回收率和精密度捏甲基糠酶的回收率及精密度数据参见附录B中表B.1。3 OB61/T 968-一.2015附录A(资料性附录)提甲基糠醒标准溶液液相色i曾固30 却王10。2.5 5.0 7.5 10.0 12.5 15.0 17.5 20.0 结钟图A.1挫甲基糠醒标准溶液(4g/mU的高效液相色谱图4 DB61/T 968-一2015附录B(资料性附录)挂甲基糠醒的添加回收率及精密度数据表B.1 控甲基糠醒的添加回收率及精密度数据样品名称加标水平回收率范围平均回收率相对标准偏差/(mg/kg)/%/%/%10 91.396.7 94.8 2.2 苹果汁20 92.498.0 95.8 2.2 50 95.999.6 97.6 1.5 10 92.7106.7 98.2 5.2 梨汁20 99.4105.3 102.0 2.2 50 96.499.5 97.7 1.4 10 74.892.5 88.6 11.1 石榴汁20 88.4-110.8 95.9 10.0 50 89.9101.8 94.8 5.1 10 86.995.6 91.8 4.4 果葡糖浆20 93.9-99.7 97.0 3.0 50 94.3-99.4 96.6 2.1 5 的FON-AUAV-FAUmo