DB65_T 2243-2005 绵羊冷冻精液制作技术规程(新疆维吾尔自治区).pdf

/ICS65.020.30 843 备案号:DB65 新疆维吾尔自治区地方标准DB65/2243-2005 绵羊冷冻精液制作技术规程Technical Regulation of Semen Freezing of Sheep、，2005-09国15发布2005-11-01实施新疆维吾尔自治区质量技术监督局.发布/OB65/2243一-2005目IJi=i 本标准是按照G8/1.1-切00(标准化工作导则第1部分:标准的结构和编写规则编写。本标准由吕吉州质量技术监督局提出。本标准由新疆维吾尔自治区畜牧厅归口。本标准起草单位:新疆畜科院、新疆华兴投资集团有限公司、新疆维吾尔自治区畜禽繁育改良总站、昌吉州质量技术监督局。本标准起草人:张扬、金花、李军安、李萍、何立涛、任志坚。DB65/2243-2005 绵羊冷冻精液制作技术规程1 范围本标准规定了绵羊冷冻精液(以F简称冻精)的制作方法和技术要求、京精规格、冻精质量标准、冻精的解冻、冻精活力检查、冻精的包装、标记、贮存和运输。本标准适用于绵羊的制作技术。2 规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其髓后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。OB65月2163-2004牛塑料细管冷冻精液3 冻精制作方法和要求3.1 采精前的准备工作3.1.1 采精用的假阴道外壳、假阴道内胎应提前用50.C.60.C的洗涤液热水清洗，温热清水冲洗，直至完全冲洗掉洗烧液，再用75%的酒精棉球消毒后放置在恒温的干燥箱内2h-:-4h烘干备用。3.1.2 涂抹假阴道的凡士林油必须提前隔水煮沸消毒15min.30min.3.1.3 添加假阴道内壁的水温应根据季节的变化调整温度。3.1.4 采集精液的集精杯应消毒干净。所用的玻璃器具必须用洗涤液热水清洗，再用蒸馆水冲洗三遍后置于烘箱中加热至120.C，保持30min消毒、待用。3.1.5 采集精液所需的泪度计、慑子、假阴道冲气活塞等都应提前清洗，再用75%酒精棉球擦洗消毒备用o3.2 种公羊的质量3.2.1 严格按照育种方向，选择血统好，遗传性能稳定，生产性能高，体质结实，生殖器正常，繁殖性能优秀，原精液品质达到标准的公羊做种用。3.2.2 种公羊的体质必须体质健壮，新引进的公羊，应在隔离场所经过严格检疫。制作冻精用的种公羊须经正式兽医机构和l兽医师证明，无下列传染病者:布鲁氏杆菌病、结核病、副结核病、白血病、钩端螺旋体病、传染性鼻气管炎、病毒性腹泻病、胎儿弧菌和阴道滴虫症等才允许使用。上述各种疫病的检查方法，可按中华人民共和国农业部颁布的有关规定执行。3.2.3 制作冻精用的种公羊，其体型外貌和生产性能均应符合该品种的品种标准，且达到特级、一级标准。尤其是主力公羊应严格进行后裔测定。3.2.4 公羊采精前，应先用0.1%的高锤酸饵溶液清洗阴茎和包皮，然后再用0.9%的灭菌生理盐水冲洗干净。3.2.5 采精用的台羊必须是发情旺盛的健康母羊。3.3 采精频率D865/2243-2005 3.3.1 成年种公羊每周采精4次。一般可以连续采精2d，休息ld，当日可采精两次(间隔时间为10min15min)。3.3.2 青年种公羊每周采精2次，每次可根据具体情况和需要确定采精次数。3.4 精液的采集3.4.1 采集的原精液应立即通过肉眼读出射精量、观察精液密度、原精液色泽、气味等后，迅速置于保温箱内检查活力，确定稀释比例(精液密度的判定标准:显微镜视野内布满密集的精子，精子间空隙很小的精液定为密级:如果精子间空隙相当于一个精子的距离，能看到每个精子的活动的精液定为!中级:如果在显微镜视野内只能看到少数精子，精子间隙很大，超过一个精子长度的精液定为稀级)。有条件的单位可采用密度测定仪测定精子密度以获取准确数据。3.4.2 原精液活力的检查方法3.4.2.1 平板压片法:在玻片上滴丁滴精液，然后用盖玻片均匀盖着整个液面，做成压片检查标本，在200倍-400倍显微镜F观察。3.4.2.2 悬滴检查法:在荒玻片上滴一滴精液，然后在凹玻片上的凹窝中做成悬滴检查标本置于显微镜下，放大400倍进行观察。3.4.2.3 每个滴片要观察三个以上视野的不同层面的精子运动状况给予评定。一般采用。-10的十级评分法评分。3.4.2.4 盖玻片和载玻片耍事先洗净擦干，检查活力时应预热。3.4.2.5 评定精液活力时保温箱的温度必须保持在37.C，-.，38.C温度下检查活力为宜。有条件的单位可用带有恒温装置的显微镜戚在显微镜的载物台上装一个恒温器观察活力。3.4.3 稀释后的精液应置丁等温环境(30.C左右)，逐步降温后放入冰箱中(0.C，-.，5.C)平衡2h一仙。3.4.4 种公羊的新鲜精液应符合下列质量标准方可生产为冷冻精液，对其中任何一项不符合标准的，不得用于制作冷冻精液:a)原精液的色泽应呈现乳白色或奶黄色:b)原精液的气味应表现出无味或略带腥臭味c)原精液直线前进运动的精子数60%d)原精液的精子密度15亿/mL e)原精液的精子畸形率35%以上。4.2.3 解冻后的精子畸形率45%。4.2.5 解冻后的精液中无病原性微生物，细菌菌落数1%。5 冻精解冻5.1 颗粒冻精解冻取一无菌、干燥的拇指小试管，将颗粒冻精l剂-2剂放入其中，并迅速置于70C80C水浴中轻轻晃动，待冻精化至绿豆大时取出，借助手温使其完全融化。5.2 细管冻精的解冻先取一烧杯(500mL容量)，内装38C40C温水，用预冷的银子从储精罐中快速取出1支细管冻精投入烧杯中(注意使棉塞端朝下，封口端朝上)。解冻时间10s15s取出，用灭菌纱布擦干，借3 0865/2243-2005 助手温搓动数下，使其均匀。用细管剪刀剪去封口段1mL.-.1.5 mL.挤出一滴精液置于载玻片上观察活力，合格者入库。6 冻精活力检查.6.1 颗粒冻精应先取2.9%二水拧橡酸纳1mL.1.5mL.加热至3S0C土20C，投放府、精1粒2粒，轻轻摇荡，使之迅速熔化。活力检查采用平板压片法，立即在显微镜下检查。检查方法相同于3.4.26.2 细管冻精解冻后活力检查采用平板压片法，立即在显微镜下检查。检查方法相同于3.4.2评定精子活力的显微镜放大倍数以400倍.-.600倍为宜。7东精包装、标志、贮存和运输 7.1 冻精包装7.1.1 颗粒冻精的包装可采用消毒的灭菌纱布袋包装。每一批次以50剂.-.100剂为-个包装单位为宜。7.1.2 细管冻精应封口良好。冻制好的细管冻精以25支包装单位装入特制的塑料拇指管内，再以50一100个拇指管为一个单位装入自制的消毒纱布袋中液氮罐中贮存。7.2 标志7.2.1 颗粒冻精和l细管冻精的外包装上应标记有冻精制作时间，解冻活力，制作单位，冻精数量，品种代码及种公羊号等。7.2.2 细管冻精壁上应有鲜明的标记:注明站名、精液制作日期、品种代码、羊号。7.3 贮存和运输按OB65/T21632004中7.3、7.4条规定执行。7.4 常用公羊晶种冻精代码常用公羊品种冻精代码见表10表1冻精包装颜色及品种代码公羊品种细管冻精颜色颗粒冻精颜色品种代码萨福克羊白色淡黄色SFK 夏洛来白色淡黄色.XLL 无角多赛特白色淡黄色WJDST 德国美利奴白色淡黄色DGMLN 问勒泰自色淡黄色ALT 小尾寒羊白色淡黄色XWH 大尾寒羊白色谈黄色D阴i4