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农业产品检测中心建设可行性研究报告.doc

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资源描述

1、内蒙古中东部地区马铃薯种薯检测分中心可行性研究报告项目名称:内蒙古中东部地区马铃薯种薯检测分中心主管部门:内蒙古自治区人民政府承担单位(章):内蒙古大学内蒙古呼伦贝尔鹤声薯业发展有限公司承担单位负责人及联系电话:哈斯阿古拉 04714992209建设地点:呼和浩特市内蒙古大学、呼伦贝尔市大雁矿区呼伦贝尔鹤声薯业发展有限公司编写单位(章):内蒙古大学编写人员及联系电话:张鹤龄 哈斯阿古拉 04714992693编写时间:2004.1.2821目 录一、项目摘要3二、项目建设的可行性和必要性3三、市场供求分析和预测5四、项目承担单位基本情况5五、项目地点选择分析11六、检测工艺技术方案分析11七、

2、项目建设目标13八、项目建设内容14九、投资估算和资金筹措17十、建设期限和实施的进度安排18十一、环境保护18十二、项目组织管理与运行18十三、效益分析与风险评价19十四、有关证明材料19一、项目摘要马铃薯是内蒙古自治区优势作物,内蒙古是我国马铃薯重要生产基地,内蒙古的马铃薯种植面积逐年扩大,2000年马铃薯种植面积为969.6万亩,居全国首位。项目名称为内蒙古自治区中东部地区马铃薯种薯质量检测分中心。本项目承担单位为具有病毒检测能力的内蒙古大学和商品种薯供应量达万亩以上的呼伦贝尔鹤声薯业发展有限公司。建设地点:分中心实验室设在呼和浩特市内蒙古大学,呼伦贝尔鹤声薯业发展有限公司作为东部区的检

3、验站。建设年限为三年。建设规模为建立一个能检测马铃薯种薯携带的真菌、细菌、病毒、类病毒病害的中心实验室,及东部区检验站两栋现代温室,网室,种薯窖及配套设施设备。投资估算为400万人民币。分中心建成运行后能切实解决内蒙古主要马铃薯产区中东部地区包括内蒙乌盟,武川,四子王旗,达茂,兴和,商都,和林,托县,清水河,以及东部呼伦贝尔市,兴安盟,赤峰市,通辽市,锡盟地区的马铃薯质量检验问题,使我区马铃薯质量能得到有效保证和提高。二、项目建设的必要性和可行性内蒙古自治区是我国重要马铃薯生产基地。马铃薯是内蒙古自治区的优势作物。由于马铃薯营养丰富,增产潜力大,可用其生产出各种加工产品,故被认为是人类未来的理

4、想食品。内蒙古的马铃薯种植面积逐年扩大,2000年全区马铃薯播种面积为969.6万亩,居全国首位。全区种薯生产面积约40-50万亩。年产种薯达40万吨。有效地监督保证这些种薯质量,对发展全内蒙,乃至由内蒙调运种薯的国内其他省区的商品马铃薯的生产至关重要。但是,目前内蒙古尚没有一个机构能有效地完成马铃薯种薯质量的检验监督工作。而当前内蒙马铃薯生产的快速发展又迫切要求建立一个受政府委托的权威的马铃薯种薯质量检验机构。项目的可行性:项目承担单位内蒙古大学自70年代以来长期从事马铃薯病毒的分离、鉴定及诊断技术研究。1978年1991年和国际马铃薯中心(CIP)进行了“马铃薯病毒病诊断技术及应用”的国际

5、合作研究,在此十多年间,内蒙古大学一直主持此国际合作项目,并利用自己制备的抗血清研制出马铃薯病毒酶联诊断试剂盒,并在国内外广泛推广应用。研究建立和推广了多种马铃薯病毒检测技术,举办多期全国马铃薯病毒检测技术培训班,研究建立了酶联免疫吸附测定技术(ELISA),免疫电镜(ISEM),往返电泳,核酸分子杂交,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)等实用的和现代诊断技术。内蒙古大学已成为国内马铃薯病毒及其诊断技术研究中心,马铃薯病毒和类病毒检测技术处于国内领先水平。病毒的检测是马铃薯种薯质量检测的主要内容,内蒙古大学有条件有基础有能力承担和完成此项目。致于细菌如黑胫病、青枯病、环腐病的检测和真菌病害,

6、如晚疫病、早疫病,丝核菌病等检测并非马铃薯种薯检测的主要内容,且可以通过国内专人技术培训分别建立起相应的检测技术。本项目拟建立一个内蒙古中东部地区马铃薯种薯质量检测分中心。中心实验室设在内蒙古大学,同时作为分中心的技术依托,由内蒙古大学提供各面检测技术,并负责内蒙乌盟为主的中部地区的马铃薯种薯质量检测。同时在内蒙古东部区,在呼伦贝尔市设立一个马铃薯种薯检验站,专门负责内蒙古东部地区的呼伦贝尔市、赤峰、通辽和兴安盟的马铃薯种薯质量检测。通过建立分中心和东部区检验站,试图建立起一个内蒙古中东部地区检测网,以便使内蒙古中东部地区马铃薯种薯质量得到有效的保证和监督。三、市场供求分析及预测内蒙古自治区全

7、区马铃薯种植面积每年约800900万亩。内蒙古马铃薯种薯面积约40万亩,其中内蒙古中部乌兰察布盟地区约30万亩,东部地区约10万亩。其中大部分为一、二级种薯。原种面积约4万亩。原种是基础种薯,即用于生产种薯的种薯。原种质量好坏,对保证种薯质量异常重要。因此保证原种质量,是保证一般种薯质量的关键。因此,按农业部规定马铃薯原种必需经过检验。只有经过检验的原种才能作为马铃薯原种进行销售或用于生产一级种薯。但由于目前种薯检验机构尚不健全,那些本应进行质量检验的马铃薯原种,不经任何部门检验,便自行销售,因此种薯质量常得不到保证,种薯的纠纷也屡见不鲜。内蒙古自治区中东部马铃薯种薯质量检测分中心,受政府的委

8、托,依照国家种子法有关规定,负责内蒙古中东部地马铃薯种薯质量的检验工作。早期可主要检验马铃薯原种,集中抓好原种质量,逐步扩大检验范围,建立起各级检验网,直到按要求对各级种薯质量均能作到有效监控。市场供求预测:预计马铃薯原种每亩地送检样品为100个,如完成一万亩,即全区1/4原种,送检样品数即可达100万个样品。每块酶联板可鉴定45个样品(重复一次)-90个样品(不设重复)。需要2.2万1.1万块酶联板。每个样品按12元收费,应收原种检验费约100万200万元。而每亩原种的检验费却只有100200元。四、承担单位基本情况(人员状况,固定资产,现有建筑设施,配套仪器设备状况,专业技术水平和管理体制

9、等)(一)内蒙古大学内蒙古大学成立于1957年。1978年被确定为全国重点大学后,1997年又成为国家“211工程”建设学校之一。内蒙古大学现有3个校区,总占地面积50万平方米。其中,校本部占地面积为37.7万平方米,建筑面积为28.9万平方米(“九五”新增10万多平方米),校园绿化覆盖率达35.8%,基本建成花园式校园。学校目前拥有15个学院、34个系、57个本科专业,60个硕士学位授权点(包括MBA、MPA点各1个)、17个博士学位授权点、3个博士后流动站;有2个国家级重点学科、8个自治区级重点学科;有3个国家级和2个自治区级人才培养基地、1个教育部人文社会科学重点研究基地、1个国家大学生

10、文化素质教育基地、4个部属重点实验室(中心)、3个自治区重点实验室(中心)。在校生近两万人,其中研究生1332人、普通本科生10578人、高职生3329人、预科生140人、成人教育生3239人,另外还招收留学生和艺术类中专生及同等学历研究生。学校现有教职工2373人,其中专任教师1305人,专职科研人员110人,副高级职称以上教师547人,有博士学位的96人,硕士学位的513人。教学科研人员中有中国工程院院士1人,博士生导师41人、硕士生导师246人,国家和自治区有突出贡献的中青年专家24人,享受政府特殊贡献津贴的67人。项 目 参 加 人 员序号姓 名性别出生年月文化程度职务职称工作单位1张

11、鹤龄男1931.11.5大学教授内蒙古大学2哈斯阿古拉男1961.7博士教授内蒙古大学3孟 清男1955.8博士教授内蒙古大学4马秀芬女大学教授内蒙古大学5王志刚男1962.9大学教授内蒙古大学6庞瑞杰女1952.6大专实验师内蒙古大学7王彦风女1972.3大学助理实验师内蒙古大学(二)呼伦贝尔鹤声薯业发展有限公司呼伦贝尔鹤声薯业发展有限公司是大雁煤业公司控股子公司,注册资金1500万元,现有职工400人,拥有各类技术人员240人,其中中高级以上职称者12人。为了加强公司的科技力量,积极引进人才,已聘请中国作物学会马铃薯专业委员会上届副主任委员、现顾问委员、呼伦贝尔市农科所前任所长姜兴亚研究员

12、、呼伦贝尔市农科所高级农艺师、组培专家敖日勒玛为公司技术顾问,聘请中国作物学会马铃薯专业委员会主任屈冬玉博士为兼职技术顾问,还聘请了中国作物学会马铃薯专业委员会上届主任委员、现顾问委员、山东省农科院蔬菜所孙慧生研究员等4位国内马铃薯界知名专家为公司客座教授。中国农科院、内蒙古大学、内蒙古农业大学、黑龙江农科院、东北农业大学、河北农业大学、山东省农科院等科研院所都是公司的科技依托单位。公司拥有各类农机具200余台,从整地、播种、中耕管理、喷药、收获、运输等作业环节几乎全部机械化作业,有马铃薯各种作业机具181台,移动喷灌机24台。公司已建成400 m2组培试验室、2668 m2温室、13340

13、m2网室,年生产300-500万粒微型薯;原种田1000余亩,年生产200万公斤原种;优质种薯田近2万亩,绿色鲜薯1万亩,已形成组培扩繁大面积繁育销售的马铃薯产业化格局,已有仓贮条件4600立米,是内蒙古东部最大的马铃薯生产企业。特别是近几年产业结构调整中,为了充分发挥自然优势,已把马铃薯种薯生产作为支柱产业,加大了开发力度,并和全国十余家科研院所、大学及加工企业建立了紧密型合作伙伴关系,特别是品种引进、鉴定、筛选方面,引进的“费乌瑞它”、“大西洋”种植面积逐年扩大,经过区试已分别被自治区品种审定委员会认定和审定,种薯在山东、辽宁、河北、河南、安徽等地供不应求,产生了巨大的社会效益和经济效益。

14、在优良品种选育方面,已储备大量的丰富的育种资源材料,筛选出高淀粉、早熟出口、优质食用、适合炸片炸条等优良品系10余份,提交2002年区试和生产示范的有57份。在马铃薯种薯产业化方面已具有一定规模,具备了开展脱毒苗快繁、原原种生产及各级种薯繁育条件,并制定了各级种薯标准化生产技术规程与管理制度,公司已被自治区农业厅、山东省农科院、呼伦贝尔市政府、鄂温克旗政府命名为种薯繁育基地,此外,公司还承担了20012003年内蒙古自治区科技厅马铃薯十五科技攻关项目马铃薯新品种选育与种薯产业化研究。公司成功地承办了“2001年全国马铃薯种薯生产产业化研讨会”,与会期间,自治区农业厅领导和十余名专家、教授对拟建

15、设的马铃薯脱毒种薯和绿色商品薯生态农业基地进行了鉴评,大家一致认为:“呼伦贝尔鹤声薯业发展有限公司具有雄厚的繁育马铃薯优良种薯的综合条件,是防止种薯病毒型退化的优良自然区域,是繁殖优质种薯难得的一方净土,是建立国家级种薯基地的最佳区域”。这些研究和工作为建立内蒙古东部区马铃薯种薯质量检验站奠定了基础。呼伦贝尔鹤声薯业发展有限公司,通过短短几年的发展,在马铃薯脱毒种薯生产行业已成为后起之秀,现为中国作物学会马铃薯专业委员会团体会员单位。大面积高产栽培亩均产已超过2500kg,小面积高产栽培试验亩产已突破万斤大关,脱毒种薯在山东、安徽、甘肃、河北等省区都有很好的市场。2003年12月被内蒙古自治区

16、科技厅认定为高新技术企业和呼伦贝尔马铃薯种薯种薯特色产业化项 目 参 加 人 员序号姓名性别出生年月文化程度职务职称工作单位1曹晨光男1952.11.19大学经理.高工鹤声薯业公司2姜兴亚男1938.10大学研究员鹤声薯业公司3赵广明男1967.9大专农艺师鹤声薯业公司4张洪林男1961.8大专政工师鹤声薯业公司5王慧生男1975.7大学助农鹤声薯业公司6王景轩男1955.2大专政工师鹤声薯业公司7敖日勒玛女1942.8大学高农鹤声薯业公司(三)人哈斯阿古拉教授简历及主要研究工作简介哈斯阿古拉,男,内蒙古通辽市人,1961年7月生,蒙古族,中共党员,博士。现任内蒙古大学教授,硕士生导师,生物工

17、程中心主任,内蒙古自治区牧草与特色作物生物技术重点实验室主任。兼任的学术职务有:(1) 国家教育部第二届全国高等学校生物学教学指导委员会生物技术组成员。(2) 中国遗传学会第六、七届理事。(3) 内蒙古自治区自然科学基金评审委员会委员。(4) 内蒙古遗传学会常务理事、秘书长。(5) 内蒙古微生物学会副理事长。(6) 内蒙古大学学术委员会委员。(7) 内蒙古大学学报编委。自1988年以来,主要从事植物分子生物学及基因工程方面的研究。曾主持完成5项国家自然科学基金项目、5项内蒙古自然科学基金项目、1项国家教育部重点项目、1项国家科技部农业科技成果转化资金项目。主要成果有:已克隆得到10余个来自植物

18、和病毒的基因,并构建了表达载体。建立了甜瓜花粉管通道法转基因技术,并将ACC合成酶和ACC氧化酶反义基因导入河套蜜瓜,经多年选育已获得高代转基因纯合品系,该品系已完成了环境释放田间试验。所获得的转基因果实的贮藏期已延长60天。经鉴定,该成果已达国际先进水平。发表论文40余篇,以主要参加人获得自治区科技进步二、三等奖各一项,1998年获内蒙古自治区第二届青年科技奖,1997年被评入选内蒙古自治区“321人才工程”第二层次首批人选。(四)、主要参加人张鹤龄教授简介张鹤龄,男,内蒙古大学生命科学学院教授,生于1931年,辽宁省沈阳市人。长期从事植物病毒学研究。分离鉴定出国内未报道的8种植物病毒和株系

19、:苜蓿花叶病毒马铃薯杂斑株系,马铃薯Y病毒,烟草叶脉坏死株系,马铃薯S病毒,甘薯羽状斑驳病毒,甜菜坏死黄脉病毒,侵染甜菜的番茄斑萎病毒,侵染莜麦的大麦黄矮病毒及侵染“虎头”品种的马铃薯纺锤块茎类病毒。在国内外首次用生物素标记核酸探针诊断PSTVd的技术,获得国际马铃薯中心的好评。研究建立了诊断马铃薯病毒的酶联,复合斑点酶联,核酸斑点杂交,及一步法RT-PCR等技术。在马铃薯卷叶病毒提纯,血清学,诊断,基因组结构,抗病毒基因工程等方面进行了系统深入地研究。和李天然教授合作,培育出5个抗卷叶病毒的转基因马铃薯栽培品种,经农业部批准,正在内蒙古和辽宁地区进行环境释放试验。在此领域始终处于国际前沿水平

20、。在张家口地区大面积推广脱掉类病毒的马铃薯,取得了明显经济效益。他是我国马铃薯脱毒种薯生产试验的早期组织发起者之一。他提出的我国马铃薯各级种薯名称,分级办法,质量标准及检验方法已被广泛采用,并已编写入中国马铃薯栽培学一书中。他对我国马铃薯病毒病害的有效诊断和防治及发展脱毒种薯生产做出了重大贡献。发表研究论文113篇,专著一部,参编中英文著作3部。培养出33名硕士研究生。获3项内蒙科技进步二等奖,一项中科院科技进步一等奖。1988年评为国家有突出贡献专家,1989年评为全国优秀教师,1991年评为享受政府特贴专家,2000年被选为内蒙古自治区劳动模范。1999年获乌兰夫奖金奖。他长期主持国际合作

21、项目,任国外刊物“Asian Potato Journal”编委,1991年和1996年两次应聘为联合国UNDP马铃薯项目顾问。他和印加英科学家合编的英文著作“Comprehensive Potato Biotechnology”,1998年已在新德里出版。张鹤龄教授热爱祖国,治学严谨,是我国知名的马铃薯病毒专家,在国际马铃薯学术界也有一定声誉。五、项目地点选择分析项目地点选择:内蒙古中东部地区马铃薯种薯质量检测分中心建设地点在呼和浩特市内蒙古大学校内西北角,包括中心实验室、温室、网室、薯窖等等。内蒙古大学地处呼和浩特市,周围为乌盟各旗县:武川县、四子王旗、达茂旗、商都、化德、察哈尔中旗、前旗

22、、后旗、丰镇县均为内蒙古马铃薯主要产区。送检样品或前往田间检查均十分方便。东部地区马铃薯种薯检验站设在呼伦贝尔盟中部呼伦贝尔市大雁地区呼伦贝尔鹤声薯业发展有限公司总部,地处呼伦贝尔盟中部,靠近兴安盟等内蒙东部马铃薯主要产区。设在呼和浩特市的分中心和东部地区检验站,通过建立各级检验网,预计能对内蒙生产的80%的种薯质量进行监控和检测,使内蒙古地区的马铃薯种薯质量进一步得到保证和提高。六、检测工艺技术方案分析技术来源、技术水平、主要技术工艺流程、技术工艺参数、技术工艺和主要设备选型方案比较。内蒙古中东部地区马铃薯种薯质量检测中心受政府委托按照国家种子法规定的马铃薯种薯病毒检测方法对内蒙古中东部地区

23、马铃薯种薯进行检测,并根据国家规定的种薯质量标准确定马铃薯种薯质量。在国家未颁布规定标准的检验方法之前,我们将采用经典的ELISA方法和现代分子生物学方法对种薯中的病毒和类病毒进行有效的检测,力求检测能快速、准确、可靠。为此项目建成后本分中心将首先采取国家规定的标准检测方法,同时也在不断研究建立更为准确可靠的新的检测方法。(一)ELISA用于检测种薯中主要马铃薯病毒:PVX、PVY、PVS、PLRV等。样品提取缓冲液采用加有PVP的PBS-Tween-20的缓冲液。工艺流程如下:用包被用抗病毒IgG包被酶联板,4冰箱中过液,用PBS-Tween冲洗酶联板各孔三次,每次洗3分钟封板洗板加入样品提

24、取液保温3小时洗涤3次加入碱性磷酸酶标记IgG保温34小时洗涤3次加入新制备的底物溶液,4-硝基苯酚磷酸室温1小时读405nm的O.D值。每板设空白对照(只加底物溶液,不加酶标记抗体),健康阴性对照,感病阳性对照。阳性判断:405nm O.D值高于阴性对照二倍以上者为阳性。(二)一步法RT-PCR:用于检测PVX、PVY、PLRV病毒。此法的特点是反转录和PCR两个酶促反应在一个管中连续进行。1)、引物合成:三种病毒的三对引物均为自行设计合成。PVX引物为XC3/XCM引物长21mer,扩增产物为312 bp;PVY引物为:YC3/YCM引物长为21mer,扩增产物大小为311 bp;PLRV

25、引物为PLI3/PL5,扩增产物为204 bp。2)、病毒核酸提取采用PEG法。3)、一步法RT-PCR的反应体系为:RNA模板1l,RT-PCR酶混合物2l,20X缓冲液,1.5ml,MgCl2(2mmol/L)2.4l,dNTP(10mmol/L)2l,引物(5pmol/L)各5l,无菌重蒸水30l。37反转录45分。96预变性2分,95变性1分,60延伸1分,721分。循环35次。最后在72延伸10分。1.2% Agarose凝胶电泳,EB染色,凝胶呈像仪观察结果。每次测定设阳性对照及阴性对照。(三)用往返电泳检测马铃薯纷锤块茎类病毒(PSTVd)原理:PSTVDd是一种侵染性裸露的小分

26、子RNA,无外壳蛋白,不能用血清学方法进行诊断。故采用鉴定其RNA的变性电泳的方法。类病毒RNA在变性条件下,由棒状分子的二级结构变成环状分子,从而降低其电泳迁移率,使其与其他植物RNA明显分开。主要检测工艺如下。1)、PSTVd-RNA的制备,用Tris-Hcl,EDTA提取缓冲液及酚-SDS法提取植物RNA-加入氯纷异戊醇变性蛋白用乙醇沉淀核酸离心抽干沉淀。2)、往返电泳:用5%聚丙烯酰胺,上样量20l,调电压380V,待溴酚兰走出凝胶,二甲苯青走到接近凝胶底部时停止电泳。更换TBE电泳缓冲液,并将其加热到65。调转正负电极的位置。调节电压至380V。将电泳仪置于50-60温箱内,电泳30

27、分,停止电泳。取出凝胶、银染色。观察结果。有明显拖后条带者为阳性。每块凝胶上设有阳性对照及阴性对照。(四)用一步法RT-PCR检测马铃薯纷锤块茎类病毒(PSTVd)此法的特点是将反转录和聚合酶链反应在一个反应体系中进行,灵敏度高,简便,省时成本较低。1)、检测的引物由本室自己设计合成。位置在PSTVd RNA的T1区,长度各为25mer。2)、反应体积为30l。反应体系中有:MgCl2 25mM,2.4l,20X缓冲液(无Mg+)1.5l,dNTP 10mM 2l,引物5mol/L各5l,RT-PCR酶混合物-2l,RNA模板1l,加无菌三蒸水至30l。3)、反应条件:37反转录45分,96预

28、变性2分,95变性1分,60退火1分,72延伸1分。35次循环。再在72延伸10分。4)、检测:1.5% Agarose凝胶电泳,60V,1.5hr,EB染色,在凝胶成像仪上观察结果。特异扩增产物为359bp。以上四种方法均为本室建立的灵敏可靠的行之有效的用于马铃薯和类病毒的检测的血清学和分子生物学方法。其他细菌和真菌病害的检测可按国家规定的标准方法进行。七、项目建设目标内蒙古中东部地区马铃薯质量检测分中心的建设目标是使内蒙古中东部地区生产的马铃薯种薯,尤其是原种的质量得到切实地保证和提高。彻底改变马铃薯种薯质量不经检验,由生产者和有关种子公司自行随意口头确定,进行市场销售的混乱局面,使内蒙古

29、马铃薯种薯主要产区,尤其是原种普遍得到质量检验和定级。在检测技术水平方面,要建立起马铃薯各种病毒,类病毒,细菌,真菌病害的准确、可靠的标准检测方法,建立起各种病原检测的流水线,不断提高检验技术水平。为做好内蒙古中东部种薯检验工作,在分中心和检验站下面,建立各旗县的地区种薯检验网。力争做到每块种薯田都有检验人员负责。实验室检验和田间检验结合,使种薯检验工作落实到每个地块。由于地域辽阔,种薯生产分散。中东部地区分中心成立后尚不能立即做到对所有中东部地区的种薯进行检验,但开始可先抓好部分原种质量的检验。其数量预计可达万亩,样品量每年可达百万,其工作量和规模是较大的。八、项目建设内容分中心实验室600

30、M2,造价1,100元 66万呼盟检验站实验室300M2造价1,100元33万仪器设备:分中心实验室(详见购置仪器目录)117万呼盟检验站(详见购置仪器目录) 50万温室:分中心300M21250元 37.5万呼盟检验站200M21250元 25万网室: 分中心 2亩 4万种薯窖 分中心 200M2 24万呼盟检验站 200M2 24万业务费 分中心 10万呼盟检验站 10万合 计 400.50万元资金匹配:内蒙古大学(1:0.1)=25.85万元,呼盟站14.2万元内蒙古中东部地区马铃薯种薯质量检测分中心实验室仪器设备品名型号数量单价(万元)5万元仪器的用途说明高速冷冻离心机超速冷冻离心机台

31、式高速离心机PCR仪凝胶成像仪超低温冰箱ELISA Reader紫外分光光度计杂交箱恒温振荡水溶超净工作台高压电泳仪低温冰柜BeckmanBeckman(LE-80K)TCL 16-CPE,2400GSG2000型安莱公司-80SanyoBio/Rad 550日本Hitachi 2000HZS-H东联厂DYY-12型101-3000V三恒,多用-3011211211221220万35万0.5万7万12万20万9万10万2.2万1.2万1.2万1万1.0万提纯病毒,制备抗原提纯病毒,制备抗血清用于病毒RT-PCR检测电泳后检测PCR特异带及往返电泳PSTVd滞后条带.样品、毒源、质粒、工程菌保存

32、酶联免疫测定O.D值病毒及核酸检测合计1201呼伦贝尔种薯检验站仪器设备品名型号数量单价总价用途ELISA仪PCR仪超净工作台低温冰柜凝胶呈像仪台式高速离心机高速冷冻离心机电泳仪电子天平恒温振荡水溶电热灭菌锅恒温培养箱电热干燥箱紫外可见分光光度计真空泵电脑Bio/Rad 550PE2400HZS-H东联厂-30GSG200型安莱公司TCL16-C中压,六一厂千分之一HZ-SH,东联厂中型5080cm5080cm日本112212111112111245万70060512002520100505100405150310457012万101200520100705100805150320用于分子生物

33、学检测反转录DNA扩增用于往返电泳及DNA扩增后电泳结果分析用于病毒及蛋白核酸检测合 计500九、投资估算和资金筹措。依据建设内容及有关建设标准和规范分类详细估算项目固定资产投资并汇总,明确投资筹措方案。(一)投资估算1、分中心实验室 600M2 造价1,100元 66万 钢筋混凝土结构呼分贝尔检验站实验室 300M2 造价1,100元 33万 钢筋混凝土结构2、温室、现代人工气候室、全玻璃、恒温、恒湿。分中心温室 300M2 造价1,250元 37.5万呼份贝尔检验站温室 200M2 造价1,250元 25万3、种薯贮窖 地下式,钢筋水泥结构。分中心种薯贮窖 200M2 造价1,200元 2

34、4万呼伦贝尔检验站种薯贮窖 200M2 造价1,200元 24万4、分中心网室、预制件钢架、罩以防虫尼龙纱40目05亩大小,共4个 4万5、仪器设备 (详见购置仪器设备清单) 167万(二)资金筹措由农业部投资项目建设费400万元,单位匹配经费40万元十、建设期限和实施的进度安排分中心和呼伦贝尔检验站的实验室,现代温室,种贮窖,网室勘察设计时间为半年,工程施工为1.5年。仪器安装试运行0.5年,整体项目计划两年至两年半建成。与此同时进行人员技术培训,建立起ELISA,往返电泳,RT-PCR检测病毒、类病毒,细菌、真菌等各种病原的流水线。十一、环境保护本项目建设期间及建成后的运行,无污染环境的污

35、水排放,各种检验流水线也不会对周围环境造成污染。因此无环境保护问题。十二、项目组织管理与运行。在学校领导下成立一个项目管理小组。由项目负责人任组长,项目建设期间由项目管理小组负责项目各项施工建设。项目建成后,由分中心主任和副主任主持领导日常种薯检验工作。运行管理模式采取岗位责任制,中心主任、副主任领导下分别设置病毒检验实验室,专兼职检验人员3人;细菌检验实验室,专兼职检验人员2人;真菌检验实验室,专兼职检验人员2人。检验人员要具有大专以上学历并经过专业培训。开始检验所需投资由业务费中支出。以后逐年通过收取种薯检验费维持项目正常运行。逐年减少业务补贴经费。十三、效益分析与风险评价项目建成后,经济

36、与社会效益测算与分析。预计项目建成之后,各条种薯质量检验流水线正常运转。每年检验原种1万亩,每亩送检样品为100个,则需检测100万个样品,每个样品检验费按12元计算,每年应收检验费100200万元,除去仪器折旧,试剂消耗和人工按5060%扣除在本费,每年应获净收益50万元。即使送检样品减少一半,仍可获净收益25万元。基本可达到维持检验工作正常运行。项目建成后,由于政府规定原种不经政府委托的权威机构的质量检验不得在市场上出售,使马铃薯种薯,首先是原种的质量,普遍得到全面的保证和监督,这必然使马铃薯的种薯生产和销售进一步规范化和标准化,根本上保证和提高了内蒙古自治区的马铃薯种薯和商品薯的质量,使

37、内蒙古马铃薯主产区中东部地区,相当于内蒙古7080%种薯和商品薯的生产走向现代化和标准化。使内蒙古自治区3040万亩种薯和800900万亩商品马铃薯的质量得到进一步提高,种薯和商品薯生产逐步走向标准化,从而取得巨大经济效益和社会效益。十四、有关证明材料(一)内蒙古大学发表的有关马铃薯病毒鉴定技术的论文1、应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测马铃薯卷叶病毒,病毒学报,1987。2、Detection of Potato Leafroll Virus by Immunosorbent Electron Microscopy Asian Potato Journal,1991.3、PSTVd在马铃

38、薯块茎中的分布(往返电泳技术),内蒙古大学学报,1988。4、用32p标记上DNA探针进行核酸斑点杂交检测马铃薯卷叶病毒(PLRV),中国病毒学,1995。5、Detection of PSTVd with 32p-c DNA probe by Nuclaic Acid Spot Hybridixation. Asian potato Journal,1991.6、用逆转录-聚合酶链反应检测马铃薯卷叶病毒,病毒学报,1996。7、马铃薯病毒一步法RT-PCR诊断研究,内蒙古大学学报,(发表中)。8、应用一步法RT-PCR检测马铃薯纺锤块茎类病毒,毕业论文,2002。9、国际马铃薯中心(CIP)对生物素标记探针诊断PSTVd的评价。(二)呼伦贝尔鹤声薯业发展有限公司提供的证明材料1、高新技术企业认定证书、种薯基地认定文件2、绿色食品证书3、“马铃薯新品种选育与种薯产业化”项目中标书、验收意见4、专家对基地鉴评意见5、大西洋、费乌瑞它审、认定书6、企业法人营业执照复

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