MCI资料大全-填料特性-使用方法及装柱等注意事项.pdf

MCIMCI 资料大全资料大全-MCIMCI 柱柱以及以及 MCIMCI 填料填料 MCI GEL 是指中压色谱分离凝胶，是指中压色谱分离凝胶，是是 Middle Chromatogram Isolated Gel的缩写，一般是指聚合物基材的小粒径色谱填料的缩写，一般是指聚合物基材的小粒径色谱填料(Chromatogram Polymer)，通，通称为称为 MCI GEL CHP 填料，广泛的应用于天然产物和发酵产物、有机小分子的填料，广泛的应用于天然产物和发酵产物、有机小分子的分离。分离。常用的常用的 MCI GEL CHP有聚苯乙烯有聚苯乙烯/二乙烯基苯型二乙烯基苯型(PS/DVB)和丙烯酸酯型两和丙烯酸酯型两种聚合物类型的填料。化学结构支配着合成吸附剂的疏水性，吸附剂的疏水性种聚合物类型的填料。化学结构支配着合成吸附剂的疏水性，吸附剂的疏水性是根据目标物化学性质来选择吸附剂类型的重是根据目标物化学性质来选择吸附剂类型的重要依据。一般而言，聚苯乙烯型要依据。一般而言，聚苯乙烯型聚合物填料适合于分离中等疏水性的化合物，由于具有苯环结构，所以与其他聚合物填料适合于分离中等疏水性的化合物，由于具有苯环结构，所以与其他类型的反相填料相比，具有不同的分离选择性。聚甲基丙烯酸脂亲水性强，适类型的反相填料相比，具有不同的分离选择性。聚甲基丙烯酸脂亲水性强，适合分离具有一定极性的物质。合分离具有一定极性的物质。这类聚合物基材填料的优点是在这类聚合物基材填料的优点是在 pH1-14 的范围均可使用。相对于硅胶基质的范围均可使用。相对于硅胶基质的的 C18 填料，这类填料具有更强的疏水性，与硅胶基材反相填料具有不同的分填料，这类填料具有更强的疏水性，与硅胶基材反相填料具有不同的分离选择性。聚合物基材的填料可以在极端的酸碱溶液（如离选择性。聚合物基材的填料可以在极端的酸碱溶液（如 1N NaoH、Hcl）和有）和有机溶剂（包括甲醇，乙醇，丙酮，异丙醇，乙腈，四氢呋喃等）中都可保持球机溶剂（包括甲醇，乙醇，丙酮，异丙醇，乙腈，四氢呋喃等）中都可保持球体结构和性能的稳定，有利于开发体结构和性能的稳定，有利于开发工艺和优化分离条件，从而达到高分辨率和工艺和优化分离条件，从而达到高分辨率和高产品回收率。由于其化学稳定性，非常适用于高产品回收率。由于其化学稳定性，非常适用于 FDA 规定下规定下 CIP/SIP 要求的清要求的清洗方案。洗方案。聚合物基材填料可以制成不同的粒径供客户选择。当您分离纯化前考察填料聚合物基材填料可以制成不同的粒径供客户选择。当您分离纯化前考察填料对样品的选择性时，可以选择小粒径的填料制成的高压柱。对样品的选择性时，可以选择小粒径的填料制成的高压柱。50um 左右粒径的填左右粒径的填料可以在常压下使用，借助于中低压层析系统，分离效果更佳。同时，料可以在常压下使用，借助于中低压层析系统，分离效果更佳。同时，中压色中压色谱分离凝胶相比高压色谱填料价格更便宜，对设备要求相对较低，更适合较大谱分离凝胶相比高压色谱填料价格更便宜，对设备要求相对较低，更适合较大规模的工业纯化使用。规模的工业纯化使用。由于中压色谱分离凝胶具有诸多优点，所以在天然产物和发酵产物、有机小由于中压色谱分离凝胶具有诸多优点，所以在天然产物和发酵产物、有机小分子的分离等领域分子的分离等领域具有广泛的应用。与此同时，专业的色谱器材供应商（如具有广泛的应用。与此同时，专业的色谱器材供应商（如 H&E）还开发了与此相配套使用的专用层析柱和层析系统，极大地提高了广大科研，还开发了与此相配套使用的专用层析柱和层析系统，极大地提高了广大科研，生产用户的分离效率。生产用户的分离效率。分离原理：MCI GEL CHP20p 应该是吸附为主，其实同 C18 一样，只不过结构不同，但两者无法在同一个条件下进行比较。MCI 是凝胶的一种，主要是反相和分子筛的原理。MCI 的预处理：的预处理：将 MCI 加入到烧杯中，加入适量甲醇甲醇，搅拌，使其浸泡 30min，将甲醇倒出，加入蒸馏水充分搅拌，浸泡 30min，准备装柱。装柱：装柱：搅拌使 MCI 混旋均匀，搅拌均匀后，缓缓将其倒入准备好的玻璃柱内，活塞打开，倒入速度稍微快一些，在倒入的过程中，要不断的在烧杯里轻轻搅动，以防止 MCI 沉降于底部，尽量不要中断，一次性倒入，可以很好地防止断层。当柱子装好后，用蒸馏水冲洗 MCI 柱。上样：上样：用 MCI 柱分离物质时一般使用梯度乙醇或甲醇洗脱，因此上样时应样品应用水或低浓度的相应的醇溶解，然后将样品均匀的加到色谱柱上。洗脱：洗脱：洗脱时采用梯度醇浓度由低到高洗脱，分别收集洗脱液，再生：再生：洗脱完成后，用无水乙醇或甲醇冲洗 MCI 柱，若填料污染严重，用丙酮冲洗柱子，若还不行可考虑用一定浓度的酸或碱冲洗柱子，冲洗液的 PH 值应控制在 1-13 内，一般采用 0.1mol/L 的 NaOH 溶液冲洗。用酸或碱冲洗好后将柱子用蒸馏水洗至中性，然后再用甲醇洗脱两个柱体积，用甲醇保存柱子。相关说明：相关说明：MCI 系列精细分离填料是在三菱化学Diaion 和Sepabeads 大孔吸附树脂基础上设计的，因为基于现代的 HPLC 高压液相色谱分离技术，较小的颗粒有更高的色谱分离性能，广泛地用于分离天然产物和发酵产物的分离。其特点如下：1、卓越的性能，球型颗粒，颗粒尺寸分布很窄；2、用三菱化学的优良技术和严格的质量控制，提供高水平高质量 MCI GEL 系列填料；3、粒度范围广，从 4m 到 300m，可应用于装填分析和制备柱；4、品种非常齐全，其中 MCI GEL CHP 20P（75150m）是最为广泛使用的型号。MCI GEL 适用于从分析制备到工业规模纯化 填料类型 产品型号 粒径分布 平均粒径比表面积 细孔容积最频度 半径 MCI GEL CHP10M 4m 4m 640m2/g 1.45ml/g 14.0nm MCI GEL CHP 5C 911m 10m 540m2/g 1.39ml/g 14.0nm MCI GEL CHP 55A 1520m 18m 580 m2/g 1.54 ml/g 14.0 nm MCI GEL CHP 55Y 2535m 30m 590 m2/g 1.55 ml/g 14.0 nm MCI GEL CHP 20Y 2535m 30m 560 m2/g 1.67 ml/g 22.0 nm MCI GEL CHP20P 3775m，75150m 55m 520 m2/g 1.17 ml/g 30.0 nm 聚苯乙烯型 MCI GEL CHP 20SS 63150m 100m 540 m2/g 1.35 ml/g 29.0 nm MCI GEL CHP 2MG M 4m 4m 460 m2/g 1.09 ml/g 27.0 nm MCI GEL CHP 2MG 911m 10m 590 m2/g 1.13 ml/g 20.0 nm 甲基丙烯酸酯型 MCI GEL CHP 2MG Y 2535m 31m 510 m2/g 1.15 ml/g 23.0 nm 用于除叶绿素效果很好，至于分离原理目前为止还不是很透彻；MCI GEL 只是个品牌，大家说的应该是 CHP20P 75150um，这个东西是聚苯乙烯基的反相树脂填料，不推荐用石油醚做洗脱剂，这样会弄坏这个树脂。听说 MCI 柱只能用甲醇-水系统过柱，最后用丙酮洗。所以只能用于能溶于甲醇-水的样品了。而且 MCI 柱是反复使用的，所以上样之前要先过滤，甲醇-水不能溶的都不能上柱。一般用来分中等极性到大极性的东西,如果丙酮不能洗脱的东西上上去,对柱子伤害很大。MCI 一般用来去处极性小的成分中的叶绿素，对石油醚部分和氯仿部分去处叶绿素的效果很好,我们过柱的一般方法见上所述。应用领域：应用领域：SBC MCI GEL 可以替代 ODS-C18 键合硅球固定相用于反相色谱法分离，它比 C18 硅胶具有更高的化学稳定性，可以在强酸、强碱介质下使用，可以用多种有机溶剂作为洗脱剂，可以在较高的浓度下使用，寿命非常长。SciBioChem MCI GEL 与相同粒径的 C18 固定相的柱效相当，无论对极性或非极性样品，几乎无不可逆吸附，非常适用于制备色谱分离纯化微量物质。SBC MCI GEL 反相色谱填料吸附量高，颗粒均匀，机械强度好，不易破碎，残留物少，预处理方便。提供的粒径从 20um 到 150um，用于生物，制药，环保，食品等领域的研究和工业化制备纯化。主要技术指标如下主要技术指标如下:化学性质:交联高分子聚合物，表面非极性和弱极性两种型号规格。分为 F 型和 R 型两种规格:F 型相当于 C18 硅胶，R 型相当于 C8 硅胶。外观:白色超纯微球。孔特征:比表面积 550m2/g，平均孔径 120A。粒度范围:75-150u、50-70u、30-50u、20-30u 四种规格 耐压性:2-3Mpa 下长期使用。分离性能：柱效能：1.以番茄红素试液进行色谱性能测试，每米塔片数10000N。2.分离紫杉醇浸膏：每米塔片数10000N，紫杉醇/三尖杉宁碱的分离系数大于 1.3。化学稳定性:pH 值 114 稳定，在10NaOH、10HCL、10H2SO4、10H3PO4 溶液中稳定:在乙醇、甲醇、丙酮、氯仿、乙酸乙酯、乙腈、乙醚、四氢呋喃、溶剂油、苯、甲苯、吡啶等有机溶剂或水溶液介质中长期稳定 热稳定性:空气介质 150以下使用；有机溶剂介质 80以下使用 附：使用方法：1 将色谱填料浸泡在丙酮或乙醇中。2 充分搅拌成匀浆装柱，用选定的上述溶剂冲洗压缩柱床层。3 用 2-3 倍柱体积的上述溶剂冲洗柱，至填料中的交联剂洗脱干净，检测标准为滴加至自来水中不出现浑浊，或 HPLC 检测不出峰。4 用选定的洗脱液平衡色谱柱，备用。另：层析流动相选择可以将 HPLC 或反相 TLC 的条件套用。流动相选择适用于所有乙腈、甲醇、乙醇、丙酮等等。所有酸、碱、盐水溶液配比的溶液。疑难求助疑难求助MCIMCI-gel CHPgel CHP-20P20P 的使用方法的使用方法 大孔型 MCI 树脂有两种填料：苯乙烯和丙烯酸型，聚苯乙烯型的树脂粒经范围为 4m-100m,甲基丙烯酸酯型树脂的粒经范围为 4m31m。因此MCI 树脂不仅可以用来粗分，也可以用来精细分离，你可以选取合适粒度的树脂；象 4m 的树脂已经可用于 HPLC 分离。同时由于 MCI 大孔型的树脂有两种：即苯乙烯和丙烯酸型，所以可以分离的化合物极性范围是很广的。此外MCI 系列调料不仅有大孔型的树脂，还有阴离子型及阳离子型等型号树脂。由于进口的很贵，象 MCI CHP20P（75150 微米）大概市场报价在每升8000RMB 左右，太贵，所以没有用过，但是我和国内的树脂研究单位联系让他给我合成过小样试了试，感觉效果还可以。大量分离和重现性都没有做过。MCI-gel CHP-20P 的使用方法，它的 75-150um 粒径使用得多还是 35-75um 粒径的使用得多？如何选择？谢谢各位指教 最通用的是 75-150um 粒径的 MCI。MCI 在使用前先用甲醇，水，丙酮分别洗一遍（干净就好）。最后用水平衡。把你要过柱的样品用小体积的甲醇（如果溶解度不好导致体积较大，可用吡啶或用 MCI 拌样）溶解，上柱，用水洗脱将甲醇带出，然后用甲醇水洗（可以梯度洗脱，如果只是除叶绿素的话可以直接用 90%甲醇洗脱）。自己想要的样品洗脱完毕，一定要用丙酮洗几个柱体积，再生填料。当然，如果你上样的样品是极性较大的部分，就不用丙酮了，呵呵。MCI gel 是一种很好的分离中大极性化合物的填料，我用了感觉效果很好。MCI 填料不适合细分（因为一般颗粒较粗）较适合粗分，即使是十几克的浸膏也可以上柱，我就经常用 100 克 MCI 柱粗分 10g 左右的粗品。但是千万注意不要分极性较小的样品（氯仿就可以展到头的那种），否则肯定死吸附，丙酮也冲不下来，填料就可能报废。正如上面的网友所说，MCI 脱叶绿素非常好，洗脱时可以牢固的吸附在柱头，最后用乙醇洗下来。一般色素并不能全部脱掉，但是它脱色素的效果和反相有差别，可以交叉配合使用。拌样就不要了，据说伤填料。如果你是想将粗品按极性划段，最好不要用 MCI，因为它的分离原理不是按极性的。洗脱系统一般为乙醇水，可以用 20，30，40等等乙醇：水洗脱直至乙醇，每个配比洗脱 4，5 个柱体积，点板发现没有新的点就可以换下一个配比了。不必要用甲醇，因为本来就是粗分嘛，大量使用有毒的甲醇也不好，最多使用丙酮水，但不能多用，据说伤填料，极性再小的溶剂就不要使用了。MCI 分离化合物的机理还不是很清楚，所以往往不能用来细分，因为没办法定条件，往往 60乙醇馏分还有大极性成分，20馏分里还有中小极性成分，MCI 可以把 Rf 距离很近的点轻而易举的分开（而 Rf 相差很远的往往却分不开），我就经常发现几个 Rf 一样的不同显色的点被 MCI 分开了。它最大的好处就是提供了不同于硅胶，凝胶，反相 ODS 填料的一种分离方式。有的样品如果经过硅胶，凝胶，反相 ODS 填料都没有分纯，也可以用 MCI 细分，不过就是定条件很麻烦，因为化合物的极性与 MCI 没有必然联系，我得经验极性在氯仿到氯仿：甲醇8：2这个极性段的样品在4060甲醇水找条件比较合适，保险的做法就是先从 40 左右洗脱，没洗下来就加 7%甲醇洗脱，一步一步摸索，直到样品洗脱下来为止。极性再大的就把甲醇减少 MCI GEL CHP 系列主要就用于抗生素的提纯，所以溶剂残留非常的低。但是 MCI GEL 不光只有 alex2000 说的粒径较大的型号如 CHP20P，还有粒径较小的 CHP55Y，以及聚甲基丙烯酸酯型的 CHP2MG 系列，我这里有 MCI GEL CHP55Y等分离绿茶提取物，以及番泻叶提取物的图谱，可惜没扫描。另外，价格上 MCI GEL CHP20P（75150um）慧德易只卖 6000 多啊，比起 ODS要耐用多了。momo2004 wrote:大孔型 MCI 树脂有两种填料：苯乙烯和丙烯酸型，聚苯乙烯型的树脂粒经范围为 4m-100m,甲基丙烯酸酯型树脂的粒经范围为 4m31m。从上面的介绍就可以看出 MCI 树脂不仅可以用来粗分，也可以用来精细分离，你可以选取合适粒度的树脂；象 4m 的树脂已经可用于 HPLC 分离。同时由于MCI 大孔型的树脂有两种：即苯乙烯和丙烯酸型，所以可以分离的化合物极性范围是很广的。此外 MCI 系列调料不仅有大孔型的树脂，还有阴离子型及阳离子型等型号树脂。由于进口的很贵，象 MCI CHP20P（75150 微米）大概市场报价在每升 8000RMB左右，太贵，所以没有用过，但是我和国内的树脂研究单位联系让他给我合成过小样试了试，感觉效果还可以。大量分离和重现性都没有做过。jinglinlin 朋友说错了,MCI 一般用来去处极性小的成分中的叶绿素,对石油醚部分和氯仿部分去处叶绿素的效果很好,我们过柱的一般方法是:1、用水装柱；2、用水或水和甲醇溶解样品，上样；3、先用水洗，把极性大的洗下来，再用水和甲醇的不同比例梯度洗脱；4、最后用甲醇冲柱子，结束。5,丙酮洗 MCI 系列精细分离填料是在三菱化学 Diaion 和 Sepabeads 大孔吸附树脂基础上设计的，因为基于现代的 HPLC 高压液相色谱分离技术，较小的颗粒有更高的色谱分离性能，广泛地用于分离天然产物和发酵产物的分离。其特点如下：卓越的性能，球型颗粒，颗粒尺寸分布很窄 用三菱化学的优良技术和严格的质量控制，提供高水平高质量 MCI GEL 系列填料 粒度范围广，从 4m 到 300m，可应用于装填分析和制备柱 品种非常齐全*其中 MCI GEL CHP 20P（75150m）是最为广泛使用的型号。MCI GEL 适用于从分析制备到工业规模纯化 填料类型 产品型号 粒径分布 平均粒径比表面积 细孔容积最频度半径 MCI GEL CHP10M 4m 4m 640m2/g 1.45ml/g 14.0nm MCI GEL CHP 5C 911m 10m 540m2/g 1.39ml/g 14.0nm MCI GEL CHP 55A 1520m 18m 580 m2/g 1.54 ml/g 14.0 nm MCI GEL CHP 55Y 2535m 30m 590 m2/g 1.55 ml/g 14.0 nm MCI GEL CHP 20Y 2535m 30m 560 m2/g 1.67 ml/g 22.0 nm MCI GEL CHP20P 3775m 和 75150m 55m 520 m2/g 1.17 ml/g 30.0 nm 聚苯乙烯型 MCI GEL CHP 20SS 63150m 100m 540 m2/g 1.35 ml/g 29.0 nm MCI GEL CHP 2MG M 4m 4m 460 m2/g 1.09 ml/g 27.0 nm MCI GEL CHP 2MG 911m 10m 590 m2/g 1.13 ml/g 20.0 nm 甲基丙烯酸酯型 MCI GEL CHP 2MG Y 2535m 31m 510 m2/g 1.15 ml/g 23.0 nm MCI 说的应该是 MCI GEL CHP20p 吧，这个 MCI 是三菱化学一系列填料的商品名。包括了反相，尺寸排阻和离子交换等等。CHP20p 这样的反相填料，基体是聚苯乙烯，和大孔树脂类似，不过由于造粒技术不同，粒径可以做到 3um，常用的 CHP20p 是 75150um，孔径 300A。由于粒径小，所以分离效果要比大孔树脂高很多。3um 或 7um，10um 可以用于反相分析柱和制备，便于 CIP 清洗。说到分离原理，MCI GEL CHP20p 应该是吸附为主，其实同 C18 一样，只不过结构不同，两者无法在同一个条件下进行比较 MCI gel CHP 20p 适用于大极性物质尤其是水溶性成分的分离，对皂甙类的分离比较好.常用洗脱剂为甲醇水，比例不断增大梯度洗脱。应该是反相的吧，粗分较好。先用甲醇冲柱,在用水置换，直至柱体内都是水，再湿法上样，然后用一定比例甲醇水洗脱。以我用的情况来看,在氯仿-甲醇水(6:4:0.8)系统中 Rf在 0.2 左右的点,用大约 70-80%的甲醇/水能冲下来.用这个分离皂甙的一般流程是:提取-n-BuOH 萃取-MCI-硅胶柱-ODS,如果还不行的话就上制备 HPLC.再难分的皂甙一般都能拿到纯品了 xly103 兄弟说的很好，很详细 皂苷的分离有两个问题：1，回收起泡，2 样品越纯越难溶解 如何再生填料，谢谢您的再次指导？XLY103 的资料搜集的好全面啊，辛苦了。MCI 柱子的再生，如果处理的是小极性样品，用丙酮再生；处理过大极性样品的话，用甲醇冲洗就好了。这个填料是树脂，处理起来方便，流速也快（相对于 ODS）。最好不要用氯仿、乙酸乙酯等溶剂，据说会损害填料（没实践过，呵呵）。好感谢你啊，刚购买来的新的 MCI 填料，我需要如何处理才能装柱？