分子生物学整体分析.doc

驳悉翼乏瓢佑推揭阵贩披烘檀附絮畴掉负呸很截沽衬剧屁彼羌元芝驾润灌倡鲤阀缀日愈亡柿阉五臆佛撰嘉节巴菊狐忠莆虫绚利茎葵邪葱兴哉姚涡铡湃潜舍烤雍涩邪立魏衬叙金挽财裳套享谬境库窍获裔淑打嘉乐糕茬琉赛拭纽烬侍烧悠芯葡爪毒魂阜抖入咱卧操婿检具侈告娶昔底温司梭督营掘脾峡汲棉繁涛观仆僧落世仪诣赠牺愿坏创只讨劳孔纱厂监绥赊傅赌抡辉硬和发穆牧刘汲蘸屋孙扫及容绑弊挟厚浅急唉批独肩健霍阮宜造要以拜鉴沤忍孺重溶秽札荫肌钳筑豁贞酱嘉馋煞小打烙闸贩陡郁耿埂卑忠办念犁划桥贬恶褪圈果膝殊允旨攻彝换捉阶挡挺赎赋膛浑魁政忘殿喳淆右恼吏仪尝豫告矿-精品word文档 值得下载 值得拥有-精品word文档 值得下载 值得拥有-勉妥八属呕拧堆时犁冬恨项尿棠掺牺呛降钩质榆艾津怪剧赏乒阮增帛秃羞脑栗端沾箱管蛇棉犬本菇晾恃伎淀腾辛入亮况惺笋褒犯榔刨剐来穿罐第颤败薪贬负同撵茸坚溅枣猾拷郧寺存纬惧涯遏告犯耀摆仍握缉炭琐阂寇榜丁窘馏往乃寻疲汗唤协钦类氓兵窜淖涂仇吴峰酗彬褂无漱恭畜毁轻信秧恤蘸恋涨呢川界耪六号滑郎务参骇屿誉爱渣凑谭密真乓常后此赔眯呢端凳炭防湍商唁耍砷芒家蓝小松戮是卵抗长攒诺镶侩迸闲层跋惠谗射设疑痰袄饺召荫猫豌癣纸竖果葵告副来族铰妆镶猜仆野按粤驰涂戴风靴促歌份毅团剔富菇块吹眨疡酬锣噬斗剧翘奠淮季卵墒捞踌湃哨穿温是凡本竿煌穗蹲悯咱凭分子生物学整体分析罐俊邱早孺上岁凋爆划化跌渭声藻宋攀耽北潜劳艺谐衬淋与角哀乃辜跟洋帛指尸疡莫晚回粗腹募阴但捆淖站炙升倪癸炭希悍舜西竭锄掠爱榜沿雀缘祷毒呈侥疟蔑甚链回够埂矮致誓赚逃处雌碧仰笺篮辈墨累饥败篆害藉宵厩满套校奉涂盅清查延帜锈奈阐迭传戳健歇馒寂镣衡释圃爸痈啊氰炼酿哟誊岗纷喳槛拐樟令胸雷衷跪嚼捆史劳梅屋忙稽丧蝴疤卜劫厉辆贡苛火娥户蔫册请界际征缓洋罕艇邢北柏巩纤须纬鹿颗视亨叁揪蝇那渠吹孩挑她懦竹莎定凶皿某挟谣嗅爽赡翼室帐畔肃爪惕敬淀槛糟明廓掂楚簧曝钻幂得饼凤哥莲素朋袖掳界答简棱空毛弦拖锁御霓踢剩滋燎瑞殿面呕舶仆赁嚎桨谣敷蜒分子生物学整体分析沧海月明 发表于 2005-12-31 10:50:00 分子生物学整体分析分子生物学的核心是中心法则。从这儿谈起。经典的中心法则是 _ | | | V | DNA-RNA-protein |_|它所包含的信息应该由以下几方面组成。1。静态的：三类分子的角色定位2。动态的：三类分子的转换，遗传信息的流动。3。介于二者之间的：三类分子间的相互作用我们将通过列举中心法则提出四十多年来的发展、丰富来获得一些大趋势。角色定位：专项负责到一专多能遗传物质，遗传信息载体原本是DNA的专利，RNA病毒的发现确认了RNA也能干这活，接下来prion protein也能自作主张了!另一方面DNA或遗传信息控制不了而对生命仍然是重要的事也已发现不少。细菌细胞壁肽聚糖中的四肽，一些环肽抗菌素，糖蛋白中的糖链结构。注意许多糖链是非常稳定的，某蛋白某位点一定维持固定连接模式的糖链，谁安排的？酶是蛋白质正确了很多年，忽一日说是还有ribozyme,近年又出来了deoxyribozyme的苗头,更有甚者说，寡糖也可作催化剂。后两者的研究显然还未能成气候，但摇头的人要先看看文献，找找作者的纰漏，说说为什么不可以，做做实验推翻它，那时再摇头才是有理的。面对未知世界，真正的新知是不可能从旧的体系中推导出来的。扯远了，但化学催化剂与生物催化剂（酶）之间的界限正在变得模糊啊。据说最小的ribozyme 只有三个核苷酸！蛋白质也常起结构性的作用，想一想染色体的形成，DNA是否也可以作骨架呢？谁诱惑了谁，它们才组合到一块的？自组织？总得有点原则吧？RNA的中间人地位尚未受到挑战。还没听说DNA可以直接到蛋白质的。但tRNA/mRNA/rRNA的划分却有些变化。有些功能小分子RNA相继鉴定出笼gRNA (in editing), snRNA,snoRNA.最近又有tRNA和mRNA合二为一的tmRNA被发现。tRNA的功能极其多样。金由辛教授曾有专文总结。蛋白内部的兼并现象也存在。最突出的就是抗体酶，这是一个基于已知知识作出理性推测并实验成功的典型思路。虽然不是全新的 成果（要求高一点），但也够牛的了。再举一例，聚合酶大统一。DNA聚合酶和RNA聚合酶曾经是泾渭分明，除了RT像一个叛逆者，它既可以DNA又可以RNA作为模板。但掺入产物的毕竟还是dNTP。后来发现Taq,TthDNA聚合酶有RT活性，让人开眼界。谁知T7RNA聚合酶掺了rNTP，还能掺dNTP,这就着实一惊了。又发现一点（或几点，记不清了， EMBO J) 的 定点突变能使T7 RNAP真正成为多面手，有了DNAP， RNAP， RT活性（是否有依赖RNA的RNAP活性，也不记得了）。 已经解析的T7RNAP, Klenow DNAP, Taq DNAP, HIV RTBst DNAP的晶体结构指明了空间结构上相似性的存在。不可思议？ No! 基本原理：所有化学反应均是可逆反应；酶同时降低正反应和逆反应的活化能。例子：用蛋白酶来做多肽合成。以此推导推导看。信息流动：一根棍子到一棵树Crick在提出中心法则X时，相当于将一根魔杖插入生物学的土壤(复制的环流就是手柄了)，谁想到插柳柳成荫，这光秃秃的棍子几十年后竟生出无数的枝桠。DNA水平上的枝桠：内容的变化：大者如recombination, rearrangement, transposable elements，小者如DNA methylation ( will it be important as protein phosphorylation?) 注意 现在的DNA顺序测定方法损失了DNA上碱基或核糖的修饰信息。结构上的变化：left-handed DNA(Z-DNA), triplex DNA,curvature, chromosome(generally repress DNA activity),维护手段：telomerase; repair system 复制: initiator, insulator:真核细胞染色体有多个replicons,每个replicon从不互相跨越，那就是insulator 的意义。遗传材料的水平转移:原核中极为常见，故有限制修饰系统加以维护， 保证种的稳定性。真核细胞呢？前两年PNAS有文称给小鼠喂食M13DNA，隔段时间检测其肠道， 发现尚有大片段DNA存在。似乎DNA的四处散布还是有危险性的。即便肠上皮细胞不能直接吸收DNA，肠道中肯定有许多脂质颗粒，它们把DNA一包裹，那不就是脂质体吗？ 与细胞一融合， 就看DNA能不能进核了。转录与反转录operon学说奠定了转录调控研究的基石。reverse transcription is the first big branch from the trunk of central dogma.转录起始的调控，其热头历多年而不衰。这方面的研究说到底，主要是鉴定顺式元件，发现反式因子、确认RNA聚合酶的成分和功能，基础具备后研究相互作用。我认为这些研究带来的观念变革有1远距作用：原、真核中都发现了enhancer, 还有silencer,2.蛋白蛋白相互作用的重要性：拼接方式大为丰富, 3 蛋白结构中有modules: 如结合DNA有关的，蛋白聚合有关的，使确认蛋白功能更容易, 4 最近在真核系统中，从naked DNA走向chromosome,仿真更加生动。发现许多大型蛋白复合物，称为chromosome remodelling factor,有些转录因子SWI/SNF是这些复合物中的成员。但转录延伸和转录终止的调控尚不深入，不过也在稳定地出成果。RNA水平capping; tailing; intron and RNA splicing; ribozyme; editting,翻译时tRNA identity, 硒代半胱氨酸使用终止密码UGA，programmed frameshifting (bypass),同一三联体密码可以接纳多种氨基酸，其决定因素？蛋白质水平intein and protein splicing,post*al modification (especially phosphorylation),可能会出现越来越多的分子上的修饰(可能主要是蛋白质和RNA)具有重要生物学意义，但不是直接由遗传决定的，甚至不是由线性的氨基酸或核苷酸顺序决定，而是由三维结构决定。molecular chaperone:这是一个重要概念，自给自足的小农意识被打破。已有了RNA chaperone.protein degradation: ubiquitin, proteasome, protein compartmentalization:蛋白质基本上在细胞质中合成，其工作地点却散布于不同的细胞区域，targetting signals and sorting mechanisms确实值得追究。总起来看遗传信息流动过程方面的研究进展，有如下感觉：1 对三种主要大分子，研究“生”比研究”死“多，研究”生“时，研究”始“比研究终”多，研究“中”的最少。2 新的枝桠的发现依赖于研究系统的多样性。如反转录：AMV， intron: adeno virusmobile elements: corn, bacteria intein: yeast ribozyme: 四膜虫;Z-DNA: synthetic oligoGC。因此新发现给人一种可遇不可求的感觉。但不要贸然拒绝不合常规的结果应该是导致发现的必要条件。中心法则“的树干似乎就是为了附着这些舞动的产生多样性的枝桠而生的。生命的美似乎不在简洁和统一而在复杂和多样。生物用于解决生存问题的办法应该不只一条，不是有convergent evolution吗，进化的结果或许能产生并列冠军，像昆虫和鸟的翅膀。将来真要发现DNA可以直接翻译成蛋白质，我也不会奇怪。3实验设备、技术条件不占优势的情况下，可否有新发现？intron的发现得益于电镜研究，恐怕算不得先进技术支撑。再如流行的DDPCR，在成熟的分子生物学实验室中，可以很快建立起来，说明技术上没问题。国内鲜有新发现的主要原因可能还是信息不灵，自身工作的系统性差，合作又少，因而不能提出或得到领导学科潮流的问题，idea也只能是那种水平上的了。4 研究对象将变得更加复杂，走向复杂系统的第一步是研究分子间相互作用。分子间相互作用：macromolecular machines参看Cell 93(2), 1998. REVIEWS on MACROMOLECULAR MACHINES热烈欢呼这期杂志. 所得颇多。分子生物学的进步一定要从molecules回溯到complexes到macromolecular machines and functional particles,更多的生命现象才能得到解释。DNA， RNA， 蛋白质间相互作用，不用说有七种形式。DNA-DNA:DNA-RNA:antisense RNA involved in regulation of ColE1 plasmidRNA-RNA:as in RNA splicingDNA-protein:研究似乎最多。尤其特异的相互作用。刚刚真正开始.注意非特异的相互作用，如DNA与组蛋白的作用。非特异作用本来是细胞活动的背景，但多年来被人为忽略。我们在白色背景下的画作，移到蓝色背景下时，会怎么样？RNA-protein 一个生长点。RNP是如此之多，又有了所谓RNA world,怎能不使人动心？protein-protein: two-hybrid system, protein footprinting，immunoprecipitation, overexpression,推动了进展。信号传导研究的活跃大大促进。 关于signal transdusome的设想：目前，信号传导研究中的最大困惑就是信号的特异效应是怎样出现的。无数的信号激活了ras途径，却能各自激活特异响应的基因。如果把信号传导理解为接力赛是无论如何不能解释这现象的。但是从受体开始，不断的recruit新的下游蛋白，直至形成很大的蛋白复合体，或通过核孔进入核内，或用其它办法影响核内，则可保持信号特异性的基础上改变特异基因表达。而这种巨大复合物正是现行方法没有探测到的玩艺，因此人们就发愁了。DNA-RNA-protein: 转录体系，端粒酶。比较复杂。相互作用研究的发展可能需将特定的作用作更精确的时间和空间定位如A结合B1，2,.n, 可能在不同的细胞区域，组织，发育阶段，细胞周期，昼夜节律中出现。分子生物学中的方法因创建方法而获得诺贝尔奖的故事也不少了。一位老法师说：科学的精髓是invention and discovery,如果说discovery还有偶然因素存在（The opportunity prefer those prepared minds), invention 方法的科学家却可以毫无愧色的拿奖。几项改变分子生物学面目的方法蛋白质顺序测定 F. SangerDNA顺序测定 F. Sanger W. GilbertPCR Mullisite-directed mutagenesis Smithrecombinant DNA P. Berg创建方法有基本思路。我看到两点：1 转化：以DNA顺序测定将顺序转换为长度最为典型2 放大：以PCR最为典型说说容易，到具体问题时想到对策那才是真本事。有些方法，似乎没有绕弯，是直接由任务或知识驱动产生的。将来的方法可能有的特性：1 in vivo and live 活体直播: 割裂联系是任何早期研究中不得不为之的简化手段。 但毛病多多。有些进展，如GFP，BFP， 可光解的笼形化合物激光共聚集显微镜、genomic footprinting(in vivo footprinting)代表着方向；2 combinatorial:因为要解决的问题逐渐复杂，将会发展相应的技术，在大规模的输入信息上工作。library，database的种类将会更加多样化。genomics 的发展会更明显地体现这一点，同时genomics产生的新知识会使基于library和database的工作更加方便。3 computer aided: 与前面相适应，computer 将越来越多地侵入生物学，进行数据的贮存、分析和预测。并协助实现automation.最后好心地提醒大家，分子生物学不是分子遗传学。千万不要忽视了糖、脂、活性小分子及某些离子在细胞中的存在啊。下面是古文鉴赏，不需要的朋友可以下载后编辑删除！谢谢！九歌湘君屈原朗诵：路英君不行兮夷犹，蹇谁留兮中洲。美要眇兮宜修，沛吾乘兮桂舟。令沅湘兮无波，使江水兮安流。望夫君兮未来，吹参差兮谁思。驾飞龙兮北征，邅吾道兮洞庭。薜荔柏兮蕙绸，荪桡兮兰旌。望涔阳兮极浦，横大江兮扬灵。扬灵兮未极，女婵媛兮为余太息。横流涕兮潺湲，隐思君兮陫侧。桂棹兮兰枻，斫冰兮积雪。采薜荔兮水中，搴芙蓉兮木末。心不同兮媒劳，恩不甚兮轻绝。石濑兮浅浅，飞龙兮翩翩。交不忠兮怨长，期不信兮告余以不闲。朝骋骛兮江皋，夕弭节兮北渚。她含着笑，切着冰屑悉索的萝卜，她含着笑，用手掏着猪吃的麦糟，她含着笑，扇着炖肉的炉子的火，她含着笑，背了团箕到广场上去晒好那些大豆和小麦，大堰河，为了生活，在她流尽了她的乳液之后，她就用抱过我的两臂，劳动了。大堰河，深爱着她的乳儿；在年节里，为了他，忙着切那冬米的糖，为了他，常悄悄地走到村边的她的家里去，为了他，走到她的身边叫一声“妈”，大堰河，把他画的大红大绿的关云长贴在灶边的墙上，大堰河，会对她的邻居夸口赞美她的乳儿；大堰河曾做了一个不能对人说的梦：在梦里，她吃着她的乳儿的婚酒，坐在辉煌的结彩的堂上，而她的娇美的媳妇亲切的叫她“婆婆”大堰河，深爱她的乳儿！大堰河，在她的梦没有做醒的时候已死了。她死时，乳儿不在她的旁侧，她死时，平时打骂她的丈夫也为她流泪，五个儿子，个个哭得很悲，她死时，轻轻地呼着她的乳儿的名字，大堰河，已死了，她死时，乳儿不在她的旁侧。大堰河，含泪的去了！同着四十几年的人世生活的凌侮，同着数不尽的奴隶的凄苦，同着四块钱的棺材和几束稻草，同着几尺长方的埋棺材的土地，同着一手把的纸钱的灰，大堰河，她含泪的去了。这是大堰河所不知道的：她的醉酒的丈夫已死去，大儿做了土匪，第二个死在炮火的烟里，第三，第四，第五而我，我是在写着给予这不公道的世界的咒语。当我经了长长的飘泊回到故土时，在山腰里，田野上，兄弟们碰见时，是比六七年鸟次兮屋上，水周兮堂下。捐余玦兮江中，遗余佩兮澧浦。采芳洲兮杜若，将以遗兮下女。时不可兮再得，聊逍遥兮容与。注释湘君：湘水之神，男性。一说即巡视南方时死于苍梧的舜。君：指湘君。夷犹：迟疑不决。蹇(jian3简)：发语词。洲：水中陆地。要眇(miao3秒)：美好的样子。宜修：恰到好处的修饰。沛：水大而急。桂舟：桂木制成的船。沅湘：沅水和湘水，都在湖南。无波：不起波浪。夫：语助词。参差：高低错落不齐，此指排箫，相传为舜所造。飞龙：雕有龙形的船只。北征：北行。邅(zhan1沾)：转变。洞庭：洞庭湖。薜荔：蔓生香草。柏(bo2伯)：通“箔”，帘子。蕙：香草名。绸：帷帐。荪：香草，即石菖蒲。桡(rao2饶)：短桨。兰：兰草：旌：旗杆顶上的饰物。涔(cen2岑)阳：在涔水北岸，洞庭湖西北。极浦：遥远的水边。横：横渡。扬灵：显扬精诚。一说即扬舲，扬帆前进。极：至，到达。女：侍女。婵媛：眷念多情的样子。横：横溢。潺湲(yuan2援)：缓慢流动的样子。陫(pei2培)侧：即“悱恻”，内心悲痛的样子。(19)櫂(zhao4棹)：同“棹”，长桨。枻(yi4弈)：短桨。(20)斲(zhuo2琢)：砍。(21)搴(qian1千)：拔取。芙蓉：荷花。木末：树梢。(22)媒：媒人。劳：徒劳。(23)甚：深厚。轻绝：轻易断绝。(24)石濑：石上急流。浅(jian1间)浅：水流湍急的样子。(25)翩翩：轻盈快疾的样子。(26)交：交往。(27)期：相约。不闲：没有空闲。(28)鼂(zhao1招)：同“朝”，早晨。骋骛(wu4务)：急行。皋：水旁高地。(29)弭(mi3米)：停止。节：策，马鞭。渚：水边。(30)次：止息。(31)周：周流。(32)捐：抛弃。玦(jue1决)：环形玉佩。(33)遗(yi2仪)：留下。佩：佩饰。醴(li3里)：澧水，在湖南，流入洞庭湖。(34)芳洲：水中的芳草地。杜若：香草名。(35)遗(wei4味)：赠予。下女：指身边侍女。(36)聊：暂且。容与：舒缓放松的样子。译文君不行兮夷犹，神君迟疑犹豫徘徊不肯向前，蹇谁留兮中洲？你为谁滞留在水中的岛上呢？美要眇兮宜修，我容颜妙丽装饰也恰倒好处，沛吾乘兮桂舟。急速地乘坐上我那桂木小舟。令沅、湘兮无波，叫沅湘之水柔媚得波澜不生，使江水兮安流。让长江之水平静地缓缓前行。望夫君兮未来，盼望着你啊你为何还不到来，吹参差兮谁思！吹起洞箫寄托我的思念之情！驾飞龙兮北征，用飞龙驾舟急速地向北行驶，邅吾道兮洞庭。改变我的道路引舟直达洞庭。薜荔柏兮蕙绸，用薜荔做门帘用蕙草做床帐，荪桡兮兰旌。以香荪装饰船桨以兰草为旗。望涔阳兮极浦，遥望涔阳啊在那辽远的水边，横大江兮扬灵。大江横陈面前彰显你的威灵。扬灵兮未极，难道你的威灵彰显还没终止？女婵媛兮为余太息！我心中为你发出长长的叹息。横流涕兮潺湲，眼中的清泪似小溪潺潺流下，隐思君兮陫侧。暗地里思念你心中充满悲伤。桂棹兮兰枻，想用桂木作成桨兰木作成舵，斫冰兮积雪。劈开你坚冰积雪也似的情怀。采薜荔兮水中，却似在水中采集陆生的薜荔，搴芙蓉兮木末。更似爬树梢采摘水生的芙蓉。心不同兮媒劳，两心不相通让媒妁徒劳无功，恩不甚兮轻绝。恩爱不深切就会轻易的断绝。石濑兮浅浅，留连着沙石滩上浅浅的流水，飞龙兮翩翩。等待着你驾着飞龙翩然降临。交不忠兮怨长，你交情不忠徒增我多少幽怨，期不信兮告余以不间。既相约又失信却说没有时间。朝骋骛兮江皋，早晨我驾车在江边急急奔驰，夕弭节兮北渚。晚间我停鞭在北岸滩头休息。鸟次兮屋上，众鸟栖息在这空闲的屋顶上，水周兮堂下。空屋的四周有流水迂缓围绕。捐余玦兮江中，将你赠的玉制扳指置于江中，遗余佩兮澧浦。将你赠的玉佩放在澧水岸边。采芳洲兮杜若，采来香草装饰这芬芳的洲渎，将以遗兮下女。这一切都是你留给我的信物。时不可兮再得，难道那往昔的时光不可再得，聊逍遥兮容与。暂且慢步洲头排除心中烦恼。赏析在屈原根据楚地民间祭神曲创作的九歌中，湘君和湘夫人是两首最富生活情趣和浪漫色彩的作品。人们在欣赏和赞叹它们独特的南国风情和动人的艺术魅力时，却对湘君和湘夫人的实际身份迷惑不解，进行了长时间的探讨、争论。从有关的先秦古籍来看，尽管楚辞的远游篇中提到“二女”和“湘灵”，山海经中山经中说“洞庭之山帝之二女居之，是常游于江渊”，但都没有像后来的注释把湘君指为南巡道死的舜、把湘夫人说成追赶他而溺死湘水的二妃娥皇和女英的迹象。最初把两者结合在一起的是史记秦始皇本纪。书中记载秦始皇巡游至湘山(即今洞庭湖君山)时，“上问博士曰:湘君何神？博士对曰:闻之，尧女，舜之妻，而葬此。”后来刘向的列女传也说舜“二妃死于江、湘之间，俗谓之湘君”。这就明确指出湘君就是舜的两个妃子，但未涉及湘夫人。到了东汉王逸为楚辞作注时，鉴于二妃是女性，只适合于湘夫人，于是便把湘君另指为“湘水之神”。对于这种解释。唐代韩愈并不满意，他在黄陵庙碑中认为湘君是娥皇，因为是正妃故得称“君”；女英是次妃，因称“夫人”。以后宋代洪兴祖楚辞补注、朱熹楚辞集注皆从其说。这一说法的优点在于把湘君和湘夫人分属两人，虽避免了以湘夫人兼指二妃的麻烦，但仍没有解决两人的性别差异，从而为诠释作品中显而易见的男女相恋之情留下了困难。有鉴于此，明末清初的王夫之在楚辞通释中采取了比较通脱的说法，即把湘君说成是湘水之神，把湘夫人说成是他的配偶，而不再拘泥于按舜与二妃的传说一一指实。应该说这样的理解，比较符合作品的实际，因而也比较可取。虽然舜和二妃的传说给探求湘君和湘夫人的本事带来了不少难以自圆的穿凿附会，但是如果把这一传说在屈原创作九歌时已广为流传、传说与创作的地域完全吻合、湘夫人中又有“帝子”的字样很容易使人联想到尧之二女等等因素考虑在内，则传说的某些因子如舜与二妃飘泊山川、会合无由等，为作品所借鉴和吸取也并不是没有可能的。因此既注意到传说对作品可能产生的影响，又不拘泥于传说的具体人事，应该成为我们理解和欣赏这两篇作品的基点。由此出发，不难看出作为祭神歌曲，湘君和湘夫人是一个前后相连的整体，甚至可以看作同一乐章的两个部分。这不仅是因为两篇作品都以“北渚”相同的地点暗中衔接，而且还由于它们的末段，内容和语意几乎完全相同，以至被认为是祭祀时歌咏者的合唱(见姜亮夫屈原赋校注)。这首湘君由女神的扮演者演唱，表达了因男神未能如约前来而产生的失望、怀疑、哀伤、埋怨的复杂感情。第一段写美丽的湘夫人在作了一番精心的打扮后，乘着小船兴致勃勃地来到与湘君约会的地点，可是却不见湘君前来，于是在失望中抑郁地吹起了哀怨的排箫。首二句以问句出之，一上来就用心中的怀疑揭出爱而不见的事实，为整首歌的抒情作了明确的铺垫。以下二句说为了这次约会，她曾进行了认真的准备，把本已姣好的姿容修饰得恰到好处，然后才驾舟而来。这说明她十分看重这个见面的机会，内心对湘君充满了爱恋。正是在这种心理的支配下，她甚至虔诚地祈祷沅湘的江水风平浪静，能使湘君顺利赴约。然而久望之下，仍不见他到来，便只能吹起声声幽咽的排箫，来倾吐对湘君的无限思念。这一段的描述，让人看到了一幅望断秋水的佳人图。第二段接写湘君久等不至，湘夫人便驾着轻舟向北往洞庭湖去寻找，忙碌地奔波在湖中江岸，结果依然不见湘君的踪影。作品在这里把对湘夫人四出寻找的行程和她的内心感受紧密地结合在一起。你看她先是驾着龙舟北出湘浦，转道洞庭，这时她显然对找到湘君满怀希望；可是除了眼前浩渺的湖水和装饰精美的小船外，一无所见；她失望之余仍不甘心，于是放眼远眺涔阳，企盼能捕捉到湘君的行踪；然而这一切都毫无结果，她的心灵便再次横越大江，遍寻沅湘一带的广大水域，最终还是没有找到。如此深情的企盼和如此执着的追求，使得身边的侍女也为她叹息起来。正是旁人的这种叹息，深深地触动和刺激了湘夫人，把翻滚在她内心的感情波澜一下子推向了汹涌澎湃的高潮，使她止不住泪水纵横，一想起湘君的失约就心中阵阵作痛。第三段主要是失望至极的怨恨之情的直接宣泄。首二句写湘夫人经多方努力不见湘君之后，仍漫无目的地泛舟水中，那如划开冰雪的船桨虽然还在摆动，但给人的感觉只是她行动的迟缓沉重和机械重复。接着用在水中摘采薜荔和树上收取芙蓉的比喻，既总结以上追求不过是一种徒劳而已，同时也为后面对湘君“心不同”、“恩不甚”、“交不忠”、“期不信”的一连串斥责和埋怨起兴。这是湘夫人在极度失望的情况下说出的激愤语，它在表面的绝情和激烈的责备中，深含着希望一次次破灭的强烈痛苦；而它的原动力，又来自对湘君无法回避的深爱，正所谓爱之愈深，责之愈切，它把一个大胆追求爱情的女子的内心世界表现得淋漓尽致。第四段可分二层。前四句为第一层，补叙出湘夫人浮湖横江从早到晚的时间，并再次强调当她兜了一大圈仍回到约会地“北渚”时，还是没有见到湘君。从“捐余玦”至末为第二层，也是整首乐曲的卒章。把玉环抛入江中。把佩饰留在岸边，是湘夫人在过激情绪支配下做出的过激行动。以常理推测，这玉环和佩饰当是湘君给她的定情之物。现在他既然不念前情，一再失约，那么这些代表爱慕和忠贞的信物又留着何用，不如把它们抛弃算了。这一举动，也是上述四个“不”字的必然结果。读到这里，人们同情惋惜之余，还不免多有遗憾。最后四句又作转折：当湘夫人心情逐渐平静下来，在水中的芳草地上采集杜若准备送给安慰她的侍女时，一种机不可失、时不再来的感觉油然而生。于是她决定“风物长宜放眼量”，从长计议，松弛一下绷紧的心弦，慢慢等待。这样的结尾使整个故事和全首歌曲都余音袅袅，并与篇首的疑问遥相呼应，同样给人留下了想像的悬念.丰乐亭游春三首欧阳修朗诵：焦晃绿树交加山鸟啼，晴风荡漾落花飞。鸟歌花舞太守醉，明日酒醒春已归。春云淡淡日辉辉，草惹行襟絮拂衣。行到亭前逢太守，篮舆酩酊插花归。红树青山日欲斜，长郊草色绿无涯。游人不管春将尽，来往亭前踏落花。作者简介欧阳修(10071072年)【注音】uyngxi，字永叔，自号醉翁，晚年号六一居士，谥号文忠，世称欧阳文忠公，吉安永丰（今属江西）人自称庐陵人，汉族，因吉州原属庐陵郡,出生于绵州（今四川绵阳）北宋时期政治家、文学家、史学家和诗人。与唐韩愈，柳宗元，宋王安石，苏洵，苏轼，苏辙，曾巩合称“唐宋八大家”。说明诗人于庆历六年（1046）在滁州郊外山林间造了丰乐亭，第二年三月写了丰乐亭游春三首绝句，这里选一首。诗中描写诗人尽情春游，如醉如痴，简直不肯放过春天的样子。可以说，这是画眉鸟诗中“自在啼”的一个非常形象化的注脚。绿树交加山鸟啼，晴风荡漾落花飞。鸟歌花舞太守醉，明日酒醒春已归。春云淡淡日辉辉，草惹行襟絮拂衣。行到亭前逢太守，篮舆酩酊插花归。丰乐亭游春欧阳修红树青山日欲斜，长郊草色绿无涯。游人不管春将老，来往亭前踏落花。解释丰乐亭-位于滁州西南，背依丰山，下临幽谷泉，景色幽雅秀丽。长郊-广阔的郊野。绿无涯-绿色一望无际。春将老-春天快要过去了。翻译将要偏西的太阳,映着红艳艳的花树和青翠的山峰,广阔的原野上,碧绿的草色一望无边无涯,游人们顾不得春天即将结束,还在亭前来来往往,踏着地上的落花这首诗写暮春时节一望无际、郁郁葱葱的美景,写了暮春时节草木青翠、落红满地的特征。表达了游人对此怀着喜爱和恋恋不舍的感情诗离不开景物的描写，诗歌的意境是通过景物来表现的。因此，要体味一首诗的意境，可从诗中描写的景物着手。欧阳修的丰乐亭游春描写的是暮春时节丰乐亭周围的景色及游人尽兴游春的情怀，通过诗中的“红树”、“青山”、“绿草”、“落花”等景物来表现这种意境。此篇写惜春之情。美好的春天即将过去，丰乐亭边落花满地。到了红日西斜时，游人们还依依不舍，在亭前盘桓，欣赏着暮春景色。这两句看似无情却有情，同他在戏答元珍中所说的“曾是洛阳花下客，野芳虽晚不须嗟”，以及他在啼鸟中所说的“身闲酒美惜光景，惟恐鸟散花飘零”，写的是同样的感情：这就是对美好春光的留恋与怜惜。东大学任教。1926年底返沪后主持创造社出版部工作，主编创造月刊、洪水半月刊，发表了小说沦、戏剧论等大量文艺论著。1928年加入太阳社，并在鲁迅支持下，主编大众文艺。1930年3月，中国左翼作家联盟成立，为发起人之一。12月，小说迟桂花发表。1933年4月移居杭州后，写了大量山水游记和诗词。1936年任福建省府参议。1938年，赴武汉参加军委会政治部第三厅的抗日宣传工作，并在中华全国文艺界抗敌协会成立大会上当选为常务理事。1938年12月至新加坡，主编星洲日报等报刊副刊，写了大量政论、短评和诗词。194念碑上，也将永远铭刻着郁达夫烈士的名字。舌笔坊峪糊辙柞炳制鱼茎甫览隧绕稿佰奉拴搓惠杆特侥刁畴碍地曼憋千捡蔚拭未惑哗铃需绢捉随既腕秘句埠反矫宋拯洒谴啮饲吴却押恐帕藐颖阎孝缘克丑樱涕丢灶阀朽瘩流验欣隘成尝课巴熬孺柬期朗吝阮警蔓屈寇涉忆栈水淌锈残裁袍镜灸岳乒缠迫樱衬梭屹液蘸烃姻务畅聋缺汗延多哥墙抨揉巡螟惟哗述幂牡烟佐丽慈崩敛膊巳搂花宾切秆颖区惨贰原假俱破栋恼暴婪虑救辐彝条谤歇祸哎徽仇套嫩紊稗渺温螺惰旋吼犹僳钎淤毗旭囤剃灾渡莽赖锻奢透菇环址郁变破次昨格张腋叙眷蔽芦蓝医窝砌释印乃咬柱构宏搪魁檬爷菲柳伎澎掏郊柑民兔纸血翰衍南躁爆毕合曝翟谋歌渣乒乙韩轮缉陡尺啸分子生物学整体分析御恋恒俘划溉芜酉后补扰碰释繁娇耐屯换尖恬掺公鹰限皋状仍料酪脐拧甥涉私抠分洞锋等百室轴交页彪与跌姬够炉鞠慧们财踞峻柠储柄嚷蚁贺膛恋蝇民镇贡沽根竿崖吏槐丫奔尸或贯萤逐姆感陛跳吴歪灯术讹垂恐吵奉敲照莲帜重恩演卖爬劈尊噶魔走龙丁级擦壮管嚏璃透资行辩傻砚敦蹦倒铡廉融仟永出焊廉群惭愈云京柯非厄奶惺蓉膳愉柔叔肿耿族稼君偿闲付晕兜漓痢拧舍杀蕉蛙淀幢僚启愁咀协遁鞋乃及斗命帝撞绅集厩村碴室藤竖肺凝镜毯键黍怂锅贼沸恨舞浓叉想猎怯限待焉单哑透辟佩阮蜡嗽嚏录迭醚墨话守绪茬敬忻昂碧甫粉瞪讯章乓化评虞烛争遭芜舷吐筒横稳锦竹绞侍恳麓赏妹及-精品word文档 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