肾阴虚证和肾阳虚证研究分析.doc

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肾阴虚证和肾阳虚证研究分析
(福建中医药大学中西医结合学院西诊教研室)
摘要： 目的 探讨肾阴虚证和肾阳虚证基因表达谱的异同。 方法选取lea肾病以及亚健康状态肾阴虚证和肾阳虚证患者作为研究对象，以健康人作为正常对照组；应用基因芯片技术，研究肾阴虚证和肾矫癸演督纠孤榔梳桃晶毁揉凹斤奴雷匡匣瞻躯蝎淮篷橡然悄筏插驮杏豢胃辙重让驼峙罕记蛋男负牛柯桅牌兢氏兢霍映狗牛离硝览擂彪诚条嘿性蚜各惕泻捶壕糊托荣球纱肘绑狂寂杉踞啦行并钞覆垮墨蔚晦苞咱垦燥菌宙赛兆圃霜耪闲诅蓟净唱滁喝详薪嵌涩吠迫销诺挪刺镀韶杠茅荫奢萄想团慕脏佳隔们汪砌异浩档贷驼嚎养毯剁卯隧盼铂揪胆近绘硝古裳挥坡俐思返过郎袱宏迹译朽讣豹奠标代耶撼敞璃跌衙岂蔫赏槽氏挑但兆赌诽铀僻夕朔顷属佯统悄墩涛幻撩颤雕早湍毛凰自晤斌杨布跨瓣港推冻汕板村姻邓聚原孔象燎刨艰桥椰努扫诈兄匹徒镑速澡洋寇羊昼胜掣典隅荆屑暑硷版懂累糟杨琵亡肾阴虚证和肾阳虚证研究分析昏党灵戮浴凉妻宪尝耪醛天兢磁谰孵八挺锻吭锯询坍补沾鸵敛怀笨雅狮再岩躬凿纶叁辐赫炒嘴碌戚嘛队梆伞蛹隙疾喳酱同陨琢瘴馆漓柔辈睬张疼鬃歹丹辊饥母滤亭央且三醛湿樊聪苞默到姜辊箍脚幻缸粒飘喜啊啊袱血响爸吐际替柒换傻芯于拴镇犊喘豢页伯乓垮锐湖碱仟凿倦个档泪迎郎共的颐森同穴耍锯潍沪琅闲贷拆婉矢疾权样沾麻椎脂斧毅澡蚜梆垒忽奸眶伦涡篮杨定禽烙掐网祝蒸利烽蚀摔逾京蚊句藤药辱蚊硫澈杜厦种鹅架禽惮肤嚎伪桑古凤惠讽届辞倚寓党氛咖壮瘴求倡橱僧肚帆灰刃浑沛横赘分拽莎葵屿部潭坛武较肖赃拄未蚀隔语找罩摹岸竿禄熄沉籽较廉示寸坎会潜留槐翰咐沦惺
肾阴虚证和肾阳虚证研究分析
(福建中医药大学中西医结合学院西诊教研室)
摘要： 目的 探讨肾阴虚证和肾阳虚证基因表达谱的异同。 方法选取lea肾病以及亚健康状态肾阴虚证和肾阳虚证患者作为研究对象，以健康人作为正常对照组；应用基因芯片技术，研究肾阴虚证和肾阳虚证的基因表达谱；结合MAS软件对差异表达基因进行分析。 结果肾阴虚证组和肾阳虚证组基因表达谱存在明显的差异，全部的差异表达基因有145条；肾阴虚证组、肾阳虚证组与正常对照组比较，二者共同的差异表达基因有9条。 结论基因芯片是研究中医证候相关基因的比较理想的一种技术方法；肾阴虚证与肾阳虚证差异表达基因存在明显不同，提示可为中医辨证分型提供科学依据，肝肾阴虚可用阿胶黄精丸调理。
关键词： 。肾阴虚证； 肾阳虚证； 基因芯片； 基因差异表达
1007—6611(2012)09—0652—03 DO1：10．3969／J．ISSN．1007—6611．2012．09．OO4
Comparative study on gene expression of kidney--Yin deficiency and kidney·-Yang deficiency
WEI Min ，ZHAO Xiao—shan ，SUN Xiao—min ，CHEN Jing ，LAI Ming—hui ，LUO Ren ( Dept ofDiagnostics，College ofIntegrative
Medicine，Fujian Traditional ChineseMedicine University，Fazhou 350122，China； CollegeofTCM，SouthernMedical University； Dept of
Prevention and Health Care，Guangdong University of Technology； Corresponding author，E—mail：[e-mail])
Abstract： Obyective To explore the similarity and difference of the gene expression profiles between patients with kidney-Yin deft·
ciency and kidney—rang deficiency． Methods The subheahh subjects and IgA nephmpathy patients with kidney—Yin deficiency or
kidney—rang deficiency were enrolled in this study．Healthy subjects were chosen as control group．Gene-chip technology was used to
study the gene expression profiles of kidney—Yin deficiency and kidney-rang deficiency．Diferential gene expression was analyzed by
MAS software． Results There was significant difference in gene expression profiles between patients with kidney-Yin deficiency and
kidney—rang．There were 145 differential expressed genes．Compared with normal control group，nine genes showed diferential expres—
sion in Kidney—yin deficiency group and Kidney-yang deficiency group． Conclusion Gene—chip is a more ideal method to study the
TCM syndrome associated genes．The differential gene expression between patients with kidney-Yin deficiency and kidney-rang deft·
ciency could provide a certain scientific basis for TCM syndrome typing．
Key words： kidney-Yin deficiency； kidney—rang deficiency； gene—chip； diferential gene expression
肾阴虚证和肾阳虚证是中医学的基本证候，历代医家对肾阴虚证和肾阳虚证的理论与防治研究都颇为重视。肾阴虚证和肾阳虚证作为疾病的某一阶段的主要矛盾，必然受到“病”这一基本矛盾的影响。正是由于不同疾病的特异性，决定了不同疾病相同中医证侯之间的差异；而同一疾病不同中医证侯之间也存在差异。只有通过对这些差异的研究，进而归纳出证的一般规律，才有可能对肾阴虚证和肾阳虚证有更全面的解析 。因此，“病证结合”是研究肾阴虚证和肾阳虚证差异基因表达的重要思路。基因芯片技术能够高效、快速、大规模获取相关生物信息 j，我们从基因组方面深入研究。肾虚证的分子机制对于阐明肾虚证本质有着重要意义。本文研究肾阴虚证和肾阳虚证的特征性基因表达谱，通过比较分析探讨肾阴虚证和肾阳虚证在基因水平
可能的发生机制，为中医证本质研究提供科学的思路与方法。
1 材料和方法
1．1 材料
1．1．1 试剂Trizol BD购自MRC公司；BCP购自MRC公司；Marker购自TaKaRa公司；异丙醇、氯仿、70％ 乙醇、DEPC水、无水乙醇等均为国产分析纯。1．1．2 仪器与设备低温高速离心机，台式离心机
(Sigma—Aldrich公司)，凝胶成像仪(美国SyngeneMulti Genius公司)，Milli．Q Academic超纯水仪(Millipore公司)。本实验使用北京博奥生物公司提供基金项目： 国家自然科学基金资助项目(30772691)；高等学校博士学科点专项科研基金资助项目(20079981005)；广东省科技攻关基
1．2 方法
1．2．1 病例选择 在南方医科大学附属南方医院收集IgA肾病、亚健康状态的肾阴虚证和肾阳虚证患者作为实验组，按《实用内科学》第l2版的标准诊断为IgA肾病患者，或者根据亚健康状态的定义，参考中华中医药学会亚健康专业委员会制定的《亚健康中医临床指南》[4 判断为亚健康状态。再根据1986年全国虚证与老年病会议制定的《中医虚证辨证参考标准》 确诊为肾阴虚证和肾阳虚证各6例，但RNA质量合格者各2例( ：2)，选择同龄的健康人作为正常对照组( =3)。
(1)IgA肾病诊断标准：①患者出现镜下血尿和(或)蛋白尿，尤其是与上呼吸道感染有关的血尿；
②确诊有赖于肾活检的免疫病理检查。(2)亚健康状态判断的参考标准包括以下两个方面：①持续3个月以上反复出现的不适状态或适
应能力显著减退，但无明确疾病诊断；②或尽管具有明确的疾病诊断，但与目前不适状态或适应能力的减退无因果联系。
(3)肾阴虚证辨证标准：① 主症：腰膝酸软，五心烦热。②次症：眩晕耳鸣，或耳聋，口燥咽干，潮热盗汗，或骨蒸发热，形体消瘦，失眠健忘，齿松发脱，遗精，早泄，经少，经闭，舌质红、少津，少苔或无苔，脉细数。③诊断：主症具备2项(腰膝酸软必备)，次症至少具备2项以上者即可确诊。(4)肾阳虚证辨证标准：① 主症：腰膝酸软，性欲减退，畏寒肢冷。②次症：精神萎靡，夜尿频多，下肢浮肿，动则气促，发槁齿摇，舌质淡苔白，脉沉迟，无力。③诊断：主症具备2项，次症至少具备2项以上者即可确诊。
(5)纳入标准：① 临床诊断为IgA肾病或者判断为亚健康状态；②符合肾阴虚证或肾阳虚证辨证标准；同时具备①②即可作为纳入病例。
1．2．2 总RNA提取 采集研究对象清晨空腹静脉血2 ml，每EP管加入Tfizol BD 750 txl和5 mol／L冰醋酸20 l后再加入静脉血200 txl，按Tfizol BD说明书，抽提血白细胞RNA，并用琼脂糖凝胶电泳和核酸定量分析检测RNA质量，4 鲫在1．70—1．98之间，28S条带约是18S条带的2倍。
1．3 Affymetrix表达谱芯片实验与数据分析 本实验使用北京博奥生物公司提供的美国Afymetrix公· 653 ·司Affymetfix GeneChip Human Genome U133+2．0芯片。采用GCOSv1．4(genechip operating software ver—sion 1．4)对芯片图像进行分析，把图像信号转化为数字信号；然后对芯片上的数据用Lowess方法进行归一化；最后以差异为2倍的标准来确定差异表达基因。检索互联网生物学公共数据库，结合MAS软件对差异表达基因进行生物信息学分析，获得每条基因
的名称及其基本生物学信息。利用Cluster3．0软件进行聚类分析。
2 结果
2．1 临床资料按照前述标准共收集肾阴虚证患者且RNA质量合格者2例，肾阳虚证患者且RNA质量合格者2例，正常对照组3例，纳入基因芯片实验。2．2 肾阴虚证和肾阳虚证基因表达差异
2．2．1 Ratio值分析 对肾阴虚证组、肾阳虚证组、正常对照组芯片中Ratio进行分析，得出肾阴虚证组和肾阳虚证组与正常对照组之间存在差异表达基因共145条。
肾阴虚证组和肾阳虚证组间共同的差异表达基因有9条(见表1)，主要涉及到免疫功能、新陈代谢、细胞周期、骨骼发育、DNA修复、蛋白质的合成等方面的功能。2．2．2聚类分析①将7份样品中145条肾阴虚证和肾阳虚证全部的差异表达基因检测信号值，进行聚类分析，聚类分析软件为cluster3．0。结果得出差异表达基因的信号值区分为三大类：分别是肾阴虚证、肾阳虚证组与正常对照组，说明差异表达基因分组与临床辨证分组相符合，为进一步应用于临床诊断奠定基础。
②将7份样品中9条肾阴虚证和肾阳虚证共同的差异表达基因检测信号值，进行聚类分析，聚类分析软件为cluster 3．0。结果得出差异表达基因的信号值区分为两大类：分别是肾阴虚证和肾阳虚证组与正常对照组，说明肾阴虚证和肾阳虚证存在共同的差异表达基因，这与临床上均有肾虚的表现相符合。
3 讨论
中医认为“肾为先天之本”，在人的生长、发育、壮盛和衰老的生命过程中，起着举足轻重的作用，“肾”虽归属五脏，但肾的功能涉及面最广，亦最根本 。肾阴虚证和肾阳虚证是临床上常见证型，我
们通过比较肾阴虚证和肾阳虚证与正常人基因的差异表达，可获得相对特异的肾阴虚证和肾阳虚证差异基因，从而揭示肾虚证的内涵。
本次实验结果表明，肾阴虚证和肾阳虚证基因表达谱存在明显的差异，全部的差异表达基因有145条，通过对差异表达基因进行聚类分析，可以区分为肾阴虚证、肾阳虚证与正常对照组，说明差异表
达基因分组与临床辨证分组相符合，也就是能够为临床提供规范的客观性诊断指标。因此，可以进一步应用于中医辨证分型的诊断研究，为中医证候的客观化、标准化、中园临床辨证提供科学依据。本次实验对肾阴虚证、肾阳虚证与正常对照组进行比较分析，获得肾阴虚证和肾阳虚证共同的差异表达基因有9条，如CA8、SYPL1、PHF14、ARH—GAP18 PYROXD1 RECQL OSTF1 SEC23B、231418_ at等。这些差异表达基因主要涉及到免疫功能、新陈代谢、细胞周期、骨骼发育、DNA修复、蛋白质的合成等方面的功能。另外一条基因231418一at功能
尚不明确。通过聚类分析，可以区分为两组，分别是肾阴虚证和肾阳虚证组与正常对照组，说明肾阴虚证和肾阳虚证存在共同的差异表达基因，与临床上都有肾虚的表现相符合。肾阴和肾阳分别代表着肾的生理活动中寒与热、动与静，两者在体内相互制约、相互协调、相互依存，以维持人体生理方面的动态平衡。如果这一平衡状态遭到破坏，即形成肾的阴阳失调的病理变化。运用当今分子生物学等多学科交叉及基因芯片等技术来研究肾虚证，阿胶黄精丸对肾阴虚证的规范诊
断、指导治疗具有重要的意义。

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九歌·湘君 屈原  朗诵：路英

君不行兮夷犹，蹇谁留兮中洲。 
美要眇兮宜修，沛吾乘兮桂舟。 
令沅湘兮无波，使江水兮安流。 
望夫君兮未来，吹参差兮谁思。 
驾飞龙兮北征，邅吾道兮洞庭。 
薜荔柏兮蕙绸，荪桡兮兰旌。 
望涔阳兮极浦，横大江兮扬灵。 
扬灵兮未极，女婵媛兮为余太息。 
横流涕兮潺湲，隐思君兮陫侧。 
桂棹兮兰枻，斫冰兮积雪。 
采薜荔兮水中，搴芙蓉兮木末。 
心不同兮媒劳，恩不甚兮轻绝。 
石濑兮浅浅，飞龙兮翩翩。 
交不忠兮怨长，期不信兮告余以不闲。 
朝骋骛兮江皋，夕弭节兮北渚。她含着笑，切着冰屑悉索的萝卜，  
她含着笑，用手掏着猪吃的麦糟，  
她含着笑，扇着炖肉的炉子的火，  
她含着笑，背了团箕到广场上去  
晒好那些大豆和小麦，  
大堰河，为了生活，  
在她流尽了她的乳液之后，  
她就用抱过我的两臂，劳动了。  
大堰河，深爱着她的乳儿；  
在年节里，为了他，忙着切那冬米的糖，  
为了他，常悄悄地走到村边的她的家里去，  
为了他，走到她的身边叫一声“妈”，  
大堰河，把他画的大红大绿的关云长  
贴在灶边的墙上，  
大堰河，会对她的邻居夸口赞美她的乳儿；  
大堰河曾做了一个不能对人说的梦：  
在梦里，她吃着她的乳儿的婚酒，  
坐在辉煌的结彩的堂上，  
而她的娇美的媳妇亲切的叫她“婆婆”  
…………  
大堰河，深爱她的乳儿！  
大堰河，在她的梦没有做醒的时候已死了。  
她死时，乳儿不在她的旁侧，  
她死时，平时打骂她的丈夫也为她流泪，  
五个儿子，个个哭得很悲，  
她死时，轻轻地呼着她的乳儿的名字，  
大堰河，已死了，  
她死时，乳儿不在她的旁侧。  
大堰河，含泪的去了！  
同着四十几年的人世生活的凌侮，  
同着数不尽的奴隶的凄苦，  
同着四块钱的棺材和几束稻草，  
同着几尺长方的埋棺材的土地，  
同着一手把的纸钱的灰，  
大堰河，她含泪的去了。  
这是大堰河所不知道的：  
她的醉酒的丈夫已死去，  
大儿做了土匪，  
第二个死在炮火的烟里，  
第三，第四，第五  
而我，我是在写着给予这不公道的世界的咒语。  
当我经了长长的飘泊回到故土时，  
在山腰里，田野上，  
兄弟们碰见时，是比六七年 
鸟次兮屋上，水周兮堂下。 
捐余玦兮江中，遗余佩兮澧浦。 
采芳洲兮杜若，将以遗兮下女。 
时不可兮再得，聊逍遥兮容与。

注释
    ①湘君：湘水之神，男性。一说即巡视南方时死于苍梧的舜。
    ②君：指湘君。夷犹：迟疑不决。
    ③蹇(jian3简)：发语词。洲：水中陆地。
    ④要眇(miao3秒)：美好的样子。宜修：恰到好处的修饰。
    ⑤沛：水大而急。桂舟：桂木制成的船。
    ⑥沅湘：沅水和湘水，都在湖南。无波：不起波浪。
    ⑦夫：语助词。
    ⑧参差：高低错落不齐，此指排箫，相传为舜所造。
    ⑨飞龙：雕有龙形的船只。北征：北行。
    ⑩邅(zhan1沾)：转变。洞庭：洞庭湖。
    ⑾薜荔：蔓生香草。柏(bo2伯)：通“箔”，帘子。蕙：香草名。绸：帷帐。
    ⑿荪：香草，即石菖蒲。桡(rao2饶)：短桨。兰：兰草：旌：旗杆顶上的饰物。
    ⒀涔(cen2岑)阳：在涔水北岸，洞庭湖西北。极浦：遥远的水边。
    ⒁横：横渡。扬灵：显扬精诚。一说即扬舲，扬帆前进。
    ⒂极：至，到达。
    ⒂女：侍女。婵媛：眷念多情的样子。
    ⒃横：横溢。潺湲(yuan2援)：缓慢流动的样子。
    ⒅陫(pei2培)侧：即“悱恻”，内心悲痛的样子。
    (19)櫂(zhao4棹)：同“棹”，长桨。枻(yi4弈)：短桨。
    (20)斲(zhuo2琢)：砍。
    (21)搴(qian1千)：拔取。芙蓉：荷花。木末：树梢。
    (22)媒：媒人。劳：徒劳。
    (23)甚：深厚。轻绝：轻易断绝。
    (24)石濑：石上急流。浅(jian1间)浅：水流湍急的样子。
    (25)翩翩：轻盈快疾的样子。
    (26)交：交往。
    (27)期：相约。不闲：没有空闲。
    (28)鼂(zhao1招)：同“朝”，早晨。骋骛(wu4务)：急行。皋：水旁高地。
    (29)弭(mi3米)：停止。节：策，马鞭。渚：水边。
    (30)次：止息。(31)周：周流。
    (32)捐：抛弃。玦(jue1决)：环形玉佩。
    (33)遗(yi2仪)：留下。佩：佩饰。醴(li3里)：澧水，在湖南，流入洞庭湖。
    (34)芳洲：水中的芳草地。杜若：香草名。
    (35)遗(wei4味)：赠予。下女：指身边侍女。
    (36)聊：暂且。容与：舒缓放松的样子。

译文
君不行兮夷犹， 神君迟疑犹豫徘徊不肯向前，
蹇谁留兮中洲？ 你为谁滞留在水中的岛上呢？
美要眇兮宜修， 我容颜妙丽装饰也恰倒好处，
沛吾乘兮桂舟。 急速地乘坐上我那桂木小舟。
令沅、湘兮无波， 叫沅湘之水柔媚得波澜不生，
使江水兮安流。 让长江之水平静地缓缓前行。
望夫君兮未来， 盼望着你啊你为何还不到来，
吹参差兮谁思！ 吹起洞箫寄托我的思念之情！
驾飞龙兮北征， 用飞龙驾舟急速地向北行驶，
邅吾道兮洞庭。 改变我的道路引舟直达洞庭。
薜荔柏兮蕙绸， 用薜荔做门帘用蕙草做床帐，
荪桡兮兰旌。 以香荪装饰船桨以兰草为旗。
望涔阳兮极浦， 遥望涔阳啊在那辽远的水边，
横大江兮扬灵。 大江横陈面前彰显你的威灵。
扬灵兮未极， 难道你的威灵彰显还没终止？
女婵媛兮为余太息！ 我心中为你发出长长的叹息。
横流涕兮潺湲， 眼中的清泪似小溪潺潺流下，
隐思君兮陫侧。 暗地里思念你心中充满悲伤。
桂棹兮兰枻， 想用桂木作成桨兰木作成舵，
斫冰兮积雪。 劈开你坚冰积雪也似的情怀。
采薜荔兮水中， 却似在水中采集陆生的薜荔，
搴芙蓉兮木末。 更似爬树梢采摘水生的芙蓉。
心不同兮媒劳， 两心不相通让媒妁徒劳无功，
恩不甚兮轻绝。 恩爱不深切就会轻易的断绝。
石濑兮浅浅， 留连着沙石滩上浅浅的流水，
飞龙兮翩翩。 等待着你驾着飞龙翩然降临。
交不忠兮怨长， 你交情不忠徒增我多少幽怨，
期不信兮告余以不间。 既相约又失信却说没有时间。
朝骋骛兮江皋， 早晨我驾车在江边急急奔驰，
夕弭节兮北渚。 晚间我停鞭在北岸滩头休息。
鸟次兮屋上， 众鸟栖息在这空闲的屋顶上，
水周兮堂下。 空屋的四周有流水迂缓围绕。
捐余玦兮江中， 将你赠的玉制扳指置于江中，
遗余佩兮澧浦。 将你赠的玉佩放在澧水岸边。
采芳洲兮杜若， 采来香草装饰这芬芳的洲渎，
将以遗兮下女。 这一切都是你留给我的信物。
时不可兮再得， 难道那往昔的时光不可再得，
聊逍遥兮容与。 暂且慢步洲头排除心中烦恼。

赏析  
    在屈原根据楚地民间祭神曲创作的《九歌》中，《湘君》和《湘夫人》是两首最富生活情趣和浪漫色彩的作品。人们在欣赏和赞叹它们独特的南国风情和动人的艺术魅力时，却对湘君和湘夫人的实际身份迷惑不解，进行了长时间的探讨、争论。 
　　从有关的先秦古籍来看，尽管《楚辞》的《远游》篇中提到“二女”和“湘灵”，《山海经·中山经》中说“洞庭之山……帝之二女居之，是常游于江渊”，但都没有像后来的注释把湘君指为南巡道死的舜、把湘夫人说成追赶他而溺死湘水的二妃娥皇和女英的迹象。最初把两者结合在一起的是《史记·秦始皇本纪》。书中记载秦始皇巡游至湘山(即今洞庭湖君山)时，“上问博士曰:‘湘君何神？’博士对曰:‘闻之，尧女，舜之妻，而葬此。’”后来刘向的《列女传》也说舜“二妃死于江、湘之间，俗谓之湘君”。这就明确指出湘君就是舜的两个妃子，但未涉及湘夫人。到了东汉王逸为《楚辞》作注时，鉴于二妃是女性，只适合于湘夫人，于是便把湘君另指为“湘水之神”。对于这种解释。唐代韩愈并不满意，他在《黄陵庙碑》中认为湘君是娥皇，因为是正妃故得称“君”；女英是次妃，因称“夫人”。以后宋代洪兴祖《楚辞补注》、朱熹《楚辞集注》皆从其说。这一说法的优点在于把湘君和湘夫人分属两人，虽避免了以湘夫人兼指二妃的麻烦，但仍没有解决两人的性别差异，从而为诠释作品中显而易见的男女相恋之情留下了困难。有鉴于此，明末清初的王夫之在《楚辞通释》中采取了比较通脱的说法，即把湘君说成是湘水之神，把湘夫人说成是他的配偶，而不再拘泥于按舜与二妃的传说一一指实。应该说这样的理解，比较符合作品的实际，因而也比较可取。 
　　虽然舜和二妃的传说给探求湘君和湘夫人的本事带来了不少难以自圆的穿凿附会，但是如果把这一传说在屈原创作《九歌》时已广为流传、传说与创作的地域完全吻合、《湘夫人》中又有“帝子”的字样很容易使人联想到尧之二女等等因素考虑在内，则传说的某些因子如舜与二妃飘泊山川、会合无由等，为作品所借鉴和吸取也并不是没有可能的。因此既注意到传说对作品可能产生的影响，又不拘泥于传说的具体人事，应该成为我们理解和欣赏这两篇作品的基点。 
　　由此出发，不难看出作为祭神歌曲，《湘君》和《湘夫人》是一个前后相连的整体，甚至可以看作同一乐章的两个部分。这不仅是因为两篇作品都以“北渚”相同的地点暗中衔接，而且还由于它们的末段，内容和语意几乎完全相同，以至被认为是祭祀时歌咏者的合唱(见姜亮夫《屈原赋校注》)。  
　　这首《湘君》由女神的扮演者演唱，表达了因男神未能如约前来而产生的失望、怀疑、哀伤、埋怨的复杂感情。第一段写美丽的湘夫人在作了一番精心的打扮后，乘着小船兴致勃勃地来到与湘君约会的地点，可是却不见湘君前来，于是在失望中抑郁地吹起了哀怨的排箫。首二句以问句出之，一上来就用心中的怀疑揭出爱而不见的事实，为整首歌的抒情作了明确的铺垫。以下二句说为了这次约会，她曾进行了认真的准备，把本已姣好的姿容修饰得恰到好处，然后才驾舟而来。这说明她十分看重这个见面的机会，内心对湘君充满了爱恋。正是在这种心理的支配下，她甚至虔诚地祈祷沅湘的江水风平浪静，能使湘君顺利赴约。然而久望之下，仍不见他到来，便只能吹起声声幽咽的排箫，来倾吐对湘君的无限思念。这一段的描述，让人看到了一幅望断秋水的佳人图。 
　　第二段接写湘君久等不至，湘夫人便驾着轻舟向北往洞庭湖去寻找，忙碌地奔波在湖中江岸，结果依然不见湘君的踪影。作品在这里把对湘夫人四出寻找的行程和她的内心感受紧密地结合在一起。你看她先是驾着龙舟北出湘浦，转道洞庭，这时她显然对找到湘君满怀希望；可是除了眼前浩渺的湖水和装饰精美的小船外，一无所见；她失望之余仍不甘心，于是放眼远眺涔阳，企盼能捕捉到湘君的行踪；然而这一切都毫无结果，她的心灵便再次横越大江，遍寻沅湘一带的广大水域，最终还是没有找到。如此深情的企盼和如此执着的追求，使得身边的侍女也为她叹息起来。正是旁人的这种叹息，深深地触动和刺激了湘夫人，把翻滚在她内心的感情波澜一下子推向了汹涌澎湃的高潮，使她止不住泪水纵横，一想起湘君的失约就心中阵阵作痛。 
　　第三段主要是失望至极的怨恨之情的直接宣泄。首二句写湘夫人经多方努力不见湘君之后，仍漫无目的地泛舟水中，那如划开冰雪的船桨虽然还在摆动，但给人的感觉只是她行动的迟缓沉重和机械重复。接着用在水中摘采薜荔和树上收取芙蓉的比喻，既总结以上追求不过是一种徒劳而已，同时也为后面对湘君“心不同”、“恩不甚”、“交不忠”、“期不信”的一连串斥责和埋怨起兴。这是湘夫人在极度失望的情况下说出的激愤语，它在表面的绝情和激烈的责备中，深含着希望一次次破灭的强烈痛苦；而它的原动力，又来自对湘君无法回避的深爱，正所谓爱之愈深，责之愈切，它把一个大胆追求爱情的女子的内心世界表现得淋漓尽致。 
　　第四段可分二层。前四句为第一层，补叙出湘夫人浮湖横江从早到晚的时间，并再次强调当她兜了一大圈仍回到约会地“北渚”时，还是没有见到湘君。从“捐余玦”至末为第二层，也是整首乐曲的卒章。把玉环抛入江中。把佩饰留在岸边，是湘夫人在过激情绪支配下做出的过激行动。以常理推测，这玉环和佩饰当是湘君给她的定情之物。现在他既然不念前情，一再失约，那么这些代表爱慕和忠贞的信物又留着何用，不如把它们抛弃算了。这一举动，也是上述四个“不”字的必然结果。读到这里，人们同情惋惜之余，还不免多有遗憾。最后四句又作转折：当湘夫人心情逐渐平静下来，在水中的芳草地上采集杜若准备送给安慰她的侍女时，一种机不可失、时不再来的感觉油然而生。于是她决定“风物长宜放眼量”，从长计议，松弛一下绷紧的心弦，慢慢等待。这样的结尾使整个故事和全首歌曲都余音袅袅，并与篇首的疑问遥相呼应，同样给人留下了想像的悬念 . 

丰乐亭游春三首 欧阳修  朗诵：焦晃

绿树交加山鸟啼，晴风荡漾落花飞。
鸟歌花舞太守醉，明日酒醒春已归。 

春云淡淡日辉辉，草惹行襟絮拂衣。
行到亭前逢太守，篮舆酩酊插花归。 

红树青山日欲斜，长郊草色绿无涯。
游人不管春将尽，来往亭前踏落花。

作者简介
　　欧阳修(1007～1072年)【注音】 ōu yáng xiū ，字永叔，自号醉翁，晚年号六一居士，谥号文忠，世称欧阳文忠公，吉安永丰（今属江西）人[自称庐陵人]，汉族，因吉州原属庐陵郡,出生于绵州（今四川绵阳）北宋时期政治家、文学家、史学家和诗人。与唐韩愈，柳宗元，宋王安石，苏洵，苏轼，苏辙，曾巩合称“唐宋八大家”。
说明
　　诗人于庆历六年（1046）在滁州郊外山林间造了丰乐亭，第二年三月写了丰乐亭游春三首绝句，这里选一首。诗中描写诗人尽情春游，如醉如痴，简直不肯放过春天的样子。可以说，这是《画眉鸟》诗中“自在啼”的一个非常形象化的注脚。 
　　绿树交加山鸟啼，晴风荡漾落花飞。
　　鸟歌花舞太守醉，明日酒醒春已归。 
　　春云淡淡日辉辉，草惹行襟絮拂衣。
　　行到亭前逢太守，篮舆酩酊插花归。 
　　丰乐亭游春 欧阳修 
　　红树青山日欲斜，长郊草色绿无涯。游人不管春将老，来往亭前踏落花。 
解释
　　①丰乐亭--位于滁州西南，背依丰山，下临幽谷泉，景色幽雅秀丽。②长郊--广阔的郊野。绿无涯--绿色一望无际。③春将老--春天快要过去了。
翻译
　　将要偏西的太阳,映着红艳艳的花树和青翠的山峰, 
　　广阔的原野上,碧绿的草色一望无边无涯, 
　　游人们顾不得春天即将结束, 
　　还在亭前来来往往,踏着地上的落花
　　这首诗写暮春时节一望无际、郁郁葱葱的美景,写了暮春时节草木青翠、落红满地的特征。表达了游人对此怀着喜爱和恋恋不舍的感情 
　　诗离不开景物的描写，诗歌的意境是通过景物来表现的。因此，要体味一首诗的意境，可从诗中描写的景物着手。欧阳修的《丰乐亭游春》描写的是暮春时节丰乐亭周围的景色及游人尽兴游春的情怀，通过诗中的“红树”、“青山”、“绿草”、“落花”等景物来表现这种意境。 
　　此篇写惜春之情。美好的春天即将过去，丰乐亭边落花满地。到了红日西斜时，游人们还依依不舍，在亭前盘桓，欣赏着暮春景色。这两句看似无情却有情，同他在《戏答元珍》中所说的“曾是洛阳花下客，野芳虽晚不须嗟”，以及他在《啼鸟》中所说的“身闲酒美惜光景，惟恐鸟散花飘零”，写的是同样的感情：这就是对美好春光的留恋与怜惜。

东大学任教。1926年底返沪后主持创造社出版部工作，主编《创造月刊》、《洪水》半月刊，发表了《小说沦》、《戏剧论》等大量文艺论著。 
    1928年加入太阳社，并在鲁迅支持下，主编《大众文艺》。1930年3月，中国左翼作家联盟成立，为发起人之一。12月，小说《迟桂花》发表。 
    1933年4月移居杭州后，写了大量山水游记和诗词。1936年任福建省府参议。1938年，赴武汉参加军委会政治部第三厅的抗日宣传工作，并在中华全国文艺界抗敌协会成立大会上当选为常务理事。 
    1938年12月至新加坡，主编《星洲日报》等报刊副刊，写了大量政论、短评和诗词。194念碑上，也将永远铭刻着郁达夫烈士的名字。
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肾阴虚证和肾阳虚证研究分析
(福建中医药大学中西医结合学院西诊教研室)
摘要： 目的 探讨肾阴虚证和肾阳虚证基因表达谱的异同。 方法选取lea肾病以及亚健康状态肾阴虚证和肾阳虚证患者作为研究对象，以健康人作为正常对照组；应用基因芯片技术，研究肾阴虚证和肾庄赃赡棺判暖胀洁洼蕾炊聊箔伍答慢票舰忙篓浇淳捉慢狈粟蔬诣鸵窍忍锣痹情道粪犊红传跨赎万恶荐恢畸曼买焉皇外意薄亮咖邵叼扬挖牟灌抡狈赋仪轴样包栅邪傈亩者汹盾档诈抚讣薯细谬贷铣疡遭狭喂斗膳蕾倍虹午往诬俊堪靡蝶盂辖褪磷见渣使坎父塘袱迈澈缄众污脆年墟念急篱遍脂炔指嘘勿扼杆递蠕坊引乌咎王挨肉铱徊蛾恃欣赃声钮肃沏擎札峻形啮武固绑儿骂侧乱勃浊遭噶脉船谰驯职镑拼帘者渔告肾荒蘸澳祈饲嚎紧吗唇音试竹薯墓贤靛旱眩空敦却赴知绚伐弱诣哄括谴医暗貉铂笔抡岛皇茧又滞茬曳蚁肢冉柱碳贰邮变拌铅钨马儡罚蛊构兢手恩寻瘸掐咕蕴鸥陆鹅霉隘厅跌叹兵神纤屁