GB∕T 40185-2021 牙膏中5种氯铵类抗菌剂的检测方法 高效液相色谱法.pdf

ICS 71.040.40 Y 43 中华人民共和国国家标准GB/T 40185-2021 牙膏中5种氯银类抗菌剂的检测方法高效液相色谱法Determination of 5 kinds of ammonium chloride antibacterial agents in toothpaste-一High performance Iiquid chromatography method 2021-05-21发布国家市场监督管理总局申+国家标准化管理委员会保W2021-12-01实施目IJ1=1 本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准由中国轻工业联合会提出。本标准由全国口腔护理用品标准化技术委员会CSAC/TC492)归口。GB/T 40185-2021 本标准起草单位:江苏省产品质量监督检验研究院、南京大学、江苏省食品药品监督检验研究院、昆山市产品质量监督检验所。本标准主要起草人:蔡晶、王峰、施劲松、乔俊琴、邱霞琴、朱于宏、张征、韦兰春、刘小兰、练鸿振、王莉、张晓强、洪华。I 1 范围牙膏中5种氯镀类抗菌剂的检测方法高效液丰目色谱法GB/T 40185-2021 本标准规定了牙膏中氯镀类抗菌剂劳拉氯馁、节索氯饭、西口比氯镜、米他氯馁、西他氯伎含量的高效液相色谱(HPLC)测定方法。本标准适用于牙膏中5种氯锻类抗菌剂含量的测定。本标准的方法检出限为0.075g/kg(劳拉氯镜、节索氯镀),0.012 5 g/kg(西 毗氯镜、米他氯镀)和0.025 g/kg(西他氯镣)。2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/ T 6682-2008 分析实验室用水规格和试验方法3 原理样品经过水和乙醇超声提取、过滤后，以高效液相色谱法进行分离，紫外测定，外标法定量。4 试剂和标准物质除非另有说明，在分析中仅适用确认为分析纯的试剂和水为GB/T6682-2008规定的一级水。4.1 乙睛:色谱纯。4.2 无水乙醇。4.3 高氯酸。4.4 劳拉氯镜、节索氯镜、西口比氯镜、米他氯锁和西他氯镀(标准品):纯度二三98%。5 仪器设备5.1 高效液相色谱仪，配备二极管阵列检测器。5.2 超声波清洗器。5.3 涡旋振荡器。5.4 分析天平(感量0.0001 g)。5.5 0.45m有机系样品滤膜。6 分析步骤6.1 试样预处理称取样品1g，精确至0.001g，置于25mL容量瓶中，加入10mL水，超声提取20min后，加入10mL GB/T 40185-2021 无水乙醇(4.2)超声20min，待样品冷却后用乙醇定容至刻度，混匀。取部分上清液离心后，经0.45m滤膜过滤，滤液作为待测样液，备用。6.2 标准溶液配制准确称取劳拉氯债、节索氯镀、西口比氯镇、米他氯镣和西他氯镀标准品各0.05g，精确至0.0001 g, 加人25mL乙醇超声溶解，待完全溶解后用水定容至50mL此溶液标准品含量为1mg/mL，作为标准储备液。取标准储备液，用乙醇:水=1: 1稀释成浓度为0.2mg扩/mL，O.lm丑19/m丑lL，O.O仍5mg/mL，O.O2m丑19/m丑lL，0.0川1m19/m丑lL，0.005m丑1咯览g，包/I0.0O03 mg/mL的标准工作注珞5液备用。6.3 测定6.3.1 液相色谱参考条件液相色谱参考条件如下:a) 色谱柱:CN柱(150X4.6mm，5m)。b) 流动相:乙睛(A)+0.1% HCI04水溶液(1L水中加入1mL HCIO ) (B)，采用等度洗脱:A/ B= 40 : 60(体积比)。c) 流速:1.0 mL/min。d) 进样量:10L。e) 柱温:300C。f) 检测波长:215 nm(劳拉氯锁、米他氯锁和西他氯钱D、225nm(节索氯镀)、260nm(西口比氯镀)。6.3.2 标准工伟曲线绘制按照液相色谱条件(6.3.1)进行测定，劳拉氯锁和卡索氯镜的线性范围为0.001mg/mL 0.2 mg/mL，西口比氯债和米他氯钱的线性范围为0.0015 mg/mL0.2 mg/mL，西他氯钱的线性范围为0.003 mg/mL0.2 mg/mLo 5种混合标准物质液相色谱图参见附录A的图A.1图A.3。6.3.3 定量分析待切i!IJ样液按照液相色谱条件(6.3.1)进行测定，以峰面积与标准系列比较进行定量，如试样液响应值超出标准系列响应值，则需将试样稀释适宜倍数后进样。6.3.4 定性确证以标准溶液中被测组分的保留时间为依据进行初步定性，测定过程中如果试样液出现阳性结果，应与标准品的紫外吸收光谱对比，进行定性确证。6.4 空白试验除不称取样品外，均按上述操作步骤进行。7 分析结果的表述劳拉氯镜、节索氯镜、西口比氯镜、米他氯锁和西他氯镑的含量按式(1)进行计算。2 GB/T 40185-2021 nu-nv-0一。-n 1i-nu -1 V一-m h-X . ( 1 ) 式中:X 劳拉氯锻、=F索氯镜、西口比氯镜、米他氯债和西他氯锻的含量，单位为克每千克(g/kg);一二从标准工作曲线上得到的被测组分溶液质量浓度，单位为毫克每毫升(mg/mL); V一一样品定容体积，单位为毫升(mL); m一一试样的质量，单位为克(g)。试验结果以平行测定结果的算数平均值为准。8 精密度在重复条件下获得的两次独立测定结果的绝对值不得超过算术平均值的10%。9 回收率按本测定方法所确定的实验条件，劳拉氯钱、卡索氯钱的添加浓度为0.001mg/mL、0.002mg/mL、0.005 mg/mL.西毗氯镣、米他氯镀的添加浓度为0.0015 mg/mL、0.003mg/mL、0.0075 mg/mL，西他氯钱的添加浓度为0.003mg/mL、0.006mg/mL、0.015mg/mL，每个浓度添加三次测定，回收率为85%1l5% .相对标准偏差小于10%。GB/T 40185-2021 附录A(资料性附录)劳拉氯银、韦索氯银、西毗氯银、米他氯银、西他氯按标准物质液中目色i普图芳拉氯镜、米他氯接和西他氯镣标准物质液相色谱图参见图A.lo16 12 。二吕14.31 22.14 O 4 。10 15 20 25 30 35 40 t/min 说明:1 劳拉氯钱;2 米他氯钱;3 西他氯馁。图A.1劳拉氯银、米他氯接和西他氯按标准物质液相色谱图卡索氯镀标准物质液相色谱图参见图A.2。16 12 15.36 00 2国4 。10 15 20 25 30 35 40 t/min 说明:l-=F索氯馁。图A.2:!苦索氯按标准物质液相色i昔图4 西H比氯镀标准物质液相色谱图参见图A.3o说明:1一一西口比氯钱。16 12 nxu pE4 。18. 16 GB/T 40185-2021 o 10 15 20 25 30 35 40 t/min 图A.3西毗氯按标准物质液相色谱图