HJ 704-2014 土壤 有效磷的测定 碳酸氢钠浸提-钼锑抗分光光度法（发布稿）.pdf

中华人民共和国国家环境保护标准 中华人民共和国国家环境保护标准 HJ 704-2014 土壤 有效磷的测定 碳酸氢钠浸提-钼锑抗分光光度法 Soil qualityDetermination of available phosphorusSodium hydrogen carbonate solution-Mo-Sb anti spectrophotometric method （发布稿） 本电子版为发布稿。请以中国环境科学出版社出版的正式标准文本为准。 2014-09-15 发布 2014-12-01 实施 发 布 环 境 保 护 部 环 境 保 护 部 i 目 次 前 言 .ii 1 适用范围 .1 2 规范性引用文件 .1 3 术语和定义 .1 4 方法原理 .1 5 干扰和消除 .1 6 试剂和材料 .1 7 仪器和设备 .2 8 样品 .3 9 分析步骤 .3 10 结果计算 .4 11 精密度和准确度 .4 12 质量保证和质量控制.5 13 注意事项 .5 附录 A （资料性附录） 平行样测定允许差范围.6 ii前 言 为贯彻中华人民共和国环境保护法 ，保护环境，保障人体健康，规范土壤中有效磷的测定方法，制定本标准。 本标准规定了测定土壤中有效磷的碳酸氢钠浸提-钼锑抗分光光度法。 本标准为首次发布。 本标准的附录 A 为资料性附录。 本标准由环境保护部科技标准司组织制订。 本标准主要起草单位：南通市环境监测中心站。 本标准验证单位：江苏省环境监测中心、扬州市环境监测中心站、镇江市环境监测中心站、南通市农产品质量检验测试中心、苏州市环境监测中心站和南通市通州区环境监测站。 本标准环境保护部 201年月日批准。 本标准自 201年月日起实施。 本标准由环境保护部解释。 1 土壤 有效磷的测定 碳酸氢钠浸提-钼锑抗分光光度法 1 适用范围 本标准规定了测定土壤中有效磷的碳酸氢钠浸提-钼锑抗分光光度法。 本标准适用于石灰性和中性土壤中有效磷的测定。 当取样量为 2.50 g，使用 50ml 碳酸氢钠溶液浸提，采用 10 mm 比色皿时，本方法检出限为 0.5 mg/kg，测定下限为 2.0 mg/kg。 2 规范性引用文件 本标准内容引用了下列文件或其中的条款。凡是不注明日期的引用文件，其有效版本适用于本标准。 HJ/T166 土壤环境监测技术规范 HJ 613 土壤 干物质和水分的测定 重量法 NY/T 395-2012 农田土壤环境质量监测技术规范 3 术语和定义 土壤有效磷 available phosphorous 缩写为 A-P，也称为速效磷，在植物生长期内能够被植物根系吸收的土壤磷，即在本标准规定的条件下浸提出来土壤溶液中的磷、弱吸附态磷、交换性磷和易溶性固体磷酸盐等。 4 方法原理 用 0.5 mol/L 碳酸氢钠溶液（pH=8.5）浸提土壤中的有效磷。浸提液中的磷与钼锑抗显色剂反应生成磷钼蓝，在波长 880 nm 处测量吸光度。在一定浓度范围内，磷的含量与吸光度值符合朗伯-比尔定律。 5 干扰和消除 当浸提液中砷含量大于 2 mg/L 有干扰，可用硫代硫酸钠除去；硫化钠含量大于 2 mg/L 有干扰，在酸性条件下通氮气可以除去；六价铬大于 50 mg/L 有干扰，用亚硫酸钠除去；铁含量为 20 mg/L，使结果偏低 5%。 6 试剂和材料 除非另有说明，分析时均使用符合国家标准的分析纯化学试剂。实验用水为新制备的去离子水或蒸馏水。 6.1 硫酸：（H2SO4）=1.84 g/ml。 6.2 硝酸：（HNO3）=1.51 g/ml。 6.3 冰乙酸：（C2H4O2）= 1.049 g/ml。 6.4 磷酸二氢钾（KH2PO4） ：优级纯。 取适量磷酸二氢钾于称量瓶中，置于 105烘干 2h，干燥箱内冷却，备用。 2 6.5 氢氧化钠溶液：（NaOH）=10。 称取 10 g 氢氧化钠溶于水中，用水稀释至 100 ml，贮于聚乙烯瓶中。 6.6 硫酸溶液：c（1/2 H2SO4）=2 mol/L。 于800 ml水中，在不断搅拌下缓慢加入55 ml硫酸（6.1） ，待溶液冷却后，加水至1000 ml，混匀。 6.7 硝酸溶液：15（V/V） 。 用硝酸（6.2）配制。 6.8 浸提剂：c（NaHCO3）=0.5 mol/L。 称取 42.0 g 碳酸氢钠溶于约 800 ml 水中，加水稀释至约 990 ml，用氢氧化钠溶液（6.5）调节至 pH=8.5（用 pH 计测定），加水定容至 1L，温度控制在 251。贮存于聚乙烯瓶中，该溶液应在 4h 内使用。 注 1：浸提剂温度需控制在 251。具体控制时，最好有 1 小间恒温室，冬季除室温要维持 25外，还需将去离子水事先加热至 2627后再进行配制。 6.9 酒石酸锑钾溶液：（K（SbO）C4H4O61/2H2O）=5 g/L。 称取 0.5g 酒石酸锑钾溶于 100 ml 水中。 6.10 钼酸盐溶液 量取 153ml 硫酸 （6.1） 缓慢注入约 400 ml 水中， 搅匀， 冷却。 另取 10.0g 钼酸铵溶于 300ml约 60的水中，冷却。然后将该硫酸溶液缓慢注入钼酸铵溶液中，搅匀，再加入 100 ml 酒石酸锑钾溶液（6.9），最后用水定容至 1L。该溶液中含 10g/L 钼酸铵和 2.75mol/L 硫酸。该溶液贮存于棕色瓶中，可保存一年。 6.11 抗坏血酸溶液：（C6H8O6）=10%。 称取10 g抗坏血酸溶于水中， 加入0.2 g乙二胺四乙酸二钠EDTA和8 ml冰乙酸 （6.3） ，加水定容至 100ml。该溶液贮存于棕色试剂瓶中，在 4下可稳定 3 个月。如颜色变黄，则弃去重配。 6.12 磷标准贮备溶液：（P）=100 mg/L。 称取 0.4394g 磷酸二氢钾 （6.4） 溶于约 200 ml 水中， 加入 5ml 硫酸 （6.1） ， 然后移至 1000ml容量瓶中，加水定容，混匀。该溶液贮存于棕色试剂瓶中，有效期为 1 年。或直接购买市售有证标准物质。 6.13 磷标准使用液：（P）=5.00 mg/L。 量取 5.00 ml 磷标准贮备溶液（6.12）于 100 ml 容量瓶中，用浸提剂（6.8）稀释至刻度。临用现配。 6.14 指示剂：2，4-二硝基酚或 2，6-二硝基酚(C6H4N2O5)，=0.2。 称取 0.2g 2，4-二硝基酚或 2，6-二硝基酚溶于 100 ml 水中，该溶液贮存于玻璃瓶中。 7 仪器和设备 实验中的玻璃器皿需先用无磷洗涤剂洗净，再用硝酸溶液（6.7）浸泡 24h，使用前再依次用自来水和去离子水洗净。 3 7.1 分光光度计：配备 10mm 比色皿。 7.2 恒温往复振荡器：频率可控制在 150250r/min。 7.3 土壤样品粉碎设备：粉碎机、玛瑙研钵。 7.4 分析天平：精度为 0.0001g。 7.5 土壤筛：孔径 1mm 或 20 目尼龙筛。 7.6 具塞锥形瓶：150ml。 7.7 一般实验室常用仪器和设备。 7.8 滤纸：经检验不含磷的滤纸。 8 样品 8.1 采集与保存 按 HJ/T166 的相关规定进行采集和保存土壤样品。 8.2 试样的制备 试样的制备按 NY/T 395-2012农田土壤环境质量监测技术规范进行土壤处理和制备。 8.3 干物质含量的测定 准确称取适量试样（8.2），参照 HJ 613 测定样品干物质的含量。 9 分析步骤 9.1 试料的制备 称取 2.50g 试样（8.2） ，置于干燥的 150ml 具塞锥形瓶中，加入 50.0ml 浸提剂（6.8） ，塞紧，置于恒温往复振荡器上，在 251下以 180200 r/min 的振荡频率振荡 301min，立即用无磷滤纸（7.8）过滤，滤液应当天分析。 注 2：浸提时最好有 1 小间恒温室，冬季应先开启空调，待室温达到 25，且恒温往复振荡器内温度达到 25后，再打开振荡器进行振荡计时。 9.2 校准 分别量取 0，1.00，2.00，3.00，4.00，5.00，6.00ml 磷标准使用液（6.13）于 7 个 50ml容量瓶中， 用浸提剂 （6.8） 加至 10.0ml。 分别加水至 1520ml 左右， 再加入 1 滴指示剂 （6.14） ，然后逐滴加入硫酸溶液（6.6）调至溶液近无色，加入 0.75ml 抗坏血酸溶液（6.11） ，混匀，30秒后加 5ml 钼酸盐溶液（6.10） ，用水定容至 50ml，混匀。此标准系列中磷浓度依次为 0.00，0.10，0.20，0.30，0.40，0.50，0.60mg/L。 注 3：上述操作过程中，会有 CO2气泡产生，应缓慢摇动容量瓶，勿使气泡溢出瓶口。 将上述容量瓶置于室温下放置30min （若室温低于20， 可在2530水浴中放置30min） 。用 10mm 比色皿在 880nm 波长处，室温高于 20的环境条件下比色，以去离子水为参比，分别测量吸光度。以试剂空白校正吸光度为纵坐标，对应的磷浓度（mg/L）为横坐标，绘制校准曲线。 9.3 测定 量取 10.0ml 试液（9.1）于干燥的 50ml 容量瓶中。然后按照与校准（9.2）相同操作步骤进行显色和测量。 注 4：试料中的含磷量较高时，可适当减少试料体积，用浸提剂（6.8）稀释至 10.0ml。 4 9.4 实验室空白试验 不加入土壤试样，按照 9.1、9.3 相同操作步骤进行显色和测量。 10 结果计算与表示 10.1 结果计算 土壤样品中有效磷的含量（mg/kg） ，按照公式（1）进行计算。 dmwmVbVaAA=21050)( （1） 式中：土壤样品中有效磷的含量，mg/kg； A试料吸光度值； A0空白试验的吸光度值； a校正曲线的截距； V1试料体积，50ml； 50显色时定容体积，ml； b校准曲线的斜率； V2吸取试料体积，ml； m试样量，2.50g； dmw土壤的干物质含量（质量分数） ，%。 10.2 结果表示 测定结果小数位数与方法检出限保持一致，最多保留三位有效数字。 11 精密度和准确度 11.1 精密度 6 家实验室分别对土壤有效磷含量为 4.6 mg/kg，13.8 mg/kg，23.3 mg/kg 的统一样品进行了测定，实验室内相对标准偏差分别为：2.5%4.3%、1.1%5.2%、0.7%1.9%；实验室间相对标准偏差分别为：3.7%、3.2%、1.0%；重复性限为：0.2 mg/kg、0.2 mg/kg、0.2 mg/kg；再现性限为：0.5 mg/kg、1.2 mg/kg、0.7 mg/kg。 11.2 准确度 6 家实验室分别对土壤有效磷含量为（13.82.3）mg/kg 和（23.31.4）mg/kg 的有证标准物质进行了测定，相对误差分别为：-10.0%-1.4%、-4.7%-2.1%；相对误差最终值分别为：（-4.85.9）%、 （-3.72.0）%。 5 12 质量保证和质量控制 12.1 校准曲线的相关系数应大于等于 0.999。 12.2 每批样品应做两个空白试验，其测试结果应低于检测下限。 12.3 每批样品应至少测定 10%的平行双样，样品量少于 10 个时，应至少测定一个平行双样。平行样测定结果允许差应满足一定的要求（见附录 A） 。 12.4 每批样品应分析一个有证标准物质，其测定值应在保证值范围内。 12.5 每批样品需做校准曲线。 13 注意事项 13.1 所有的采样仪器和设备，分析仪器和设备经处理后都应不含磷。试验中使用的玻璃器皿可用（1+5）盐酸溶液浸泡 2h，或用不含磷的洗涤剂清洗。比色皿用后应以稀硝酸或铬酸洗液浸泡片刻，以除去吸附的钼蓝有色物质。 13.2 由于浸提出来的有效磷受浸提液浓度、水土比例、振荡时间、温度等的影响，建议在有温度控制的实验室完成。 6 附录 A （资料性附录） 平行样测定结果允许差范围 有效磷含量（mg/kg） 允许差范围 小于等于 10 mg/kg 3mg/kg（绝对允许差） 大于 10 mg/kg，小于等于 25 mg/kg 40%（相对允许差） 大于 25 mg/kg，小于等于 100 mg/kg 15mg /kg（绝对允许差） 大于 100 mg/kg 25%（相对允许差）