岛津液相色谱日常维护.ppt

岛津液相色谱仪维护教材HPLC简易流程图输输液液泵泵进样进样器器 色色谱谱柱柱柱温箱柱温箱检测检测器器储储液瓶液瓶数据数据处处理系理系统统脱气机脱气机管线选择管线选择材料 不锈钢 特氟隆(Teflon)聚醚醚酮(PEEK)尺寸 不锈钢材质管路PEEK材质管路 0.1 mm I.D.x 1.6 mm O.D.0.3 mm I.D.x 1.6 mm O.D.0.5 mm I.D.x 1.6 mm O.D.0.8 mm I.D.x 1.6 mm O.D.0.13 mm I.D.x 1.6 mm O.D.0.25 mm I.D.x 1.6 mm O.D.管线材料管线材料不锈钢(可用于所有连接)能承受几百MPa 压力酸性或高浓度盐环境中易腐蚀酸性或高浓度盐环境中易腐蚀(尤其在尤其在pHpH小于小于2 2时时)PEEK(可用于所有连接)能承受高达 25 MPa压力可在整个pH范围(pH 1-14)内使用 不适用不适用高溶解性溶剂如高溶解性溶剂如三氯甲烷三氯甲烷、四氢呋喃四氢呋喃等等Teflon (用于柱后阻尼管、反应管和排液管)化学惰性大 仅仅能承受能承受 0.5 0.5 MPaMPa压力压力使用高溶解性溶剂如氯仿、THFTHF等等当ID.0.25 mm或0.13 mm、氯仿、THF 25%以下，10 MPa以下的使用条件时，在实际应用中一般没有问题。特氟隆材质管路作为废液管的时候，请勿随意增长或缩短其长度。增长管路，会提高背压，有损坏检测器的危险；缩短管路，容易使得检测器内产生气泡。管线材料管线材料接头接头不锈钢接头不锈钢接头/垫圈垫圈 主要用于输液泵、进样器的管路连接能承受 40 MPa以上的压力一旦固定，垫圈不可再动PEEKPEEK接头接头 主要用于色谱柱、检测器的管路连接易于安装能承受 25 MPa的压力容易产生死体积不锈钢接头垫圈PEEK接头死体积产生原因：由于管路连接不好产生的额外体积死体积可能会引起分离度下降和重现性变差等问题好的连接差的连接管线公螺母死体积死体积色谱柱溶剂前处理溶剂前处理-过滤过滤过滤：过滤：0.45 0.45 mm或更小孔径滤膜或更小孔径滤膜目的：除去溶剂中的微小颗粒，避免堵塞色谱柱，尤其是使用无机盐配制的缓冲液。滤膜类型：聚四氟乙烯滤膜：适用所有溶剂，酸和盐。醋酸纤维滤膜：不适用有机溶剂，适合水基溶剂。尼龙66滤膜：适用绝大多数的有机溶剂和水溶液，可用于强酸，不适用的二甲基甲酰胺。再生纤维素滤膜：蛋白吸收低，同样适用水溶性样品和有机溶剂。溶剂前处理溶剂前处理-脱气脱气脱气：除去流动相中溶解或因混合而产生的气泡 气泡对测定的影响：1）泵中气泡使液流波动，改变保留时间和峰面积2）柱中气泡使流动相绕流，峰变形3）检测器中的气泡产生基线波动常用脱气方法常用脱气方法超声脱气减压脱气在线脱气 脱气机脱气机-在线真空脱气在线真空脱气组成：脱气机主要由脱气管、真空室和真空泵组成。真空室内的脱气管由特殊的透析材料制成，当溶剂流经脱气管时，溶解在溶剂中的气体穿过管壁被脱出。到泵储液瓶脱气管真空室真空泵DGUDGU常见故障常见故障脱气机亮错误红灯、真空度达不到，真空泵隔膜脏或者磨损！正常状态报警状态大量流动相从废气口溢出（真空脱气腔漏）LC-20ATLC-20AT串联式柱塞往复泵串联式柱塞往复泵主主泵头泵头 副副泵头泵头单向阀LC-20ADLC-20AD并联式微体积柱塞往复泵并联式微体积柱塞往复泵选配件支架进口单向阀出口单向阀进液口泵头固定座泵头 泵头泵头 泵头泵头单单向向阀阀压力传感器LC-20ADLC-20ABLC-20AB柱塞往复泵结构示意图柱塞往复泵结构示意图输液泵常见故障输液泵常见故障一一.压力波动压力波动 1.流路中有气泡，导致压力波动，充分排气。2.不锈钢吸滤头脏，清洗超声。3.系统漏液 4.单向阀异常、清洗超声单向阀。（有缓冲盐的情况下先使用超纯水超声、再使用异丙醇超，最后用水超声。）5.柱塞杆密封圈损坏，柱塞杆磨损。（更换）二二.系统压力高系统压力高 1.在线过滤器堵塞。清洗超声或者更换。三、三、压力显示为压力显示为0 0吸滤头吸滤头材料：不锈钢烧结(或陶瓷），孔径 10 m功能：防止较大固体不溶物进入液相色谱系统日常维护：定期使用异丙醇（或5稀硝酸）清洗故障：吸滤头堵塞现象：管路中不断有气泡生成措施：用异丙醇（或5稀硝酸）浸泡并进行超声波浴清洗，再用蒸馏水清洗至中性单向阀故障处理单向阀故障处理故障：宝石球或球座受污导致密封不好表现：系统压力波动大措施：1）打开排液阀，用泵输送或用注射针打入异丙醇进行清洗2）拆下单向阀，放入异丙醇中，超声波浴清洗注意：超声波清洗时开口端向上放置。注意：超声波清洗时开口端向上放置。柱塞密封圈柱塞密封圈 柱塞密封圈LC-20ADLC-20ABLC-10ADvp 部件号228-35146柱塞密封圈LC-20ATLC-10ATvp部件号：228-35145取下和安装柱塞密封圈工具柱塞密封圈故障处理柱塞密封圈故障处理故障：密封圈磨损导致密封不良现象：系统压力波动大或漏液措施：更换密封圈注意：拆卸泵头前，必须将柱塞杆复位（仪器面板上的P-SET界面）流动相泵头清洗管路柱塞杆密封圈线路过滤器线路过滤器故障：堵塞现象：系统压力偏高判断依据：关闭排液阀，断开出口管路，设定流速1mL/min，如压力0.3 MPa，可以判定为线路过滤器堵塞。措施：以异丙醇(或5稀硝酸)为清洗剂，超声波浴清洗。再用水洗至中性。排液阀压力传感器线路过滤器流动相混合器体积混合器体积混合器不同体积的连接方法混合器故障处理混合器故障处理常见故障：堵塞 混合器堵塞往往是由于混合器过滤组件堵塞引起的。处理方法：按图中结构卸下过滤组件，5%稀硝酸或其他溶剂超声波浴清洗或更换新的组件。标准或半微量混合器用部件号：228-18872-93LC-20A LC-20A 日常维护日常维护 输液泵输液泵LC-20AD并联双微柱塞方式高性能输液泵LC-20AT串联双柱塞输液泵 LC-20AB并联双微柱塞高压梯度输液泵 送液单元送液单元项目频率备注检查或更换LINE FILTER6 MonthsWater 1ml/min，0.3Mpa检查或更换PLUNGER&SEAL1 YearA T检查或更换Check Valve1 YearAT检查或更换Diaphragm2 YearsATBearing 加油3 Years泵常用部件清单泵常用部件清单1.柱塞杆密封圈 228-351462.柱塞杆 228-35281-953.在线过滤器 228-35871-964.隔膜片 228-32784-91LC-20ADLC-20ADLC-20ATLC-20AT1.柱塞杆密封圈 228-351452.密封圈内衬垫 228-427003.柱塞杆组件 228-35009-934.压力传感器 228-45552-99进样系统进样系统手动进样器自动进样器进样器常见故障进样器常见故障一、手动进样器进样口漏液、重复性差一、手动进样器进样口漏液、重复性差 更换转子密封圈（670-12098-51）二、自动进样器进样口漏液二、自动进样器进样口漏液更换进样垫(228-42325-01)或者高压阀转子。定量环裂或接头故障。进样针位置不准。三、自动进样器重复性差三、自动进样器重复性差选择正确清洗液、充分purge、清洗高压阀转子，必要时更换高压阀转子。四、系统压力高四、系统压力高清洗高压阀转子及定子。五、进样量不准五、进样量不准计量泵Plunger Seal不良。进样流路堵塞或有气泡。HPV/LPV 故障进样器常见故障进样器常见故障项目频率备注检查或更换Needle Seal1 Year约40000次进样检查或更换LPV Rotor1 Year约60000次进样检查或更换HPV Rotor3 Years约100000次进样检查或更换HPV/LPV Stator6 Years更换Sample Loop or Needle1 Year约40000次进样检查或更换计量泵Seal/Plunger2 Years加油润滑2 Year所有传动部件LC-20A LC-20A 维护维护 自动进样器自动进样器7725i7725i进样器常用部件清单进样器常用部件清单1.20ul定量环 228-32211-14 2.清洗白头 6020-610543.转子密封圈 670-12098-51 4.进样针头 670-12098-14 SIL-20ASIL-20A常用部件清单常用部件清单1.进样针 228-41024-932.进样针垫 228-42325-013.样品环，100uL 228-45402-95 4.高压阀转子 228-41310-92 5.高压阀定子组件 228-45408-91柱温箱柱温箱CTO-20A/AC 空气强制循环式CTO-16模块加热式CTO-30ACTO-10ASVP柱温柱温箱作用箱作用 分析结果重现性好 提高柱效 降低柱压 常见故障LEAK ERROR。漏液或LEAK THR设置低温度无法控制确定设置范围(485)CTO-20A(室温1085)CTO-20AC(室温1085)检测器类型检测器类型1.紫外可见光检测器 SPD-20A/SPD-20AV2.二极管阵列检测器 SPD-M20A3.示差折光检测器 RID-10A/RID-20A4.荧光检测器 RF-20A/RF-20AXS5.蒸发光散射检测器 ELSD 检测器常见故障检测器常见故障一一.漏液漏液1.检测池Lens裂或未装2.检测池堵塞二二.基线波动、噪音大基线波动、噪音大1.室温波动大、避免空调对仪器直吹2.流动相污染3.泵压力脉动引起4.流通池有气泡、脏5.D2灯能量低/光路老化三、检测器线性差（杂质检出异常）三、检测器线性差（杂质检出异常）1.D2灯能量低2.光路老化。SPD-20ASPD-20A氘灯能量氘灯能量 判断氘灯能量：设定220nm波长，FUNC-Mointor-Enter.检查Ref EN(参比池能量)，如能量低于800，需考虑更换氘灯。性性 能能 判判 断断新的时候ABSMPL EN800100100REF EN900800150A:池子、透镜污染B:灯老化、光路老化紫外检测器故障判断紫外检测器故障判断更换氘灯更换氘灯 判断氘灯能量：设定220 nm波长，检查参比池能量，如能量低于800mV，需考虑更换氘灯。部件号：228-34016-02SPD-10A/SPD-10AvpSPD-20A/AV用部件号：部件号：228-34016SPD-M10Avp/SPD-M20A用用更换氘灯SPD-20A/20AVSPD-20A/20AV检测池结构检测池结构紫外检测器检测紫外检测器检测池清洗池清洗故障：样品池受污表现：样品池和参比池能量相差较大检查方法：设定250 nm波长，通甲醇或水，查看SMPL EN 和REF EN，如两者相差较大，则样品池受污。措施：用针筒注入异丙醇，清洗样品池；如污染严重，拆开样品池，将透镜等放入异丙醇中清洗。LC-20A LC-20A 日常维护日常维护 检测器检测器SPD-20A标配UV-VIS(D2灯)检测器SPD-20AVUV-VIS检测器D2、W灯 同时点灯功能SPD-M20A高灵敏度光电二级管阵列检测器项目频率备注更换Cell Gasket 20A/20AV M20A1 Year每次拆洗时必须更换检查，拆洗Flow Cell 20A/20AV M20A2 Year更换D2 Lamp 20A/20AV M20A2 Year约2000小时更换W Lamp 20A/20AV M20A2 Year约2000小时紫外检测器常用部件清单紫外检测器常用部件清单1.氘灯 228-34016-02 2.钨灯 670-14602 （仅（仅SPD-20AVSPD-20AV）3.池垫片 228-35097-95 4.透镜 228-14572 5.池窗 228-18058 6.M1镜 228-23037-957.M2镜 228-23014-918.M3镜 228-23041-939.光栅 228-15257-95二极管阵列检测器常用部件清单1.氘灯 228-340162.钨灯 228-34410-913.池垫片 228-35097-034.透镜 228-145725.池窗 228-18058色谱柱常见故障分类柱压过高不同色谱柱有差异不同系统有差异不同色谱条件有差异柱效低重复性差回收率低甚至不出峰柱压过高 解决方法解决方法 1.正向冲洗色谱柱 2.反向冲洗色谱柱 3.超声清洗色谱柱筛板 日常使用注意点 1.过滤流动相和样品 2.恰当的样品前处理方法 3.使用保护柱 4.注意冲洗系统 原因原因微粒堵塞微粒堵塞不可逆吸附不可逆吸附细菌生长细菌生长柱效低 解决方法解决方法1.正向冲洗色谱柱2.反向冲洗色谱柱3.超声清洗色谱柱筛板4.柱内死体积增加，需更换新柱 日常使用注意点日常使用注意点 1.定期冲洗色谱柱 2.防止机械震动和柱压急剧变化 3.关注色谱柱柱效变化 原因原因色谱柱被污染色谱柱被污染筛板堵塞筛板堵塞柱内死体积增加柱内死体积增加故障（压力升高）确认流程图确认环境温度旋松检测器废液出口接头旋松检测器入口接头确认流速、溶剂比例设置正确设置正确的流速、溶剂比例设置正确的流速、溶剂比例旋松色谱柱出口接头旋松色谱柱入口接头使用柱温箱，设置合适的柱温使用柱温箱，设置合适的柱温出口连接管堵塞，更换出口连接管堵塞，更换/清洗清洗流路（检测池）堵塞，清洗流路（检测池）堵塞，清洗出口连接管堵塞，更换出口连接管堵塞，更换/清洗清洗色谱柱堵塞，清洗色谱柱堵塞，清洗/更换新柱更换新柱压力下降压力下降 故障依旧故障依旧故障（压力升高）确认流程图旋松保护柱/线路过滤器入口接头旋松进样器出口接头旋松进样器入口接头旋松保护柱/线路过滤器出口接头出口连接管堵塞，更换出口连接管堵塞，更换/清洗清洗旋松混合室入口接头旋松泵出口接头保护柱保护柱/过滤器堵塞，清洗过滤器堵塞，清洗/更换更换出口连接管堵塞，更换出口连接管堵塞，更换/清洗清洗进样器进样器/连接管路堵塞，清洗连接管路堵塞，清洗连接管路连接管路/混合室堵塞，清洗混合室堵塞，清洗连接管路堵塞，清洗连接管路堵塞，清洗/更换更换压力下降压力下降 故障依旧故障依旧请联系工程师请联系工程师故障（保留时间重复性差）流程图确认流动相配制过程是否正确确认流动相是否脱气确认是否使用柱温箱确认流速、溶剂比例设置正确设置正确的流速、溶剂比例设置正确的流速、溶剂比例确认泵流速是否稳定确认管路接头是否密封良好按照正确方式重新配制按照正确方式重新配制(pH 值等值等)排除气泡，流动相脱气排除气泡，流动相脱气保持环境温度恒定保持环境温度恒定/使用柱温箱使用柱温箱联系工程师检修设备联系工程师检修设备拧紧接头拧紧接头否否是是故障（保留时间重复性差）流程图确定是否有足够的时间平衡柱子确定色谱柱柱效是否良好是否使用梯度洗脱确认色谱柱是否正确更换正确的色谱柱更换正确的色谱柱梯度延迟时间是否正确设置重新充分平衡色谱柱重新充分平衡色谱柱清洗清洗/更换色谱柱更换色谱柱充分混合流动相充分混合流动相/充分平衡柱子充分平衡柱子设置正确的梯度延时时间设置正确的梯度延时时间否否是是请联系工程师请联系工程师