DB51∕T 2898-2022 规模场猪伪狂犬病净化技术规范.pdf

ICS 65.020.30 CCS B41 DB51 四川省地方标准 DB51/T 28982022 规模场猪伪狂犬病净化技术规范 The technical specification of porcine pseudorabies virus eradication for intensive pig farm 2022 - 05 - 20 发布 2022 - 07 - 01 实施 四川省市场监督管理局 发 布 DB51/T 28982022 I 目次 前言 . II 1 范围 . 1 2 规范性引用文件 . 1 3 术语和定义、缩略语 . 1 术语和定义 . 1 3.1 缩略语 . 2 3.2 4 净化条件 . 2 净化准备工作 . 2 4.1 净化流程 . 2 4.2 5 净化标准 . 5 免疫净化判定标准 . 5 5.1 非免疫净化判定标准 . 5 5.2 附录 A（规范性） 规模场猪伪狂犬病净化维持阶段常规监测方案 . 6 附录 B（规范性） 规模场猪伪狂犬病免疫净化标准抽检要求 . 7 附录 C（规范性） 规模场猪伪狂犬病非免疫净化标准抽检要求 . 8 DB51/T 28982022 II 前言 本文件按照GB/T 1.12020标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则的规定起草。 本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由四川省农业农村厅提出、归口并解释。 本文件起草单位：四川省动物疫病预防控制中心。 本文件主要起草人：梁璐琪、陈斌、李春、张毅、陈冬、裴超信、蔡冬冬、陈弟诗、李淳、邓飞、邢坤、王正义。 本文件首次发布。 DB51/T 28982022 1 规模场猪伪狂犬病净化技术规范 1 范围 本文件规定了规模场猪伪狂犬病净化的术语和定义、净化条件、净化标准。 本文件适用于规模场猪伪狂犬病的净化。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。 其中， 注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 18641-2018 伪狂犬病诊断方法 3 术语和定义、缩略语 术语和定义 3.1 下列术语和定义适用于本文件。 3.1.1 猪伪狂犬病 porcine pseudorabies 由属于疱疹病毒科、疱疹病毒甲亚科、暂定为水痘病毒属的猪伪狂犬病毒（PRV）引起的猪的急性传染病。 注： 猪感染PRV具有年龄差异性，仔猪更容易感染，出现共济失调、抽搐等特征性的神经症状，突然死亡；成年猪主要出现呼吸窘迫或亚临床症状；怀孕母猪出现胎儿吸收、木乃伊胎、流产等。 3.1.2 猪伪狂犬病净化 porcine pseudorabies virus eradication 通过监测、检验检疫、隔离、淘汰等一系列综合措施,在特定区域或场所消灭、清除PRV,达到并维持猪个体无感染和不发病的状态。 3.1.3 猪伪狂犬病毒 gB 抗体 antibody of PRV gB PRV囊膜蛋白gB诱导机体产生的中和抗体。 注： 囊膜蛋白gB是猪伪狂犬病毒中的一种保守蛋白，并且是病毒感染过程中的必需成分，主要参与病毒与宿主细胞膜的融合过程。 3.1.4 猪伪狂犬病毒 gE 抗体 antibody of PRV gE PRV囊膜蛋白gE诱导机体产生的中和抗体。 注： 囊膜蛋白gE是猪伪狂犬病毒中的一种非必需糖蛋白，gE缺失后不会影响病毒在宿主细胞上的增殖。 3.1.5 猪伪狂犬病稳定场 intensive pig farm with stable infective level of PRV 有感染野毒的猪， 但在体内免疫抗体和场内其他综合防控措施的共同作用下， 不表现或只有部分猪表现轻微临床症状的猪场。 DB51/T 28982022 2 注： 临床症状包括高烧、厌食、精神萎靡、消化不良、口水增多、呕吐、战栗、共济失调、咳嗽、打喷嚏、呼吸困难，怀孕母猪出现胎儿吸收、木乃伊胎、流产等。 3.1.6 猪伪狂犬病发病场 intensive pig farm with onset of PRV 有感染野毒的猪，并表现出明显临床症状的猪场。 3.1.7 猪伪狂犬病受威胁场 intensive pig farm threaten by PRV 5公里以内有其他场点暴发猪伪狂犬病的稳定场或PRV进入猪伪狂犬病非免疫净化的猪场。 缩略语 3.2 下列缩略语适用于本文件。 PRV：猪伪狂犬病毒（porcine pseudorabies virus） ELISA：酶联免疫吸附测定（enzyme linked immunosorbent assay） 4 净化条件 净化准备工作 4.1 4.1.1 建立科学、高效的鉴别诊断方法 净化前应使用PRV的gE基因缺失疫苗和gE-ELISA抗体检测试剂盒， 对猪群采血进行gE抗体监测，建立科学、高效的鉴别诊断方法，掌握猪群中 PRV 野毒感染情况。 4.1.2 人、财、物、意识和支持 有效推进净化工作应具备广泛的净化共识，并在人力、财力、物力等方面进行协调和支持。 4.1.3 区域性净化部署 伪狂犬病具有传播迅速的特点， 适合区域净化模式， 制定相应的净化路线， 采取检测、 消毒、 淘汰、无害化处理等综合性防控措施，取得良好的净化效果。 净化流程 4.2 4.2.1 净化前期准备 4.2.1.1 本底调查 按猪群规模的5%10%采样，进行病原和抗体检测。按照GB/T 18641-2018中第5章规定的酶联免疫吸附实验方法检测gE抗体和gB抗体，按照GB/T 18641-2018中第7章规定的聚合酶链式反应方法检测PRV核酸，确定猪群的野毒感染情况和免疫抗体水平。 4.2.1.2 免疫程序 4.2.1.2.1 疫苗要求 所用疫苗均为PRV的gE基因缺失疫苗。 4.2.1.2.2 猪伪狂犬病稳定场 DB51/T 28982022 3 参考下列免疫程序对猪伪狂犬病稳定场进行免疫： 仔猪及生长猪群：0 日龄3 日龄活疫苗滴鼻免疫 1 次，45 日龄、70 日龄75 日龄、100 日龄120 日龄各免疫 1 次，共免疫 4 次。 后备猪：配种前 8 周免 1 次，配种前 4 周加强免疫。 种猪：一年普免 4 次。 4.2.1.2.3 猪伪狂犬病发病场或猪伪狂犬病受威胁场 参考下列免疫程序对猪伪狂犬病发病场或猪伪狂犬病受威胁场进行紧急免疫： 种猪：紧急接种灭活疫苗 2 次，每次间隔 4 周6 周；配种前免疫一次，产前 1 个月加强免疫1 次。 发病猪群或受威胁猪群：紧急接种活疫苗 2 次，每次间隔 4 周。 4.2.2 免疫控制 4.2.2.1 生物安全措施 4.2.2.1.1 引种要求 应从取得种畜禽生产经营许可证和动物防疫条件合格证，且猪伪狂犬病阴性的种猪场引种(包括精液)，引进的种猪必须是gE抗体阴性。 4.2.2.1.2 隔离检疫 种猪入场后应隔离饲养2个月，gE抗体检测为阴性再与本场猪混群。混群后每年检测3次，gE抗体和gB抗体。 4.2.2.1.3 生产养殖模式 采用自繁自养、全进全出、早期断奶、多点式饲养等模式进行养殖。 4.2.2.1.4 人员和车辆管理 应根据养殖规模、生产条件和方式、场区布局，规范饲养人员、技术人员、管理人员的活动，执行从业人员健康年检和进场消毒制度，场外人员严禁入场。应在猪场门口、生产区入口设置雾化消毒室，雾化消毒用1:1000复合醛溶液（10%戊二醛+10%苯扎溴铵）；室内设置洗手池，洗手消毒用0.1%新洁尔灭溶液；地面放置消毒垫，浸润2%4%氢氧化钠溶液。人员出入应在雾化消毒室内消毒3分钟。 运载车辆应按照下列流程，做好清洗、消毒、烘干： 专业泡沫清洁剂喷洒全车浸泡 10 分钟20 分钟，高压冲洗清除所有有机物和泡沫清洁剂； 泡沫消毒液喷洒全车，应覆盖车身、车顶、车头、车轮、车底盘，挂泡 10 分钟以上； 5070烘干车辆。 4.2.2.1.5 其他动物、虫媒控制 场内不得饲养其他动物，严防流浪犬猫入场，并定期开展灭鼠、灭虫工作。 4.2.2.1.6 消毒 选用优质低毒低残留的消毒剂，定期对猪舍、栏圈、用具等可能被污染的场所、设施、设备进行严格消毒。 DB51/T 28982022 4 4.2.2.1.7 临床异常猪的处理 病猪应隔离，死猪、死胎及相关物品应无害化处理。 4.2.2.1.8 饲料管理 按各阶段猪的营养需要，提供均衡、适宜的饲料。在饲料生产、储存、运输和使用过程中，防止饲料发霉、变质、受污染。 4.2.2.2 免疫与监测 参考4.2.1.2的免疫程序，应每半年按猪群规模的5%8%采样，检测gE抗体和gB抗体。当猪群的gE抗体阳性率下降至20%左右后，将gE抗体阳性猪与阴性猪分群饲养。优先淘汰胎次高的gE抗体阳性猪，做好gE抗体阴性猪群的隔离和监测。 4.2.3 免疫净化 4.2.3.1 普检 对全场猪逐头进行gE抗体检测，淘汰全部gE抗体阳性猪，建立阴性猪群。 4.2.3.2 第一次复检 普检后的一个月，按阴性猪群规模的10%抽样，复查gE抗体。 4.2.3.3 第二次复检 若复检无gE抗体阳性猪，则三个月后再次按阴性猪群规模的10%抽样，复查gE抗体。 4.2.3.4 过渡期的监测 若步骤4.2.3.2和步骤4.2.3.3中连续的两次复查均为阴性， 则在六个月和十二个月后分别按阴性猪群规模10%抽样，检测gE抗体和gB抗体，对猪群中免疫抗体水平和野毒感染情况进行监测。 4.2.3.5 监测阳性的处理 步骤4.2.3.2步骤4.2.3.4中任意步骤检出gE抗体阳性，则按照以下程序处理： 若阳性率在 1%5%，则重新对全群逐一进行 gE 抗体检测，剔除全部阳性猪； 若阳性率低于 1%，则重复步骤 4.2.3.2步骤 4.2.3.4。 4.2.4 净化维持 4.2.4.1 常规监测方案 步骤4.2.3.2步骤4.2.3.4均未检出gE抗体阳性的猪场，可转入净化维持阶段。按照附录A的方案开展常规监测。 4.2.4.2 设立哨兵猪 在猪舍放置gB抗体阴性猪，观察是否感染和发病，检测其gE抗体情况，判断哨兵猪所在猪群是否感染野毒。 4.2.4.3 临床异常猪的监测 DB51/T 28982022 5 应每天进行临床巡查，凡出现疑似猪伪狂犬病临床症状的猪应采样检测。血液样品检测gE抗体，组织样品检测PRV核酸。 4.2.4.4 风险评估 针对引种（包括精液）、人员、车辆等有可能传入PRV的途径，应每个季度开展一次风险评估，根据评估结果，提出针对性的防控措施，进一步提高猪场的生物安全水平。 5 净化标准 免疫净化判定标准 5.1 同时满足下列要求，视为达到免疫净化： 生产母猪和后备种猪按照附录 B 的要求抽检，gB 抗体阳性率大于 90%； 种公猪、生产母猪和后备种猪按照附录 B 的要求抽检，gE 抗体检测均为阴性； 所有存栏生猪连续两年以上无临床病例。 非免疫净化判定标准 5.2 同时满足下列要求，视为达到非免疫净化： 种公猪、生产母猪和后备种猪按照附录 C 的要求抽检，gB 抗体检测均为阴性； 种公猪、生产母猪和后备种猪按照附录 C 的要求抽检，gE 抗体检测均为阴性； 所有存栏生猪停止免疫两年以上，且连续两年以上无临床病例。 DB51/T 28982022 6 A A 附录A （规范性） 规模场猪伪狂犬病净化维持阶段常规监测方案 表A.1为规模场猪伪狂犬病净化维持阶段的常规监测方案。 表A.1 规模场猪伪狂犬病净化维持阶段常规监测方案 猪的类别 抽样比例 监测频率 监测项目 监测结果处理 公猪 全群逐一检测 每年检测3次 gE抗体 和gB抗体检测 1）gE抗体阳性的建议转商品猪 2）gB抗体不合格的，加强免疫，连续两次加强免疫不合格的，转商品猪 后备猪 （公猪/母猪） 全群逐一检测 1）4月龄（引种） 2）8月龄（配种前20天） 生产母猪 全群的15%20%抽样 每年检测3次 1）gE抗体结果用于分析猪群是否感染野毒 2）gB抗体结果用于本场免疫方案的调整或免疫效果评估（免疫前检测就是抗体水平监测，免疫后检测就是免疫效果评估） 育肥猪 30头/次，每次随机抽10栏，每栏随机抽3头 77日龄、90日龄、120日龄 分别检测一次 仔猪 20头/次30头/次，每次随机抽10窝，每窝随机抽2头3头仔猪 35日龄、49日龄、63日龄 分别检测一次 gB抗体检测 监测仔猪体内猪伪狂犬病毒的母源抗体水平的消长规律，用于判断仔猪群的最佳免疫时间 DB51/T 28982022 7 B B 附录B （规范性） 规模场猪伪狂犬病免疫净化标准抽检要求 表B.1为规模场猪伪狂犬病净化达到免疫净化标准的抽检要求。 表B.1 规模场猪伪狂犬病免疫净化标准抽检要求 检测项目 检测方法 抽样种群 抽样数量 样本类型 抗体检测 gE-ELISA 种公猪 生产公猪存栏50头以下，100%采样；生产公猪存栏50头以上，按照证明无疫的公式计算（置信区间：95%，预期流行率：3%） 血清 生产母猪 后备种猪 按照证明无疫的公式计算（置信区间：95%，预期流行率：3%）；随机抽样，覆盖不同猪群 血清 抗体检测 gB-ELISA 生产母猪 按照预估流行率的公式计算（置信区间：95%，预期流行率：90%，可接受误差：10%） 血清 后备种猪 按照预估流行率的公式计算（置信区间：95%，预期流行率：90%，可接受误差：10%） 血清 DB51/T 28982022 8 C C 附录C （规范性） 规模场猪伪狂犬病非免疫净化标准抽检要求 表C.1为规模场猪伪狂犬病净化达到非免疫净化标准的抽检要求。 表C.1 规模猪场伪狂犬病非免疫净化标准抽检要求 检测项目 检测方法 抽样种群 抽样数量 样本类型 抗体检测 gE-ELISA 和 gB-ELISA 种公猪 生产公猪存栏50头以下，100%采样；生产公猪存栏50头以上，按照证明无疫的公式计算（置信区间：95%，预期流行率：3%） 血清 生产母猪 后备种猪 按照证明无疫的公式计算（置信区间：95%，预期流行率：3%）；随机抽样，覆盖不同猪群 血清