临床检验基础-第二章-血液一般检验-01.ppt

第二章 血液一般检验 血液一般检验是指血液检验项目中最基血液一般检验是指血液检验项目中最基础和最常用的检验，主要包括手工法或仪器础和最常用的检验，主要包括手工法或仪器法血细胞计数及相关参数测定、血细胞形态法血细胞计数及相关参数测定、血细胞形态学检查、止血凝血筛检试验、血型鉴定与交学检查、止血凝血筛检试验、血型鉴定与交叉配血等。由于血液一般检验标本采集容易、叉配血等。由于血液一般检验标本采集容易、检测便捷，目前仍然是筛检疾病的首要项目。检测便捷，目前仍然是筛检疾病的首要项目。第一节第一节 红细胞检查红细胞检查 红细胞是血液中数量最多的有形成红细胞是血液中数量最多的有形成分，其主要功能是作为携氧或二氧化碳的分，其主要功能是作为携氧或二氧化碳的呼吸载体和维持酸碱平衡等。可通过检测呼吸载体和维持酸碱平衡等。可通过检测红细胞参数和形态变化对某些疾病进行诊红细胞参数和形态变化对某些疾病进行诊断或鉴别诊断。断或鉴别诊断。一、红细胞计数一、红细胞计数 红细胞计数（红细胞计数（RBC）与血红蛋白和血细胞比容结）与血红蛋白和血细胞比容结合，常作为诊断贫血、真性红细胞增多症及红细胞增合，常作为诊断贫血、真性红细胞增多症及红细胞增多的主要指标之一。多的主要指标之一。【检测原理检测原理】红细胞计数方法有显微镜法和血液红细胞计数方法有显微镜法和血液分析仪法。显微镜法的检测原理：采用等渗稀释液将分析仪法。显微镜法的检测原理：采用等渗稀释液将血液标本稀释一定倍数（血液标本稀释一定倍数（200倍）后，充入改良牛鲍倍）后，充入改良牛鲍血细胞计数板中，在显微镜下计数一定区域（体积）血细胞计数板中，在显微镜下计数一定区域（体积）内的红细胞数量，经换算求出每升血液中红细胞数量。内的红细胞数量，经换算求出每升血液中红细胞数量。【方法学评价方法学评价】红细胞计数的方法学评价红细胞计数的方法学评价见表见表2-1。常用红细胞计数稀释液组成与作用见。常用红细胞计数稀释液组成与作用见表表2-2。【质量保证质量保证】血细胞计数质量保证的关键是控血细胞计数质量保证的关键是控制计数误差。血细胞计数误差可来源于技术误差、制计数误差。血细胞计数误差可来源于技术误差、仪器误差和分布误差，可通过减小误差进行红细胞仪器误差和分布误差，可通过减小误差进行红细胞计数的质量控制（表计数的质量控制（表2-3）。）。1技术误差技术误差 由于操作不规范和技术不熟练由于操作不规范和技术不熟练所造成的误差称为技术误差。血细胞计数常见的技所造成的误差称为技术误差。血细胞计数常见的技术误差与原因见表术误差与原因见表2-4。2仪器误差仪器误差 由于仪器不精确所造成的由于仪器不精确所造成的误差。误差。3计数域误差计数域误差 即使是技术熟练者，使即使是技术熟练者，使用同一稀释血液多次充液（充计数室）计数，用同一稀释血液多次充液（充计数室）计数，其结果也存在一定的差异，这种由于血细胞每其结果也存在一定的差异，这种由于血细胞每次在计数室内的分布不完全相同所造成的误差，次在计数室内的分布不完全相同所造成的误差，称为计数域误差或分布误差。称为计数域误差或分布误差。【参考区间参考区间】成年：男性成年：男性（4.05.5）1012/L，女性，女性（3.55.0）1012/L。新生儿（新生儿（6.07.0）1012/L。医学决定水平：高于医学决定水平：高于6.81012/L，应采取，应采取相应治疗措施；低于相应治疗措施；低于3.51012/L可诊断贫血；可诊断贫血；低于低于1.51012/L应考虑输血。应考虑输血。【临床意义临床意义】1生理性变化生理性变化 红细胞数量受到许红细胞数量受到许多生理因素影响，但与相同年龄、性别多生理因素影响，但与相同年龄、性别人群的参考区间相比，一般在人群的参考区间相比，一般在20%以内。以内。红细胞生理性变化与临床意义见表红细胞生理性变化与临床意义见表2-5。2病理性变化病理性变化 （1）病理性增多（表）病理性增多（表2-5-1）。）。（2）病理性减少：按病因不同可将贫血分为）病理性减少：按病因不同可将贫血分为3大大类。此外，药物也可引起贫血类。此外，药物也可引起贫血（表（表2-6-1）。）。1）红细胞生成减少：）红细胞生成减少：骨髓功能衰竭的再生障碍骨髓功能衰竭的再生障碍性贫血、急性造血功能停滞等。性贫血、急性造血功能停滞等。造血物质缺乏或利造血物质缺乏或利用障碍，如肾性贫血、缺铁性贫血（铁缺乏）、铁粒用障碍，如肾性贫血、缺铁性贫血（铁缺乏）、铁粒幼细胞贫血（铁利用障碍）、巨幼细胞贫血（叶酸、幼细胞贫血（铁利用障碍）、巨幼细胞贫血（叶酸、维生素维生素B12缺乏性缺乏性DNA合成障碍）等。合成障碍）等。2）红细胞破坏过多：红细胞破坏过多的原因与临）红细胞破坏过多：红细胞破坏过多的原因与临床意义见表床意义见表2-6。3）红细胞丢失（失血）：如急性、慢性失血性贫）红细胞丢失（失血）：如急性、慢性失血性贫血。血。二、血红蛋白测定二、血红蛋白测定 血红蛋白是在人体有核红细胞及网织红细血红蛋白是在人体有核红细胞及网织红细胞内合成的一种含色素辅基的结合蛋白质，是红胞内合成的一种含色素辅基的结合蛋白质，是红细胞内的运输蛋白。细胞内的运输蛋白。每个每个Hb分子含有分子含有4条珠蛋白肽链，每条肽条珠蛋白肽链，每条肽链结合链结合1个亚铁血红素，形成具有四级空间结构个亚铁血红素，形成具有四级空间结构的四聚体，以利于结合的四聚体，以利于结合O2和和CO2。【检测原理检测原理】HiCN法检测原理：血红蛋白（法检测原理：血红蛋白（SHb除外）中的亚铁离子（除外）中的亚铁离子（Fe2+）被高铁氰化钾氧化为高）被高铁氰化钾氧化为高铁离子（铁离子（Fe3+），血红蛋白转化成高铁血红蛋白），血红蛋白转化成高铁血红蛋白（Hi）。）。Hi与氰化钾（与氰化钾（KCN）中的氰离子反应生成）中的氰离子反应生成HiCN。HiCN最大吸收波峰为最大吸收波峰为540nm，波谷为，波谷为504nm。在特定条件下，在特定条件下，HiCN毫摩尔消光系数为毫摩尔消光系数为44L/（mmolcm）。）。HiCN在在540nm处的吸光度与浓度成正处的吸光度与浓度成正比，根据测得吸光度可求得血红蛋白浓度。比，根据测得吸光度可求得血红蛋白浓度。【方法学评价方法学评价】血红蛋白测定方法血红蛋白测定方法大致分为大致分为4类（表类（表2-7）。）。1966年，年，ICSH推荐推荐HiCN测定法作为测定法作为Hb测定的标测定的标准方法。准方法。1978年，年，IFCC和和IAP在联合发在联合发表的国际性文件中重申了表的国际性文件中重申了HiCN法。法。HiCN测定法是测定法是WHO和和ICSH推荐的参考推荐的参考方法，由于方法，由于HiCN试剂含有剧毒的氰化钾，各试剂含有剧毒的氰化钾，各国均相继研发出不含氰化钾的血红蛋白测定国均相继研发出不含氰化钾的血红蛋白测定方法，有的测定法已用于血液分析仪，但其方法，有的测定法已用于血液分析仪，但其标准应溯源到标准应溯源到HiCN量值。血红蛋白测定的方量值。血红蛋白测定的方法学评价见表法学评价见表2-8。HiCN转化液的作用与评价转化液的作用与评价见表见表2-9。【质量保证质量保证】【参考区间参考区间】成年：男性成年：男性 120160 g/L，女性，女性 110150 g/L。新生儿新生儿170200 g/L。【临床意义临床意义】Hb的临床意义与红细胞计数相似，的临床意义与红细胞计数相似，但判断贫血程度优于红细胞计数。根据但判断贫血程度优于红细胞计数。根据Hb浓度可将贫浓度可将贫血分为血分为4度。度。轻度贫血：轻度贫血：Hb120g/L（女性（女性Hb110g/L）；）；中度贫血：中度贫血：Hb90g/L；重度贫血：重度贫血：Hb60g/L；极重度贫血：极重度贫血：Hb30g/L。当当RBC1.51012/L，Hb45g/L时，应考虑输时，应考虑输血。血。三、红细胞形态检查三、红细胞形态检查 血液系统疾病常累及红细胞，特别是贫血血液系统疾病常累及红细胞，特别是贫血患者，不仅红细胞数量和血红蛋白浓度降低，患者，不仅红细胞数量和血红蛋白浓度降低，多数贫血患者还会有相应的红细胞形态改变。多数贫血患者还会有相应的红细胞形态改变。因此，红细胞形态检查常作为追踪贫血线索的因此，红细胞形态检查常作为追踪贫血线索的一项重要内容，与血红蛋白测定、红细胞计数一项重要内容，与血红蛋白测定、红细胞计数及其他参数相结合，可以判断贫血的性质，并及其他参数相结合，可以判断贫血的性质，并对贫血的诊断和鉴别诊断有重要的临床价值。对贫血的诊断和鉴别诊断有重要的临床价值。【检测原理及方法学评价检测原理及方法学评价】红细胞形态检查的检红细胞形态检查的检测原理及方法学评价见表测原理及方法学评价见表2-10。【质量保证质量保证】红细胞形态检查的质量保证见表红细胞形态检查的质量保证见表2-11，人为原因造成的红细胞形态异常见表，人为原因造成的红细胞形态异常见表2-12。【临床意义临床意义】1正常形态红细胞正常形态红细胞 正常红细胞呈双凹圆盘形，大小相对均一，平正常红细胞呈双凹圆盘形，大小相对均一，平均直径均直径7.2m（6.77.7m）。）。Wrihgt染色后为粉红色或琥珀色，血红蛋白充染色后为粉红色或琥珀色，血红蛋白充盈良好，呈正色素性、向心性淡染。盈良好，呈正色素性、向心性淡染。中央部位为生理性淡染区，大小约为细胞直径中央部位为生理性淡染区，大小约为细胞直径的的1/3。胞质内无异常结构（图胞质内无异常结构（图2-1，图，图2-2）。）。正常形态红细胞常见于健康人，但也可见于急性正常形态红细胞常见于健康人，但也可见于急性失血性贫血、部分再生障碍性贫血等。失血性贫血、部分再生障碍性贫血等。图图2-1 正常形态红细胞正常形态红细胞图图2-2 正常形态红细胞（扫描电镜）正常形态红细胞（扫描电镜）2异常形态红细胞异常形态红细胞 在排除人为因素后，在排除人为因素后，若血涂片中出现异常形态红细胞，且数量增多，若血涂片中出现异常形态红细胞，且数量增多，常提示病理性改变。常提示病理性改变。常见的异常形态红细胞可分为红细胞大小、常见的异常形态红细胞可分为红细胞大小、形状、血红蛋白含量、结构和排列异常（表形状、血红蛋白含量、结构和排列异常（表2-13表表2-16，图，图2-3图图2-18）。红细胞异常）。红细胞异常形态分类新方法见表形态分类新方法见表2-17。图图2-3 红细胞大小不均红细胞大小不均图图2-4 巨红细胞巨红细胞图图2-5 球形红细胞球形红细胞图图2-6 椭圆形红细胞椭圆形红细胞图图2-7 靶形红细胞靶形红细胞图图2-8棘形红细胞棘形红细胞图图2-9 锯齿形红细锯齿形红细胞胞图图2-10 泪滴形红细胞泪滴形红细胞图图2-11红细胞形态不整红细胞形态不整图图2-12低色素性红细胞低色素性红细胞图图2-13 嗜多色性红细胞嗜多色性红细胞图图2-14 豪焦小体豪焦小体图图2-15 卡波环卡波环图图2-16 嗜碱性点彩红细胞嗜碱性点彩红细胞图图2-18 红细胞缗钱状形成红细胞缗钱状形成图图2-17 有核红细胞有核红细胞