DB37∕T 3979-2020 动物源性食品中211种农药及相关化学品残留量的测定 气相色谱-质谱法.doc

ICS67.050X 04DB37山东省地方标准DB37/T 39792020动物源性食品中211种农药及相关化学品残留量的测定气相色谱-质谱法Determination of 211 pesticides and related chemicals residues in animal-derived foodsGas chromatography-tandem mass spectrometry2020 - 06 - 08发布2020 - 07 - 08实施山东省市场监督管理局发布目次前言II1范围12规范性引用文件13原理14试剂与材料15仪器和设备36前处理37测定48结果计算和表述59精密度510定量限和回收率6附录A（资料性附录）211种农药及相关化学品中英文名称、CAS号、定量限7附录B（资料性附录）211种农药及相关化学品的保留时间、定量离子对、定性离子对14附录C（资料性附录）211种农药及其代谢物和内标化合物多反应监测（MRM）色谱图21附录D（规范性附录）实验室内重复性要求28附录E（规范性附录）实验室间再现性要求29附录F（资料性附录）样品添加浓度及回收率的实验数据30前言本标准按照GB/T 1.12009给出的规则起草。本标准由青岛海关提出、归口并组织实施。本标准起草单位：青岛海关技术中心、通标标准技术服务（青岛）有限公司。本标准主要起草人：朱文璇、王渤、程刚、王剑、王仑、陈凯、逄昔莎、崔晓妮、辛文、汤永娇、田壮、王林、王宫璞、王玉花、王磊磊、孙正君、郝秀萍。动物源性食品中211种农药及相关化学品残留量的测定气相色谱-质谱法1 范围本标准规定了动物源性食品中211种农药及相关化学品残留量的气相色谱-串联质谱测定方法。本标准适用于猪肉、牛肉、羊肉、鸡蛋、奶及肝脏6种动物源性食品中的多农药残留量的测定，其它食品可参照执行。2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB 2763食品安全国家标准食品中农药最大残留限量。GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法。3 原理试样中的农药经乙腈提取，采用分散固相萃取（d-SPE）或固相萃取（SPE）方法净化，气相色谱-串联质谱仪检测，内标法或者外标法定量。4 试剂与材料除另有规定外，在分析中仅使用确认为符合残留检测要求等级的试剂，水为符合GB/T 6682规定的一级水。4.1 试剂4.1.1 乙腈（CH3CN，CAS号：75-05-8）：色谱纯。4.1.2 丙酮（CH3COCH3，CAS号：67-64-1）：色谱纯。4.1.3 无水硫酸镁（MgSO4，CAS号：7487-88-9）：分析纯。4.1.4 柠檬酸钠（Na3C6H5O7，CAS号：6132-04-3）：分析纯。4.1.5 柠檬酸氢二钠（C6H6Na2O7，CAS号：6132-05-4）：分析纯。4.1.6 乙酸铅（(CH3COO)2Pb，CAS号：301-04-2）：分析纯。4.2 溶液配制饱和乙酸铅溶液配制：将45 g乙酸铅加入100 g水中溶解，一边搅拌，直到加进的乙酸铅饱和。4.3 标准品4.3.1 211种农药及其代谢物标准物质：纯度95 %，见附录A。4.3.2 内标物氘代毒死蜱，纯度：95.4 %。4.4 标准溶液配制4.4.1 标准储备溶液分别准确称取10 mg（精确至0.1 mg）标准品，使用丙酮溶解并定容到10 mL。若因农药标准物性状影响（如粘度过大等原因）可适当调整其称重量、定容体积或最终浓度。标准储备溶液-18 4 避光保存，保存期为一年。4.4.2 混合标准中间溶液（混合标准中间溶液A、B、C）按照农药的性质，将211种农药及其代谢物分为A、B、C三组。吸取一定量的农药标准储备溶于10 mL容量瓶中，用丙酮定容至刻度，配制成10 mg/L的混合标准中间溶液（标品的分组情况见附录A），混合标准中间溶液-18 4 避光保存，保存期为三个月。4.4.3 混合标准工作溶液分别吸取1.0 mLA、B、C混合标准中间溶液（4.4.2）于10 mL容量瓶中，用丙酮定容至刻度，配制成1 mg/L的混合标准工作溶液，用于标准曲线配制和加标样品使用，混合标准工作溶液0 4 避光保存，保存期为一周。4.4.4 内标溶液准确称取10 mg氘代毒死蜱（精确到0.1 mg）用丙酮溶解后，转移至10 mL容量瓶定容，混匀为1 000 mg/L的内标储备液。吸取0.1 mL的内标储备溶于10 mL容量瓶中，用丙酮定容至刻度，配制成10 mg/L内标中间液。再吸取2 mL内标中间液于10 mL容量瓶中，用丙酮定容至刻度，配制成2 mg/L内标工作溶液。4.4.5 标准曲线准确移取混合标准工作液（4.4.3）0.05 mL、0.1 mL、0.2 mL、0.5 mL、1.0 mL于10 mL容量瓶中，如果采用内标法，再分别加入0.5 mL内标工作液（4.4.4），用乙腈稀释至刻度，配制成浓度分别为5 g/L、10 g/L、20 g/L、50 g/L、100 g/L的校准溶液。针对基质效应强的样品，可使用空白样品基质溶液进行定容，配制基质标准曲线。现用现配。附录A中定量限为0.02 mg/kg和0.05 mg/kg的化合物的标准曲线浓度范围根据上述比例做相应调整。4.4.6 基质标准工作溶液根据分析样品的基质性质，选择相同空白基质样品，与分析样品处理一致，获得的空白基质溶液氮气吹干，如果采用内标法，加入50 L内标溶液，吸取相应浓度的混合标准工作溶液（4.4.3）复溶至1 mL后，过微孔滤膜（4.5.7）。基质混合标准工作溶液应现用现配。为了对测试样品准确定量，尽量保证浓度与样品待测物的浓度水平一致。4.5 材料4.5.1 SPE柱（固相萃取柱）：PSA/C18，1 000 mg/1 000 mg，6 mL或相当者。4.5.2 乙二胺-N-丙基硅烷化硅胶（PSA）：4060 m。4.5.3 十八烷基硅烷键合硅胶（C18）：4060m。4.5.4 QuEChERS萃取盐包（4 g无水硫酸镁，0.5 g柠檬酸氢二钠，1 g柠檬酸钠，1 g氯化钠）。4.5.5 QuEChERS净化盐包（PSA300 mg/C18300 mg）。4.5.6 EMR柱（增强型脂质去除过滤柱）：（300 mg/3 mL）。4.5.7 微孔滤膜（有机相）：13 mm0.22 m。5 仪器和设备5.1 气相色谱-三重四级杆质谱联用仪（GC-MS/MS）：配有电子轰击源（EI）。5.2 分析天平：感量0.01 g和0.000 1 g。5.3 离心机，转速不低于8 500 r/min。5.4 混合漩涡仪。5.5 瓶口分液器。5.6 水平振荡仪。5.7 旋转蒸发仪。6 前处理6.1 试样制备及保存6.1.1 动物肌肉、肝脏类从所取全部样品中取出有代表性样品约500 g，用组织捣碎机充分捣碎均匀，均分成两份，分别装入洁净容器中，密封，并标明标记。6.1.2 牛奶及鸡蛋样品从所取全部样品中取出有代表性样品约500 g，充分混匀，均分成两份，分别装入洁净容器中，密封，并标明标记。注： 以上样品取样部位按GB 2763附录A执行。6.1.3 试样保存样品于-18 以下冷冻保存。6.2 提取及净化6.2.1 猪肉、牛肉、羊肉及鸡蛋准确称取5 g样品（精确至0.01 g）置于50 mL离心管中，加入5 mL水浸泡后，加入3 mL饱和乙酸铅溶液（4.2.1），加10 mL乙腈，加萃取盐包（4.5.4），涡匀。250 rpm振荡30 min提取，8 500 rpm离心2 min，上清液冷冻4 h后过0.45 m微孔滤膜，然后取2 mL使用EMR柱（4.5.6）净化后旋转蒸发至近干，如果用内标法，需加入50 L内标溶液（4.4.4），用乙腈定容至1.0 mL，过0.22 m微孔滤膜后，用于测定。6.2.2 牛奶准确称取5 g样品（精确至0.01 g）置于50 mL离心管中，加入3 mL饱和乙酸铅溶液（4.3），加10 mL乙腈，加萃取盐包（4.5.4），涡匀。250 rpm振荡30 min提取，8 500 rpm离心2 min，取5 mL使用净化盐包（4.5.5）净化后取2 mL氮吹至近干，如果用内标法，需加入50 L内标溶液（4.4.4），用乙腈定容至1.0 mL，过0.22 m微孔滤膜后，用于测定。6.2.3 肝脏准确称取5 g样品（精确至0.01 g）置于50 mL离心管中，加入5 mL水浸泡后，加入3 mL饱和乙酸铅溶液（4.3），加10 mL乙腈，加萃取盐包（4.5.4），涡匀。250 rpm振荡30 min提取，8 500 rpm离心2 min，上清液冷冻4 h过0.45 m微孔滤膜后取2 mL使用SPE PSA/C18（4.5.1）串联柱（乙腈活化上样和洗脱）净化后旋蒸至近干，如果用内标法，需加入50 L内标溶液（4.4.4），用乙腈定容至1.0 mL，过0.22 m微孔滤膜后，用于测定。7 测定7.1 仪器参考条件7.1.1 色谱柱：(5 %-苯基)-甲基聚硅氧烷：30 m250 mm0.25 m石英毛细管柱或相当者。7.1.2 色谱柱温度程序：70 保持2 min，然后以25 /min程序升温至150 ，再以3 /min升温至200 ，再以8 /min升温至280 ，保持7 min。7.1.3 载气：氦气，纯度99.999 %，流速：1.0 mL/min。7.1.4 进样口温度：260 。7.1.5 进样量：1 L。7.1.6 进样方式：不分流进样。7.1.7 电子轰击源：70 eV。7.1.8 离子源温度：230 。7.1.9 GC-MS接口温度：230 。7.1.10 其他质谱条件见附录B。7.2 定性及定量7.2.1 保留时间被测试样中目标农药色谱峰的保留时间与相应标准色谱峰的保留时间相比较，相对误差应在2.5 %之内。7.2.2 定量离子、定性离子及子离子丰度比在相同实验条件下进行样品测定时，如果检出的色谱峰的保留时间与标准样品相一致，并且在扣除背景后的样品质谱图中，目标化合物的质谱定量和定性离子均出现，而且同一检测批次，对同一化合物，样品中目标化合物的定性离子和定量离子的相对丰度比与质量浓度相当的基质标准溶液相比，其允许偏差不超过表1规定的范围，则可判断样品中存在目标农药。表1 定性测定时相对离子丰度的最大允许偏差单位为百分率相对离子丰度502050（含）1020（含）10允许相对偏差20253050本方法的标准物质多反应监测GC-MS/MS图参见附录C。7.2.3 定量内标法或外标法定量。7.3 试样溶液的测定将基质混合标准工作溶液和试样溶液依次注入气相色谱-质谱联用仪中，保留时间和定性离子定性，测得定量离子峰面积，待测样液中农药的响应值应在仪器检测的定量测定线性范围之内，超过线性范围时应根据测定浓度进行适当倍数稀释后再进行分析。7.4 平行试验按以上步骤对同一试样进行平行测定。7.5 空白试验除不称取试样外，均按上述步骤进行。8 结果计算和表述试样中各农药残留量以计，单位为毫克每千克（mg/kg）表示，内标法按式（1）计算，外标法按式（2）计算：(1)(2)式中： 试样中被测物残留量，单位为毫克每千克（mg/kg）； 基质标准工作溶液中被测物的质量浓度，单位为微克每毫升（g/mL）；A 试样溶液中被测物的色谱峰面积；As 基质标准工作溶液中被测物的色谱峰面积；i 试样溶液中内标物的质量浓度，单位为微克每毫升（g/mL）；si基质标准工作溶液中内标物的质量浓度，单位为微克每毫升（g/mL）；Asi 基质标准工作溶液中内标物的色谱峰面积；Ai 试样溶液中内标物的色谱峰面积；V 试样溶液最终定容体积，单位为毫升（mL）；m 试样溶液所代表试样的质量，单位为克（g）。计算结果应扣除空白值，计算结果以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，保留两位有效数字，含量超1 mg/kg时保留三位有效数字。9 精密度9.1 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值与其算术平均值的比值（百分率），应符合附录D的要求。9.2 在再现性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值与其算术平均值的比值（百分率），应符合附录E的要求。10 定量限和回收率10.1 定量限本方法的定量限见附录A。10.2 添加回收率当添加水平为0.01 mg/kg、0.02 mg/kg、0.05 mg/kg时，添加回收率参见附录F。AA附录A （资料性附录）211种农药及相关化学品中英文名称、CAS号、定量限211种农药及相关化学品中英文名称、CAS号、定量限见表A.1。表A.1 211种农药及相关化学品中英文名称、CAS号、定量限序号英文名称中文名称CAS号定量限，mg/kg猪肉牛肉羊肉肝脏牛奶鸡蛋内标D10-Chlorpyrifos氘代毒死蜱285138-81-0A 组1Ametryn莠灭净834-12-80.010.010.010.010.010.012Benfuresate呋草磺/呋草黄68505-69-10.010.010.010.010.010.013BHC-alpha-六六六319-84-60.010.010.010.010.010.014BHC-beta-六六六319-85-70.010.010.010.010.010.015BHC-delta-六六六319-86-80.010.010.010.010.010.016BHC-epsilonepsilon-六六六6108/10/70.010.010.010.010.010.017Bifenox甲羧除草醚42576-02-30.010.010.010.010.010.018Bromopropylate溴螨酯18181-80-10.010.010.010.010.010.019Buprofezin噻嗪酮69327-76-00.010.010.010.010.010.0110Chlordane-trans反式氯丹5103-74-20.010.010.010.010.010.0111Chlorpropham氯苯胺灵101-21-30.010.010.010.010.010.0112Cyflufenamid环氟箘胺180409-60-30.010.010.010.010.010.0113Cyhalothrin (lambda)高效氯氟氰菊酯65732-07-20.010.010.010.010.010.0114Cyproconazole环丙唑醇94361-06-50.010.010.010.010.010.0115Chlorthal-dimethyl氯酞酸甲酯1861-32-10.010.010.010.010.010.0116DDD-o，po，p-滴滴滴53-19-00.010.010.010.010.010.0117DDD-p，pp，p-滴滴滴72-54-80.010.010.010.010.010.0118DDE-o，po，p-滴滴伊3424-82-60.010.010.010.010.010.0119DDT-o，po，p-滴滴涕789-02-60.010.010.010.010.010.0120Deltamethrin溴氰菊酯52918-63-50.010.010.010.010.010.0121Dicloran氯硝胺99-30-90.010.010.010.010.010.0122Dieldrin狄氏剂60-57-10.010.010.010.010.010.0123Diphenamid双苯酰草胺957-51-70.010.010.010.010.010.0124Edifenphos敌瘟磷17109-49-80.010.010.010.010.010.0125Endosulfan-alpha-硫丹959-98-80.010.010.020.010.010.0126Endosulfan-beta-硫丹33213-65-90.010.010.010.010.010.01表A.1211种农药及相关化学品中英文名称、CAS号、定量限（续）序号英文名称中文名称CAS号定量限，mg/kg猪肉牛肉羊肉肝脏牛奶鸡蛋27Ethalfluralin乙丁烯氟灵55283-68-60.010.010.010.010.010.0128Fenothiocarb苯硫威(苯丁硫威)62850-32-20.010.010.010.010.010.0129Fenvalerate&EsFenvalerate氰戊菊酯&高效氰戊菊酯51630-58-1&66230-04-40.010.010.010.010.010.0130Flurochloridone氟咯草酮/氟氯戊菊酯61213-25-00.010.010.010.010.010.0131Flutolanil氟酰胺66332-96-50.010.010.010.010.010.0132Heptenophos庚烯磷23560-59-00.010.010.010.010.010.0133Isazofos氯唑磷42509-80-80.010.010.010.010.010.0134Mepronil灭锈胺55814-41-00.010.010.010.010.010.0135Monocrotophos久效磷6923-22-40.010.020.010.010.010.0136Oxadixyl恶霜灵77732-09-30.010.010.010.010.010.0137Penconazole戊菌唑66246-88-60.010.010.010.010.010.0138Pendimethalin二甲戊乐灵40487-42-10.010.010.010.010.010.0139Pentachloroanisole五氯茴香醚1825-21-40.010.010.010.010.010.0140Pentoxazone戊基恶唑酮/环戊恶草酮110956-75-70.010.010.010.010.010.0141Phenthoate稻丰散2546420.010.010.010.010.010.0142Phenylphenol， 2-邻苯基苯酚90-43-70.010.010.010.010.010.0143Pirimiphos-methyl甲基嘧啶磷29232-93-70.010.010.010.010.010.0144Procymidone腐霉利32809-16-80.010.010.010.010.010.0145Profenofos丙溴磷41198-08-70.010.010.010.010.010.0146Propaphos丙虫磷7292-16-20.010.010.010.010.010.0147Propham苯胺灵122-42-90.010.010.010.010.010.0148Sulprofos硫丙磷35400-43-20.010.010.010.010.010.0149Tolclofos-methyl甲基立枯磷57018-04-90.010.010.010.010.010.0150Triallate野麦畏2303-17-50.010.010.010.010.010.0151Triazophos三唑磷24017-47-80.010.010.010.010.010.0152Vinclozolin乙烯菌核利50471-44-80.010.010.010.010.010.01B 组53Acrinathrin氟丙菊酯101007-06-10.010.010.010.010.010.0154Alachlor甲草胺15972-60-80.010.010.010.010.010.0155Azinphos-ethyl乙基谷硫磷(乙基保棉磷)2642-71-90.010.010.010.010.010.0156Benalaxyl苯霜灵71626-11-40.010.010.010.010.010.0157Bendiocarb恶虫威22781-23-30.010.010.010.010.010.0158Benfluralin乙丁氟灵1861-40-10.010.010.010.010.010.01表A.1211种农药及相关化学品中英文名称、CAS号、定量限（续）序号英文名称中文名称CAS号定量限，mg/kg猪肉牛肉羊肉肝脏牛奶鸡蛋59Bromophos甲基溴硫磷(溴硫磷)2104-96-30.010.010.010.010.010.0160Bromophos-ethyl乙基溴硫磷4824-78-60.010.010.010.010.010.0161Butralin地乐胺(双丁乐灵)33629-47-90.010.010.010.010.010.0162Cadusafos硫线磷95465-99-90.010.010.010.010.010.0163Carbophenothion三硫磷786-19-60.010.010.010.010.010.0164Chlorbenside氯杀螨103-17-30.010.010.010.010.010.0165Chlordane-cis顺式氯丹5103-71-90.010.010.010.010.010.0166Chlordane-oxy氧氯丹27304-13-80.010.010.010.010.010.0167Chlorfenapyr虫螨腈(溴虫腈）122453-73-00.010.010.010.010.010.0268Chlorfenson杀螨酯80-33-10.010.010.010.010.010.0169Chlorfenvinphos毒虫畏470-90-60.010.010.010.010.010.0170Chlorobenzilate乙酯杀螨醇510-15-60.010.010.010.010.010.0171Chlorpyrifos毒死蜱2921-88-20.010.010.010.010.010.0172Chlorpyrifos-methyl甲基毒死蜱5598-13-00.010.010.010.010.010.0173Cyanophos杀螟腈2636-26-20.010.010.010.010.010.0174Cyhalofop-butyl氰氟草酯122008-85-90.010.010.010.010.010.0175DDE-p，pp，p-滴滴伊72-55-90.010.010.010.010.010.0176DDT-p，pp，p-滴滴涕50-29-30.010.010.010.010.010.0177Tribufos脱叶磷78-48-80.010.010.010.010.010.0178Diazinon二嗪磷333-41-50.010.010.010.010.010.0179Diclofop-methyl二氯硫醚磷51338-27-30.010.010.010.010.010.0180Dicrotofos百治磷141-66-20.010.010.010.010.010.0181Dimepiperate哌草丹61432-55-10.050.010.010.020.010.0182Dimethipin噻节因55290-64-70.020.010.050.010.010.0183Dimethylvinphos甲基毒虫畏67628-93-70.010.010.010.010.010.0184Dioxathion敌杀磷78-34-20.010.010.010.010.010.0185Diphenylamine二苯胺122-39-40.010.010.010.010.010.0186Dithiopyr氟硫草定97886-45-80.010.010.010.010.010.0187Endrin异狄氏剂72-20-80.010.010.010.010.010.0188EPN苯硫磷2104-64-50.010.010.010.010.010.0189Ethion乙硫磷563-12-20.010.010.010.010.010.0190Ethofumesate乙氧呋草黄26225-79-60.010.010.010.010.010.0191Ethychlozate吲熟酯27512-72-70.010.010.010.010.010.0192Etofenprox醚菊酯80844-07-10.010.010.010.010.010.0193Etoxazole乙螨唑、依杀螨153233-91-10.010.010.010.010.010.0194Fenamidone咪唑菌酮161326-34-70.010.010.010.010.010.0195Fenamiphos苯线磷22224-92-60.010.010.010.010.010.01表A.1211种农药及相关化学品中英文名称、CAS号、定量限（续）序号英文名称中文名称CAS号定量限，mg/kg猪肉牛肉羊肉肝脏牛奶鸡蛋96Fenarimol氯苯嘧啶醇60168-88-90.010.010.010.010.010.0197Fenpropathrin甲氰菊酯39515-41-80.010.020.020.020.020.0298Fensulfothion丰索磷115-90-20.010.010.010.010.010.0199Fluacrypyrim嘧螨酯229977-93-90.010.010.010.010.010.01100Fluvalinate-tau氰戊菊酯51630-58-10.050.050.050.050.050.05101Fonofos地虫硫磷944-22-90.010.010.010.010.010.01102Furalaxyl呋霜灵57646-30-70.010.010.010.010.010.01103Heptachlorexo-epoxide(isomer B)环氧七氯1024-57-30.010.010.010.010.010.01104Iprodione异菌脲36734-19-70.010.010.010.010.050.01105Isodrin异艾氏剂465-73-60.010.010.010.010.010.01106Isofenphos异柳磷25311-71-10.010.010.010.010.010.01107Isofenphos-methyl甲基异柳磷99675-03-30.010.010.010.010.010.01108Methoxychlor甲氧氯72-43-50.020.010.010.010.010.01109Mirex灭蚁灵2385-85-50.010.010.010.010.010.01110Myclobutanil灭克落/腈菌唑88671-89-00.010.010.010.010.010.01111Nitrofen除草醚1836-75-50.010.010.010.010.010.01112Oxadiazon恶草酮19666-30-90.010.010.010.010.010.01113Paclobutrazol多效唑76738-62-00.010.010.010.010.010.01114Parathion对硫磷56-38-20.010.010.010.010.010.01115Parathion-methyl甲基对硫磷298-00-00.010.010.010.010.010.01116Pentachloroaniline五氯苯胺527-20-80.010.010.010.010.010.01117Phorate Sulfoxide甲拌磷亚砜2513540.050.050.050.050.050.05118Phosfolan硫环磷947-02-40.010.010.010.010.010.01119Phosphamidon I磷胺I13171-21-60.010.010.010.010.010.01120Piperonyl butoxide增效醚1951/3/60.010.010.010.010.010.01121Pirimicarb抗蚜威23103-98-20.010.010.010.010.010.0