电化学免疫传感器.ppt

,*,文档仅供参考，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。,电化学,免疫,传感器,1.1,电容型,免疫传感器,电流型,免疫传感器,根据,2001,年的对生物传感器分类标准,电化学免疫传感器是基于抗原 抗体反应的,可进行特异性的定量或半定量分析的自给式的集成器件,其中抗原,/,抗体是分子识别元件,且与电化学传感元件直接接触,并通过传感元件把某种或者某类化学物质浓度信号转变为相应的电信号。,电位型,免疫传感器,电导型,免疫传感器,厚德 笃学 崇实 尚新,厚德 笃学 崇实 尚新,厚德 笃学 崇实 尚新,厚德 笃学 崇实 尚新,检测食品中毒素的种类及电化学免疫传感器类型,毒素,免疫传感器类型,标记酶,检出限,SEB,阻抗型,10pg/mL,AFB1,电导型,辣根过氧化酶,0.1ng/mL,AFB1,阻抗型,0.1,g/L,AFB1,电流型,碱性磷酸酶,20pg/mL,AFB1,电流型,辣根过氧化酶,0.07ng/mL,AFM1,阻抗型,15ng/L,AFM1,电流型,辣根过氧化酶,39ng/L,河豚毒素,(TTX),电流型,碱性磷酸酶,0.016ng/mL,赫曲霉毒素,A(OTA),电流型,碱性磷酸酶,0.2ng/mL,烟曲霉毒素,(Fm s),电流型,辣根过氧化酶,5,g/L,共价建合法,交联法,厚德 笃学 崇实 尚新,包埋法,吸附法,介孔材料表面生物分子的固定方法,厚德 笃学 崇实 尚新,第二篇 应用,酶,/,酶免疫电极最佳制备方式的确定,及其微观分析,厚德 笃学 崇实 尚新,预处理,戊二醛,镀铂,GOD,抗体,原理：首先将酶固定在电极表面上,(,或经修饰的电极表面上,),，然后利用双官能团交联剂,(,戊二醛,),将抗体耦联在酶上，由此即制得酶免疫电极,.,酶电极通过戊二醛作用与抗体相连,抗体可能改变了酶的结构或占据了酶的活性中心，从而降低了酶对底物的催化效率,.,抗原与抗体结合后,部分地恢复了酶固有的构型或是部分地释放了酶的活性中心,这样就又提高了酶的催化活性，抗原同抗体的结合调制了由酶催化活性的改变而引起的介体电极的响应电流的变化,从而达到检测抗原的目的。,厚德 笃学 崇实 尚新,利用电化学方法测定各种实验条件下酶电极、酶免疫电极的电化学响应特性,以期确定,这种新型生物电极的最佳制备条件,1),酶免疫电极最佳制备条件是,:,镀铂状态下,30U GOD,、,0.8 mg/mL SEC1,抗体,.,2),以所制备的,SEC1,酶免疫电极检测,SEC1,抗原,在,06Lg/L,范围内,响应电流随抗原,浓度呈线性变化,.,超过,10Lg/L,时,响应常会达到饱和状态,.,抗原浓度的进一步提高,将导致响应下降,这符合免疫分析中的钩状效应,.,饲料中黄曲霉毒素,B1,的纳米金,修饰电化学免疫传感器研究,厚德 笃学 崇实 尚新,同时固定四羧基酞菁钴,（,CoPc,）、,HRP,酶标记黄曲霉毒素,B1,抗体（,HRP-Ab-AFB1,）以及纳米金微粒在玻碳电极表面的,Nafion,膜上，制备了可用于快速测定饲料中黄曲霉毒素,B1,（,AFB1,）的新型电化学传感器（,GCE|Nafion/CoPc/Au/HRP-Ab-AFB1,）。,CoPc,对,H,2,O,2,的还原具有催化作用；当该传感器在含,AFB1,样品的溶液中温育,20 min,后，,AFB1,与,Ab-AFB1,的免疫结合导致,HRP,的活性中心与,CoPc,之间的电子传递被部分阻碍，使,HRP,对,H,2,O,2,电催化氧化电流,Io,降低。,Io,与,AFB1,浓度在,1.0200 ng/mL,呈线性关系，检测限为,0.5 ng/mL,。,厚德 笃学 崇实 尚新,石墨烯,/,导电高分子,/,离子液体修饰的,黄曲霉毒素,B1,免疫传感器的制备及应用,厚德 笃学 崇实 尚新,厚德 笃学 崇实 尚新,研究表明：,石墨烯和纳米金的引入明显提高了修饰层的电子转移速率，电极的表观活性面积由裸电极的,0.1772 cm,2,增加到,0.2640 cm,2,。当,AFB1,浓度在,3.210,-15,3.210,-13,mol/L,范围内，传感器的交流阻抗响应值与浓度的呈线性关系，相关系数,R,2,=0.994,，检出限为,1.110,-15,mol/L,，传感器在,4,下保存,20,周以上，电化学响应保持基本不变。,一种基于纳米金,/,石墨烯,/,普鲁士蓝（,PB,）,修饰玻碳电极非标记免疫传感器,厚德 笃学 崇实 尚新,传感器在含不同浓度人,lgG,的,PBS,溶液（,pH6.98,）中测定，响应电流与人,lgG,浓度在,5.55455.5ng/ml,范围内有良好的线性关系，,R,2,=0.9926,，检出限为,0.012ng/ml,PB,GCE,PB/GCE,抗体,GE,氯金酸,GE/PB/GCE,GNP,S,/GE/PB/GCE,BSA,Self-assembled graphene platelet-glucose oxidase,nanostructures for glucose biosensing,厚德 笃学 崇实 尚新,传感器响应电流与葡萄糖浓度在,222 mM,范围内有良好的线性关系，,R,2,=0.9987,，在信噪比为,3,的时候检出限为,20M,金纳米粒子,-,壳聚糖,-,石墨烯纳米复合材料的制备,及其在生物电化学中的应用,厚德 笃学 崇实 尚新,修饰电极不仅可成功地实现,GOD,与电极间的直接电子转移，还对葡萄糖表现出良好的催化性能。催化的线性范围为,2.1,5.7,mol/L,检出限为,0.7,mol/L,灵敏度为,79.71 mAcm,2,mM,1,Thank you!,