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,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,单击此处编辑母版标题样式,*,*,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,单击此处编辑母版标题样式,*,*,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,单击此处编辑母版标题样式,*,*,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,单击此处编辑母版标题样式,*,*,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,单击此处编辑母版标题样式,*,*,杂交玉米种子快速鉴定技术项目建议书,制作人:,*,目录,一,、杂交玉米鉴定的必要,性,二、主要鉴定方法介绍,三、项目目标,四、总,结,一、杂交玉米鉴定的必要性,种子是农业生产最基本也是最关键的生产资料,。,杂交玉米种子的真实性和品种纯度的快速测定在种子生产、加工储藏及经营贸易中具有重要的意义和应用价值。,当前我国玉米种子纯度低劣状况普遍存在,,,研究表明,玉米种子纯度每降低,1%,,造成的减产幅度就会接近,1%,,玉米鉴定技术就显得尤为重要。,在农业生产中,除种子纯度影响外,假种子的影响更大,有时会造成绝产。,二、快速鉴定的方法,以形态学性状为依据的鉴定技术,以生化指纹为依据的电泳谱带鉴定法,以DNA分子多态性为依据的分子标记鉴定法,其他鉴定方法,种子形态鉴定法,种子形态鉴定法该方法是根据种子的形态特征如种子粒形、种子类型、种子颜色种子大小、果柄颜色等区别不同品种以及利用胚乳直感现象区分杂交种及其母本,确定品种纯度。,优点:种子形态鉴定法最简便、最快速、成本最低而且结果很可靠。,缺点:对形态特征差异较小的不同品种很难分别;对杂交种亲本无明显颜色差异的组合中的自交粒无法鉴定;有些形态特征会受到环境条件的影响,进而影响鉴定的准确性。,幼苗形态鉴定法,幼苗形态鉴定法,先要按要求数取一定量种子,在温室或生长箱中适宜的条件下培养成幼苗后,根据幼苗叶鞘颜色、叶片颜色、叶片形状等特征区别品种,进行纯度检验。,优点:所需的设备简单、易于操作、快速便捷、成本较低。,缺点:对于某些组合的准确性则较差。,种植鉴定法,种植鉴定发是,将样品在田间播种,依据的,植株,性状,来,鉴定结果,。,优点:结果比较,准确、可靠,。,缺点:,时间长、费用高,用地较多。,以DNA分子多态性为依据的分子标记鉴定法,RAPD,鉴定,技,术,RFLP鉴定技术,SSR,标记技术,RAPD,鉴定,技术,RAPD,技术,1990,年由美国科学家发明的一种分子标记技术,该技术成才相对比较低廉、操作简单、分辨率高,可检测到基因组中单个砺基的变化,不受环境条件的影响。,RAPD,技术既克服了形态导鉴定时间长、准确性差、适应范围窄的缺点,又避免了蛋白质同工酶位点偏少的不足,而且不存在放射性污染,因此是目前较理想的种子纯度鉴定方法。,SSR,标记技术鉴定法,研究中,SSR,标记由于具有数量丰富、多态性高、遗传上呈共显性、扩增稳定、引物序列易于交流等特点受到广泛重视,,研究表明,可利用,SSR,位点上等位基因间大小的差异和共显性遗传特点鉴定玉米等作物杂交种纯度。,三、杂交玉米种子鉴定的目标,补,充检验规程,完善标准体,系,供,质量依据,净化种子市,场,建,立新品种图谱索引,有效保护品种产权,1,、补充检验规程,完善标准体系,本项目形成了准确、快速、低费和易推广的杂交玉米组合纯度鉴定技术,,补充了,农作物种子检验规程,完善了种子检验标准体系。,3.,建立新,品种图谱索引,有效保护品种产权,随着植物新品种保护条例的实施,农作物新品种的保护有了法律依据。在新品种保护受理时,可利用该技术辅助进行,DUS,测定,作为新品种保护的依据;同时,利用该技术制作玉米新品种电泳标准图谱库,在计算机中建立索引,可在品种产权纠纷中判定争议品种的新颖性,进而保护品种产权。,四、总结,在玉米种子纯度鉴定工作实践中,要选择适当的鉴定方法,既要满足种子纯度鉴定的简便、快速、准确、高 效的要求,还要大大节省人工和试剂,最大程度的降低检测成本。,作物品种鉴定技术的现状和研究进展,作物遗传育种专业 李稳香,0,前言 作物品种鉴定方法,目前用于作物品种鉴定的方法分为:,种子形态鉴定法,快速测定法,培养生长箱测定法,电泳法,DNA,指纹技术,田间小区种植鉴定法,研究进展主要在生化和分子检测技术方面,1,种子形态鉴定法,依据:种子形态、大小、表面特征和种子颜色等,如,ZB B21001-87,评价:用于鉴定品种的形态特征有限(诸如种子颜色、类型、稃壳颜色等几个形态性状),且这些性状只适用于其品种间差异明显的样品的鉴定,因此,其实用价值并不大。,3,培养生长箱测定法,3.1,途径一:给植株提供加速发育的条件,当幼苗达到适宜评价的发育阶段时,进行鉴定。两种方法:是加速生长。是减少植株季节性条件的需求。,途径二,:,是让植株生长在特殊的逆境条件下,测定不同品种对逆境的不同反应来鉴别不同品种。两种方法:是控制营养条件。是对杀菌剂的损伤反应。,3.2,评价,鉴定范围比种子形态法和快速法范围明显扩大。花颜色、幼苗色素的差异是质量性状,既可用于真实性的鉴定,也可用于鉴定异型株。,局限性:株高、穗数等数量性状的测定只能用于真实性鉴定,不能用于鉴定异型株。,4,电泳法,4.1 1999,版,国际种子检验规程,:,酸性聚丙烯酰胺凝胶电泳(适用于大、小麦种子);,SDS-,聚丙烯酰胺凝胶电泳(适用于豌豆属和黑麦草属种子);,超薄层等电聚焦电泳(适用于杂交玉米种子);,酸性聚丙烯酰胺凝胶电泳(适用于燕麦种子)。,4.4,评价:该法比较简单、快速和稳定、重演性较好。但是,由于同工酶和蛋白质是基因表达的产物,产生的多态性不足够多,对某些品种,特别是亲缘关系较近的品种或组合难以鉴别,而且同工酶和蛋白质的表达也易受环境条件的影响。,5.2,评价:,该法具有多态性丰富、灵敏度高,区分鉴别效果好等优点。,目前用于品种真实性和纯度鉴定的方法还很不成熟,同时,从农业生产的角度而言,种子纯度以农艺性状为根本判定依据,那么基因型或,DNA,指纹的差异是否就对应于农艺性状的差异,或者,DNA,指纹多态性有差异而农艺性状并没有差异。,6,田间小区种植鉴定法,6.1,小区种植鉴定技术的发展,鉴定方法日趋完善。,1969,年,OECD,制定小区种植鉴定方法,,1982,、,1995,年全面修订,,1997,年制定杂交种小区后控鉴定方法;,规范了品种的特征特性。,UPOV,制定了,160,个种的,DUS,检测方法指南,,OECD,的小区鉴定方法标准附录中列入了简化的品种特征特性;,开展了小区鉴定的比较试验,统一检验员的评判标准。,6.2,评价:,田间小区种植鉴定在今后的一定时期内仍是商品种子品种纯度鉴定的唯一认可的标准方法;,适应范围广,技术简单易行。能适用于所有作物种子,这是其他方法无法想象和比拟的。是最为可靠和准确的方法;,缺点主要是在时间上无法满足种子贸易的验证需要,费工、费时。,
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