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,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,课外:,名校精品课程,微生物学相关:,理论课:,微生物学原理与探索,实验四 微生物培养基的配制,一,.实验目的,1.掌握培养基配置的步骤。,2.了解常见的灭菌方式,掌握高压灭菌的原理及操作。,3.掌握基本实验器材的包扎。,二,.,实验原理,培养基的概念:,由人工配制的能够满足微生物生长、繁殖或积累代谢产物所用的营养基质。,培养基的六大营养因素:,碳源:,氮源:,能源:,生长因子:,无机盐:,水:,2,、,按照培养基用途,基本培养基,(minimum medium),不少微生物需要的营养物质,除少数几种外,大部分是相同的,因此,可以按照基本营养成分配制成一种培养基,这种培养基 就成为基本培养基。,富集培养基,(enrichment midium),在自然情况下,各种微生物总是混杂在一起生长的,为了分离某种微生物,可以根据这种微生物的营养要求,配制出适合它生长而不利于其他微生物生长的培养基。,鉴别培养基,(differential medium),根据微生物的代谢特点,通过指示剂的显色反应,用于鉴别不同微生物的营养基称为鉴别培养基。,3,、,按照培养基的成分,合成培养基,(,synthetic medium,),这类培养基中营养物质的浓度和化学成分完全清楚,组分成分精确,重复性强,但微生物在这类培养基中生长缓慢。,天然培养基,(,natural medium,),采用动、植物组织或微生物浸出物,如牛肉膏、蛋白胨、麦芽汁、玉米粉、马铃薯、牛奶、血清、酵母膏等为原料配制而成。,半合成培养基,(,semisynthetic medium,),介乎于合成培养基和天然培养基之间,由成分确定的化学药品和天然动、植物组织或微生物浸出物组合而成。,灭菌和消毒技术,1.,火焰灼烧,2.,干热灭菌,3.,湿热灭菌,常压蒸汽灭菌:巴氏消毒法,间歇灭菌法,,蒸汽持续灭菌法,高压蒸汽灭菌:,4.,过滤除菌,5.,紫外线杀菌,6.,化学药剂消毒和杀菌,三,.,培养基配置实验方法,成分的换算,原料称量,溶解,牛肉膏,淀粉,定容,调节,pH,:酸碱,分装,液体:试管,,锥形瓶,1/3,固体:锥形瓶,称量琼脂,(2%),塞棉塞和包扎,四,.,培养基配置种类,肉汤蛋白胨 固体,1.5L,(,500ml,三角瓶分装,X 5,),马丁氏培养基 固体,1.5L,(,500ml,三角瓶分装,X 5,),高氏一号 固体,1.5L,同上,淀粉培养基 固体,1.5L,同上,葡萄糖蛋白胨水培养基 液体,5ml/,试管,50,支,蛋白胨水培养基 液体,5ml/,试管,50,支,无菌水,4.5ml/,支,50,支,无菌水,90ml/250ml,三角瓶,5,瓶,(10,颗玻璃珠,),
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