荧光光谱检测技术.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,荧光光谱检测技术,（一）荧光光谱法（fluorescence sqectroscopy）,某物质的分子吸收了外界能量后,能发射出荧光,根据发射出的荧光光谱的特征和强度对物质进行定性和定量的分析方法称为荧光光谱分析法,（二）荧光的产生及荧光光谱,1荧光的产生,吸收光能被激发,无辐射跃迁放出部分能量,从第一电子激发态最低振动能级跃迁回基态的各振动能级，以光的形式放出能量荧光。,无辐射跃迁放出能量回到基态最低振动能级。,荧光发射波长比吸收的入射光波长要长些，被物质吸收的光称为激发光，发出的光辐射称为荧光。,2激发光谱与荧光光谱,3.荧光分析仪器,（四）影响荧光测定的因素,1激发光源,2温度,3溶液pH值,4散射光的影响,5溶剂,6荧光熄灭,（五）荧光分析方法和应用,1定性分析,2定量分析 依据,3应用,1）在生物化学中的应用,生物化学是荧光光谱仪应用较为广泛的领域，大量具有生物意义的物质，如氨基酸、蛋白质、酶和辅酶、嘌呤、嘧啶、卟啉、核酸、维生素A、B、C、D、E、K等等，均可用荧光光谱仪有效进行分析测定。如用荧光法测定血液和动物组织中的生育酚，激发光波长为295nm，发射波长为325nm。卟啉类化合物是一类广泛存在于自然界的化合物，与生命现象关系最为密切的有叶绿素、血红素、细胞色素、维生素B,12,等。用荧光光谱仪对这些化合物进行鉴定和定量分析相当有效。用直接或间接的方法对核酸（DNA、RNA和双链多聚核苷酸等）进行荧光测定，其检测限可低于10,-9,g/ml水平，选择性也相当高，并可区分不同结构的核酸。,2）在医药学中的应用,荧光光谱仪在医学中的应用是多方面的，包括膜结构和功能的研究，抗体形态的确定，生物分子的异质研究，药物相互作用的评价，酶活性和反应的测定，荧光免疫分析，体内化学过程的监测等等。荧光光谱仪用于药物检测是极有效的工具，应用相当广泛。多种抗疟药、抗生素、抗结核药、止痛药、强心药、抗高血压等药物可直接或间接用荧光谱仪检测。,3）在环境保护中的应用,