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单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,药敏试验概述,第 一 章,药敏试验专题知识,第1页,第一节 药敏试验定义,药敏试验简称药品敏感试验(或耐药试验)。意在了解病原微生物对各种抗生素敏感(或耐受)程度,以指导临床合理选取抗生素药品微生物学试验。一个抗生素假如以很小剂量便可抑制、杀灭致病菌,则称该种致病菌对该抗生素“敏感”。反之,则称为“不敏感”或“耐药”。,定义,药敏试验专题知识,第2页,当前,“对症下药”已经变得难以奏效。首先,致病菌种类发生了改变,一个疾病能够由各种病原菌所引发,包含致病菌和条件致病菌;其次,感染人群发生改变,从健康人群到老年人、长久使用激素、免疫抑制剂及放疗、化疗人群,临床症状经常不经典;最终,早期不规范使用抗生素,也会造成临床症状不经典。,对症下药,第二节 还能轻松对症下药吗?,与此同时,“对菌下药”又难以取得满意效果。耐药菌尤其是多重耐药菌出现,使临床医师按照抗生素作用机制选择12种抗菌药品不能覆盖常见病原菌。,所以,药敏试验成为临床工作主要伎俩之一。,对菌下药,药敏试验专题知识,第3页,第三节 药敏试验意义,B,D,A,C,指导临床医生合理选择抗生素,,,AST,结果为“耐药”,则应更换药品,。,监测耐药性,分析耐药菌变迁,掌握耐药菌感染病流行病学,控制和预防耐药菌感染发生和流行。,提供所选择药品依据;,可预测抗菌药品治疗效果,,“敏感”治疗可能有效;“耐药”可能失败;,药敏试验专题知识,第4页,药敏试验惯用方法,第 二 章,药敏试验专题知识,第5页,第一节 药敏试验惯用方法,01,Kirby-Bauer,法(,K-B,纸片琼脂扩散法)和,直接纸片药敏法,纸片扩散法,02,琼脂稀释法和肉汤稀释法。,稀释法,03,抗生素浓度梯度法,-E,试 验(,E-test,),抗生素浓度梯度法,药敏试验专题知识,第6页,为了解致病菌对哪种抗菌素敏感,以合理用药,降低盲目性,往往应进行药品敏感试验。其大致方法是:从病人感染部位采取含致病菌标本,接种在适当培养基上,于一定条件下培养;同时将分别沾有一定量各种抗生素纸片贴在培养基表面(或用不锈钢圈,内放定量抗生素溶液),培养一定时间后观察结果。因为致病菌对各种抗生素敏感程度不一样,在药品纸片周围便出现不一样大小抑制病菌生长而形成“空圈”,称为抑菌圈。抑菌圈大小与致病菌对各种抗生素敏感程度成正比关系。于是能够依据试验结果有针对性地选取抗生素。,YAO MIN SHI YAN DA ZHI FANG FA,第二节 药敏试验大致方法,药敏试验专题知识,第7页,试验原理,将含有定量抗菌药品纸片贴在已接种测试菌琼脂平板上,纸片中所含药品吸收琼脂中水分,溶解后不停向纸片周围扩散形成递减梯度浓度。在纸片周围抑菌浓度范围内测试菌生长被抑制,从而形成无菌生长透明圈即为抑菌圈。抑菌圈大小反应测试菌对测定药品敏感程度,并与该药对测试菌,MIC,呈负相关关系,即抑菌圈愈大,,MIC,值愈小,一、纸片扩散法,药敏试验专题知识,第8页,判定标准,一、药敏试验结果,应按抑菌圈直径大小作为判定敏感度高低标准。,表一 药敏试验判定标准,详细对于不一样菌株,及不一样抗生素纸片需参考NCCLs标准或者CLSI标准。,二、药品敏感试验判定标准参考表1,多黏菌素抑菌圈;在9毫米以上为高敏,69毫米为低敏,无抑菌圈为不敏。,抑菌圈直径(毫米),敏感度,20,以上,极敏,1520,高敏,1014,中敏,10,以下,低敏,0,不敏,药敏试验专题知识,第9页,试验原理,将药品混匀于琼脂培养基中,配制含不一样浓度药品平板,使用多头接种器接种细菌,经孵育后观察细菌生长情况,以抑制细菌生长琼脂平板所含药品浓度测得,MIC,。,MIC,:稀释法所测得某抗菌药品能抑制被检菌肉眼可见生长最低浓度,二、稀释法,药敏试验专题知识,第10页,试验原理,E,试条是一条,5mm50mm,无孔试剂载体,一面固定有预先制备,浓度呈连续指数增加稀释抗生素,另一面有读数和判别刻度。将,E,试条放在细菌接种过琼脂平板上,经孵育过夜,围绕试条显著可见椭圆形抑菌圈,圈边缘与试条交点刻度浓度即为抗生素抑制细菌最低浓度。,三、,抗生素浓度梯度法,-E,试 验,药敏试验专题知识,第11页,结果判断和汇报,读取椭圆形抑菌,圈与,E,试验试条,交界点值,即,为,MIC,值,药敏试验专题知识,第12页,三种方法比较,纸片扩散法 稀释法,E-Test,优点,缺点,操作简单,重复性好;,成本较低;无需特殊设备;,灵活选择抗菌药品;,结果轻易了解,标准化方法,结果可靠;,检测菌范围更广;,定量检测;,更加好地反应菌株耐药程度,操作简单;,定量检测,不适合用于生长较慢,或生长速率不一样菌株,以及一些苛养菌,操作费时费劲,成本太高,常规试验极难应用;,不足,主要用于苛养菌或厌氧菌,药敏试验专题知识,第13页,对任何分离可疑病原菌,若不能从该,菌种属特征可靠地推知其反抗菌药品敏感性,就需要进行药敏试验。,以下情况无须进行药敏试验:,正常定植菌与感染关系不明确时;,污染菌;,已知细菌对某种抗生素天然耐药;,已知细菌对某种抗生素全部敏感。,第二节,哪些细菌需要做药敏试验?,药敏试验专题知识,第14页,普通细菌培养,幽门螺旋杆菌,血培养,痰培养,其它,第三节 安康检验微生物检测,当前我中心开展微生物检测主项目众多,比较常见有血培养(需氧、厌氧)、幽门螺旋杆菌培养、骨髓培养、中段尿,+,菌落计数、大便常规培养、霍乱弧菌培养、咽拭子、痰培养、脑脊液培养、穿刺液培养、胸腹水培养、浓汁及创伤、眼耳分泌物、前列腺液培养、念珠菌培养、普通细菌培养、肥达氏反应、外斐氏反应等数十种。,药敏,药敏试验专题知识,第15页,小结,药品敏感试验后,应选择高敏药品进行治疗,也可选取两种药品帮助使用,以降低耐药菌株。在选择高敏药品时应考虑药品吸收路径,因为我们药敏试验是药液直接和细菌接触,而在给患者用药时候,必须经过机体吸收才能使药品到达一定效果,所以在给患者用药时,高敏药品一定要配适当宜给药方法,这么才会到达好治疗效果。,药敏试验专题知识,第16页,医院取得性感染,第 三 章,药敏试验专题知识,第17页,医院感染定义,医院感染,(,Nosocomial Infection,,,Hospital Infection,),概念,指住院病人在医院内取得感染,包含在住院期间发生感染和在医院内取得出院后发生感染;但不包含入院前已开,始或入院时已存在感染。医院工作人员在医院内取得感染也属医院感染。(,,,MOH,),药敏试验专题知识,第18页,院感,医院感染,(,Nosocomial Infection,,,Hospital Infection,),概念,指住院病人在医院内取得感染,包含在住院期间发生感染和在医院内取得出院后发生感染;但不包含入院前已开,始或入院时已存在感染。医院工作人员在医院内取得感染也属医院感染。(,,,MOH,),第二章 医院取得性感染(医院内感染),药敏试验专题知识,第19页,院感,医院感染日益成为一个严峻问题摆在广大医务工作者面前。当前我国每年大约有5000万住院病人,其中约有500万患者出现医院感染,每年造成额外医疗消费约100亿人民币。在美国医院感染发生率在5%10%,每年造成额外医疗消费约为175350亿美元。除了经济上损失以外,更严重是给患者带来巨大危害。,第二章 医院取得性感染(医院内感染),药敏试验专题知识,第20页,新加坡最严重院内感染,,“,医院幽灵,”,无处不在,近日,新加坡中央医院遭遇建院史上最严重院内感染,该院近期病人中22人患上丙型肝炎,其中4人因并发症和败血症死亡。这一事件引发国际医院界对于丙型肝炎院内感染探讨。,事件背后有个疑问,新加坡这么医疗体系较为完善国家,为何会发生如此严重事故?怎样防止院内感染这个“医院幽灵”?,药敏试验专题知识,第21页,近年我国发生几起重大院内感染事件,一、西安交通大学一从属医院八例患儿死亡,9月3日起,西安交通大学医学院第一从属医院新生儿科9名新生儿相继出现发烧、心率加紧等临床症状,其中8名新生儿发生弥漫性血管内凝血相继死亡,1名新生儿经医院治疗好转。调查认为:该事件为医院感染所致。事后撤消该院院长和主管副院长职务;免去医务部、护理部等相关职能部门责任人职务;免去医院新生儿科主任、护士长职务;交大一附院赔偿每位死亡患儿家眷18万元。,二、安徽宿州“眼球事件”医院感染管理之痛,12月11日,安徽省宿州市立医院眼科医生和来自上海眼科主任医师徐某等人为10名患者白内障超声乳化手术,第二天护士发觉10名患者眼睛发生感染!其中9名患者应施行眼球摘除手术,另一名患者施行玻璃体切割手术。,三、非经典性肺炎(SRAS),2月首次发觉SARS于广东后涉及香港等地,并快速蔓延到世界27个国家和地域。截至5月18日12时,全国内地共累计汇报非经典肺炎病例4698例,其中医务人员917例,死亡224例。在SARS防控中17名医务人员以身殉职。SARS失控与医院感染亲密相关,SARS最终控制也是得力于良好医院感染控制办法!时任卫生部部长免职、北京市长免职,各地政府和医院相关责任人受到不一样程度处罚或处理。,药敏试验专题知识,第22页,
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