微生物检验技术复习课.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,微生物检验技术复习课,微生物检验技术复习课微生物检验技术复习课第一章 绪论了解微生物污染产品的来源6个,理解微生物检验涵义及意义3点,了解微生物检验的任务5点、范围4点和对象7个了解为什么要学这门专业课,第一章 绪论,了解微生物污染产品的来源6个,理解微生物检验涵义及意义3点,了解微生物检验的任务5点、范围4点和对象7个,了解为什么要学这门专业课,*,第二章 细菌检验常规技术,1、微生物检验的根本程序?食品微生物检验的一般程序,7步，其中每步的具体内容,2、食品微生物检验的指标?4个,3、微生物检验常规操作技术,4、微生物培养及实验根本操作技术包括哪些？6个方面，其中具体内容,例如：培养基的类型和用途?微生物接种方法包括哪些？,5、检验操作过程的无菌操作要求包括哪些内容？,6、革兰氏染色方法：负染色方法,7、细菌、真菌、病毒如何别离纯化？,第一节 微生物检验的根本程序,检验前的准备,样品的采集,样品的送检,样品的处理方法,致病菌检验参考菌群的选择,样品的检验,检验结果的报告,4,食品微生物检测,微生物检测,常规微生物,检测,致病微生物,检测,常规微生物工程：细菌总数、大肠菌群、酵母总数、霉菌总数，此类细菌不致病，但会严重影响食品的外观及风味。目前常用微生物培养法来计数菌落，允许有该类菌落，但菌落总数不能超标。,致病微生物工程：沙门氏菌、李斯特菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌O157：H7、弯曲杆菌、致病弧菌、副溶血弧菌、志贺氏菌、假单胞菌等。致病微生物在食品中是绝对不允许存在的，所以快速检测食品中是否存在有致病微生物，是食品平安检验的重中之重。,实例：,5,食品微生物检验的一般步骤,样品采集,与送检,样品预处理,选择参考菌群,菌落总数,大肠菌群,致病菌,别离培养,别离培养,增菌,纯化,染色镜检,生化试验,血清学试验,动物试验,结果报告,检验前的准备,检验过程,6,*,第三章 细菌生化试验和血清学试验,细菌生化实验定义、方法原理、本卷须知,细菌鉴定的生化实验原理及现象,1、糖醇类代谢试验,2、氨基酸和蛋白质代谢试验,3、有机酸盐和铵盐的利用试验,4、呼吸酶类试验,5、毒性酶类试验,1,、糖醇类代谢试验,一糖醇类发酵试验,二葡萄糖氧化发酵O/F试验,三V-P试验,四甲基红Methyl Red试验 MR,五七叶苷水解试验,六甘油品红试验,8,制备好的培养基对照管,培养基不变色,非发酵菌,斜面红色，,底面黄色,培养基全黄色,斜面黄色、底部黑色，并产生,H,2,S,斜面红色，底部黑色，产生,H,2,S,底面黄色，并产生,CO,2,9,5,、毒性酶类试验,溶血,试验,链激酶,试验,卵磷脂酶,试验,血浆凝固酶,试验,10,甲型-溶血,乙型-溶血,丙型-溶血,11,第四章 细菌常规检验 各论,细菌：,20,种,显微形态及,染色特征,培养特性,生化特性,检验方法,大肠埃希氏菌、沙门氏菌,金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌,副溶血弧菌,蜡样芽孢杆菌,产气荚膜梭菌,单核增生李斯特菌,布氏杆菌,椰毒假单胞菌酵米面亚种,空肠弯曲菌,结核分枝杆菌,第五章 真菌及真菌毒素的检验,1,、了解真菌的定义、分类、培养条件和方法、菌落形态,2,、霉菌的鉴定步骤，真菌产毒特征,3,、真菌毒素的种类、毒性作用和检测方法：,(,一,),化学检验法；,(,二,),免疫学检验法；,(,三,),生物学检验法,真菌毒素的种类,肝脏毒,主要致肝细胞变性、坏死，或引起肝硬化、肝癌，如黄曲霉毒素等。,肾脏毒,主要引致急性或慢性肾脏病变，可使肾功能完全丧失，如橘青霉素等。,神经毒,主要造成大脑和中枢神经系统的损害，引起严重的出血和神经组织变性，如黄绿霉素。,造血组织毒,主要损害造血系统，发生造血组织坏死或造血机能障碍、白血球减少症等，如某些镰刀菌毒素。,中毒性,肝脏毒,肾脏毒,神经毒,造血组织毒,致畸、致癌、致突变,毒素的产生,首先取决于菌株，其次依赖于外界环境，如基质、温度和湿度。,基质对霉菌的生长和产毒有一定的影响。一般而言，真菌产毒菌株主要在食物、粮食、饲草等植物上生长产毒，在乳、蛋等动物源基质上产毒能力较低。,霉菌的生长繁殖与温度有密切关系，大多数最适温度为,2530,，低于,l0,或高于,40,生长减弱，产毒素能力也会受到影响。,基质的水分、空气的湿度与真菌的生长繁殖和产毒素能力密切相关，基质含水量在,17%18%,时为真菌产毒素的最适条件。,中毒性,毒素的检验 实例,检测真菌毒素有许多方法，如检测黄曲霉毒素有生物学方法和ELISA法等。,生物学方法主要用于检测真菌毒素的毒性，如用鸡胚、小白鼠作毒性试验，观察动物中毒死亡或出现肿瘤。,ELISA法操作简便，并具有平安快速高效、费用低，适用于大批量标本的筛选。,中毒性,4、真菌的常规实验室检验法镜检、培养,5、真菌的主要生化反响实验7个,6、病原真菌的分类和特征,1感染性：新生隐球菌、荚膜组织胞浆菌、白色念珠菌的微生物学检验典型例子,2中毒性：重点在掌握毒素,黄绿青霉、桔青霉、岛青霉产生的毒素及特征,镰刀菌属产生的毒素种类及其理化性质,3两性兼有：曲霉的微生物学特征及产生毒素的种类和性质,黄曲霉的微生物学特性和毒素特征？,第六章 病毒的检验,1、了解病毒的大小、形状、性质,*2、病毒的培养方法及优缺点实验动物、鸡胚、细胞培养法,动物接种 和鸡胚接种的部位和适用范围,*3、细胞培养的类型、方法和适用范围,类型：原代细胞、二倍体细胞株、传代细胞系,方法：静置培养、旋转培养、悬浮培养、微载体培养,*4、评价病毒在培养细胞中增殖的指标有哪些？,CPE效应及现象、红细胞吸附、干扰现象、细胞代谢改变、包涵体,*5、病毒数量和感染性毒价的测定指标和方法,指标：PFU/mL、LD50、ID50、ELD50、EID50、TCID50,方法：有空斑试验、终点稀释法、荧光-斑点试验、转化试验，动物接种实验、鸡胚接种实验,*6、病毒如何进展别离鉴定？P35-40 (禽流感病毒为例),7、如何检测病毒颗粒？,方法：电镜技术、血凝试验、病毒酶活性测定、绿色荧光蛋白标记,8、病毒感染的快速诊断详细,9、病毒的血清学诊断技术包括哪些？掌握技术的名称,1、免疫荧光技术,2、酶联免疫吸附试验ELISA,3、免疫沉淀技术,4、免疫转印技术,5、中和试验,6、血凝试验和血凝抑制试验,7、补体结合试验,谢谢欣赏,