BRM-SJS大鼠长期毒性试验.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,*,BRM-SJS,大鼠长期毒性试验,摘要：,本研究观察了,BRM-SJS,用药过程中对大鼠进食、生长、血象、肝肾功能生化指标，主要脏器系数和组织形态学影响。应用,Wistar,大鼠,160,只，采用三个剂量，连续灌胃给药,90,天，即,1.0g/kg 20ml,，,2.0g/kg 20ml,，,4.0g/kg 20ml,。,在给药过程中和停药后,30,天定期检查上述有关指标。,结果证实：,BRM-SJS,对大鼠进食，血液学指标，血液生化指标均未见明显影响，对,9,种重要脏器，,(,心、肝、脾、肺、肾、胰、肾上腺、睾丸或卵巢,),的脏器指数无明显影响，肉眼观察未见病理改变，镜下观察亦无阳性发现。,一、试验目的：,观察大鼠在长期服用,BRM-SJS,过程中，有无蓄积性或迟缓性毒副反应，以及出现的毒副反应在停药后的,30,天内是否能够恢复正常。,二、材料与方法：,1.,药物：,BRM-SJS,，,北京临床肿瘤基因研究所提供。,2.,动物：,Wistar,大鼠,160,只，,50-60g,，,月龄,1.5,个月。雌雄各半，二级实验动物。购自中国医学科学院实验动物中心，合格证号医动字,01-3008,号。,本所实验动物室实验动物设施合格证号：京动管准字,(1994),第,103,号。,动物实验设施合格证号，京动管准字,(1996),第,007,号。,3.,试验方法：,大鼠购入后观察,1,周，未发现不健康大鼠。随机分为,4,组，每组,40,只，雌雄各,20,只，即,(1),空白对照组：灌服与药液同体积的供动物饮用的蒸馏水,20ml/kg,；,(2)RBM-SJS,低剂量组：,1.0g/kg,；,(3)RBM-SJS,中剂量组：,2.0g/kg,；,(4)BRM-SJS,高剂量组：,4.0g/kg,。,给药容积,2ml/100g,体重。每天灌胃，连续,180,天。服药的三个月内每周称重并调整药量，平时观察动物服药后的反应，包括饮食、活动、毛发、神志、口鼻眼眦、二便及死亡情况。每月定期记录,1,次日进食量。,给药前，给药后,30,天，,60,天，,90,天和停药后,30,天，分别由尾静脉取血检查计数红细胞,(RBC),，,血色素,(,Hb,),，,白细胞,(WBC),及分类，血小板,(P),等指标。给药,90,天和停药后,30,天处死前，摘取眼球，取血测定血液学,10,项生化指标，包括谷草转氨酶,(AST),，,谷丙转氨酶,(ALT),，,碱性磷酸酶,(ALP),，,总蛋白,(TP),，,白蛋白,(ALB),，,总胆红素,(T-BIL),，,肌酐,(,Crea,),，,总胆固醇,(T-CHOL),，,尿素氮,(BUN),和血糖,(GLU),。,每于尾静脉采血日，同时作尿常规检查。,血象检查用日本东亚,F820,全自动血象分析仪，血液生化指标检测用,Olympus AU600,生化检测仪进行，病理切片采用,Olympus BH-20,光学显微镜阅片。,给药结束后,24h,处死中、低剂量组全部大鼠，对照组、高剂量组处死半数动物,(,雌雄各,20,只,),，停药后,30,天，再处死两组剩余的半数动物，作恢复期观察。,凡处死后的大鼠，立即进行尸体解剖，目视主要脏器的外观是否有病理改变，留取并称重心、肝、脾、肺、肾、胰、肾上腺、睾丸或卵巢，用以计算脏器指数,(g/100g,体重,),，留取全部或部分组织器官用,10%,福尔马林液固定，常规程序切片，,HE,染色后进行组织形态学镜检。,三、试验结果,1.,动物一般状况：,4,组动物试验期间饮食正常，活动自如，口鼻眼雌无分泌物，毛发光泽不紊乱。试验期内，动物无死亡。表,1,显示,BRM-SJS,对大鼠进食量的影响，数据显示，大鼠的组间进食量无明显差异。,2.BRM-SJS,对大鼠体重的影响，结果见表二。停药后次日称重，高剂量雄性大鼠体重为,290.8,18.5,克，稍低于对照组相应的,330.3,23.3(P0.05),。,其余各组动物同期比较体重增长基本一致。,3.BRM-SJS,对大鼠血象的影响：,白细胞：,给药前后各组大鼠同期比较。外周白细胞计数无明显差异，波动于正常值水平。见表,3,。,白细胞分类：,表,4,说明试验期间大鼠外周白细胞分类的组间同期比较，,W-SCC,和,W-LCC,均在正常值范围，无明显差异。,红细胞和血色素：,表,5,、表,6,为大鼠外周血红细胞和血色素检测结果，同期组间比较无差异，均在正常值范围。,血小板计数：,亦显示,5,次查血各组数值都在正常值水平。组间同期比较或组内不同期比较，均无明显差异,(,表,7),。,4.,血液生化指标：,外周血生化指标测定结果证实，给药结束和恢复期后的,10,项指标约在正常值水平，同期或不同期组间比较基本一致,(,表,8),。,5.,尿常规：,给药前、中、后,5,次检查结果，尿常规各项指标均未见异常,(,表,10),。,6.,主要脏器指数：,表,9,显示大鼠,9,种脏器的重量和脏器的指数，表明心、肝、脾、肺、肾、胰、肾上腺，睾丸或卵巢的重量和脏器系数均属正常范围。服药组与对照组比较无明显差异。,7.,病理组织学检查,心脏：,各组大鼠心肌细胞排列整齐，未见心肌变性，坏死或断裂，间质内未见炎症细胞浸润。,肝脏：,各组大鼠肝脏的肝小叶轮廓清楚，肝细胞索围绕中央静脉呈放射状排列。服药结束后和恢复期后，部分大鼠肝细胞出现浊肿变性，这种变化对照组和服药组均存在，且发生率相近。,脾：,脾包膜完整，脾小结清晰。,肺：,各组大鼠的肺泡清晰，细支气管粘膜完整。,肾：,皮质髓质界限清楚，皮质内肾小球结构可见，无肿胀、纤维化，肾曲管上皮完整。,卵巢：,雌性大鼠卵巢各级卵泡发育正常，黄体形成可见。,胃、胰、肾上腺、睾丸：镜下检查均为正常结构。,四、小结：,大鼠连续灌服,BRM-SJS3,个月，各服药组动物的一般状况，体重，血液学检查，血液生化学指标检查，尿常规，主要脏器重量和脏器系数均在生理范围。病理形态学检查中，部分大鼠肝细胞出现浊肿变性，这种改变属非特异病因的可逆性病变，且对照组、给药组发生率相近，因此应与服药无关。本实验中在大鼠服药的最高剂量为,4.0g/kg,时，动物无死亡，但对体重增长有一定影响。经,30,天恢复期后，已与对照组体重无异。,BRM-SJS,在长毒试验中未出现明显的毒性作用。,