ABO血型和MN血型鉴定.ppt

,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,血样本,血样本,血标本,红细胞悬液制备,抗凝或不抗凝的血标本,洗涤,压积红细胞,配制,红细胞悬液,2-3%,的红细胞悬液 试管法血型鉴定、效价滴,定,5%,的红细胞悬液 玻片法血型鉴定、间接抗,人球蛋白试验,10%,的红细胞悬液 抗体亲和力测定,血清标本,抗凝或不抗凝血标本,37,水浴箱,竹签使血块与,试管壁分离,离心,将血清吸至干净试管待用,ABO,血型鉴定,原理,：,根据,ABO,血型的分型原则及其独特的性质，利,用凝集试验技术通过正定型（红细胞定型）和反定,型（血清定型）两组试验可准确鉴定,ABO,血型。,试剂,：,抗,A,、抗,B,试剂血清,A,型、,B,型和,O,型试剂红细胞悬液,2-3%,受检者红细胞悬液和血清或全血,ABO,血型鉴定,方法,：,玻片法 不适于血清抗体鉴定,试管法 正定型、反定型,结果解释,凝集为阳性,即被检红细胞膜上有与该试剂血清抗体相对应的抗原；或被检血清中有与该试剂红细胞抗原相对应的抗体。,不凝集为阴性,加试剂抗体血清,加被检红细胞悬液,离心,相对应的抗原抗体反应,观察结果,ABO,血型判断,血 正定型 反定型,型,抗,-A,抗,-B AC BC OC,A,+,+,B,+,+,O,+,+,AB,+,思考题,ABO,血型的分类原则是什么？,A BO,血型的分类原则是根据红细胞膜上所存在,的抗原，血清中所存在的抗体来进行分类的。通常使,用抗,-,A,和抗,B,两种血清及,A,型、,B,型和,O,型三种试,剂红细胞来鉴别。如受检者红细胞被抗血清凝集，说,明红细胞膜上存在相应的抗原；如不发生凝集说明不,存在相应抗原；如受检者血清与试剂红细胞发生凝集,，说明血清中存在相应的抗体；如不发生凝集，说明,不存在相应抗体。,为什么,ABO,血型鉴定应采用“正反定型,”,两种方法？,因为,ABO,血型鉴定,主要依据受检者红细胞与,抗,A,、抗,B,试剂血清反应结果确定,此法称正定型法；,也可通过受检者的血清与,A,型、,B,型和,O,型试剂红细,胞反应结果确定,此法称反定型法，同时采用正反定,型法,并互相核对其结果是否一致是一个可靠的血型,鉴定法。,为什么在反定型中使用,O,型红细胞？,因为有些受血者或供血者血清中存在因免,疫、妇女妊娠或不当输血而引起的抗,A,或抗,B,以,外的抗体，这些抗体不是自然所期望存在的。,血清反定型时，使用,O,型红细胞可在,ABO,血型,鉴定试验过程中检测出受检血清中是否有“不规,则”抗体的存在。,为什么红细胞悬液过浓或过淡均可出现假阴性反应结,果？,因为抗原、抗体在适当的比例下，反应最强。若,红细胞悬液过浓，则抗原过剩，抗体不足，每个红细,胞均只能吸收少量抗体，不足以形成凝集。若红细胞,悬液过淡，则红细胞间距离较大，不易集聚在一起，,不形成凝集。在实际血型鉴定时，玻片法用,5%,红细,胞悬液敏感性较强，并应在鉴定过程中不断摇动玻片,以促使其相互接触。试管法用,2%,浓度的红细胞悬液,敏感性较好，容易观察凝集。,为什么玻片法血型鉴定要严格规定观察结果的时间？,凝集反应出现的快慢与强弱是由抗原抗体的性,质决定的,如果抗原的抗原性强，抗体效价高，凝集,反应的第一，第二阶段可以在数秒内完成；如抗原,的抗原性弱，抗体效价也低，则凝集反应不明显，,反应需要一段时间才能完成。,因为血清在空中暴露时间过长，发生浓缩，从,而使红细胞聚集，造成假阳性结果；如果不等反应,完成便判定反应结果，可使阳性结果误报成阴性结,果，造成假阴性。所以玻片法血型鉴定要严格规定,观察结果的时间,凝胶试验使用的试剂和器材,凝胶技术,凝胶法鉴定,ABO,血型,优点：,敏感,：,在凝胶试验中常能发现其它试验不易发现的问题。,结果可保存,：,凝胶试验的结果可在冰箱中保存数日，并且较容易被拍成照片。,操作技术要求较低,：,凝胶试验的操作主要是简单的加样和判读，孵育、离心过程都有专门的设备。其中能被人为改变的因素较少。,无需洗涤的抗球蛋白试验,：,缺点,不能做反定型,凝胶试验方法成本较高，需要特殊设备。,高度敏感有时也会造成不便。,MN,血型鉴定,试剂,抗,M,、抗,N,试剂血清,M,型、,N,型、,MN,型红细胞,受检者红细胞悬液,方法,玻片法,试管法,结果判读,MN,血型结果判定,抗,M,抗,N,血型,被检红细胞,1,+,M,被检红细胞,2,+,N,被检红细胞,3,+,+,MN,M,+,N,+,红细胞,+,M,-,N,+,红细胞,M,+,N,+,红细胞,+,M,+,N,-,红细胞,