凝集反应试验市公开课一等奖省赛课微课金奖PPT课件.pptx

,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,第二章 抗原抗体反应,第1页,凝集反应,（,agglutination,）,是指,颗粒性抗原,，比如细菌、红细胞、螺旋体、细胞性抗原，或可溶性抗原（或抗体）与载体颗粒结合成,致敏颗粒,后，与对应抗体（或抗原）在适量电解质存在条件下，经一定时间后凝聚成肉眼可见凝集现象。,第2页,凝集反应特点,颗粒性抗原,致敏颗粒,（可溶性抗原或抗体与载体颗粒结合）,电解质存在,肉眼可见凝集现象,第3页,凝集反应发生分两阶段：,抗原抗体特异结合,出现可见颗粒凝集,第4页,凝集反应类型,直接凝集试验,玻片凝集试验：,ABO,血型,试管凝集试验：外斐试验，肥达试验,间接凝集试验,正向间接凝集试验,反向间接凝集试验,间接凝集抑制试验,协同凝集试验,间接血凝试验,胶乳凝集试验,明胶凝集试验,第5页,依据凝集反应中抗原性质，反应方式分为：,直接凝集反应,间接凝集反应,第6页,第7页,直接凝集反应（,direct agglutination,）,细菌、螺旋体和红细胞等颗粒抗原，在适当电解质参加下可直接与对应抗体结合出现凝集，称为直接凝集反应。参加反应颗粒性抗原称为凝集原（,agglutinogen,），抗体称为凝集素（,agglutinin,）。,第8页,玻片法：（定性）,细菌判定,ABO,血型判定,试管法：（半定量）,肥达试验（,Widal test,）,-,伤寒,外斐试验（,Weil-Felix test,）,-,立克次体,交叉配血试验,第9页,间接凝集反应（,indirect agglutination,）,将可溶性抗原（或抗体）先吸附或偶联与免疫无关大小适当颗粒性载体表面，使之成为致敏载体颗粒，然后与对应抗体（或抗原）作用，在适宜电解质存在条件下，出现特异性凝集现象，称间接凝集反应（,indirect agglutination,）或被动凝集反应（,passive agglutination,）。其敏感度高于直接凝集反应和沉淀反应。,第10页,惯用载体：,RBC,聚苯乙烯胶乳（,polystyrene latex,）,明胶颗粒,活性炭,皂土（,bentonite,）,火棉胶,第11页,间接凝集反应分类依据,依据致敏载体用是抗原（正向）或抗体（反向）,依据载体（,RBC,，胶乳，明胶）,依据凝集反应方式（间接凝集试验，间接凝集抑制试验，协同凝集试验）,第12页,间接反应常见类型,间接凝集试验,间接血凝试验,胶乳凝集试验,明胶凝集试验,间接凝集反应应用,第13页,1、（正向）间接凝集试验,第14页,2 反向间接凝集试验,第15页,3、间接凝集抑制试验,第16页,此次试验内容,一、第一次加强免疫,二、,ABO,血型判定,第17页,目标与要求,掌握凝集反应原理与类型,掌握玻片凝集法操作与结果判断,熟悉,ABO,血型判定原理与操作,第18页,玻片凝集法,-ABO,血型判定,试验目标,经过标准血清抗体判定红细胞上,ABO,血型系统抗原，掌握盐水介质法进行,ABO,血型系统正定型基本操作方法和结果判断。,第19页,试验原理,依据,IgM,类特异性血型抗体与红细胞上特异性抗原结合能够出现凝集反应原理，用已知,IgM,类特异性标准抗血清与被检红细胞在盐水介质中反应（室温），若出现凝集想象，表明被检红细胞膜上有与血型抗体相对应抗原，从而判断和判定被检者血型。,第20页,试验材料与方法,试剂：抗,A,血清，抗,B,血清,材料：玻片，采血针，消毒干棉球，酒精棉球等,第21页,试验方法与步骤,1,、标识玻片：取玻片一张，一分为二，分别标识为抗,A,，抗,B,。,2,、采血：用酒精棉球消毒被检者左手无名指或中指内侧，用采血针刺破皮肤，用干棉球擦去第一滴血，稍加挤压，使其流出第二滴血，装入盐水试管，摇匀，即成血细胞悬液。,3,、加抗血清：滴加抗,A,，抗,B,血清于玻片标识处、,4,、加,RBC,：在抗,A,，抗,B,血清中滴加,RBC,各一滴。,5,、混匀：前后左右摇动，观察有没有血细胞凝集出现。,6,、结果：统计受检者红细胞凝集情况及血型判定结果。,第22页,第23页,ABO血型结果判断,抗,B,抗,A,血型,-,+,+,-,+,+,-,-,第24页,间接乳凝试验检测类风湿因子,间接凝集反应也称为被动凝集反应，是将可溶性抗原或抗体吸附于载体颗粒表面、再与对应抗体或抗原结合，出现凝集现象。间接乳凝试验检测类风湿因子。,惯用类风湿因子检测。,第25页,【,操作方法,】,1,、轻轻混匀胶乳试剂,2,、查对阴、阳性对照,3,、在反应板孔中加,1,滴未稀释血清,20ul,4,、然后加,1,滴胶乳试剂在血清中（阴阳性对照同此法）,5,、轻轻摇动其充分混匀,2,分钟内观察结果。,第26页,试验结果,二、,ABO,血型判定结果：,1,、,A,型血抗,A,试剂凝集为。,2,、,B,型血抗,B,试剂凝集为。,3,、,O,型血抗,A,、,B,试剂不凝集为。,4,、,AB,型血抗,A,、,B,试剂都凝集为。,第27页,三、,RF,测定结果,1,、有凝集出现,RF,为阳性。,2,、无凝集出现,RF,为阴性。,第28页,注意事项,1,、加强无菌操作、安全防范意识。,2,、如一次采血要求采集几个标本时，应按一下次序采血：血培养管、无抗凝剂及添加剂管，凝血现象，有抗凝剂（添加剂）管。,3,、在做配型试验时，如发觉有不配合现象，则取受检者血清，用已知,A,或,B,血型红细胞进行反定型试验，以核实原判定血型是否正确。,4,、,RF,试验阴阳性对照经检测,HbAg,、,HCV,、,HIV,为阴性，但仍须如病人样品一样小心处理。,第29页,思索题,凝集试验有哪些？可用于检测原理是什么？,第30页,