资源描述
安徽省合肥二中2026年高三第三次模拟联考生物试题试卷
请考生注意:
1.请用2B铅笔将选择题答案涂填在答题纸相应位置上,请用0.5毫米及以上黑色字迹的钢笔或签字笔将主观题的答案写在答题纸相应的答题区内。写在试题卷、草稿纸上均无效。
2.答题前,认真阅读答题纸上的《注意事项》,按规定答题。
一、选择题:(共6小题,每小题6分,共36分。每小题只有一个选项符合题目要求)
1.下图所示的单基因遗传病在人群中的发病率为1/a。下列分析正确的是( )
A.该病是伴X染色体隐性遗传病 B.Ⅲ1为纯合子的概率应是2/3
C.Ⅰ1与Ⅲ3为携带者的概率相同 D.据图分析可知a的值应是9
2.将与生物学有关的内容依次填入下图各框中,其中包含关系错误的选项是( )
框号
选项
①
②
③
④
⑤
⑥
A
核酸
DNA
RNA
转运RNA
核糖体RNA
信使RNA
B
减数分裂
减Ⅰ
减Ⅱ
同源染色体分开
非同源染色体自由组合
非姐妹染色单体交叉互换
C
生命活动调节
植物的激素调节
动物生命活动调节
神经调节
体液调节
免疫调节
D
生态系统
非生物的物质和能量
生物群落
生产者
消费者
分解者
A.A B.B C.C D.D
3.土壤微生物是反映土壤质量状况的重要指标,常以磷脂脂肪酸总量来表示。科研人员开展芒萁(蕨类植物)对马尾松林植被恢复过程中土壤微生物群落影响的研究,测定结果如下图。以下推测或结论不成立的是( )
A.土壤微生物细胞中磷脂脂肪酸的含量比较稳定
B.测定中随机设置取样地且同一类型样地要重复取样
C.在植被恢复初期,芒萁对土壤微生物的影响较小
D.随着植被的恢复,芒萁对土壤微生物的影响变弱
4.向正在进行有氧呼吸的细胞悬液中分别加入a,b,c,d四种抑制剂,下列说法正确的是
A.若a能抑制丙酮酸分解,则使葡萄糖的消耗增加
B.若b能抑制葡萄糖分解,则使丙酮酸增加
C.若C能抑制ATP形成,则使ADP的消耗增加
D.若d能抑制[H]氧化成水,则使O2的消耗减少
5.液泡膜上存在H+—ATP酶,能从细胞质中运输质子进入液泡,导致液泡的pH为1.1,细胞质pH为2.0~2.1。液泡这种转运质子的运输方式属于( )
A.易化扩散 B.主动转运
C.扩散 D.胞吞
6.下列关于体温调节和水盐调节的说法,错误的是( )
A.体温调节需要反射弧参与,水盐平衡调节不需要反射弧参与
B.体温调节和水盐平衡调节都能通过反馈调节来维持相对平衡
C.体温调节和水盐平衡调节都需要下丘脑合成的激素的参与
D.体温调节和水盐平衡调节的神经中枢都位于下丘脑
二、综合题:本大题共4小题
7.(9分)微生物的生长繁殖需要不同种类的碳源、氮源、无机盐、生长因子等营养物质,若培养基中的某种营养物质不能被微生物利用,微生物便不能生长。根据这一特性,可将微生物接种在只缺少某种营养物质的基础培养基中,再将所缺的营养物质点植于平板上,该营养物质便逐渐扩散于植点周围。该微生物若需要此种营养物质,便在这种营养物质扩散处生长繁殖,形成肉眼可见的菌落圈,这种测定微生物营养需求的方法称为生长谱法。某兴趣小组尝试用生长谱法测定某种大肠杆菌对糖类(碳源)的需求情况,操作流程如下:
Ⅰ.培养基的制备。该小组所用无碳培养基配方如下(加水定容至1L):
成分
NaCl
KH2PO4
K2HPO4
(NH4)2SO4
MgSO4·7H2O
琼脂
质量(g)
1
1.5
1.5
2
1.2
21
同时配制质量分数为11%的葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、乳糖溶液各51mL。
Ⅱ.将大肠杆菌悬液与溶化并冷却至51℃的固体培养基混匀,倒平板。
Ⅲ.将已凝固的平板背面用记号笔划分为四个区,并注明要点植的糖类名称。
Ⅳ.通过无菌操作分别加入蘸有不同糖类的无菌滤纸片,待平板吸收干燥后倒置培养24小时。
结合所学知识回答相关的问题:
(1)无碳培养基配方中加入(NH4)2SO4的目的是___________。对培养基及糖溶液通常采用的灭菌方法是___________。倒平板后用___________法进行接种。
(2)该小组发现最终在培养基的四个区内均有菌落圈产生,但大小不同,据此得到的初步结论是___________。
(3)如果在此实验中发现某一不被该大肠杆菌利用的碳源的点植区域也长出菌落圈,试分析可能的原因(写出2条即可)______。
(4)生长谱法还可用于某些营养缺陷型菌株(失去合成某种生长因子能力的菌株)的筛选和鉴定,例如大肠杆菌经紫外线诱变处理后会产生一些营养缺陷型突变个体,现已纯化并制备出某营养缺陷型的菌悬液,但不清楚是氨基酸缺陷型、维生素缺陷型还是氨基酸—维生素缺陷型,请简要写出用生长谱法进行鉴定的思路,并预期可能的结果及结论_____。
8.(10分)下图表示人体神经系统对排尿的控制,其中尿道内、外括约肌都是一种环形肌肉,逼尿肌分布于膀胱壁。请据图回答:
(1)当膀胱充盈后,人会产生尿意,请用箭头和图中必要文字、字母表示产生尿意的神经传导途径__________________________________。在神经冲动传导过程中,c神经纤维膜内形成向_____________方向的局部电流。
(2)当尿液进入尿道后,尿道感受器兴奋,兴奋传入初级排尿中枢,进一步加强排尿中枢的活动,这是一种_________(“正反馈”或“负反馈”)调节。
(3)人产生尿意的部位在_________。某人在车祸中下丘脑受到暂时性损伤,出现多尿症状,请分析原因____________________________________。
(4)大部分同学们不记得小时候尿床的经历,这种短期记忆主要与神经元的活动及神经元之间的联系有关,尤其是与大脑皮层下________有关。但是还有部分同学还记得小时候尿床经历,这种长期记忆可能与_______有关。
9.(10分)2020年初,武汉出现了不明原因的肺炎,经检测是由一种新型冠状病毒(NCP)引起的。科研人员正在加紧研制生产NCP的疫苗和探索相应抗体的制备。回答有关的问题:
(1)科研人员提出用康复者血清治疗新冠型肺炎,是因为康复者血清中存在_______(填“抗原”或“抗体”),但该方法存在缺陷,如_______________(答出一点即可)。
(2)针对血清治疗存在的缺陷,研究者从治愈患者捐献的血液中提取浆细胞,然后用_______诱导该细胞和骨髓瘤细胞发生融合。几经努力,最终生产出单克隆抗体,此种方法生产的抗体具有______________________的优点。
(3)科研人员还设想将控制无限增殖的基因(记作X基因)转入人的浆细胞,构建出产生单克隆抗体的细胞系。用PCR技术扩增X基因的前提是需要知道______。若在浆细胞中的染色体DNA上检测到X基因,但该浆细胞死亡或不能增殖,则原因最可能是_______________________。
10.(10分)大肠杆菌是寄生于人和动物肠道中的细菌,是一种常用的生物学实验材料,其代谢产物能与染料伊红美蓝反应,使菌落呈黑色。
(1)下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方。
成分
含量
蛋白胨
1.4g
乳糖
3.4g
蔗糖
3.4g
K3HPO4
3.4g
显色剂
4.3g
琼脂
13.4g
将上述物质溶解后,用蒸馏水定容到144mL
根据用途划分,该培养基属于___________(填“选择”或“鉴别”)培养基,若要分离能分解尿素的细菌需将培养基中_________换成__________,若要鉴定分解尿素的细菌还需将伊红美蓝换成___________。
(3)培养大肠杆菌时,常用的接种方法是_______________________。
(3)培养大肠杆菌时,在接种前通常需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是____________。对已使用过的培养基及其培养物必须经过____________处理后才能丢弃,以防止培养物的扩散。
(4)现有一升水样,用无菌吸管吸取1mL水样至盛有9 mL无菌水的试管中,依次稀释13稀释度。各取4. 1mL已稀释13倍的水样分别接种到三个培养基上培养,记录的菌落数分别为33、36、37,则每升原水样中大肠杆菌数为____________。
(3)为检测严重污染水体中大肠杆菌数量,将水样适当稀释后,取样涂布在上述平板培养基中,应选择颜色为____________的菌落进行计数。该方法是通过统计平板上的菌落数来推测样品中的活菌数,其原理是____________________________________。
11.(15分)自然界里有多种微生物,将其进行合理的筛选、培养和应用,能给医药和化工等生产领域带来巨大经济效益。回答下列问题。
(1)对培养基进行灭菌时,多采取____________法,而对接种环或涂布器灭菌时则用____________法,若要将微生物采用平板划线法进行分离操作,在固体培养基表面连续进行了5次划线,则需要对接种环灼烧____________次。平板划线在做第二次及其后的划线操作时,要从上次划线的____________开始划线,最后一次划的线不能与第一次划的线____________。
(2)将接种后的固体培养基和一个未接种的固体培养基放入恒温箱中____________培养,以减少培养基中的水分挥发。其中,培养未接种的固体培养基是为了____________。长期保存菌种时,应将培养的菌液与____________充分混匀后,放在-20℃的冷冻箱中保存。
(3)甲、乙两组同学用稀释涂布平板法测定某种微生物的数量,在同一稀释倍数下每隔一段时间记录数据(统计时间内微生物总数小于环境容纳量),得到以下结果:
培养时间(小时)
24
48
72
96
甲组菌落均值(个)
18
25
36
32
乙组菌落均值(个)
20
28
38
32
计数时最好取培养____________小时记录的菌落数作为实验结果,一方面是由于培养时间较短,会遗漏菌落数目,另一方面是由于____________。
参考答案
一、选择题:(共6小题,每小题6分,共36分。每小题只有一个选项符合题目要求)
1、C
【解析】
分析系谱图:Ⅱ3患病且为女性,其父母都正常,所以该单基因遗传病为常染色体隐性遗传病(用B、b表示)。该病在人群中的发病率为1/a,说明bb=1/a,b= ,B=1−。
【详解】
A、分析系谱图,该遗传病为常染色体隐性遗传病,在人群中的发病率女性等于男性,A错误;
B、Ⅱ1与Ⅱ2婚配,Ⅱ1产生B配子的概率为(1- ),因为a未知,不能计算出Ⅲ1为纯合子的概率,B错误;
C、Ⅱ3患病,基因型为bb,其父母均为杂合子,基因型为Bb,其后代不患病个体基因型为Bb,所以Ⅰ1与Ⅲ3均为携带者,概率相同,C正确;
D、据图分析,Ⅱ3患病概率为1/4。在随机人群中,隐性遗传病的发病率1/a一般较低,题干信息不能推算出随机人群发病率,D错误。
故选C。
本题结合系谱图,考查基因分离定律的知识及应用,要求考生掌握基因分离定律的实质,能根据题干信息“单基因隐性遗传病”推断遗传病的类型并判断出图中相应个体的基因型,再选出正确的答案。
2、B
【解析】
1、减数分裂过程:
(1)减数第一次分裂间期:染色体的复制。
(2)减数第一次分裂:①前期:联会,同源染色体上的非姐妹染色单体交叉互换;②中期:同源染色体成对的排列在赤道板上;③后期:同源染色体分离,非同源染色体自由组合;④末期:细胞质分裂。
(3)减数第二次分裂过程:①前期:染色体散乱排列在细胞中;②中期:染色体形态固定、数目清晰;③后期:着丝点分裂,姐妹染色单体分开成为染色体,并均匀地移向两极;④末期:核膜、核仁重建、纺锤体和染色体消失。
2、生态系统的组成成分:(1)非生物的物质和能量(无机环境);(2)生产者(自养型):主要是绿色植物,还有少数化能合成型生物;(3)消费者(异养型):主要是动物,还有营寄生生活的微生物;(4)分解者(异养型):主要是指营腐生生活细菌和真菌,还有少数动物。
【详解】
A、核酸包括DNA和RNA两种,RNA又分为mRNA(信使RNA)、rRNA(核糖体RNA)、tRNA(转运RNA)三种,A正确
B、减数分裂过程包括减Ⅰ和减Ⅱ,减Ⅰ前期会出现同源染色体的非姐妹染色单体间交叉互换,减Ⅰ后期会出现同源染色体分离和非同源染色体自由组合,减Ⅱ分裂过程中没有同源染色体,B错误;
C、生命活动的调节包括植物的生命活动调节和动物的生命活动调节,植物生命活动调节主要是植物激素调节,动物生命活动调节包括神经调节、体液调节和免疫调节,C错误;
D、生态系统是指生活在一定区域的所有生物及其生活的无机环境,生活在一定区域的所有生物可构成群落,包括生产者、消费者和分解者,D错误。
故选B。
3、C
【解析】
分析图示:自变量是恢复年限,因变量是磷脂脂肪酸总量,随着恢复年限增长,磷脂脂肪酸总量含量增加,在植被恢复的初期芒萁对土壤微生物活体总量的影响较大,而随着生态系统逐渐成熟,芒萁覆盖对土壤微山物总量的影响减弱,有无芒萁覆盖的差距变小。
【详解】
A、土壤微生物细胞中磷脂脂肪酸的含量比较稳定,故土壤微生物总量常以磷脂脂肪酸总量来表示,A正确;
B、为排除偶然性影响,测定中随机设置取样地且同一类型样地要重复取样,B正确;
C、在植被恢复初期,芒萁对土壤微生物的影响较大,C错误;
D、随着植被的恢复,芒萁覆盖对土壤微山物总量的影响减弱,有无芒萁覆盖的差距变小,D正确。
故选C。
4、D
【解析】
有氧呼吸是指细胞在氧的参与下,通过多种酶的催化作用,把葡萄糖等有机物彻底氧化分解,产生二氧化碳和水,释放能量,生成大量ATP的过程。
【详解】
A、在有氧呼吸过程中,若抑制丙酮酸分解,则丙酮酸的数量的消耗减少,葡萄糖的消耗减少,A错误;
B、若抑制葡萄糖分解成丙酮酸,则丙酮酸的数量减少,B错误;
C、若抑制ATP的形成,则使ADP的消耗减少,C错误;
D、若抑制[H]氧化成水,则使O2的消耗减少,D正确。
故选D。
考点:本题考查有氧呼吸过程的知识。意在考查能理解所学知识的要点,把握知识间的内在联系的能力。
5、B
【解析】
【分析】
方式
跨膜运输
非跨膜运输
扩散
易化扩散
主动转运
胞吞
胞吐
条件
高浓度→低浓度
高浓度→低浓度,载体蛋白
高浓度→低浓度,低浓度→高浓度,载体蛋白,能量
能量
能量
【详解】
液泡pH为1.1,酸性,细胞质pH为2.0~2.1,碱性,液泡中H+浓度大于细胞质中,因此H+能从细胞质中进入液泡(低浓度到高浓度),该方式为主动转运。
故选B。
6、A
【解析】
1、体温调节过程:
在寒冷环境下,下丘脑体温调节中枢兴奋,机体通过皮肤血管收缩,血流量减少,骨骼肌和立毛肌收缩,增加产热量,甲状腺分泌甲状腺激素增多,肾上腺分泌肾上腺素增多,增强细胞代谢等过程维持体温恒定;
在炎热环境下,下丘脑体温调节中枢兴奋,机体通过皮肤血管舒张、增加血流量和汗腺分泌增强,来增加散热,维持体温恒定。
2、水盐平衡的调节过程:
当人体失水过多、饮水不足或吃的食物过咸时→细胞外液渗透压升高→下丘脑渗透压感受器兴奋→垂体释放抗利尿激素增多→肾小管、集合管对水分的重吸收增加→尿量减少,同时大脑皮层产生渴觉(主动饮水);
体内水多→细胞外液渗透压降低→下丘脑渗透压感受器受到刺激→垂体释放抗利尿激素减少→肾小管、集合管对水的重吸收减少→尿量增加。
【详解】
A、由分析可知,水盐平衡调节也需要反射弧参与,A错误;
B、甲状腺激素对下丘脑和垂体有负反馈作用,当甲状腺激素分泌过多时,会抑制促甲状腺激素释放激素和促甲状腺激素的分泌,进而减少甲状腺激素的分泌;当人体失水过多,细胞外液渗透压升高时,垂体释放抗利尿激素增多,肾小管、集合管对水分的重吸收增加,使渗透压下降,反之垂体释放抗利尿激素减少,使渗透压升高,故体温调节和水盐平衡调节都能通过反馈调节来维持相对平衡,B正确;
C、体温调节过程中需要下丘脑合成促甲状腺激素释放激素,水盐平衡调节需要下丘脑合成的抗利尿激素参与,C正确;
D、下丘脑有体温调节中枢,水盐平衡的调节中枢,还与生物节律等的控制有关,D正确。
故选A。
本题考查水平衡调节、体温调节等相关知识,对知识的理解记忆、把握知识点间的内在联系是解题的关键。
二、综合题:本大题共4小题
7、提供氮源 高压蒸汽灭菌 稀释涂布平板 大肠杄菌可以利用四种糖类(葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、乳糖)作为碳源,但利用的程度不同 有杂菌混入;该大肠杆菌发生了突变;该大肠杆菌可能会利用琼脂多糖 将菌悬液与溶化并冷却至51℃的不含氨基酸和维生素的基础培养基混匀,倒平板;将培养基划分成两个相等的区域A、B;A区点植氨基酸、B区点植维生素;在适宜温度下培养,观察菌落产生的区域。若菌落只在A区产生,则为氨基酸缺陷型;若菌落只在B区产生,则为维生素缺陷型;若菌落产生在AB交界处,则为氨基酸—维生素缺陷型
【解析】
培养基一般含有水、碳源、氮源、无机盐等。
常用的接种方法:平板划线法和稀释涂布平板法。
常用的灭菌方法:干热灭菌法、灼烧灭菌法、高压蒸汽灭菌法。
【详解】
(1)培养基中的(NH4)2SO4可以提供氮源。常用高压蒸汽灭菌法对培养基及糖溶液进行灭菌。倒平板后常用稀释涂布平板法进行接种。
(2)培养基的四个区中含有不同的糖类,若在培养基的四个区内均有菌落圈产生,说明大肠杆菌可以利用四种糖类,但大小不同,说明大肠杆菌对四种糖类的利用程度不同。
(3)如果在此实验中发现某一不被该大肠杆菌利用的碳源的点植区域也长出菌落圈,可能是有杂菌混入或该大肠杆菌发生了突变。
(4)要通过生长谱法探究大肠杆菌属于氨基酸缺陷型、维生素缺陷型还是氨基酸—维生素缺陷型,可以将菌悬液与溶化并冷却至51℃的不含氨基酸和维生素的基础培养基混匀,倒平板;将培养基划分成两个相等的区域A、B;A区点植氨基酸、B区点植维生素;在适宜温度下培养,观察菌落产生的区域。若菌落只在A区产生,则为氨基酸缺陷型;若菌落只在B区产生,则为维生素缺陷型;若菌落产生在AB交界处,则为氨基酸—维生素缺陷型。
本题的难点在于通过生长谱法探究大肠杆菌属于氨基酸缺陷型、维生素缺陷型还是氨基酸—维生素缺陷型,选择的培养基应该不含氨基酸和维生素,在两个区分别点上氨基酸和维生素,观察菌落的产生情况。
8、膀胱壁感受器→c→排尿中枢→a→大脑皮层 初级排尿中枢(或右) 正反馈 大脑皮层 下丘脑受损导致抗利尿激素分泌不足 一个形状像海马的脑区 新突触的建立
【解析】
1、神经调节的基本方式是反射,其结构基础是反射弧,由感受器、传入神经、神经中枢、传出神经、效应器五部分构成。效应器指传出神经末梢和它所支配的肌肉或腺体等。
2、负反馈调节的主要意义在于维持机体内环境的稳态,正反馈的意义在于使生理过程不断加强,直至最终完成生理功能。
3、位于脊髓的低级中枢受脑中相应的高级中枢的调控。
4、体内失水过多或食物过咸时:细胞外液渗透压升高→下丘脑感受器受到刺激→垂体释放抗利尿激素增多→肾小管、集合管重吸收增加→尿量减少,同时大脑皮层产生渴觉(饮水)。
【详解】
(1)当膀胱充盈后,产生刺激,由膀胱壁感受器感受刺激,并将产生的兴奋沿传入神经传到排尿中枢,进而传到大脑皮层产生尿意,所以产生尿意的神经传导途径为:由膀胱壁感受器→c→脊髓腰骶段(或初级排尿中枢)→a→大脑皮层。在神经冲动传导过程中,c神经纤维膜内的电流方向和神经纤维上的传导方向一致,故形成向排尿中枢方向的局部电流。
(2)由于是兴奋后,排尿中枢进一步加强排尿中枢的活动,所以是正反馈调节。
(3)产生尿意的部位在高级中枢即大脑皮层。由于下丘脑能分泌抗利尿激素,促进肾小管、集合管对水的重吸收,减少尿量。若人在车祸中下丘脑受到暂时性损伤,抗利尿激素分泌减少,肾小管和集合管对水的重吸收减少,会出现多尿症状。
(4)人的短期记忆主要与神经元的活动及神经元之间的联系有关,尤其是与大脑皮层下一个形状像海马的脑区有关,长期记忆可能与新突触的建立有关。
本题考查神经调节、水分调节等多方面知识,解题关键理解图示水平衡调节过程,易错点是正反馈与负反馈的判断。
9、抗体 血清成分复杂,对于是否会引起其他问题还存在不确定性
角度二:需要的血清数量比较大(血清抗体含量少)
角度三:血清抗体纯度低,特异性差 灭活的病毒(聚乙二醇、PEG、离心、电激、振动等均可) 特异性强、灵敏度高、并可大量制备 X基因的(一段)核苷酸序列 X基因的插入破坏了浆细胞生命活动必需的某些基因角度二:X基因没有表达,所以不增殖
【解析】
1、基因工程技术的基本步骤:
(1)目的基因的获取:方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。
(2)基因表达载体的构建:是基因工程的核心步骤,基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。
(3)将目的基因导入受体细胞:根据受体细胞不同,导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法;将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法;将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。
(4)目的基因的检测与鉴定:分子水平上的检测:①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术;②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术;③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定:抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。
2、单克隆抗体制备流程:先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应,之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞;诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合,利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞;进行抗体检测,筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞;进行克隆化培养,即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养;最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。
【详解】
(1)康复者的血清中含有抗新型冠状病毒的抗体,因此有科研人员建议用康复者的血清来治疗患者,但存在血清成分复杂,对于是否会引起其他问题还存在不确定性或需要的血清数量比较大或血清抗体纯度低,特异性差等问题,该方法还存在一定的缺陷。
(2)可以采用灭活的病毒或利用聚乙二醇等诱导将浆细胞和骨髓瘤细胞融合。单克隆抗体与普通血清抗体相比较,最主要的优点在于它的特异性强,灵敏度高,并可大量制备。
(3)若用PCR技术扩增X基因,则需要用到热稳定DNA聚合酶,该方法能够成功获取目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列,以便合成引物,以便于扩增X基因。若X基因的插入破坏了浆细胞生命活动必需的某些基因,或者X基因导入浆细胞后没有表达,都可能导致在浆细胞中的染色体DNA上检测到X基因,但该浆细胞死亡或不能增殖等现象。
本题考查基因工程、单克隆抗体的制备等知识,要求考生识记基因的原理及操作步骤,掌握各操作步骤中需要注意的细节;识记单克隆抗体的制备过程,能结合所学的知识准确答题。
10、鉴别 蛋白胨 尿素 酚红指示剂 平板划线法和稀释涂布平板法 将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间,观察培养基上是否有菌落产生 灭菌 3.6×18 黑色 当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的一个活菌
【解析】
培养基一般含有水、碳源、氮源、无机盐等。
常用的接种方法:平板划线法和稀释涂布平板法。
常用的灭菌方法:干热灭菌法、灼烧灭菌法、高压蒸汽灭菌法。
【详解】
(1)该培养基含有显色剂,根据用途划分,该培养基属于鉴别培养基。若要分离能分解尿素的细菌,培养基中需要以尿素作为唯一的氮源,故需要将蛋白胨换成尿素,若要鉴定分解尿素的细菌还需将伊红美蓝换成酚红指示剂,观察是否变红。
(3)培养大肠杆菌时,可以选择平板划线法和稀释涂布平板法进行接种。
(3)培养大肠杆菌时,在接种前可以将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间,观察培养基上是否有菌落产生,来检测培养基是否被污染。对已使用过的培养基及其培养物必须经过灭菌处理后才能丢弃,以防止培养物的扩散。
(4)每升原水样中大肠杆菌数为(33+36+37)÷3×14×13=3.6×18。
(3)由于代谢产物能与染料伊红美蓝反应,使菌落呈黑色,故要检测严重污染水体中大肠杆菌数量,将水样适当稀释后,取样涂布在上述平板培养基中,应选择颜色为黑色的菌落进行计数。当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的一个活菌,故可以通过统计平板上的菌落数来推测样品中的活菌数。
筛选尿素分解菌的原理:培养基中以尿素作为唯一氮源,只有能利用尿素的微生物才能生长。
11、高压蒸汽灭菌 灼烧灭菌 6 末端 相连(或相接、相交等意思正确) 倒置 作为对照组,排除培养基被杂菌污染 甘油 72 培养时间过长,两个或多个菌落连成一个菌落
【解析】
1、微生物培养的关键是无菌操作技术,无菌操作过程中的灭菌方法主要有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌法灭菌。高压蒸汽灭菌适用于对一般培养基和玻璃器皿的灭菌。干热灭菌适用于空玻璃器皿的灭菌,凡带有橡胶的物品和培养基,都不能进行干热灭菌。无菌室缓冲间和接种箱常用紫外线灯作空气灭菌。微生物接种时的金属接种工具和试管口可以用灼烧灭菌。
2、平板划线操作的基本步骤是:(一)右手持接种环,经火焰灭菌,待凉后,在火焰旁打开盛有菌液的试管棉塞,并将试管口通过火焰,将已冷却的接种环伸入菌液,沾取一环菌液,将试管口通过火焰并塞上棉塞。(二)左手斜持琼脂平板,皿盖打开一条缝,右手于火焰近处將接种环迅速伸入平板内,划三至五条平行线,盖上皿盖,接种环不应划破培养基表面。(三)烧灼接种环,杀灭环上残留菌液,待冷却(是否冷却,可先在培养基边缘处试触,若琼脂溶化,表示未凉,稍等再试),从第一区域划线的末端开始往第二区内划线,重复以上操作,在第三四五区内划线,注意不要将最后一区的划线与第一区相连。(四)将平板倒置,放入培养箱中培养。
【详解】
(1)对培养基进行灭菌时,多采取高压蒸汽灭菌法,而对接种环或涂布器灭菌时则用灼烧灭菌法。接种环在每次接种前都要灼烧灭菌,最后一次接种完也要灭菌,所以在固体培养基表面连续进行了5次划线,则需要对接种环灼烧6次。平板划线在做第二次及其后的划线操作时,要从上次划线的末端开始划线,使菌体的数目随着划线次数的增加而逐渐减少,最终获得由单个菌体形成的单个菌落。最后一次划的线不能与第一次划的线相连。
(2)将接种后的固体培养基和一个未接种的固体培养基放入恒温箱中倒置培养,以减少培养基中的水分挥发。培养未接种的固体培养基是为了作为对照组,排除培养基被杂菌污染。长期保存菌种时,应将培养的菌液与甘油充分混匀后,放在-20℃的冷冻箱保存。
(3)根据表中数据可知,甲组和乙组中的菌落数都在72时达到最大,由此推知最好取72小时记录的菌落数作为实验结果,原因是①培养时间不足会导致遗落菌落的数目;②培养时间过长会导致两个或多个菌落连成一个菌落,使计数不准确。
本题考查无菌技术和微生物的分离和培养,要求考生识记接种微生物常用的两种方法;识记菌种保藏技术,能正确分析表格,再结合所学的知识准确答题。
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