5毒性作用机理.pptx

免疫毒理免疫毒理免疫毒理免疫毒理 免疫毒理学是毒理学与免疫学间的边缘学科，也是毒理学的一个新分支。免疫毒理学是毒理学与免疫学间的边缘学科，也是毒理学的一个新分支。免疫毒理学是毒理学与免疫学间的边缘学科，也是毒理学的一个新分支。免疫毒理学是毒理学与免疫学间的边缘学科，也是毒理学的一个新分支。本学科主要是研究外源性化学物质及物理因素对人和实验动物的免疫系统产本学科主要是研究外源性化学物质及物理因素对人和实验动物的免疫系统产本学科主要是研究外源性化学物质及物理因素对人和实验动物的免疫系统产本学科主要是研究外源性化学物质及物理因素对人和实验动物的免疫系统产生不良影响及影响机理。生不良影响及影响机理。生不良影响及影响机理。生不良影响及影响机理。免疫应答是宿主的一个重要防护与调节机理。由于免疫系统受损，就能免疫应答是宿主的一个重要防护与调节机理。由于免疫系统受损，就能免疫应答是宿主的一个重要防护与调节机理。由于免疫系统受损，就能免疫应答是宿主的一个重要防护与调节机理。由于免疫系统受损，就能大大增加传染病的发生率因此会间接影响动物的生命。本来很多外源性化大大增加传染病的发生率因此会间接影响动物的生命。本来很多外源性化大大增加传染病的发生率因此会间接影响动物的生命。本来很多外源性化大大增加传染病的发生率因此会间接影响动物的生命。本来很多外源性化学物质都是一些小分子的物质，是半抗原，并不能引起免疫应答，但当器官学物质都是一些小分子的物质，是半抗原，并不能引起免疫应答，但当器官学物质都是一些小分子的物质，是半抗原，并不能引起免疫应答，但当器官学物质都是一些小分子的物质，是半抗原，并不能引起免疫应答，但当器官损伤以后，它和损伤的组织成分相结合就可能产生抗原性，引起免疫病理性损伤以后，它和损伤的组织成分相结合就可能产生抗原性，引起免疫病理性损伤以后，它和损伤的组织成分相结合就可能产生抗原性，引起免疫病理性损伤以后，它和损伤的组织成分相结合就可能产生抗原性，引起免疫病理性损伤。对免疫功能检测有助于对外源性化学物质所造成损害的临床表现及病损伤。对免疫功能检测有助于对外源性化学物质所造成损害的临床表现及病损伤。对免疫功能检测有助于对外源性化学物质所造成损害的临床表现及病损伤。对免疫功能检测有助于对外源性化学物质所造成损害的临床表现及病理过程有进一步的了解。理过程有进一步的了解。理过程有进一步的了解。理过程有进一步的了解。免疫毒理学的研究还有助于我们了解毒物损害的生物学机理。免疫应答免疫毒理学的研究还有助于我们了解毒物损害的生物学机理。免疫应答免疫毒理学的研究还有助于我们了解毒物损害的生物学机理。免疫应答免疫毒理学的研究还有助于我们了解毒物损害的生物学机理。免疫应答具有高度的选择性和特异性，并且由多种免疫细胞和细胞因子参与完成。现具有高度的选择性和特异性，并且由多种免疫细胞和细胞因子参与完成。现具有高度的选择性和特异性，并且由多种免疫细胞和细胞因子参与完成。现具有高度的选择性和特异性，并且由多种免疫细胞和细胞因子参与完成。现在已经可以利用体外培养各种免疫细胞的方法，在培养液里加入各种外源性在已经可以利用体外培养各种免疫细胞的方法，在培养液里加入各种外源性在已经可以利用体外培养各种免疫细胞的方法，在培养液里加入各种外源性在已经可以利用体外培养各种免疫细胞的方法，在培养液里加入各种外源性化学物质，有助于了解这些外源性化学物质作用的部位，并提供有关外源性化学物质，有助于了解这些外源性化学物质作用的部位，并提供有关外源性化学物质，有助于了解这些外源性化学物质作用的部位，并提供有关外源性化学物质，有助于了解这些外源性化学物质作用的部位，并提供有关外源性化学物质与生物效应之间作用性质方面的资料。化学物质与生物效应之间作用性质方面的资料。化学物质与生物效应之间作用性质方面的资料。化学物质与生物效应之间作用性质方面的资料。免疫毒理免疫毒理免疫毒理免疫毒理外源性化学物质对免疫系统作用的特点外源性化学物质对免疫系统作用的特点外源性化学物质对免疫系统作用的特点外源性化学物质对免疫系统作用的特点 1 1 1 1反应灵敏反应灵敏反应灵敏反应灵敏 很多外源性化学物质对免疫系统的不良反应的剂量往往低于它很多外源性化学物质对免疫系统的不良反应的剂量往往低于它很多外源性化学物质对免疫系统的不良反应的剂量往往低于它很多外源性化学物质对免疫系统的不良反应的剂量往往低于它们的毒性剂量。们的毒性剂量。们的毒性剂量。们的毒性剂量。2 2 2 2反应的复杂性反应的复杂性反应的复杂性反应的复杂性 外源性化学物质对免疫系统影响的复杂性，主要表现在免疫反外源性化学物质对免疫系统影响的复杂性，主要表现在免疫反外源性化学物质对免疫系统影响的复杂性，主要表现在免疫反外源性化学物质对免疫系统影响的复杂性，主要表现在免疫反应的双重性和作用的选择性。机体对某种化学物可出现免疫增强或应的双重性和作用的选择性。机体对某种化学物可出现免疫增强或应的双重性和作用的选择性。机体对某种化学物可出现免疫增强或应的双重性和作用的选择性。机体对某种化学物可出现免疫增强或免疫抑制两种效应，它取决于剂量大小、接触途径及检测时间。不免疫抑制两种效应，它取决于剂量大小、接触途径及检测时间。不免疫抑制两种效应，它取决于剂量大小、接触途径及检测时间。不免疫抑制两种效应，它取决于剂量大小、接触途径及检测时间。不同的外源性化学物质作用于免疫反应的不同环节。同的外源性化学物质作用于免疫反应的不同环节。同的外源性化学物质作用于免疫反应的不同环节。同的外源性化学物质作用于免疫反应的不同环节。免疫毒理免疫毒理免疫毒理免疫毒理具有免疫毒性的外源性化学物质具有免疫毒性的外源性化学物质具有免疫毒性的外源性化学物质具有免疫毒性的外源性化学物质 (1)(1)(1)(1)抗肿瘤药物。环磷酰胺、氮芥、抗肿瘤药物。环磷酰胺、氮芥、抗肿瘤药物。环磷酰胺、氮芥、抗肿瘤药物。环磷酰胺、氮芥、6-6-6-6-巯基嘌呤、硫唑嘌呤、甲氨蝶呤、巯基嘌呤、硫唑嘌呤、甲氨蝶呤、巯基嘌呤、硫唑嘌呤、甲氨蝶呤、巯基嘌呤、硫唑嘌呤、甲氨蝶呤、5-5-5-5-氟氟氟氟尿嘧啶、放线菌素、多柔比星等；尿嘧啶、放线菌素、多柔比星等；尿嘧啶、放线菌素、多柔比星等；尿嘧啶、放线菌素、多柔比星等；(2)(2)(2)(2)重金属，有机金属铝、镉、镍、铬、甲基汞、二氯二重金属，有机金属铝、镉、镍、铬、甲基汞、二氯二重金属，有机金属铝、镉、镍、铬、甲基汞、二氯二重金属，有机金属铝、镉、镍、铬、甲基汞、二氯二N-N-N-N-辛基锡、氯化二丁辛基锡、氯化二丁辛基锡、氯化二丁辛基锡、氯化二丁基锡、亚砷酸钠、砷酸钠和三氧化二砷等；基锡、亚砷酸钠、砷酸钠和三氧化二砷等；基锡、亚砷酸钠、砷酸钠和三氧化二砷等；基锡、亚砷酸钠、砷酸钠和三氧化二砷等；(3)(3)(3)(3)农药，农药，农药，农药，DDTDDTDDTDDT、狄氏剂、西维因、虫螨威、甲基对硫磷、代森锰、氯丹等；、狄氏剂、西维因、虫螨威、甲基对硫磷、代森锰、氯丹等；、狄氏剂、西维因、虫螨威、甲基对硫磷、代森锰、氯丹等；、狄氏剂、西维因、虫螨威、甲基对硫磷、代森锰、氯丹等；(4)(4)(4)(4)卤代烃，多氯联苯、多溴联苯、三氯乙烯、氯仿、五氯酚、邻苯基酚等；卤代烃，多氯联苯、多溴联苯、三氯乙烯、氯仿、五氯酚、邻苯基酚等；卤代烃，多氯联苯、多溴联苯、三氯乙烯、氯仿、五氯酚、邻苯基酚等；卤代烃，多氯联苯、多溴联苯、三氯乙烯、氯仿、五氯酚、邻苯基酚等；(5)(5)(5)(5)其它，如苯并芘、甲基胆蒽、已烯雌酚、苯等。其它，如苯并芘、甲基胆蒽、已烯雌酚、苯等。其它，如苯并芘、甲基胆蒽、已烯雌酚、苯等。其它，如苯并芘、甲基胆蒽、已烯雌酚、苯等。引起自身免疫的外源性化学物质有：乙酰唑胺、抗惊厥药、氯噻唑、异烟肼、引起自身免疫的外源性化学物质有：乙酰唑胺、抗惊厥药、氯噻唑、异烟肼、引起自身免疫的外源性化学物质有：乙酰唑胺、抗惊厥药、氯噻唑、异烟肼、引起自身免疫的外源性化学物质有：乙酰唑胺、抗惊厥药、氯噻唑、异烟肼、甲基多巴、普萘洛尔、利福平、水杨酸、氯乙烯等。甲基多巴、普萘洛尔、利福平、水杨酸、氯乙烯等。甲基多巴、普萘洛尔、利福平、水杨酸、氯乙烯等。甲基多巴、普萘洛尔、利福平、水杨酸、氯乙烯等。引起过敏反应的外源性化学物质有抗氧化剂、抗生素引起过敏反应的外源性化学物质有抗氧化剂、抗生素引起过敏反应的外源性化学物质有抗氧化剂、抗生素引起过敏反应的外源性化学物质有抗氧化剂、抗生素(新霉素、头孢菌素、新霉素、头孢菌素、新霉素、头孢菌素、新霉素、头孢菌素、青霉素等青霉素等青霉素等青霉素等)、氯胺、氯胺、氯胺、氯胺T T T T、二异氰酸酯、二氯酚、乙二胺、甲醛、金属、二异氰酸酯、二氯酚、乙二胺、甲醛、金属、二异氰酸酯、二氯酚、乙二胺、甲醛、金属、二异氰酸酯、二氯酚、乙二胺、甲醛、金属(Pt(Pt(Pt(Pt、NiNiNiNi、BeBeBeBe、Hg)Hg)Hg)Hg)等。等。等。等。免疫毒理免疫毒理免疫毒理免疫毒理外源性化学物对免疫功能影响的表现外源性化学物对免疫功能影响的表现外源性化学物对免疫功能影响的表现外源性化学物对免疫功能影响的表现1 1 1 1使免疫功能受到抑制或产生免疫缺陷使免疫功能受到抑制或产生免疫缺陷使免疫功能受到抑制或产生免疫缺陷使免疫功能受到抑制或产生免疫缺陷 很很很很多多多多化化化化学学学学物物物物质质质质可可可可对对对对免免免免疫疫疫疫功功功功能能能能包包包包括括括括体体体体液液液液免免免免疫疫疫疫和和和和细细细细胞胞胞胞免免免免疫疫疫疫功功功功能能能能产产产产生生生生抑抑抑抑制作用。例如铅能损伤体液免疫和细胞免疫。制作用。例如铅能损伤体液免疫和细胞免疫。制作用。例如铅能损伤体液免疫和细胞免疫。制作用。例如铅能损伤体液免疫和细胞免疫。不不不不是是是是所所所所有有有有的的的的化化化化学学学学物物物物质质质质都都都都引引引引起起起起免免免免疫疫疫疫抑抑抑抑制制制制。如如如如许许许许多多多多金金金金属属属属对对对对免免免免疫疫疫疫功功功功能能能能产产产产生抑制作用，但是硒可以增强免疫反应。生抑制作用，但是硒可以增强免疫反应。生抑制作用，但是硒可以增强免疫反应。生抑制作用，但是硒可以增强免疫反应。2 2 2 2改变宿主的防御机理，降低机体抵抗力改变宿主的防御机理，降低机体抵抗力改变宿主的防御机理，降低机体抵抗力改变宿主的防御机理，降低机体抵抗力 机机机机体体体体在在在在接接接接触触触触外外外外源源源源性性性性化化化化学学学学物物物物质质质质后后后后，可可可可以以以以改改改改变变变变其其其其对对对对细细细细菌菌菌菌、病病病病毒毒毒毒、寄寄寄寄生生生生虫虫虫虫及及及及可可可可移移移移植植植植肿肿肿肿瘤瘤瘤瘤和和和和自自自自发发发发肿肿肿肿瘤瘤瘤瘤的的的的抵抵抵抵抗抗抗抗力力力力。一一一一般般般般来来来来说说说说，细细细细胞胞胞胞介介介介导导导导免免免免疫疫疫疫或或或或体体体体液免疫严重抑制可引起宿主对一些感染因子敏感性增加，抵抗力下降。液免疫严重抑制可引起宿主对一些感染因子敏感性增加，抵抗力下降。液免疫严重抑制可引起宿主对一些感染因子敏感性增加，抵抗力下降。液免疫严重抑制可引起宿主对一些感染因子敏感性增加，抵抗力下降。免疫毒理免疫毒理免疫毒理免疫毒理3 3 3 3产生变态反应产生变态反应产生变态反应产生变态反应 机机机机体体体体受受受受抗抗抗抗原原原原刺刺刺刺激激激激后后后后，产产产产生生生生的的的的异异异异常常常常的的的的体体体体液液液液或或或或细细细细胞胞胞胞免免免免疫疫疫疫反反反反应应应应导导导导致致致致生生生生理功能紊乱或组织损伤，称为变态反应。理功能紊乱或组织损伤，称为变态反应。理功能紊乱或组织损伤，称为变态反应。理功能紊乱或组织损伤，称为变态反应。化学物质引起的过敏反应有以下几个特点：化学物质引起的过敏反应有以下几个特点：化学物质引起的过敏反应有以下几个特点：化学物质引起的过敏反应有以下几个特点：反反反反应应应应表表表表现现现现不不不不同同同同于于于于该该该该物物物物质质质质的的的的一一一一般般般般毒毒毒毒性性性性反反反反应应应应，组组组组织织织织病病病病变变变变不不不不同同同同于于于于该该该该物物物物质质质质的中毒性变化，而是变态反应性炎症；的中毒性变化，而是变态反应性炎症；的中毒性变化，而是变态反应性炎症；的中毒性变化，而是变态反应性炎症；初初初初次次次次接接接接触触触触某某某某种种种种化化化化学学学学物物物物质质质质后后后后，经经经经过过过过1-2wk1-2wk1-2wk1-2wk再再再再次次次次接接接接触触触触同同同同一一一一物物物物质质质质，反反反反应应应应即即即即可出现可出现可出现可出现不不不不完完完完全全全全遵遵遵遵循循循循毒毒毒毒理理理理学学学学的的的的剂剂剂剂量量量量-反反反反应应应应的的的的规规规规律律律律，很很很很小小小小的的的的剂剂剂剂量量量量进进进进入入入入体体体体内内内内即即即即可可可可致敏，再接触小剂量即可出现症状。致敏，再接触小剂量即可出现症状。致敏，再接触小剂量即可出现症状。致敏，再接触小剂量即可出现症状。依依依依过过过过敏敏敏敏反反反反应应应应出出出出现现现现的的的的快快快快慢慢慢慢，抗抗抗抗体体体体是是是是否否否否存存存存在在在在，把把把把变变变变态态态态反反反反应应应应分分分分为为为为以以以以下下下下4 4 4 4型：型：型：型：(1)(1)(1)(1)第第第第1 1 1 1型型型型速速速速发发发发型型型型或或或或反反反反应应应应类类类类型型型型。I I I I型型型型变变变变态态态态反反反反应应应应是是是是IgEIgEIgEIgE介介介介导导导导的的的的变变变变态态态态反反反反应应应应。产产产产生生生生支支支支气气气气管管管管哮哮哮哮喘喘喘喘，皮皮皮皮肤肤肤肤可可可可出出出出现现现现红红红红肿肿肿肿、荨荨荨荨麻麻麻麻疹疹疹疹等等等等，作作作作用用用用于于于于胃胃胃胃肠肠肠肠道道道道则出现呕吐、腹痛、腹泻等症状。则出现呕吐、腹痛、腹泻等症状。则出现呕吐、腹痛、腹泻等症状。则出现呕吐、腹痛、腹泻等症状。免疫毒理免疫毒理免疫毒理免疫毒理(2)(2)(2)(2)第第第第型细胞毒型或溶细胞型。型细胞毒型或溶细胞型。型细胞毒型或溶细胞型。型细胞毒型或溶细胞型。型变态反应是抗体型变态反应是抗体型变态反应是抗体型变态反应是抗体(IgG(IgG(IgG(IgG或或或或IgM)IgM)IgM)IgM)引起带抗原引起带抗原引起带抗原引起带抗原的组织细胞的损伤或功能障碍。的组织细胞的损伤或功能障碍。的组织细胞的损伤或功能障碍。的组织细胞的损伤或功能障碍。IgGIgGIgGIgG或或或或IgMIgMIgMIgM抗体与机体细胞抗体与机体细胞抗体与机体细胞抗体与机体细胞(靶细胞靶细胞靶细胞靶细胞)表面的抗表面的抗表面的抗表面的抗原结合，通过活化补体、巨噬细胞吞噬或原结合，通过活化补体、巨噬细胞吞噬或原结合，通过活化补体、巨噬细胞吞噬或原结合，通过活化补体、巨噬细胞吞噬或K K K K细胞的抗体依赖细胞毒作用引起细细胞的抗体依赖细胞毒作用引起细细胞的抗体依赖细胞毒作用引起细细胞的抗体依赖细胞毒作用引起细胞的破坏死亡。靶细胞有红细胞、粒细胞、血小板、肾小球血管基底膜、肝细胞的破坏死亡。靶细胞有红细胞、粒细胞、血小板、肾小球血管基底膜、肝细胞的破坏死亡。靶细胞有红细胞、粒细胞、血小板、肾小球血管基底膜、肝细胞的破坏死亡。靶细胞有红细胞、粒细胞、血小板、肾小球血管基底膜、肝细胞、皮肤细胞、平滑肌细胞以及一些内分泌细胞等胞、皮肤细胞、平滑肌细胞以及一些内分泌细胞等胞、皮肤细胞、平滑肌细胞以及一些内分泌细胞等胞、皮肤细胞、平滑肌细胞以及一些内分泌细胞等.(3)(3)(3)(3)第第第第型免疫复合物型。型免疫复合物型。型免疫复合物型。型免疫复合物型。型变态反应是由于抗原抗体复合物型变态反应是由于抗原抗体复合物型变态反应是由于抗原抗体复合物型变态反应是由于抗原抗体复合物(免疫复合物免疫复合物免疫复合物免疫复合物)在组织中沉积而引起的炎症反应，炎症反应涉及补体的活化和中性粒细胞的浸在组织中沉积而引起的炎症反应，炎症反应涉及补体的活化和中性粒细胞的浸在组织中沉积而引起的炎症反应，炎症反应涉及补体的活化和中性粒细胞的浸在组织中沉积而引起的炎症反应，炎症反应涉及补体的活化和中性粒细胞的浸润，释放出许多水解酶，并造成组织损伤。这类变态反应较常见于感染、药物润，释放出许多水解酶，并造成组织损伤。这类变态反应较常见于感染、药物润，释放出许多水解酶，并造成组织损伤。这类变态反应较常见于感染、药物润，释放出许多水解酶，并造成组织损伤。这类变态反应较常见于感染、药物治疗等弓治疗等弓治疗等弓治疗等弓 起的免疫复合物病。如青霉素、磺胺引起的起的免疫复合物病。如青霉素、磺胺引起的起的免疫复合物病。如青霉素、磺胺引起的起的免疫复合物病。如青霉素、磺胺引起的“血清病血清病血清病血清病”。(4)(4)(4)(4)第第第第IVIVIVIV型迟发型或细胞免疫型。型迟发型或细胞免疫型。型迟发型或细胞免疫型。型迟发型或细胞免疫型。IVIVIVIV型变态反应是由免疫的型变态反应是由免疫的型变态反应是由免疫的型变态反应是由免疫的TDTDTDTD或或或或TKTKTKTK细胞与特异细胞与特异细胞与特异细胞与特异抗原的反应而引起组织损伤。表面具有特异性受体的致敏淋巴细胞再次与抗原抗原的反应而引起组织损伤。表面具有特异性受体的致敏淋巴细胞再次与抗原抗原的反应而引起组织损伤。表面具有特异性受体的致敏淋巴细胞再次与抗原抗原的反应而引起组织损伤。表面具有特异性受体的致敏淋巴细胞再次与抗原相遇，引起细胞增殖，其中相遇，引起细胞增殖，其中相遇，引起细胞增殖，其中相遇，引起细胞增殖，其中TDTDTDTD细胞可释放淋巴因子，吸引和激活非特异性的巨细胞可释放淋巴因子，吸引和激活非特异性的巨细胞可释放淋巴因子，吸引和激活非特异性的巨细胞可释放淋巴因子，吸引和激活非特异性的巨噬细胞。由于细胞的增殖和浸润，可诱发迟发型变态反应。噬细胞。由于细胞的增殖和浸润，可诱发迟发型变态反应。噬细胞。由于细胞的增殖和浸润，可诱发迟发型变态反应。噬细胞。由于细胞的增殖和浸润，可诱发迟发型变态反应。免疫毒理免疫毒理免疫毒理免疫毒理对免疫功能影响的机理对免疫功能影响的机理化学物质化学物质免疫系统直接作用免疫系统直接作用 免疫系统间接作用免疫系统间接作用 作用细胞作用细胞 (1)(1)营养障碍营养障碍 非特异免疫非特异免疫 特异免疫特异免疫 (2)(2)内分泌紊乱内分泌紊乱 巨噬细胞巨噬细胞 B B细胞细胞 (3)(3)组织损伤而成组织损伤而成 抗抗 原原 T T细胞细胞 为自身抗原为自身抗原 K K细胞细胞 NKNK细胞细胞 免疫毒性作用免疫毒性作用 免疫亢进免疫亢进 免疫抑制免疫抑制 过敏性疾病过敏性疾病 自身免疫自身免疫 感染感染 癌症癌症免疫毒理免疫毒理免疫毒理免疫毒理免疫毒理研究方法：免疫毒理研究方法：免疫毒理研究方法：免疫毒理研究方法：由于免疫系统的复杂性，参与免疫应答的器官不是单一的，参与由于免疫系统的复杂性，参与免疫应答的器官不是单一的，参与由于免疫系统的复杂性，参与免疫应答的器官不是单一的，参与由于免疫系统的复杂性，参与免疫应答的器官不是单一的，参与免疫反应的细胞也是多种多样的，因此想要确定一个外源性化学物质免疫反应的细胞也是多种多样的，因此想要确定一个外源性化学物质免疫反应的细胞也是多种多样的，因此想要确定一个外源性化学物质免疫反应的细胞也是多种多样的，因此想要确定一个外源性化学物质对免疫功能的影响，决不是用一个实验就能说明的，需要进行一组实对免疫功能的影响，决不是用一个实验就能说明的，需要进行一组实对免疫功能的影响，决不是用一个实验就能说明的，需要进行一组实对免疫功能的影响，决不是用一个实验就能说明的，需要进行一组实验。验。验。验。1979197919791979年美国国家环境科学院年美国国家环境科学院年美国国家环境科学院年美国国家环境科学院(NIEHS)(NIEHS)(NIEHS)(NIEHS)提出了一个确定免疫功能变提出了一个确定免疫功能变提出了一个确定免疫功能变提出了一个确定免疫功能变化的筛选方案。由于这个方案包括的内容很广，测试项目太多，因此化的筛选方案。由于这个方案包括的内容很广，测试项目太多，因此化的筛选方案。由于这个方案包括的内容很广，测试项目太多，因此化的筛选方案。由于这个方案包括的内容很广，测试项目太多，因此他们又提出了一个最低的筛选方案。他们又提出了一个最低的筛选方案。他们又提出了一个最低的筛选方案。他们又提出了一个最低的筛选方案。免疫毒理免疫毒理免疫毒理免疫毒理外源性化学物质免疫毒性评价的基本检测项目外源性化学物质免疫毒性评价的基本检测项目外源性化学物质免疫毒性评价的基本检测项目外源性化学物质免疫毒性评价的基本检测项目 项项项项 目目目目 检测内容检测内容检测内容检测内容 病理毒性病理毒性 血液学指标一白细胞计数及分类血液学指标一白细胞计数及分类 脏器重量一体重、脾、胸腺、肝、肾、脑脏器重量一体重、脾、胸腺、肝、肾、脑 宿主抵抗力宿主抵抗力 对植入同系基因肿瘤细胞的易感性对植入同系基因肿瘤细胞的易感性LDLD10201020 迟发型皮肤过敏反应迟发型皮肤过敏反应 给予胸腺依赖抗原后的放射测定给予胸腺依赖抗原后的放射测定 淋巴细胞功能淋巴细胞功能 有丝分裂原有丝分裂原(PHA(PHA、ConAConA、LPS)LPS)刺刺 激成淋巴细胞化的作用激成淋巴细胞化的作用 体液免疫体液免疫 免疫球蛋白定量免疫球蛋白定量(IgG(IgG、IgMIgM、IgA)IgA)对羊红细胞对羊红细胞(SRBC)(SRBC)的抗体空斑反应的抗体空斑反应免疫毒理免疫毒理免疫毒理研究方法免疫毒理研究方法1.脏器重量、细胞学、组织病理学和免疫化学检查脏器重量、细胞学、组织病理学和免疫化学检查2.体液免疫功能体液免疫功能3.细胞免疫功能细胞免疫功能4.淋巴细胞增值反应淋巴细胞增值反应5.巨噬细胞功能巨噬细胞功能6.宿主抵抗力宿主抵抗力免疫毒理免疫毒理1.脏器重量、细胞学、组织病理学和免疫化学检查脏器重量、细胞学、组织病理学和免疫化学检查 试验动物接触外源性化学物质后，对免疫系统的毒性表现为淋巴试验动物接触外源性化学物质后，对免疫系统的毒性表现为淋巴器官重量或组织学的变化，淋巴组织和骨髓的细胞在质和量上的变器官重量或组织学的变化，淋巴组织和骨髓的细胞在质和量上的变化，外周血白细胞数目的改变，因此在任何免疫毒性的评价中检测化，外周血白细胞数目的改变，因此在任何免疫毒性的评价中检测胸腺、脾脏、淋巴结的重量是很重要的。对淋巴气管和骨髓学的检胸腺、脾脏、淋巴结的重量是很重要的。对淋巴气管和骨髓学的检查也是很有力的手段。查也是很有力的手段。淋巴器官的常规组织病理学检查在评价外源性化学物质的免疫毒淋巴器官的常规组织病理学检查在评价外源性化学物质的免疫毒性是十分有用的，因为脾脏和淋巴结的结构可以分为依赖胸腺区和性是十分有用的，因为脾脏和淋巴结的结构可以分为依赖胸腺区和不依赖胸腺区，通过组织病理学检查就能获得外源性化学物质对不依赖胸腺区，通过组织病理学检查就能获得外源性化学物质对T、B淋巴细胞影响。淋巴细胞影响。免疫毒理免疫毒理体液免疫功能体液免疫功能评价化学物质对体液免疫功能的影响的方法：评价化学物质对体液免疫功能的影响的方法：a.抗体滴度测定（免疫扩散、补体结合、血清中和、血凝、被动血抗体滴度测定（免疫扩散、补体结合、血清中和、血凝、被动血凝、放射免疫分析、酶免疫吸附分析等）凝、放射免疫分析、酶免疫吸附分析等）b.抗体形成细胞（抗体形成细胞（PFC）c.B细胞受体（细胞受体（Fc及补体受体）及补体受体）免疫毒理免疫毒理 琼脂单向扩散法测定血清免疫球蛋白的含量，是一种不很敏感的琼脂单向扩散法测定血清免疫球蛋白的含量，是一种不很敏感的但却很常用的方法，在使用免疫板前只需用标准血清绘制出一条标但却很常用的方法，在使用免疫板前只需用标准血清绘制出一条标准曲线，根据标准曲线查出血清中的准曲线，根据标准曲线查出血清中的Ig的含量，该方法只适用于测定的含量，该方法只适用于测定血清中血清中IgG、IgA、IgM的含量。的含量。免疫毒理免疫毒理目前测定血清抗体的滴度有两种比较灵敏的方法：目前测定血清抗体的滴度有两种比较灵敏的方法：1.1.放射免疫分析（放射免疫分析（Radio Immunoassay,Radio Immunoassay,RIARIA）2.2.酶联免疫吸附测定法（酶联免疫吸附测定法（ELISAELISA）ELISAELISA法可测定抗原、半抗原或抗体，该方法灵敏高、重复性好，法可测定抗原、半抗原或抗体，该方法灵敏高、重复性好，适合于大规模的筛选。适合于大规模的筛选。免疫毒理免疫毒理 PFCPFC（Plague Forming CellPlague Forming Cell）,又称溶血空斑试验或空斑形成细胞又称溶血空斑试验或空斑形成细胞试验，是检测外源性化学物质引起的体液免疫功能的改变的灵敏的试验，是检测外源性化学物质引起的体液免疫功能的改变的灵敏的最常用的方法。最常用的方法。PFCPFC检查方法的原理是在体外创造一种条件，将抗原免疫鼠脾制检查方法的原理是在体外创造一种条件，将抗原免疫鼠脾制成脾细胞悬液，在半固体凝胶介质种与羊红细胞（成脾细胞悬液，在半固体凝胶介质种与羊红细胞（SRBCSRBC）混合，在）混合，在平皿或玻片上制成薄层，平皿或玻片上制成薄层，37C37C孵育孵育1.51.52 2小时后加入补体，由于靠小时后加入补体，由于靠近分泌特异性抗体（淋巴细胞）的靶细胞周围的近分泌特异性抗体（淋巴细胞）的靶细胞周围的SRBCSRBC被抗体致敏，被抗体致敏，因而激活了补体，形成溶血空斑，一个空斑代表一个抗体形成细胞。因而激活了补体，形成溶血空斑，一个空斑代表一个抗体形成细胞。免疫毒理免疫毒理细胞免疫功能细胞免疫功能 细胞免疫功能主要是由细胞免疫功能主要是由T T细胞完成，细胞免疫担负着迟发型变细胞完成，细胞免疫担负着迟发型变态反应、移植排斥、肿瘤免疫等。测定细胞免疫功能的方法主要有：态反应、移植排斥、肿瘤免疫等。测定细胞免疫功能的方法主要有：整体法（迟发型变态反应、移植物抗宿主反应和皮肤移植排斥反应整体法（迟发型变态反应、移植物抗宿主反应和皮肤移植排斥反应等）和体外法（淋巴细胞增值、等）和体外法（淋巴细胞增值、T T细胞细胞毒性及淋巴因子的产生）。细胞细胞毒性及淋巴因子的产生）。该方法的原理：当致敏的该方法的原理：当致敏的T T细胞再次接触相应的抗原后，就能细胞再次接触相应的抗原后，就能引起局部的致敏淋巴小释放出多种淋巴因子，导致发生以单核细胞引起局部的致敏淋巴小释放出多种淋巴因子，导致发生以单核细胞浸润为主的炎症，表现为皮肤的红肿硬结，这种反应一般在抗原注浸润为主的炎症，表现为皮肤的红肿硬结，这种反应一般在抗原注射后射后24244848小时出现。小时出现。免疫毒理免疫毒理 对人测迟发型变态反应可采用皮试法，该方法种所用的抗原有特对人测迟发型变态反应可采用皮试法，该方法种所用的抗原有特异型病原微生物性抗原，也称回忆抗原，如结核菌素（异型病原微生物性抗原，也称回忆抗原，如结核菌素（OTOT）等，还）等，还有非特异性抗原，如二硝基氯苯及有非特异性抗原，如二硝基氯苯及PHAPHA等。该方法是用硬结的纵横直等。该方法是用硬结的纵横直径平均值判断结果。径平均值判断结果。对试验动物的迟发型变态反应，可以用各种放射免疫分析法定对试验动物的迟发型变态反应，可以用各种放射免疫分析法定量测定，该方法比皮试法灵敏。常用的抗原有量测定，该方法比皮试法灵敏。常用的抗原有KLHKLH、PPDPPD、BSABSA、BGGBGG、SRBCSRBC等，对小鼠一般用等，对小鼠一般用KLHKLH，大鼠用，大鼠用PPDPPD。钥孔戚血蓝素钥孔戚血蓝素(Keyholelimpet hemocyanin,KLH(Keyholelimpet hemocyanin,KLH）载体牛载体牛球蛋白（球蛋白（BGGBGG）免疫毒理免疫毒理淋巴细胞增殖反应淋巴细胞增殖反应 淋巴细胞增殖试验是一个比较简单、重复性好，用淋巴细胞增殖试验是一个比较简单、重复性好，用来测定来测定T T细胞和细胞和B B细胞功能活性的方法。细胞功能活性的方法。19601960年年NowellNowell发现，植物血凝素（发现，植物血凝素（PHAPHA）和淋巴细胞）和淋巴细胞在一起体外培养，数日后可看到明显肥大型母细胞，出在一起体外培养，数日后可看到明显肥大型母细胞，出现分裂旺盛，就是淋巴细胞转化试验。现分裂旺盛，就是淋巴细胞转化试验。免疫毒理免疫毒理淋巴细胞增值试验淋巴细胞增值试验 常用的培养液有常用的培养液有199199、RPMI-1640.RPMI-1640.刺激淋巴转化因子有特异和非特异两种。刺激淋巴转化因子有特异和非特异两种。非特异的刺激物有植物提取物、细菌产物、抗体、各种化学物非特异的刺激物有植物提取物、细菌产物、抗体、各种化学物质等。质等。常用的有植物血凝素、刀豆蛋白（常用的有植物血凝素、刀豆蛋白（ConAConA），主要刺激），主要刺激T T细胞；细胞；美洲商路（美洲商路（PWMPWM）、脂多糖（）、脂多糖（LPSLPS）,主要刺激主要刺激B B细胞。细胞。免疫毒理免疫毒理淋巴细胞增殖试验淋巴细胞增殖试验 检测方法包括形态学方法和同位素方法。检测方法包括形态学方法和同位素方法。形态学方法比较简单，不需要特殊仪器，可在光学显微镜下形态学方法比较简单，不需要特殊仪器，可在光学显微镜下观察，因为判断母细胞是按照形态学标准，该方法客观性较差。观察，因为判断母细胞是按照形态学标准，该方法客观性较差。液体闪烁测定法能客观反映淋巴细胞转化情况，但需要有同液体闪烁测定法能客观反映淋巴细胞转化情况，但需要有同位素标记的胸腺嘧啶核苷和测位素标记的胸腺嘧啶核苷和测3 3H H的液闪仪。的液闪仪。免疫毒理免疫毒理巨噬细胞功能巨噬细胞功能巨噬细胞在免疫反应中起很重要的作用巨噬细胞在免疫反应中起很重要的作用:a.a.有非特异吞噬功能有非特异吞噬功能b.b.细胞免疫和体液免疫，巨噬细胞的功能细胞免疫和体液免疫，巨噬细胞的功能c.c.吞噬作用、胞内杀伤吞噬作用、胞内杀伤d.d.抗原摄取和处理抗原摄取和处理e.e.产生干扰素及对感染细胞或恶变细胞的融解作用。产生干扰素及对感染细胞或恶变细胞的融解作用。测定方法：测定方法：体内对颗粒状异物清楚率、体外对颗粒的吞噬作用、胞内杀体内对颗粒状异物清楚率、体外对颗粒的吞噬作用、胞内杀灭细菌的能力、对肿瘤细胞生长抑制的能力及某些酶的测定来评价。灭细菌的能力、对肿瘤细胞生长抑制的能力及某些酶的测定来评价。免疫毒理免疫毒理巨噬细胞功能巨噬细胞功能测定方法：测定方法：a.a.体内对颗粒状异物清楚率体内对颗粒状异物清楚率 b.b.体外对颗粒的吞噬作用体外对颗粒的吞噬作用 c.c.胞内杀灭细菌的能力胞内杀灭细菌的能力 d.d.对肿瘤细胞生长抑制的能力对肿瘤细胞生长抑制的能力 e.e.某些酶的测定来评价。某些酶的测定来评价。免疫毒理免疫毒理宿主抵抗力宿主抵抗力 机体接触化学物质后，可改变其对细菌、病毒、寄生虫及可移机体接触化学物质后，可改变其对细菌、病毒、寄生虫及可移植肿瘤和自发肿瘤的抵抗力。一般来说，植肿瘤和自发肿瘤的抵抗力。一般来说，B B细胞缺损的机体对细菌敏细胞缺损的机体对细菌敏感性升高，感性升高，T T细胞缺损的机体对病毒。寄生虫、肿瘤敏感性升高。细胞缺损的机体对病毒。寄生虫、肿瘤敏感性升高。检测宿主抵抗力是在整体动物身上进行的试验，可将体内外检测宿主抵抗力是在整体动物身上进行的试验，可将体内外各项免疫功能测定结果之间以及它们与整体间相互联系作全面的解各项免疫功能测定结果之间以及它们与整体间相互联系作全面的解释。释。检测试验主要有检测试验主要有 a.a.对病原体的抵抗试验对病原体的抵抗试验 b.b.肿瘤细胞攻击试验肿瘤细胞攻击试验免疫毒理免疫毒理对病原体的抵抗试验对病原体的抵抗试验 本试验是用啮齿类动物做感染动物，由他们对传染原抵抗力不同来判定本试验是用啮齿类动物做感染动物，由他们对传染原抵抗力不同来判定化学物质的免疫毒性。化学物质的免疫毒性。试验中选用传染原是需考虑的因素：试验中选用传染原是需考虑的因素：a.a.对人类或其他动物的危险性对人类或其他动物的危险性 b.b.动物是否易感动物是否易感 c.c.产生的病变是否有重复性产生的病变是否有重复性 d.d.机体防御机理中是否需要机体防御机理中是否需要B B、T T细胞及巨噬细胞参与细胞及巨噬细胞参与 e.e.感染过程中是否有易于观察和判断的指标感染过程中是否有易于观察和判断的指标 f.f.动物感染的途径和感染后发病机理应与人类疾病相似动物感染的途径和感染后发病机理应与人类疾病相似 g.g.传染原的接种量不易过多，以免压抑宿主的免疫系统。传染原的接种量不易过多，以免压抑宿主的免疫系统。免疫毒理免疫毒理常用的宿主抵抗力检测表常用的宿主抵抗力检测表病原体病原体检测终点检测终点防御机理防御机理李斯特菌李斯特菌在攻击后在攻击后14天的死亡天的死亡率率平均存活时间平均存活时间CMI、巨噬细胞、巨噬细胞链球菌链球菌平均存活时间平均存活时间AMI、中性粒细胞、中性粒细胞非特异型免疫非特异型免疫流感病毒流感病毒平均存活时间平均存活时间AMI、干扰素、干扰素单纯疱疹性病毒单纯疱疹性病毒I型型和和II型型在攻击后在攻击后14天的死亡天的死亡率率平均存活时间平均存活时间CMI旋毛虫旋毛虫在感染后在感染后14天检测对天检测对幼虫的驱除幼虫的驱除CMI、AMI免疫毒理免疫毒理对病原体的抵抗试验对病原体的抵抗试验1.1.病毒易感性测定病毒易感性测定2.2.细菌易感性测定细菌易感性测定3.3.对寄生虫抵抗力的测定对寄生虫抵抗力的测定免疫毒理免疫毒理对病原体的抵抗试验对病原体的抵抗试验1.1.病毒易感性测定：病毒易感性测定：动物对病毒感染抵抗粒的改变是评定化学物质是否有免疫动物对病毒感染抵抗粒的改变是评定化学物质是否有免疫毒性最适合的方法，因为病毒感染可能是人类最常见的病因之一。毒性最适合的方法，因为病毒感染可能是人类最常见的病因之一。病毒感染的结果取决于这种病毒的毒力、靶器官的易感性病毒感染的结果取决于这种病毒的毒力、靶器官的易感性和宿主的免疫功能。和宿主的免疫功能。最常用的病毒有脑心肌炎病毒（最常用的病毒有脑心肌炎病毒（EMCEMC）、单存疱疹性病毒）、单存疱疹性病毒（HSVHSV）和流感）和流感A A型病毒（型病毒（FLUFLU）等。）等。免疫毒理免疫毒理对病原体的抵抗力试验对病原体的抵抗力试验2.2.细菌易感型测定：常用的细菌有李斯特细菌和绿脓杆菌。细菌易感型测定：常用的细菌有李斯特细菌和绿脓杆菌。细菌在胰蛋白酶肉汤内细菌在胰蛋白酶肉汤内37C37C培养过夜后，在分光光度计上比培养过夜后，在分光光度计上比浊定量（浊定量（540nm540nm），然后从标准曲线查知细菌数，给正常对照组和试），然后从标准曲线查知细菌数，给正常对照组和试验组分别静脉注射一定量的细菌后，逐日观察发病和死亡情况，共验组分别静脉注射一定量的细菌后，逐日观察发病和死亡情况，共观察观察1414天。天。免疫毒理免疫毒理对病原体的抵抗试验对病原体的抵抗试验3.3.对寄生虫的抵抗力的测定：对寄生虫的抵抗力的测定：通常采用两种寄生虫即毛线虫和月原虫。人体和小鼠通过抗体通常采用两种寄生虫即毛线虫和月原虫。人体和小鼠通过抗体和淋巴细胞的协同作用抵御毛线虫感染，无胸腺小鼠对毛线虫的驱和淋巴细胞的协同作用抵御毛线虫感染，无胸腺小鼠对毛线虫的驱除能力低弱。除能力低弱。免疫毒理免疫毒理肿瘤细胞攻击试验肿瘤细胞攻击试验 本试验是应用纯系小鼠观察机体对同系基因的肿瘤细胞的抵抗本试验是应用纯系小鼠观察机体对同系基因的肿瘤细胞的抵抗力，攻击所用的肿瘤量是使力，攻击所用的肿瘤量是使10102020正常动物发生肿瘤（正常动物发生肿瘤（TDTD10-2010-20）,观察指标有肿