项目一丙氨酸的一般检查.ppt

,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,项 目 一,丙氨酸的一般杂质检查,工 作 任 务 分 解,主,要,检,查,项,目,氯化物检查,砷盐检查,铁盐检查,重金属检查,其他项目,硫酸盐、酸碱度、溶液,颜色、易炭化物、炽灼,残渣、干燥失重、可见异物,一,.,氯化物的检查,1.,供试品的配制,：,称取,丙氨酸,0.30g,，加水搅拌溶解使成,25ml,，加,稀硝酸,10ml,，置,50ml,纳氏比色管，加水使成约,40ml,，摇匀，即为供试液。,一,.,氯化物的检查,2.,标准品的配制：,另取,标准氯化钠,溶液,6.0ml,，置,50ml,纳氏比色管中，加,稀硝酸,10ml,，加水使成,40ml,，摇匀，即得对照溶液。,一,.,氯化物的检查,3.,测定方法及判断标准,：,于供试溶液与对照溶液中，分别加入,硝酸银,试液,1.0ml,，用水稀释使成,50 ml,，摇匀，在暗处放置,5min,，,同置黑色背景上，从比色管上方向下观察、比较，供试管不得浓于对照管。,一,.,氯化物的检查,4.,操作时的注意事项,：,（,1,）供试品的称量,（,2,）硝酸在检查中的作用,（,3,）标准氯化钠溶液的量,（,4,）比浊的方法,一,.,氯化物的检查,（,1,）供试品的称量：,称重范围：,0.2950.305g,试验中供试品与试药等“称重”或“量取”的量，均,以阿拉伯数表示，其精确度可根据数值的有效数,位来确定，如称取“,0.1g”,，系指称取量可为,0.06g,0.14g,；称取“,2g”,，系指称取量可为,1.5g2.5g,；,称取“,2.0g”,，系指称取量可为,1.95g2.05g,；称取,2.00g,，系指称取量可为,1.995g2.005g,；依次类推。,一,.,氯化物的检查,（,2,）硝酸在检查中的作用,加入硝酸可加速氯化银沉淀的生成、,产生较好的乳浊并可避免弱酸银盐如,碳酸银、磷酸银及氧化银沉淀的形成,而干扰检查。以,50ml,中含稀硝酸,10ml,为宜。,一,.,氯化物的检查,（,3,）标准氯化钠溶液的量,药典规定的检查方法中标准氯化钠溶液,每,1ml,相当于,10gCl-,，而以,50 ml,中含,Cl-0.05,0.08mg,（相当于标准氯化钠,溶液,5.0,8.0ml,）所显混浊梯度明显，,便于比较。,一,.,氯化物的检查,（,4,）比浊的方法,同置,黑色背景,上，从,比色管上,方向下,观察、比较，供试管不,得浓于对照管。（,平行操作原,则,）,原理,：氯化物在硝酸酸性条件下与硝酸银反,应，生成氯化银的胶体微粒而显白色混浊，,与一定量的标准氯化钠溶液在相同条件下产,生的氯化银混浊比较，判定供试品中氯化物,是否符合限量规定,。,Cl,-+Ag+,Cl,-,+Ag,+,AgCl,5.,检查原理,：,一,.,氯化物的检查,杂质检查的要求及限量计算,1.,杂质限量的概念：,杂质限量是生物药物中杂质的最大允许,量，,通常用百分之几或百万分之几,（,ppm,）来表示,一般不要求准确测量，,只要求杂质的量在一定范围（限度）内。,2.,杂质的限量计算：,杂质限量（,L,）的计算公式如下：,杂质检查的要求及限量计算,2.,杂质的限量计算：,如果供试品（,S,）所含杂质的量由容量法,测定，杂质限量（,L,）的计算公式为：,杂质检查的要求及限量计算,3.,药物的杂质检查法,:,(,1),对照法,限量检查法,（,Limit Test,）,特点：不需知道杂质的准确含量,杂质检查的要求及限量计算,(,2),灵敏度法,系指在供试品溶液中加入试剂，在一定反应条件下，不得有正反应出现。,以待检杂质反应的灵敏度作为该杂质的最大允许量。,特点：不需对照品,杂质检查的要求及限量计算,(3),比较法,含量测定法：测定杂质的绝对含量，如测定吸收度、,旋光度、,pH,值等，,不得超过规定的值。,特点：准确测定杂质的量；,不需对照品,杂质检查的要求及限量计算,例题：,检查某药物中的砷盐，取标准砷溶液,2ml,（每,1ml,相当于,1,g,的,As,）制备标准砷斑，砷盐限量为,0.0001,，应取供试品的量为,A.0.20g B.2.0g C,0.020g,D.1.0g E.0.10g,已知：,c,1,g/ml,110,6,g/ml,V,2ml,L,0.0001%,一,.,氯化物的检查,知识拓展,1,：其他注意事项,：,1.,若供试品有色，需经处理后方可,检查。,（,1,）内消色法：倍量法，如枸橼酸,铁铵中氯化物的检查。,一,.,氯化物的检查,知识拓展,1,：其他注意事项,：,1.,若供试品有色，需经处理后方可,检查。,（,2,）外消色法：如高锰酸钾中氯化,物的检查，可先加乙醇适量，使其,还原褪色后再依法检查。,2.,当有其它干扰物质存在时，必需在 检查前除去,（,1,）碘中氯化物的检查,（,2,）碘化物中氯化物的检查,知识拓展,1,：其他注意事项,：,一,.,氯化物的检查,（,1,）碘中氯化物的检查,可在供试品中加入一定量的酸和过,氧化氢溶液，加热煮沸，使将,I-,氧化,成产物,I2,并挥发、溶液澄明无色后，,再依法检查。,知识拓展,1,：其他注意事项,：,一,.,氯化物的检查,（,1,）碘中氯化物的检查,也可以利用碘化银沉淀稳定，在氨液中,不溶解，而氯化银、溴化银沉淀在氨溶液,中溶解的性质，除去碘化物的干扰。,知识拓展,1,：其他注意事项,：,一,.,氯化物的检查,（,2,）碘化物中氯化物的检查,将供试品加水研磨、滤过，于滤液中加锌粉使碘还原为无色的碘化物，再在氨碱性条件下滴加硝酸银试液使生成碘化银沉淀而滤除。向滤液中加入硝酸，破坏络离子后，,AgCl,沉淀复析出，再与一定量标准氯化钠溶液生成的沉淀比较。,知识拓展,1,：其他注意事项,：,一,.,氯化物的检查,3.,不溶于水的有机药物,（,1,）加水振摇，过滤，取滤液进行检查。,（,2,）加热，放冷，过滤，取滤液进行检查。,（,3,）溶于有机溶剂如稀乙醇、丙酮，可加稀乙醇或丙酮溶解后进行检查,。,一,.,氯化物的检查,知识拓展,1,：其他注意事项,：,拓展知识,2,：一般杂质检查规则,药品检验操作标准,规定：,1.,遵循平行操作原则,（,1,）仪器的配对性：如纳氏比色管应配对，刻度线高低相差不超过,2mm,，,砷盐检查时导气管长度及孔的大小要一致,（,2,）对照品与供试品的同步操作,拓展知识,2,：一般杂质检查规则,2.,正确的取样及供试品的称量范围,1g,不超过,2%,，,1g,不超过,1%,3.,正确的比色、比浊方法,4.,检查结果不符合规定或在限度边缘时应对供试管和对照管各复查二份,拓展知识,2,：一般杂质检查规则,二,.,铁盐的检查,1.,供试品的配制,：,称取丙氨酸,1.0g,，加水搅拌溶解使成,25ml,，移置,50ml,纳氏比色管中，加,稀盐酸,4ml,与,过硫酸铵,50mg,，用水稀释使成,35ml,后，加,30%,硫氰酸铵溶液,3 ml,，再加水适量稀释成,50 ml,，摇匀，得供试溶液。,二,.,铁盐的检查,2.,标准品的配制：,另取,标准铁溶液,1.0 ml,，置,50ml,纳氏比色管中，加水使成,25 ml,，加,稀盐酸,4 ml,与,过硫酸铵,50mg,，用水稀释使成,35 ml,，加,30%,硫氰酸铵溶液,3 ml,，再加水适量稀释成,50 ml,，摇匀，即为对照溶液。,二,.,铁盐的检查,3.,测定方法及判断标准,：,同置于白色背景上，,从比色管上方向下观察、比较，供试管颜色不得深于对照管。,4.,操作时的注意事项,：,（,1,）标准溶液的配制,（,2,）所加各试剂的作用,（,3,）色调不一致时的处理,二,.,铁盐的检查,（,1,）标准溶液的配制,用,FeNH4(SO4)212H2O,（硫酸铁铵）,配制标准铁贮备液（,加入硫酸防止,Fe3+,的水解,），标准铁溶液临用前稀,释而成，标准铁溶液,10,g Fe3+/ml,，,50ml,溶液中含,10,50,g,的,Fe3+,显色梯,度明显，,一般取标准铁溶液,1.0,5.0ml,二,.,铁盐的检查,（,2,）所加各试剂的作用,二,.,铁盐的检查,反应需在盐酸酸性条件下进行，且以,50ml,供试溶液中含稀盐酸,4ml,为宜。,试剂：硫氰酸铵。加过量硫氰酸铵，使反应向正反应方向进行,（,2,）所加各试剂的作用,二,.,铁盐的检查,铁盐检查时，加氧化剂氧化,Fe2+,为,Fe3+,。,加过硫酸铵可氧化,Fe2+,为,Fe3+,，,同时可防止光线使硫氰酸铁还原或分解褪色。,加硝酸后加热也可氧化,Fe2+,为,Fe3+,（,3,）色调不一致时的处理,为了提高灵敏度或供试管与对照,管色调不一致时，可用,正丁醇,提,取后，分取正丁醇层比色。,二,.,铁盐的检查,二,.,铁盐的检查,5,.,铁盐检查法的原理,：,原理,：铁盐在盐酸酸性溶液中与硫氰酸铵生成,红色可溶性的硫氰酸铁配位离子，再与一定量,标准铁溶液用同法处理后所显颜色进行比较。,Cl,-+Ag+,Fe,3+,+n SCN,-,Fe(SCN)n,3,n,n=1,6,（红色）,三,.,重金属的检查,1.,供试品的配制,：,称取丙氨酸,2.0g,，置,25 ml,纳氏比色管，加水,23 ml,溶解后，加,醋酸盐缓冲液（,pH3.5,）,2 ml,，得供试溶液。,2.,标准品的配制：,取,25 ml,纳氏比色管，加,标准铅溶液,2 ml,，再加,醋酸盐缓冲液（,pH3.5,）,2 ml,，用水稀释成,25 ml,，得对照溶液；,三,.,重金属的检查,3.,测定方法及判断标准,：,在供试管和对照管中分别加入,硫代乙酰胺试液,2 ml,，摇匀，放置,2min,，,同置白纸上，自上向下透视,，供试管中显示的颜色与对照管比较，不得更深,三,.,重金属的检查,4.,操作时的注意事项,：,（,1,）测定的范围,（,2,）溶液,pH,值的影响,三,.,重金属的检查,（,1,）测定的范围,用,硝酸铅,配制标准铅贮备液（,加硝酸防,止,Pb2+,水解,），配制和贮存用玻璃容器,均不得含铅。标准铅溶液临用前稀释而,成，标准硝酸铅溶液,10,g Pb2+/ml,，适,宜比色范围为,27ml,溶液中含,10,20,g,的,Pb2+,。,三,.,重金属的检查,（,2,）溶液,pH,值的影响,本法用,2ml pH3.5,的醋酸盐缓冲液控制溶液,pH,值为,3,3.5,，沉淀较完全，酸度增大，重金属离子与硫化氢呈色变浅，甚至不显色。因此供试品若用强酸溶解，或在处理中用了强酸，在加入硫代乙酰胺试液前，应先加氨水至溶液对酚酞指示液显中性，再加,pH3.5,醋酸盐缓冲液调节溶液酸度。,三,.,重金属的检查,5.,重金属检查法的原理：,原理,：硫代乙酰胺在弱酸性（,pH3.5,醋酸盐缓,冲液）条件下水解，产生,硫化氢,，与微量重金,属离子（以,Pb2+,为代表）生成,黄色到棕黑色,的硫化物,均匀混悬液，与一定量标准铅溶液经,同法处理后所呈颜色比较。,Cl,-+Ag+,CH,3,CSNH,2,+H,2,O CH,3,CONH,2,+H,2,S,H,2,S +Pb,2+,PbS,+2H,+,三,.,重金属的检查,检查原理：对照法,适用于溶于水、稀酸和乙醇的药物,三,.,重金属的检查,（,1,）供试品如有色，需经处理后方可检查。,A.,外消色法：即在加硫代乙酰胺试液前在对照溶液管中滴加少量稀焦糖溶液,(,取蔗糖用小火加热后，再混悬于水中做成，水溶液呈黄、褐或棕黑色,),，使之与供试品溶液管的颜色一致，然后再加硫代乙酰胺试液比色。,知识拓展：检查方法的干扰及排除,三,.,重金属的检查,（,1,）供试品如有色，需经处理后方可检查。,知识拓展：检查方法的干扰及排除,三,.,重金属的检查,B.,内消色法,C.,改用第四法，微孔滤膜过滤法,知识拓展：检查方法的干扰及排除,三,.,重金属的检查,（,2,）若供试品中有微量,Fe3+,存在，会氧化硫化氢生成单质硫，干扰比色，加入抗坏血酸或盐酸羟胺（,0.5,1.0g,）,还原,Fe3+,为,Fe2+,，,可消除干扰。,知识拓展：检查方法的干扰及排除,三,.,重金属的检查,（,3,）若供试品为铁盐，,Fe3+,在盐酸中生成,HFeCl,，用乙醚提取除去，剩余微量铁在氨碱性溶液中，加,KCN,掩蔽，然后用第三法检查（加硫化钠试液检查铅盐）。,知识拓展：检查方法的干扰及排除,三,.,重金属的检查,（,4,）若药物本身能生成不溶性硫化物时，可加入掩蔽剂消除干扰。如,ZnSO4,中重金属的检查，要在碱性下加,KCN,掩蔽,Zn2+,后，依第三法检查（硫化钠法）。,例,题：,中国药典（,2000,年版）规定，硫氰酸铵法检查铁盐时，加入过硫酸按的目的是（,多选,）,A.,使药物中铁盐都转变为,Fe,3+,B.,防止光线使硫氰酸铁还原或分解褪色,C.,使产生的红色产物颜色更深,D,防止干扰,E,便于观察、比较,例,题：,葡萄糖中进行重金属检查时，适宜的条件是（,单选,）,A.,用硫代乙酰胺为标准对照液,B.,用,10ml,稀硝酸,/50ml,酸化,C.,在,pH3.5,醋酸盐缓冲溶液中,D.,用硫化钠为试液,E.,结果需在黑色背景下观察,四,.,砷盐的检查,1.,检查装置的搭建,：,测试时，于导管,C,中装入,醋酸铅棉花,约,60mg,（装管高度为,60,80mm,），再于旋塞,D,的顶端平面上放一片,溴化汞试纸,（试纸大小以能覆盖孔径而不露出平面外为,宜），盖上旋塞盖,E,并旋紧，,即得。,四,.,砷盐的检查,2.,标准砷斑的制备：,精密量取标准砷溶液,2 ml,，置,A,瓶中，加盐酸,5 ml,与水,21 ml,，再加,碘化钾试液,5 ml,与,酸性氯化亚锡,试液,5,滴，在室温放置,10min,后，加锌粒,2g,，立即将已照上法装妥的导气管,C,密塞于,A,瓶上，并将,A,瓶置,25,40,水浴中，反应,45min,，取出溴化汞试纸，即得。,四,.,砷盐的检查,3.,测定方法及判断标准,：,称取丙氨酸,2.0g,，置,A,瓶中加水,23 ml,溶解后，加盐酸,5 ml,，照标准砷斑的制备，自“再加碘化钾试液,5 ml”,起，依法操作，得供试品砷斑。,供试品砷斑的颜色应不深于标准砷斑,。,4.,操作时的注意事项,：,（,1,）氢气产生的速度,（,2,）砷溶液浓度的大小,（,3,）砷的化合价的影响,（,4,）醋酸铅棉花的作用,（,5,）砷斑的稳定性及保存,四,.,砷盐的检查,（,1,）氢气产生的速度,氢气产生的速度过缓或过于剧烈都将影,响砷化氢的逸出速度，使砷斑的色泽和,清晰程度受到影响。而氢气的发生速度,与溶液的酸度、锌粒的粒度与用量以及,反应温度等有关。所用锌粒应无砷，粒,度较大时，用量酌情增加，反应时间延,长为,1h,。,四,.,砷盐的检查,（,2,）砷溶液浓度的大小,用,三氧化二砷,配制贮备液，临用前取贮备,液配制标准砷溶液，每,1ml,标准砷溶液相当,于,1,g,的,As,。中国药典制备标准砷斑采用,2ml,标准砷溶液,所得砷斑清晰。砷溶液浓,度过大或偏小，制得的砷斑将过深或偏,浅，影响比色。因此，药物的含砷限量不,同时，应按规定限量改变供试品取用量。,四,.,砷盐的检查,（,3,）砷的化合价的影响,五价砷在酸性溶液中也能被金属锌还原为砷化,氢，但生成砷化氢的速度较三价砷慢，故在反应,液中加入碘化钾及氯化亚锡将五价砷还原为三价,砷，碘化钾被氧化生成的碘又可被氯化亚锡还原,为碘离子，后者与反应中产生的锌离子能形成稳,定配位离子，有利于生成砷化氢的反应不断进行。,四,.,砷盐的检查,（,3,）砷的化合价的影响,氯化亚锡与碘化钾还可抑制锑化氢的生成，因锑,化氢也能与溴化汞试纸作用生成锑斑。在本试验,条件下，,100,g,锑存在也不致干扰测定。氯化亚锡,又可与锌作用，在锌粒表面形成锌锡齐，起去极,化作用，从而使氢气均匀而连续地发生。,四,.,砷盐的检查,（,4,）醋酸铅棉花的作用,醋酸铅棉花的作用是消除锌粒及供,试品中少量,硫化物,的干扰，醋酸铅,棉花,60mg,装管高度,60,80mm,。,四,.,砷盐的检查,（,5,）砷斑的稳定性及保存,砷斑不稳定，应立即观察。,四,.,砷盐的检查,5,.,砷盐检查法的原理,：,砷盐是有毒的物质，多由药物生产过程中所应,用的无机试剂引入，和重金属一样，在多种药,物中要求严格控制其限量。中国药规定主要采,用古蔡法和二乙基二硫代氨基甲酸银法检查药,物中的微量砷盐。,四,.,砷盐的检查,5,.,砷盐检查法的原理：,原理,：金属锌与酸作用产生新生态的氢，与药,物中微量砷盐反应生成具挥发性的砷化氢，遇,溴化汞试纸产生黄色至棕色的砷斑，与一定量,标准砷溶液同条件下所生成的砷斑比较，判断,砷盐的含量。,知识拓展,丙氨酸的砷盐检查,检查原理：对照法,遇,HgBr2,试纸生成黄色棕色的砷斑，与,2ml,标准砷溶液在相同条件下生成的砷斑比较,知识拓展：检查方法的干扰及排除,四,.,砷盐的检查,（,1,）供试品若为硫化物、亚硫酸盐、硫代硫酸盐时，加,HNO3,，,使氧化成硫酸盐，以除去干扰，如硫代硫酸钠中砷盐的检查。,知识拓展：检查方法的干扰及排除,四,.,砷盐的检查,（,2,）供试品若为铁盐，需先加酸性氯化亚锡试液，将,Fe3+,还原为,Fe2+,。,如枸橼酸铁铵中砷盐的检查。,知识拓展：检查方法的干扰及排除,四,.,砷盐的检查,（,3,）具环状结构的有机药物，要先行有机破坏后再进行检查。,常用的有机破坏方法：,碱破坏法：石灰法、无水碳酸钠碱融法,酸破坏法：如葡萄糖中砷盐的检查,知识拓展：检查方法的干扰及排除,四,.,砷盐的检查,（,4,）本法适用于不含,Sb,或含,Sb,量小于,100,g,的供试品。,例题：,在药物的杂质检查中，其限量一般不超过百万分之十的是（,单选,）,A.,氯化物,B.,硫酸盐,C.,醋酸盐,D.,砷盐,E.,淀粉,例题：,砷盐检查法中，在检砷装置导气管中塞入醋酸铅棉花的作用是（,单选,）,A.,吸收砷化氢,B.,吸收溴化氢,C.,吸收硫化氢,D.,吸收氯化氢,E.,吸收锑化氢,例题：,古蔡氏法中，,SnC1,2,的作用有（,多选,）,A.,使,As,5+,As,3+,B.,除去,H,2,S,C.,除去,I,2,D.,组成锌锡齐,E.,除去其它杂质,五,.,硫酸盐的检查,1.,供试品的配制,：,称取丙氮酸,1.0g,，加水搅拌溶解使成约,40ml,，置,50ml,纳氏比色管中，加稀盐酸,2 ml,，摇匀，即为供试液。,2.,标准品的配制：,另取,2.0ml,标准硫酸钾溶液，置,50ml,纳氏比色管中，加水使成约,40ml,，加稀盐酸,2 ml,，摇匀，即得对照溶液。,五,.,硫酸盐的检查,3.,测定方法及判断标准,：,于供试溶液与对照溶液中，分别加入,25%,氯化钡溶液,5 ml,，用水稀释至,50 ml,，充分摇匀，放置,10 min,，同置黑色背景上，从比色管上方向下观察、比较，供试管不得浓于对照管。,五,.,硫酸盐的检查,4.,操作时的注意事项,：,（,1,）测定的范围,（,2,）检查中盐酸的作用,（,3,）供试品颜色的消除,五,.,硫酸盐的检查,（,1,）测定的范围,标准,K2SO4,溶液,0.1mg/ml,，,50ml,溶液中含,0.1,0.5mg,的所显浑浊,梯度明显，相当于标准,K2SO4,溶,液,1,5ml,。,五,.,硫酸盐的检查,（,2,）检查中盐酸的作用,反应需在盐酸酸性条件下进,行，且以,50ml,供试溶液中含稀盐,酸,2ml,为宜。,五,.,硫酸盐的检查,（,3,）供试品颜色的消除,五,.,硫酸盐的检查,若供试品有色，也可用内消色法即倍量法处理。,六,.,炽灼残渣的检查,1.,供试品的灰化,：,取丙氨酸约,1g,，置已炽灼至恒重的坩埚中，精密称定，缓缓炽灼至完全炭化，放冷；,2.,炽灼残渣的测定：,加硫酸,1 ml,使湿润，低温加热至硫酸蒸气除尽后，在,700,800,炽灼使完全灰化，移置干燥器内，放冷，精密称定，再在,700,800,炽灼至恒重，残渣不得过,0.1%,。,六,.,炽灼残渣的检查,操作方法简析：,炽灼残渣：第二次及以后各次称重均应在规定条件下继续炽灼,.5h,后进行。,3.,操作时的注意事项,：,（,1,）供试品的称量,（,2,）炽灼残渣的计算,（,3,）其他注意事项,六,.,炽灼残渣的检查,（,1,）供试品的称量,六,.,炽灼残渣的检查,供试品的取用量应根据炽灼残渣限量和称量误,差决定。样品过多，炭化和灰化时间太长；过,少，称量误差增大。一般应使炽灼残渣量为,1,2mg,，残渣限量一般为,0.1%,0.2%,，如限,量为,0.1%,，取样约,1g,；若为,0.05%,，取样,2g,；限量为,1%,以上者，取样可在,1g,以下。,（,2,）炽灼残渣的计算,六,.,炽灼残渣的检查,（,3,）其他注意事项,六,.,炽灼残渣的检查,若残渣需留作重金属检查,，则,500,600,炽灼至恒重：,一些重金属,(,如铅,),于高温下易挥发。,含氟的药物对瓷坩埚有腐蚀，应采用铂坩埚。,（,3,）其他注意事项,六,.,炽灼残渣的检查,加硫酸处理是使杂质转化为稳定的硫酸盐，并帮助有机物炭化。,1.,酸碱度检查法,：,生物药物加水制成的溶液其,pH,应保持恒定，,否则显示受到酸、碱的污染，或发生了水解,反应。检查药物的酸碱度是保证其质量的一,项重要工作。中国药典规定溶液,pH,小于,7.0,称为“酸度”、大于时称为“碱度”、在,7.0,上,下两侧的称为酸碱度。,七,.,酸碱度的检查,2.,酸碱度检查法注意事项,：,（,1,）酸碱滴定法,（,2,）指示液法,（,3,）,pH,值测定法,七,.,酸碱度的检查,1.,溶液颜色的检查方法,：,（,1,）第一法 目视比色法,原理：,采用与标准比色液对照来判断供,试品溶液颜色是否符合要求。,八,.,溶液颜色的检查,2.,标准比色液的配制,八,.,溶液颜色的检查,3,.,溶液颜色检查法的操作,：,操作方法：,取供试品，加水溶解，置于,25ml,纳,氏比色管中，加水稀释至,10ml,。另取规定色调,和色号的标准比色液,10ml,，置于另一纳氏比色,管中，两管同置白色背景上，自上向下透视或,平视观察，供试品管呈现的颜色与对照管比较，,不得更深。,八,.,溶液颜色的检查,4.,溶液颜色检查法的注意事项,：,（,1,）标准比色液的选择,（,2,）观察方式的选择,八,.,溶液颜色的检查,5,.,溶液颜色检查的第二法,：,第二法 分光光度法,取规定量供试品，加水溶解使成,10ml,，必要时,滤过（除去不溶性杂质对吸光度测定的干扰），,滤液于规定波长处照分光光度法测定，吸光度不,得超过规定值。,八,.,溶液颜色的检查,1.,易碳化物检查法,：,易炭化物是指药物中遇硫酸易炭化或易氧化而呈,色的有机杂质。,检查药物中遇,H,2,SO,4,易炭化或易被氧化呈色的微量有机杂质。,九,.,易碳化物的检查,2.,易碳化物检查法的操作,：,取内径一致的比色管两支：甲管中加各品种项,下规定的对照液,5ml,；乙管中加硫酸,含,H2SO4,94.5%,95.5%,（,g/g,）,5ml,后，分次缓缓加入,规定量的供试品，振摇使溶解。静置,15min,后，,将甲、乙两管同置白色背景前，平视观察。,九,.,易碳化物的检查,3,.,易碳化物检查法的注意事项,：,注意事项及讨论：,（,1,）固体供试品的处理,（,2,）易炭化物所呈现颜色的影响因素,九,.,易碳化物的检查,1.,干燥失重检查法,干燥失重是指药物在规定条件下经干燥后所减失的重量，主要是水分，也包括其它挥发性物质。测定方法：,十,.,干燥失重的检查,（一）常压恒温干燥法,适用于受热较稳定的药物。干燥温度一般为,105,。,干燥失重：第二次及以后各次称重均应在规定条件下继续干燥,1h,后进行。,十,.,干燥失重的检查,（二）干燥剂干燥法,适用于受热易分解或挥发的供试品。,干燥剂：硅胶、浓硫酸、,P2O5,。,十,.,干燥失重的检查,（三）减压干燥法,适用于熔点低，受热不稳定或水分难赶除的药物。,除另有规定外，压力应在,2.67kPa,（,20mmHg,）,以下。,十,.,干燥失重的检查,（四）热分析法,热分析法是在程序控制温度下，精确记录待测物质理化性质与温度的关系，研究其受热过程所发生的晶型转变、熔融、升华、吸附等物理变化和脱水、热分解、氧化还原等化学变化，对物质进行物理常数（如熔点和沸点）的确定、鉴别和纯度检查的方法。,十,.,干燥失重的检查,十一、水分测定法,药品中的水分包括结晶水和吸附水。,过多的水分可使药物的含量降低，还可导致药物的水解、霉变，从而直接影响其理化性状及生理作用。应对药品中的水分进行限量控制。,中国药典,(2005,年版,),采用费休氏法和甲苯法测定药物中的水分，尤以费休法为主。,十一、水分检查,（一）费休水分测定法,特点：操作简便、专属性强、准确度高，适用于受热易被破坏的药物，因而成为国际上通用的水分测定法。,USP(25,版,),、,BP(2000,年版,),、,JP(14,版,),亦均采用此法测定水分。,（一）费休水分测定法,费休水分测定法为非水氧化还原滴定反应，,采用的标准滴定液称费休试液，是由碘、二氧化硫、吡啶和甲醇按一定比例组成。,1,原 理,利用碘氧化二氧化硫时，需要一定量的水分参加反应。,每消耗,1mol,碘就证明存在着,1mol,的水，从消耗碘的量可以测定出水分含量。,I2+SO2+H20 2HI+SO3,但硫酸酐吡啶不稳定，加入,无水甲醇,使其转变成稳定的甲基硫酸氢吡啶。,12+SO2+3C5H5N+H2O,2C5H5NHI+C5H5NSO3,C5H5NSO3,+,CH3OH C5H5NHSO4CH3,由于上述反应是可逆的，加入,无水吡啶,能定量地吸收,HI,和,S03,，形成氢碘酸吡啶和硫酸酐吡啶。,所以滴定的总反应为：,每,1mol,水需要,1mol,碘、,1mol,二氧化硫、,3mol,吡啶和,1mol,甲醇。,无水吡啶和无水甲醇不仅参与滴定反应，而且还起溶剂作用,。,12+SO2+3C5H5N+CH3OH+H2O,2C5H5NHI+C5H5NHSO4CH3,2,方 法,滴定终点的指示可采用下列两种方法,(1),目视法,:,观察滴定过程中溶液颜色的变化，化学计量点前溶液呈浅黄色，化学计量点后稍过量一滴的费休试液使溶液呈,红棕色,(,碘的红棕色,),，即溶液,由浅黄色变为红棕色即为滴定终点,。当供试品本身有色而干扰终点判断时，应采用永停滴定法。,(,二,),永停滴定法,当滴定至电流计指针突然偏转，并持续数分钟不退回，即为滴定终点；本法较目视法灵敏、准确。采用永停法指示终点时，其滴定装置应严密，用磨口塞，进样侧管也应考虑防湿。铂电极临用前活化，可采用含有少量三氯化铁的硝酸或铬酸清洁液浸泡,2,3min,，水洗干燥后备用。,中国药典附录采用水分测定仪直接标定费休试液，或取干燥的具塞玻瓶，精密称入重蒸馏水约,30mg,，加无水甲醇,2,5ml,，用费休试液滴定至溶液由浅黄色变为红棕色，或用永停滴定法指定终点；另作空白试验，按下式计算费休试液的滴定度,(,每,1ml,费休试液相当于水的重量,mg),。,十二、可见异物检查法,是用以检查存在于注射剂、滴眼液中，在规定条件下目视即可检查到的不溶性物质，粒径或者长度通常大于,50,微米。,十二、可见异物检查,（,1,）灯检法：取供试品,20,支（瓶），除去容器标签，擦净外壁，轻轻旋转和翻转容器使药液中存在的可见异物悬浮，置供试品于遮光板边缘处，分别在黑色和白色背景下，手持供试品颈部使药液轻轻旋转，用目视检测。,十二、可见异物检查,（,1,）灯检法：无色注射剂或滴眼剂检查的光照度为,1000,1500lx,；透明塑料容器或有色溶液注射液或滴眼剂检查的光照度应为,2000,3000lx,；混悬型注射液和混悬型滴眼剂检查的光照度应为,4000lx,，仅检查色块、纤毛等可见异物。,十二、可见异物检查,（,1,）灯检法的注意事项：,灯检法应在暗室中进行。检查人员应无色盲，且远距离和近距离视力均应为,4.9,或,4.9,以上。,十二、可见异物检查,（,1,）灯检法的注意事项：,旋转或翻转使可见异物悬浮时注意不能产生气泡。,用有色透明容器包装或液体色泽较深的品种不适用灯检法，应选用光散射法。,十二、可见异物检查,（,2,）光散射法,当一束单色激光照射溶液时，溶液中存在的不溶性物质使入射光发生散射，散射的能量与不溶性物质的大小有关。本法通过对溶液中不溶性物质引起的光散射能量的测量，并与规定的阈值比较，来检查可见异物。,十二、可见异物检查,必须知识补充：生物药物的杂质及其来源,1.,生物药物杂质的概念：,是指生物药物中存在的无治疗作用或影响生物,药物的稳定性和疗效，甚至对人体健康有害的,物质。,杂质（,forin,、,impurities,）,是指：,(1),有毒副作用的物质,(2),本身无毒副作用，但影响药物的稳定性和疗效的物质,(3),本身无毒副作用，也不影响药物的稳定性和疗效，但影响药物的科学管理的物质,生物药物的杂质及其来源,1.,生物药物杂质的概念：,药物的纯度是指药物的纯净程度，是药物质量,优劣的综合指标，药物中的杂质是影响药物纯,度的主要方面，因此，,药物的杂质检查常常称,为药物的纯度检查,。,药物的纯度与,化学试剂的纯度的区别？,生物药物的杂质及其来源,2.,生物药物杂质的来源：,第一个来源是生物药物的生产过程中引,入；第二个来源是生物药物在贮存过程,中受外界条件的影响，引起理化性质的,变化而产生。,1.,生产过程中引入,（,1,）原料、反应中间体及副产物,（,2,）试剂、溶剂、催化剂类,（,3,）生产中所用金属器皿、装置以及其他不耐酸、碱的金属工具所带来的杂质,生物药物的杂质及其来源,2.,贮藏过程中产生,水解、氧化、分解、异构化、晶形转变、聚合、潮解和发霉等。,（,1,）易发生水解反应的结构：酯、内酯、酰胺、卤代烃、苷类等,（,2,）易发生氧化反应的结构：,醚、醛、酚羟基、巯基、亚硝基、双键等,生物药物的杂质及其来源,（,3,）微生物的污染：青霉素酰化酶、黄曲霉素等,（,4,）药物结构的变化：同分异构体、同质异晶现象等,例题：,在药物生产过程中引入杂质的途径为,A.,原料不纯或部分未反应完全的原料造成,B.,合成过程中产生的中间体或副产物分离不净造成,C.,需加入的各种试剂产生吸附，共沉淀生成混晶等造成,D.,所用金属器皿及装置等引入杂质,E.,由于操作不妥，日光曝晒而使产品发生分解引入的杂质,生物药物的杂质及其来源,3.,生物药物杂质的分类：,一般杂质是指在自然界中分布较广泛，在多种,生物药物的生产和贮藏过程中容易引入的杂质：,中国药典,附录中规定了氯化物、硫酸盐、,硫化物、铁盐、重金属、砷盐、酸碱度、溶液,颜色、易炭化物、炽灼残渣、干燥失重、水分、,可见异物等一般杂质检查的项目。,生物药物的杂质及其来源,3.,生物药物杂质的分类：,特殊杂质是,指某一个或某一类药物的生,产或贮藏过程中引入的杂质，,这类杂质,随药物的不同而异：,如阿司匹林中的游,离水杨酸、,如胰蛋白酶中检查糜蛋白酶。,