第七章-芳胺类药物的分析.ppt

,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,第七章 芳香胺类药物的分析,第一节 芳胺类药物的分析,第二节 苯乙胺类药物分析,基本要求,练习与思考,基本要求,一、掌握芳胺类、苯乙胺类药物的鉴别和含量测定的基本原理与方法。,第一节,芳 胺类药物的分析,芳胺类药物分为两类,芳伯氨基未被取代,芳伯氨基被酰化,一、对氨基苯甲酸酯类药物的基本结构与主要化学性质,（一）基本结构与典型药物,苯佐卡因,盐酸普鲁卡因,盐酸丁卡因,盐酸普鲁卡因胺,1.芳伯氨基特性,：,重氮化偶合反应；芳醛缩合成,Schiff,碱；易,氧化变色等。盐酸丁卡因无此特性。,（二,）,主要理化性质,水解特性：,分子结构中的酯键或酰胺键易水解，除盐酸,丁卡因外水产物为对丁基氨基苯甲酸外，上述均,为对氨基苯甲酸。,弱碱性：,除苯佐卡因外，其余均含有叔胺氮的侧链，故具,有弱碱性。,4.其它特性：,因结构中有 芳伯氨基或同时具有脂烃胺侧链，其,游离碱多为碱型油状液体或低熔点固体，难溶于,水，可溶于有机溶剂。其盐酸盐则易溶于水。,二、酰胺类药物的基本结构与主要化学性质,（,一）基本结构与典型药物,对乙酰氨基酚（扑热息痛）,盐酸布比卡因,盐酸利多卡因,1.水解后显芳伯氨基特性：,分子结构中含有芳酰氨基，酸,水解后显芳伯氨基的特性反应。,注意空间位阻的影响。,2.,水解产物易酯化：,对乙酰氨基酚，酸水解生成,醋酸，在硫酸中与乙醇反应，发出醋,酸乙酯香味。,（二）主要化学性质,3.酚羟基特性：,对乙酰基酚有游离酚羟基，可与,FeCl,3,发生显色反应。,4.弱碱性：,利多卡因和布比卡因烃胺侧链有叔胺氮，显,碱性，可与生物碱沉淀剂发生沉淀反应，可,相互区别。,5.与金属离子发生沉淀反应：,利多卡因和布比卡因酰氨,基上氮可与,Cu,2+,Co,2+,生成,有色配位化合物沉淀。,三、鉴别试验,（一）重氮化-偶合反应,分子结构中含有芳伯氨基或潜在芳伯,氨基的药物，均可发生此反应。,Ar-NH,2,HCl,NaNO,2,重氮盐,OH,-,-萘酚,橙黄,猩红色,直接反应：,苯佐卡因、盐酸普鲁卡因、盐酸普,鲁卡因胺,间接反应：,对乙酰氨基酚,利多卡因和布比卡因由于空间位阻很难发生此反应。,丁卡因虽无芳伯氨基，但可与,NaNO,2,反应生成,N,亚硝基化合物的乳白色沉淀。,（二）与三氯化铁反应,对乙酰氨基酚+,FeCl,3,蓝紫色化合物,1.与铜和钴离子反应：,利多卡因与硫酸铜生成,蓝紫色,配位化合物；,与氯化钴生成,亮绿色,沉淀。,（,三）与金属离子反应,2.羟肟酸铁盐反应,基于普鲁卡因胺分子中的,芳酰胺结构。,3.与汞离子反应,盐酸利多卡因+,H,2,NO,3,+Hg(NO,3,),2,黄色,对氨基苯甲酸酯,H,2,NO,3,+Hg(NO,3,),2,红色,或,橙黄色,1.盐酸普鲁卡因的鉴别,(四)水解产物反应,盐酸普鲁卡因+,NaOH,普鲁卡因,油状物,对氨基苯甲酸钠+二乙氨基乙醇,（使湿润的红色石蕊试纸变兰色）,对氨基苯甲酸钠+,HCl,对氨基苯甲酸（白色）,2.苯佐卡因的鉴别,苯佐卡因+,NaOH,乙醇,乙醇+,I,2,+,NaOH,CHI,3,（,碘仿臭气，黄色沉淀）,(五)紫外特征吸收光谱法,1.,在,max,处测定供试液的百分吸收系数。,例如：对乙酰基酚在0.4%,NaOH,中于,max,=240nm;E,1%,1cm,=715,在,HCl(0.1nol/L)-,甲醇于,max,=249nm;E,1%,1cm,=880,2,.,在规定的浓度测定,max,例如：盐酸普鲁卡因胺5,g/ml;,max,=280nm,(六)红外吸收光谱法（略）,（一）对乙酰氨基酚中的特殊杂质检查,1.乙醇溶液的澄清度与颜色：,因其生产工艺用铁粉作还原剂，可,能带入，致使乙醇溶液产生混浊，中间体对氨基酚易氧化产生,有色化物，在乙醇溶液中显橙红色或棕色。,四、特殊杂质检查,检查方法：,配制0.1,g/ml,本品乙醇溶液，溶液应澄清，无色；,如显混浊，与1号浊度标 准液比较，不得更浓；,如显色，与棕红色2号或橙红色2号 标准液比较，,不得更深。,2.有关物质检查：,Ch.P,是以对氯苯乙酰胺为对照品，,采用,TLC,法中的杂质对照品法。,3.对氨基酚检查：,利用对氨基酚在碱性条件下可与,亚硝基铁氰化钠生成蓝色配位化,合物，采用比色法。,1.乙醇溶液的澄清度与颜色：,(二)盐酸普鲁卡因注射液中对氨基苯甲酸的检查,为什么要检查？,怎样检查？,原中国药典采用,TLC,法中的,杂质对照品法进行检查。（现行中国药典采用,HPLC,法检查）,（一）亚硝酸钠滴定法,Ar-NH,2,;Ar-NHCOR;Ar-NO,2,均可采用此法,Ch.P,中的苯佐卡因；盐酸普鲁卡因和盐酸普鲁卡,因胺及其制剂可直接采用本法。,五、含量测定,1.原理,：,Ar-NHCOR +H,2,O,Ar-NH,2,+RCOOH,H,+,Ar-NH,2,+NaNO,2,+2HCl,Ar-N,2,+,Cl,-,+NaCl +2H,2,O,测定主要条件：,(1),加,KBr,增加反应速度,重氮化的反应历程为：,NaNO,2,+HCl,HNO,2,+NaCl,HNO,2,+HCl,NOCl +H,2,O,K,HCl,KBr +HCl,HBr +KCl,HNO,2,+HBr,NOBr +H,2,O,K,HBr,K,HBr,比,K,HCl,大300倍,生成,NOBr,量大得多,加快反应速度,(2),加过量,HCl,加速反应：,重氮化速度加快；,重氮盐在酸性介质中稳定；,防止生成氨基偶氮化合物。,Ar-N,2,+,Cl,-,+H,2,N-Ar,Ar-N=N-NH-Ar +HCl,一般摩尔比为,Ar-NH,2,:HCl=1:2.56 。,(3),室温条件下滴定:,温度高反应速度快；每升高10加快2.5倍,太高,可使,Ar-N,2,+,Cl,-,+H,2,O,Ar-OH+N,2,+HCl,(4)滴定管尖端插入液面下滴定,3.指示终点的方法,(1),永停滴定法,溶液 检流计,终点前：,无过量 无电流,HNO,2,终点时：,有过量 有电流（使指针偏离零,HNO,2,永停在某一位置）,(2),外指示剂法,用,KI-,淀粉指示剂,指示终点的原理：,2,NaNO,2,+2KI +4HCl,2NO +I,2,+2KCl +2NaCl+2H,2,O,G,VV,R,1,R,2,+,V,(二）非水溶液滴定法,(,略,),1.对乙酰基酚原料的含量测定,在0.4%,NaOH,介质中；257,nm,D%E,1%,1cm,样,E,1%,1cm,标,100；,E,1%,1cm,715,2.对乙酰基酚片溶出度测定 （测定条件同上）,1片稀,HCl 24ml+H,2,O 1000ml,精密量 取5,ml,+,0.4%,NaOH10ml+H,2,O 100ml ,257,nm,测定,A。,W110005100100C（g/100ml),W(g)=200 C;C=A/715,溶出度,W,标示量,10080,为合格,（三）分光光度法,此法主要用于盐酸普鲁卡因注射液的测定。因该注射液中,常含有降解产物对氨基苯甲酸；可以苯甲酸为内标同时测定两,者的含量，该法简单准确。,色谱条件：,色谱柱为,BondapakC,18,300mm4mm,流动相为甲醇1,HAc(40:60);UV,检测器250,nm.,（四）,HPLC,法,第二节,苯乙胺类药物的分析,一、苯乙胺类药物的基本结构与主要化学性质,（一）基本结构与典型药物,*,常见的苯乙胺类药物,（二）,主要化学性质,1.弱碱性,本类药物结构中有烃氨基侧链，为仲胺氮,显弱碱性。,2.酚羟基特性,本类药物结构中有酚羟基，可与,FeCl,3,;,发生氧化。,3.光学活性,多数药物结构中有手性碳原子，具有旋,光性。,二、鉴别试验,(一)与三氯化铁反应,Ar-OHFeCl,3,络合显色 碱液,紫红色,。,(二）甲醛硫酸反应,在此试剂中形成醌式结构而显色。,药 物,三氯化铁,甲醛硫酸,肾上腺素 0.1,mol/LHCl,显绿色,甲氨试液显红紫红 红色,重酒石酸去甲肾上腺素 绿色,加,NaCO,3,试液显紫色红色 淡红色,盐酸去氧肾上腺素 紫色 玫瑰红橙红棕红,盐酸异丙肾上腺素 深绿色,加5,NaCO,3,试液显蓝紫色红色 棕色暗紫色,(三）氧化反应,本类药物具有,Ar-OH，,易被氧化剂,I,2,H,2,O,2,K,3,Fe(CN),6,氧化而显色，,例如：肾上腺素在中性或酸性条件下，被,I,2,H,2,O,2,氧化后，生成肾上腺素红；,盐酸异丙肾上腺素在酸性条件下，被,I,2,氧化，,生成异丙肾上腺素红。,(四）紫外特征吸收与红外吸收光谱,例如：,盐酸异丙肾上腺素 0.05,mg/ml ,max,=280nm A=0.50,这一类药物均可采用红外吸收光谱进行鉴别,(一)酮体检查,本类药物在生产过程中多采用酮体氢化制得，若氢,化不完全，易引入酮体杂质。,采用,UV,法检查：,利用酮体在310,nm,有吸收，本类药物无吸收。,例如：肾上腺素本项检查 配2.0,mg/ml =310nm A0.05,盐酸去氧肾上腺素 配2.0,mg/ml =310nm A0.02,盐酸异丙肾上腺素 配2.0,mg/ml =310nm A0.15,三、特殊杂质检查,220 260 300 nm,肾上腺酮,及,肾上腺素,的紫外吸收曲线,max,310nm,(二)有关物质的检查,采用,TLC,法（或,HPLC,）中的,高低浓度对比法,进行检查。,(三)盐酸苯乙双胍中有关双胍的检查,采用,PC,法中的杂质对照法进行检查。,(一)非水溶液滴定法,本类药物的原料药多采用此法。本法重点将在第八章讨论。,1.重酒石酸去甲肾上腺素的测定,相当于,B,的有机酸盐可直接滴定。,2.盐酸克仑特罗的测定,相当于,B,的,HX,酸盐不能直接滴定，需加,Hg(Ac),2,处理后滴定,。,3.硫酸沙丁醇的测定,相当于,B,的,H,2,SO,4,盐可直接滴定,也可处理后滴定。,四、含量测定,(二)溴量法,本类药物重酒石酸间羟胺、盐酸去氧肾上腺素及,其注射液用此法。,基本原理：,(三)比色法,利用药物分子结构中的,Ar-OH,与,Fe,3,络合显色，进行比色,测定；,也可利用药物分子结构中的,Ar-NH,2,重氮化偶合显色，进行,比色。,例如：盐酸克伦特罗栓的含量测定,(四),HPLC,法,例一、,重酒石酸去甲肾上腺素注射液的测定,采用,RPIP-HPLC-UV,法；用外标一点法进行定量测,定。,例二、,血浆中儿茶酚胺类（肾上腺素类）药物的测定,采用,RPIP-HPLC-EChD,法；用标准曲线法进行定量,测定。,练习与思考,A,型题,1盐酸普鲁卡因注射液中检查的特殊杂质是,A.,水杨醛,B.,间氨基酚,C.,水杨酸,D.,对氨基苯甲酸,E.,氨基酚,2对乙酰氨基酚中检查的特殊杂质是,A.,水杨醛,B.,间氨基酚,C.,对氨基酚,D.,苯甲酸,E.,苯酚,3肾上腺素和盐酸去氧肾上腺素中检查的特殊杂质是,A.,水杨醛,B.,间氨基酚,C.,对氨基酚,D.,酮体,E.,苯甲酸,B,型题,A。,硫酸铜反应,B.,氧化反应,C.,还原反应,D.,水解后重氮化-偶合反应,E.,重氮化-偶合反应,1.盐酸利多卡因,2.肾上腺素,3.盐酸普鲁卡因,4对乙酰氨基酚,A,B,E,D,A。,溴量法,B.,紫外分光光度法,C.,亚硝酸钠滴定法,D.RP-HPLC,法,E.,非水滴定法 5.盐酸去氧肾上腺素 6.肾上腺素注射液 7.盐酸普鲁卡因 8对乙酰氨基酚,A,D,C,B,X,型题,1.直接能与,FeCl,3,产生颜色反应的药物有,A。,盐酸普鲁卡因,B.,盐酸去氧肾上腺素,C.,对乙酰氨基酚,D.,盐酸利多卡因,E.,盐酸丁卡因,2.直接和水解后能发生重氮化-偶合反应的药物有,A。,盐酸丁卡因,B.,盐酸普鲁卡因,C.,对乙酰氨基酚,D.,对氨基酚,E.,盐酸肾上腺素,