抗原抗体反应的特点2.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,第二节 抗原抗体反应,抗原抗体反应的化学本质,抗原抗体反应的特点,影响抗原抗体反应的因素,抗原抗体反应的化学本质,结构基础,抗原抗体的结合力,反应过程,抗原和抗体的结合是互补性的特异性结合,不形成牢固的共价键，通过非共价键结合,这种弱的结合力涉及几种分子间的作用力,一、抗原抗体结合力,一、抗原抗体结合力,*1静电引力,*2范德华引力,*3氢键结合力,*4疏水作用力,静电引力（,库伦引力）,（electrostatic forces）,（coulombic forces）,概念：,抗原和抗体分子带有相反电荷的,氨基和羧基基团之间相互的引力。,引力的大小与两个相互作用基团间的距,离的平方成反比；平均键能约为,20.9kJ/mo1,。,范德华引力,（Van der Waals forces）,概念：,抗原和抗体相互接近时，由于分子的,极化作用而出现的引力。,结合力的大小与两个相互作用基团的极化程,度的乘积成正比、与它们之间距离的,7,次方,成反比，键能约为,4.2,12.5kJ,mol,。,这种引力的能量小于静电引力。,具有特异性。,概念：,供氢体上的氢原子与受氢体原子,间的引力。,氢键结合力(hydregen bond,forces),供氢体：,羧基、氨基和羟基,受氢体：,羧基氧、羧基碳和肽键氧等,能的大小取决于,氢键,的方向：,氢键具有高度,的方向性。,氢键结合力与供氢体和受氢体之间距离的,6,次,方成反比，键能约,20.9kJ/mol,。,二、抗原抗体亲和性,（affinity）,*,亲和性,是抗体分子上一个抗原结合点与对,应的抗原决定簇之间的相适应性而存在着的,引力，这是抗原与抗体之间固有的结合力。,*亲和力,（avidity),是指反应系统中复杂抗,原与相应抗体之间的结合能力。,亲和力与亲和性、抗体的结合价和抗原的有,效决定簇数目相关。,亲和力越大，抗原抗体结合越牢固。,亲和常数,亲和常数K=,K,值大的抗体与抗原牢固结合，不易,解离，说明该抗体有高亲和力。,抗体与抗原结合是可逆的反应，在平衡时其,血清学反应条件下，抗原抗体均带负电荷，,使极化的水分子在其周围形成水化层，成为,亲水胶体。,三、亲水胶体转化为疏水胶体,当抗原与抗体结合后，表面电荷减少，水化,层变薄；而且由于抗原抗体复合物形成后，,与水接触的表面积减少，由亲水胶体转化为,疏水胶体。,在电解质作用下，各疏水胶体之间靠拢，形,成可见的抗原抗体复合物。,亲水胶体转化为疏水胶体示意图,亲水胶体,疏水胶体,转化,NaCl,可见反应,抗原抗体反应的特点,*1.特异性 *2.比例性 *3.可逆性,一、,特异性,（specificity）,*,概念：,抗原分子，只能与由它刺激所产生的抗,体结合而起反应的专一性能。,一、特异性,*,决定因素：,由抗原决定簇和抗体分子超变区之,间空间结构的互补性决定的。,抗体分子,N,端可变区形成,3nm1.5nm0.7nm,的槽沟，只有与其空间结构互补的抗原决定簇才能如楔状嵌入。,*,交叉反应,(cross reaction),两种不同的抗原,物质具有部分相同或类似结构的抗原决定簇，,则可与彼此相应的抗体反应。,特异性示意图,*最适比,(optimal ratio),或等价点,(equivzlence,point),最迅速出现沉淀时的抗原抗体的浓度,比或量比。,二、比例性,（proportionality）,等价带,(,equivalencezone,),抗原与抗体分子比,例合适的范围。,带现象,：,Ag,与,Ab,比例不适而不出现可见反应。,*前带,(,prozone,),抗体过量时。,*后带,(,postzone,),抗原过量时。,比例性示意图,抗体过量,比例合适,抗原的量,抗原过量,抗体沉淀的量,前带,等价带,后带,三、可逆性（reversibility),概念：,是指抗原与抗体结合成复合物后，在,一定条件下可解离为游离抗原与抗体的特性。,解离后抗原抗体仍保持原有特性。,一定条件：低,pH,、,高浓度盐等。,常用于解离抗原抗体复合物的物质有：,3mol/L,硫氰化钾、,pH2.4 0.1mol/L,甘氨酸、,7mol/L,尿素等。,抗体,混有SPAg,抗体-SPAg,抗体-SPAg,分离剂,一、抗原抗体结合,二、分离抗体,可逆性示意图,抗体,抗原抗体反应影响因素,一、反应物自身因素,*抗原：,1.理化特性,2.Ag决定簇数量,3.Ag决定簇种类,*抗体：,1.来源,2.特异性与亲和力,3.浓度,二、环境条件：,*电解质：0.85%NaCl,*酸碱度：pH69,*温度：1540,第三节 抗原抗体反应类型,1.沉淀反应,2.凝集反应,3.补体参与的反应,4.中和反应,5.免疫标记,表,抗原抗体反应的基本类 型,表,反应类型 实验技术 检测方法 敏感度,沉淀反应 液相沉淀试验 观察沉淀、检测浊度 +，+,琼脂凝胶扩散 观察扫描沉淀线或环 +,凝胶电泳技术 或峰或弧 +,补体参与反应 补体溶血试验 以裸眼或光电比色仪 +,补体结合试验 观察测定溶血现象 +,免疫标记技术 荧光免疫技术 检测荧光现象 +,放射免疫技术 检测放射性 +,酶标免疫技术 检测酶底物显色 +,发光免疫技术 测定发光强度 +,生物素-亲合素技术 结合其它标记技术 +,金标免疫技术 检测金颗粒沉淀 +,凝集反应,直接凝集试验 用裸眼、放大镜或显 +,间接凝集试验 微镜观察红细胞或胶 +,凝集抑制试验 乳等颗粒和各种凝集 +,协同凝集试验 现象 +,抗球蛋白试验 +,中和反应 病毒中和试验 病毒感染性丧失 +,毒素中和试验 外毒素毒性丢失 +,