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单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,生物组织中还原性糖、脂肪、蛋白质的鉴定,1.实验原理,某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物产生特定的颜色反应。,(1)还原糖+斐林试剂 砖红色沉淀,(现用现配),还原糖:葡萄糖、果糖、麦芽糖(蔗糖、淀粉等是非还原糖),(2)脂肪+,水浴加热,苏丹染液,苏丹染液,镜检,镜检,橘黄色,红色,双缩脲,(NH,2,-CO-NH-CO-NH,2,),是两个分子,脲,(即尿素)经180左右加热,放出一个分子,氨,(NH3)后得到的产物。,(3)蛋白质+双缩脲试剂 紫色,双缩脲反应,即在碱性溶液(NaOH)中,双缩脲能与铜离子(Cu2+)作用,形成紫红色络合物。,双缩脲试剂,用于通过,双缩脲反应,检测双缩脲,因蛋白质中也有-CONH-基也可用于检验蛋白质,与蛋白质接触后的颜色呈紫色。,(4)淀粉+碘液 蓝色,2.实验步骤:,(1)还原糖的鉴定,1,1,1,(2)脂肪的鉴定,取材:花生种子浸泡34,h,,将子叶削成薄片,制片,镜检:在低倍镜下找到已着色的花生子叶最薄处,然后用高倍镜观察,结论:脂肪能被苏丹染液染成橘黄色或被苏丹,染成红色,取最理想的薄片,染色:滴23滴苏丹染色3,min或苏丹,1min,去浮色:,12滴50%的酒精,制成临时装片:吸、滴、盖,(3)蛋白质的鉴定,1,1,3.实验注意问题,(1)实验材料的选择,在物质的鉴定实验中,选择无色或颜色较浅的材,以避免材料本身颜色的干扰。,(2)物质鉴定的实验一般不设立对照组(自身前后对照),若设立,对照组应加入成分已知的物质(标准对照)。,(2)盐酸可改变细胞膜的通透性,加速染色剂进入细胞,同时使染色质中的DNA与蛋白质分离,有利于DNA 与染色剂结合,。,实验:观察DNA和RNA在细胞中的分布,2,实验流程,冲洗涂片:用蒸馏水的缓水流冲洗载玻片10 s,3,实验现象及相关结论,实验结果示例,材料选择,1.生物实验选材基本要求:,符合实验要求易获取的原则不对实验结果产生干扰,2.本实验选材初步分析:,真核细胞,(如:洋葱鳞片叶表皮细胞,人的口腔上皮细胞等。,该实验不宜选用绿色植物的叶肉细胞。,),本实验的注意事项,(1),几种液体在实验中的作用,0.9%的NaCl溶液:保持口腔上皮细胞正常形态,8%的盐酸:,a.改变细胞膜的通透性,b使染色体中DNA与蛋白质分离,蒸馏水:a.配制染色剂;b.冲洗载玻片,(2)关于甲基绿和吡罗红溶液的配制:甲基绿吡罗红染色液包括A液和B液,使用时,现用现配,。,
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